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【中文期刊】 季朝能 张冰  等 《遗传学报》 2000年27卷12期 1100-1107页 SCIMEDLINEISTICCSCDCABP

【摘要】 通过对耐热碱性磷酸酯酶TAPND27活性位点S（69）两侧的E（68）和S（70）的定点突变，得到了3个突变子E68S、S70A和E68SS70A。在蛋白纯化的基础上测定了3个变体的一些酶学性质，与TAPND27相比，E68S的比活力上升了...

【关键词】 耐热碱性磷酸酯酶； 定点诱变； 热稳定性；

【中文期刊】 胡培静 杜媛  等 《西安交通大学学报（医学版）》 2015年4期 435-438,443页 ISTICPKUCSCDCA

【摘要】 目的：构建并验证 Brugada 综合征相关钠通道 SCN5a 基因 R104W 突变体。方法采用一步法 PCR 突变技术,以 pEGFP-SCN5a 为模板,体外定点诱变构建 pEGFP-SCN5a-R104W 突变体,进行基因测序,并用...

【关键词】 钠通道； R104W 突变； Brugada 综合征；

【中文期刊】 史丙俊 江阳  等 《中国皮肤性病学杂志》 2013年27卷1期 29-32页 ISTICPKUCSCDCA

【摘要】 目的 利用大引物PCR技术对发现的中国人Darier病ATP2A2基因A68E突变进行体外定点诱变,并构建携带有突变基因的真核表达载体.方法 首先设计三条引物(包括两条外侧正向和反向引物以及内部突变引物),通过2轮PCR扩增,扩增出含有所需...

【关键词】 大引物PCR； ATP2A2； 毛囊角化病；

【中文期刊】 张晓刚 周明  等 《武汉植物学研究》 2006年24卷3期 191-195页 ISTICPKUCSCDCABP

【摘要】 为了研究藻蓝蛋白β亚基Cys-84裂合酶CpeS结构与功能的关系以及色氨酸残基对于该酶功能的影响,构建了藻蓝蛋白β亚基Cys-84裂合酶CpeS的两个色氨酸突变体,分别为CpeS(W14I) 和CpeS(W75S).通过体内重组检测酶活性的...

【关键词】 CpeS； 定点诱变； 体内重组；

【中文期刊】 胡明 卢雪梅  等 《中国生物工程杂志》 2003年23卷3期 30-34页 ISTICPKUCSCDCA

【摘要】 综述了木素降解的关键酶之一锰过氧化物酶的三维分子结构和催化反应性能,综合概述了通过定点诱变等方法对锰过氧化物酶的结构和功能的研究进展.

【关键词】 锰过氧化物酶； 定点诱变； 黄孢原毛平革菌；

【中文期刊】 易绍东 孟素荣  等 《第一军医大学学报》 2003年23卷11期 1139-1142页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA

【摘要】 目的对我们发现的中国人Brugada综合征新的SCN5A基因突变K317N进行体外定点诱变研究,并构建携带有基因突变K317N的pRc/CMV-hH1的表达载体.方法采用PCR定点突变技术,根据突变位置附近的两个单一限制性内切酶位点Age ...

【关键词】 聚合酶链反应； 定点诱变； SCN5A；

【中文期刊】 于洪枫 曾瑞萍  等 《中山医科大学学报》 2002年23卷2期 105-107页 ISTICPKUCSCDCA

【摘要】 [目的] 构建突变型α-L-艾杜糖醛酸酶基因(IDUA)cDNA,为体外表达、鉴定突变的性质提供物质基础.[方法] 以野生型pcDNA3-IDUA为基础质粒,采用双引物法体外定点诱变技术,引入突变E404X.[结果] 突变区域经PCR-SS...

【关键词】 诱变,定点； α-L-艾杜糖醛酸酶； 基因,IDUA；

【中文期刊】 刘相梅 祁蒙  等 《生物工程进展》 2001年21卷2期 28-31页 ISTICPKUCSCDCA

【摘要】 木聚糖酶专一性水解木聚糖分子中β-1.4-糖苷键,在制浆造纸、食品、纺织、饲料、能源工业中具有广阔的应用前景.随着各种新技术的发展与应用,木聚糖酶基因的研究取得了很大进展,不仅克隆了许多不同来源的木聚糖酶基因,研究了木聚糖酶基因在同源和异源...

【关键词】 木聚糖酶基因； 表达与分泌； 定点诱变；

【中文期刊】 田红 孙竞  等 《中国实验血液学杂志》 2000年8卷2期 90-92页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA

【摘要】 本实验通过合成与原有下游引物(B)相似的一条新引物(B'),经聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增出比原BCR-ABL cDNA序列减少了4个碱基的参照物,达到定点诱变的目的.经酶切分析证明,两型B...

【关键词】 PCR定点诱变； BCR-ABL基因； 竞争性PCR；

【中文期刊】 邓飞涛 孟元普  等 《医学分子生物学杂志》 2013年10卷6期 328-331页 ISTICCA

【摘要】 目的 制备TTF-1相关蛋白26(TAP26)的3个磷酸化位点(S48,S66和T219)的突变体(TAP26(S48→A48)、TAP26(S66→A66)和TAP26(T219→V219)).方法 采用定点诱变PCR技术,分别突变掉TA...

【关键词】 TAP26； DNA序列分析； 定点诱变PCR；

【中文期刊】 潘艺 汤立军  《生命科学研究》 2012年16卷3期 212-214页 ISTICCA

【摘要】 通过改良PCR介导的定点诱变技术,经济且高效地对ApoM基因-778位点进行定点诱变,并运用萤光素酶报告系统检测其启动子活性的变化,探讨ApoM基因-778位点在ApoM基因启动子区域的作用.研究发现ApoM基因-778突变型片段启动子活性...

【关键词】 载脂蛋白M； PCR介导定点诱变技术； 萤光素酶活性分析；

【中文期刊】 王银 李云鸿  等 《宁夏医科大学学报》 2011年33卷7期 609-611,618页 ISTIC

【摘要】 目的 研究将热休克蛋白60(HSP60)蛋白序列中第70位的丝氨酸(serine)突变为丙氨酸(alanine)后,HSP60在细胞内定位的改变.方法 将PrC/CMV - HSP60P1重组质粒中HSP60P1编码第70位丝氨酸的碱基定点...

【关键词】 HSP60； 定点诱变； 细胞内的定位；

【中文期刊】 邓飞涛 柴新群  等 《中国优生与遗传杂志》 2008年16卷3期 33-35,44页 ISTIC

【摘要】 目的 研究多形性腺瘤样因子2(pleiomorphic adenoma gene like-2,PLAGL2)对肺表面活性蛋白C基因(surfactant protein-C,SP-C)表达的影响及调控机制.方法 通过定点诱变技术分别突变掉...

【关键词】 多形性腺瘤样因子2； 表面活性蛋白C基因； 定点诱变；

【中文期刊】 龙跃生 蔡阳林  等 《激光生物学报》 2008年17卷6期 824-828页 ISTICCA

【摘要】 目的:利用结合单酶切位点的融合PCR技术对癫痫相关基因SCNIA进行定点突变.方法:首先设计两对引物PF1/PR1和PF2/PR2,PF1和PR2均位于突变位点最近的单酶切位点处,而突变位点设计在第一对反向引物(PR1)和第二对正向引物上(...

【关键词】 融合PCR； 定点诱变； SCNIA；

【中文期刊】 程烽 盛燕  等 《癌变·畸变·突变》 2007年19卷1期 8-10页 ISTICCA

【摘要】 背景与目的:构建UGRP1基因启动子的定点突变表达载体.材料与方法:以插入UGRP1基因正常启动子的质粒pGL3-UGRP1(-112G)为模板,用重叠延伸PCR定点诱变技术,对-112位点的碱基进行定点突变,并构建定点突变表达载体.结果:...

【关键词】 子宫球蛋白相关蛋白1基因(UGRP1)； 启动子； 重叠延伸PCR；

【中文期刊】 蔡阳林 龙跃生  等 《广州医学院学报》 2007年35卷2期 62-64页 ISTIC

【摘要】 目的:利用长距离PCR定点突变技术对GEFS+致病相关基因SCN1A进行定点诱变.方法:在突变位点处设计一对延伸方向相反的引物,通过长距离 PCR扩增,得到携带突变位点的新质粒;然后用Dpn I酶切去掉母质粒;再转化至大肠杆菌进行克隆.结果...

【关键词】 聚合酶链反应； 诱变,定点； SCN1A；

【中文期刊】 刘利东 涂洪斌  等 《热带医学杂志》 2007年7卷1期 30-33页 ISTICCA

【摘要】 目的 分析确定SARS-CoV Spike蛋白序列中对SARS-CoV的感染能力相关性较强的位点,并进行定点诱变.方法 比对不同来源株SARS-CoV的Spike蛋白的序列,计算其相应位点的突变墒值和突变几率,结合进一步的生物信息学分析,筛...

【关键词】 SARS-CoV； Spike蛋白； 定点诱变；

【中文期刊】 钟长青 智发朝  等 《胃肠病学》 2007年12卷6期 331-334页 ISTICCA

【摘要】 背景:NOD2/CARD15基因序列单核苷酸多态性(SNP)与欧美人群的克罗恩病(CD)明显相关,其中R702W、G908R和3020insC 3个SNP位点与CD的相关性尤为显著.而日本、韩国以及我国香港和浙江地区的研究均未发现上述3个S...

【关键词】 基因,NOD2/CARD15； 诱变,定点； 转染；

【中文期刊】 刘玉冰 李晓霞  等 《天津医科大学学报》 2007年13卷1期 98-99页 ISTIC

【摘要】 <篇首> 定点诱变技术广泛应用于基因工程和蛋白质工程,常用的方法有化学诱变、寡核苷酸介导的诱变,盒式诱变和基于PCR的诱变,其中基于PCR的诱变包括重叠延伸PCR(over-lap extension PCR,OEPCR),大引物PCR(meg...

【关键词】 聚合酶链反应； 定点诱变； 重叠延伸PCR；

【中文期刊】 熊宇泉 李冰  《热带医学杂志》 2005年5卷6期 756-758,742页 ISTICCA

【摘要】 目的验证嗜热四膜虫核酶自我剪接功能,定点诱变Ⅰ型内含子核酶及检测其自我剪接功能.方法PCR扩增嗜热四膜虫核酶基因连入pGEM-T载体,通过重组PCR获得3个非发夹区域定点诱变的Ⅰ型内含子核酶基因,连入pG-EM-T载体,分别进行体外转录.结...

【关键词】 Ⅰ型内含子核酶； 定点诱变； 自我剪接；

【中文期刊】 田亚萍 张培因  等 《医学分子生物学杂志》 2004年1卷1期 10-14页 ISTICCA

【摘要】 目的定点诱变热休克蛋白-乳头瘤病毒表位融合蛋白的基因中编码半胱氨酸的密码子,解决下游纯化工作中产生多聚体蛋白的问题.方法在对蛋白质序列进行计算机表位预测及生物学特性分析的基础上,利用PCR的定点诱变技术,使原始基因序列中编码半胱氨酸的TGC...

【关键词】 乳头瘤病毒表位融合基因； 定点诱变； 表位预测；

【中文期刊】 陈春华 曹英林  等 《癌变·畸变·突变》 2003年15卷1期 10-12页 ISTICCA

【摘要】 目的:为研究载脂蛋白CⅡ启动子-190处的碱基突变对其转录活性的影响,构建带有突变的载脂蛋白CⅡ启动子的表达载体. 方法:以插入有正常ApoCⅡ启动子的质粒pGL 3为模板,设计一对带有预期突变的完全互补的引物,利用Stratagene的定...

【关键词】 载脂蛋白CⅡ； 定点诱变； 启动子；

【中文期刊】 陈春华 曹英林  等 《中国动脉硬化杂志》 2003年11卷6期 509-511页 ISTICCA

【摘要】 为探讨载脂蛋白CⅡ基因启动子区-190 bp处的碱基突变(T→A)对载脂蛋白CⅡ基因转录的影响,及其与血浆载脂蛋白CⅡ浓度降低的关系.通过定点诱变技术构建带有-190 bp处 T→A突变的载脂蛋白CⅡ启动子的荧光素酶表达载体pGL3;应用脂...

【关键词】 分子生物学； 载脂蛋白CⅡ启动子突变对转录的影响； 定点诱变；

【中文期刊】 董军 黄强  等 《江苏医药》 2001年27卷11期 813-815页 ISTICCA

【摘要】 目的抗胶质瘤单克隆抗体建株初期效价为1:105,经长期传代培养后效价下降至低于1:104,为探索其分子机制并将其改造为有活性的单链抗体,为构建靶向基因转移载体奠定基础.方法通过RT-PCR克隆该单抗可变区基因,发现轻链可变区CDR1区出现一...

【关键词】 胶质瘤； 单链抗体； 定点诱变；

【中文期刊】 王秀宏 高旭  等 《哈尔滨医科大学学报》 2000年34卷3期 165-167页 ISTICCA

【摘要】 目的验证血红素加氧酶-1(HO-1)中的第39位赖氨酸(K39)对电子传递的影响.方法通过定点诱变将K39置换为酸性氨基酸谷氨酸(E),并将得到的变异型酶基因克隆到高度表达的载体上表达,提纯变异型HO,测定其活性,比较变异型酶与野生型酶的活...

【关键词】 血红素加氧酶； 定点诱变； 碱性氨基酸；

【中文期刊】 杨宇 李厚敏  等 《生命科学研究》 2000年4卷4期 314-320页 ISTICCA

【摘要】 通过凝胶滞留分析和荧光素酶报告基因检测系统,鉴定出人类β珠蛋白基因5'旁侧远端帽位上游-2 132～-1 82 2 bp间存在一个活性沉默子片段(310 bp),将其亚克隆至pUC-T载体中,然后采用人工设计的突变引物,将经DNA足纹分析确...

【关键词】 人类β珠蛋白基因； 沉默子； 定点诱变；

【中文期刊】 苏建臣 邴雷  等 《河北师范大学学报（自然科学版）》 2009年33卷6期 810-814页

【摘要】 通过对抗菌肽Protegrin成熟肽的氨基酸组成和作用机理分析,并根据已报道的Protegrin基因序列设计引物,PCR扩增获得定点诱变的突变体基因pg-g,其编码蛋白的末端相对于野生型增加1个非极性氨基酸Gly.利用表达载体pET-28a...

【关键词】 抗菌肽； Protegrin； 定点诱变；

【中文期刊】 张晓玮 崔文涛  等 《畜牧兽医学报》 2009年40卷11期 1588-1593页

【摘要】 本研究旨在克隆通城猪含有第1个内含子的MSTN前肽基因,构建真核定点诱变载体,并通过转染C2C12细胞验证载体表达的有效性.以通城猪血液样品中提取的DNA作为模板,PCR扩增得到含第1个内含子的MSTN前肽基因,扩增产物进行克隆、测序.再将...

【关键词】 猪； MSTN前肽基因； 定点诱变；

【中文期刊】 黄春晓 崔锦  等 《河南农业科学》 2006年5期 24-27页

【摘要】 对来自野油菜黄单胞菌的α-淀粉酶基因(Gene Bank的序列号为AY167892)的启动子进行定点诱变,研究启动子的碱基改变对该基因在大肠杆菌中表达量的影响,在基因工程中有重要的意义.以α-淀粉酶基因连接到pBluescript KS+形...

【关键词】 α-淀粉酶基因； 启动子； 定点诱变；

【中文期刊】 申晓靖 段广才  等 《河南医学研究》 2005年14卷2期 100-103页 CA

【摘要】 目的:大肠杆菌不耐热肠毒素(LT)是很强的免疫原,也具有很强的粘膜免疫佐剂作用,但LT的毒性限制了它在人类疫苗中使用.本研究希望通过定点诱变构建无毒或减毒并保持LT免疫学特性的突变体.方法:以人源肠毒素大肠杆菌(ETEC)菌株E.coli ...

【关键词】 大肠杆菌； 不耐热肠毒素； 定点诱变；