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            【中文期刊】 杨靖  宋波  等 《中原医刊》 2007年34卷10期 32-33页

            【摘要】 目的 构建可用于神经系统基因功能研究和基因治疗的慢病毒RNAi载体系统,并建立一种方便、快捷的慢病毒滴度测定方法 .方法 三质粒系统:PLK0.1-puro、△8.2、水疱性口炎病毒G糖蛋白(VSV-C)共转染293T细胞,产生慢病毒RNA...

            【关键词】 慢病毒载体RNA干扰滴度测定

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            【中文期刊】 余春梅  陈昕  等 《中华微生物学和免疫学杂志》 2010年30卷8期 771-774页ISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 目的 建立用于绿色荧光标记的重组人偏肺病毒(GFP-rhMPV)空斑形成滴度测定方法.方法 基因组中插入绿色荧光蛋白基因的hMPV全序列cDNA质粒和主要蛋白质表达质粒转入细胞293T后获得感染性重组hMPV.GFP-rhMPV在Vero-...

            【关键词】 人偏肺病毒空斑形成实验滴度测定

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            【中文期刊】 韩翠翠  刘立琨  等 《生物技术通报》 2019年35卷7期 141-147页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 旨在构建TOX3基因RNAi慢病毒载体并观察其对人乳腺癌ZR-75-1细胞增殖能力的影响.针对TOX3基因设计干扰靶序列,构建载体,测序正确后进行慢病毒包装及滴度测定.转染ZR-75-1细胞,荧光显微镜下观察表达GFP的细胞数目,实时荧光定...

            【关键词】 TOX3基因慢病毒载体RNA干扰

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            【中文期刊】 郭新宇  姜锋  等 《细胞与分子免疫学杂志》 2012年28卷1期 81-83页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:构建人类白细胞抗原G5(HLA-G5)的表达载体,并进行慢病毒包装,为进一步研究HLA-G5功能提供基础工具.方法:人工合成HLA-G5全长序列经测序正确后,定向接入真核表达载体pCDH-CMV-MCS-EF1-copGFP,转化人大...

            【关键词】 人类白细胞抗原G5真核表达载体慢病毒

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            【中文期刊】 庞实锋  廖霞  等 《细胞与分子免疫学杂志》 2012年28卷7期 688-690,695页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:通过绿色荧光蛋白(GFP)标记,构建可示踪的人核迁移蛋白(hNUDC)慢病毒RNA干扰载体,并实现其对靶细胞的转导.方法:通过分子克隆技术将人核迁移蛋白的发夹RNA(shNUDC-F)克隆至慢病毒表达载体中,构建成靶向针对hNUDC的...

            【关键词】 慢病毒RNA干扰发夹RNA,巨核细胞

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            【中文期刊】 林晓晨  杨鑫  等 《吉林大学学报(医学版)》 2012年38卷2期 187-191,封2页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:研究异种基因启动子在Jurkat细胞中调节外源基因表达的作用,为人类白血病动物模型的建立提供理论依据.方法:利用生物信息学手段预测并克隆出猪CD4基因启动子,然后利用克隆的猪CD4基因启动子构建和包装慢病毒载体.包装的病毒经过滴度检测...

            【关键词】 CD4基因慢病毒Jurkat细胞

            OA
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            【中文期刊】 钟诚  姜振东  等 《第三军医大学学报》 2012年34卷18期 1818-1821页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 构建大鼠促红细胞生成素( erythropoietin,EPO)重组腺病毒载体,并转染于体外培养的大鼠螺旋神经元( spiral ganglion neurons,SGNs).方法 全基因合成大鼠EPO基因,亚克隆至穿梭质粒pAdTr...

            【关键词】 促红细胞生成素腺病毒构建

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            【中文期刊】 单晶辉  王心蕊  等 《中国公共卫生》 2011年27卷5期 572-574页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 探索利用小鼠原代神经元细胞测定狂犬病病毒(rabies virus,RV)滴度的可行性.方法 分离培养小鼠大脑皮质原代神经元细胞,接种100小鼠脑内接种半数致死量(MICLD50)的标准攻击强毒(CVS)毒株,通过免疫荧光和反转录聚合...

            【关键词】 狂犬病病毒大脑皮质原代神经元小鼠脑内接种半数致死量

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            【中文期刊】 马运葵  祁昆  等 《中国微生态学杂志》 2010年22卷5期 479-封3页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 评价麻疹减毒活疫苗(Measles Attenuated Live Vaccine,MV)不同接种剂量在初免及复种后的免疫效果及差异性.方法 在同一观察区域、不同时段对适龄儿童分成两组采用MV 0.2 ml与0.5 ml接种剂量分别在...

            【关键词】 麻疹减毒活疫苗剂量免疫

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            【中文期刊】 王青  胡建和  等 《中国生物工程杂志》 2010年30卷9期 19-23页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 研究表达H5 N1亚型禽流感病毒HA基因重组腺病毒pAd-H5的遗传稳定性及重组病毒的滴度测定.将重组腺病毒pAd-H5在293细胞上连续传代20次,取第5、10、15和20代的重组病毒采用PCR方法扩增禽流感病毒HA基因,并进行基因序列测...

            【关键词】 H5N1亚型禽流感重组腺病毒遗传稳定性

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            【中文期刊】 宋小星  尤圣武  等 《中华麻醉学杂志》 2008年28卷5期 397-400页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 构建携带米非司酮(RU486)可调控β内啡肽(β-EP)基因的腺病毒(Ad-RUNEP).方法 构建携带RU486可调控β-EP基因的腺病毒穿梭质粒pDC312-RUNEP,重组得到Ad-RUNEP后进行扩增,纯化和滴度测定,并分别在...

            【关键词】 β内啡肽腺病毒科镇痛

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            【中文期刊】 陆权  陆敏  《实用儿科临床杂志》 2007年22卷4期 241-243页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 肺炎支原体(mycoplasma pneumoniae,MP)是各年龄段儿童急性上、下呼吸道感染的常见病原,其年感染发病率为9.6%~66.7%,每隔3~8年有一次流行,并可在一个密闭环境中如学校、幼托机构、夏令营等造成暴发.MP感染无性别...

            【关键词】 肺炎支原体感染流行病学

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            【中文期刊】 陈刚  乔玉芳  等 《中华内分泌代谢杂志》 2007年23卷4期 363-367页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 构建NF-κB p65亚基特异的RNA干扰(RNAi)腺病毒表达载体,并验证其对p65亚基的基因沉默效应.方法 设计合成三对针对p65 mRNA不同位点的短发夹RNA(shRNA)编码序列,克隆到穿梭载体中,通过体外同源重组将短干扰R...

            【关键词】 RNA干扰腺病毒科基因沉默

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            【中文期刊】 温茜  马骊  等 《中华创伤骨科杂志》 2007年9卷12期 1143-1147页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 构建携带人肿瘤坏死因子受体Ⅰ胞外区和IgGFc融合基因的重组腺病毒载体(Ad-TNFRⅠ-IgGFc),体外转染兔骨髓基质干细胞(BMSCs),探讨转TNFRⅠ-IgGFc基因的BMSCs治疗类风湿关节炎的可行性.方法 将TNFR Ⅰ...

            【关键词】 肿瘤坏死因子腺病毒载体骨髓基质干细胞

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            【中文期刊】 周欣荣  原慧萍  等 《中华微生物学和免疫学杂志》 2007年27卷8期 766-770页ISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 目的 制备含大鼠脑源性神经营养因子(BDNF)基因的逆转录病毒,建立荧光定量PCR测定滴度的方法.方法 扩增BDNF基因,构建重组质粒pLXSN-BDNF,将其转染包装细胞,经G418筛选、病毒浓缩后用荧光定量PCR法和克隆形成法测定滴度....

            【关键词】 脑源性神经营养因子逆转录病毒荧光定量PCR

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            【中文期刊】 邹亚男  李天发  等 《中国地方病学杂志》 2005年24卷5期 575-578页ISTICPKUCA

            【摘要】 目的构建携载人组织因子途径抑制物(tissue factor pathway inhibitor,TFPI)基因的重组腺病毒载体,为基因治疗提供实验基础.方法利用基因重组技术,将人TFPI基因连接到穿梭质粒pDC316中,然后将腺病毒骨架质...

            【关键词】 组织因子途径抑制物腺病毒基因疗法

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            【中文期刊】 王方  王红卫  等 《中华眼科杂志》 2003年39卷4期 201-205页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的应用新型逆转录病毒载体介导单纯疱疹病毒胸苷激酶(herpes simplex virus-thymidine kinase,HSV-TK)基因转移, 探讨丙氧鸟苷(ganciclovir,GCV)对HSV-TK基因修饰人视网膜色素上皮细...

            【关键词】 膜糖蛋白质类病毒包膜蛋白质类单纯疱疹病毒属

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            【中文期刊】 邵科宇  张爽  等 《解剖学报》 2019年50卷6期 741-746页ISTICCSCDCABP

            【摘要】 目的 探讨Ⅰ型干扰素受体1 (IFNAR1)对伪狂犬病病毒(PRV)复制的影响.方法 以慢病毒介导的CRISPR/Cas9基因编辑技术,构建猪肾上皮细胞(PK15)敲除IFNAR1基因的稳定细胞系.运用细胞活力检测、荧光观察、流式细胞术检测...

            【关键词】 猪肾上皮细胞Ⅰ型干扰素受体1伪狂犬病病毒

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            【中文期刊】 徐渴  王欣  等 《环境与健康杂志》 2017年34卷11期 965-968,封3页ISTICCA

            【摘要】 目的 构建小鼠miR-29c过表达重组慢病毒载体,并对表达产物进行鉴定.方法 应用PCR法从小鼠MLE-12细胞中提取pre-miR-29c基因,测序后将其克隆到pLenti-CMV-EGFP慢病毒载体,通过PCR筛选及测序对阳性克隆进行鉴...

            【关键词】 miR-29c慢病毒载体构建

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            【中文期刊】 郑波  王亮  《中国生物制品学杂志》 2017年30卷5期 455-458页ISTICCSCDCABP

            【摘要】 目的 比较细胞工厂培养箱及普通培养箱用于生产水痘疫苗的差异.方法 对两种培养箱进行温度测试.比较两种培养箱内培养人胚肺成纤维MRC-5细胞的生长情况及活细胞数量,并对制备出的相应水痘疫苗原液进行无菌检查及病毒滴度测定.结果 与普通培养箱比较...

            【关键词】 细胞工厂培养箱水痘疫苗人胚肺成纤维MRC-5细胞

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            【中文期刊】 黄维金  朱蓉  等 《中国生物制品学杂志》 2012年25卷9期 1099-1101,1105页ISTICCSCDCABP

            【摘要】 目的 制备病毒载体疫苗滴度测定用国家标准品.方法 以鸡胚成纤维细胞制备痘苗病毒,经密度梯度超速离心纯化后,加入天花疫苗保护剂,分装冻存,分发至我国4个不同实验室,按照统一的结晶紫染色蚀斑法实验方案进行协作标定,每次实验稀释后取2个稀释度,每...

            【关键词】 痘苗病毒蚀斑滴定标准品

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            【中文期刊】 岳野  李树香  等 《中国生物制品学杂志》 2012年25卷6期 767-769页ISTICCSCDCABP

            【摘要】 目的 建立脑心肌炎病毒(Encephalomyocarditis virus,EMCV)蚀斑纯化及滴度测定方法.方法 将EMCV系列稀释后接种至单层Veto细胞,覆盖甲基纤维素,出斑后挑取蚀斑进行扩增,收获病毒液.选取5个EMCV原液样品感...

            【关键词】 脑心肌炎病毒蚀斑纯化蚀斑滴定

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            【中文期刊】 王孟丽  马建党  等 《中华实用诊断与治疗杂志》 2012年26卷8期 766-767,770页ISTIC

            【摘要】 目的 探讨Oct4,Sox2,c-Myc及Klf4-慢病毒载体的构建与包装.方法 从含有Oct4,Sox2,c-Myc及Klf4的质粒中获取目的基因,将目的基因与酶切线性化的慢病毒载体进行定向连接,其连接产物转化细菌感受态细胞,对长出的阳性...

            【关键词】 慢病毒载体构建目的基因

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            【中文期刊】 俞富祥  季世强  等 《中华实验外科杂志》 2012年29卷7期 1385页ISTICCA

            【摘要】 我们通过构建脂肪特异性蛋白27( Fsp27)基因的慢病毒载体,并感染活化态肝星状细胞(HSCs),为探讨该基因的抗纤维化作用奠定基础.一、材料与方法1.材料:293T及HSCs由温州医学院实验动物中心提供;病毒构建所需试剂分别购自Gene...

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            【中文期刊】 郭元元  游莉  等 《中国生物制品学杂志》 2011年24卷3期 259-262页ISTICCSCDCABP

            【摘要】 目的 构建人S100A8(hS100A8)重组腺病毒质粒,为hS100A8的深入研究奠定基础.方法 从pGST-hS100A8中扩增hS100A8片段,亚克隆至穿梭质粒pAdTrack-TOX,构建重组穿梭质粒pAdTrack-TOX-hS...

            【关键词】 S100A8蛋白质类重组腺病毒

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            【中文期刊】 王小波  何金生  等 《中华实验和临床病毒学杂志》 2010年24卷2期 147-149页MEDLINEISTICCSCDCA

            【摘要】 目的 建立稳定的呼吸道合胞病毒(RSV)感染滴度测定的实时荧光定量PCR(Realtime Quantitative PCR,Q-PCR)检测方法和酶免疫斑点法(Enzyme Immunospots,EIS),并与半数定量方法(50% ti...

            【关键词】 呼吸道合胞病毒,人滴定分析法聚合酶链反应

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            【中文期刊】 陈哲文  金于兰  等 《中国生物制品学杂志》 2010年23卷12期 1333-1337页ISTICCSCDCABP

            【摘要】 目的 观察水痘减毒活疫苗Oka株(V-Oka)的传代稳定性.方法 将V-Oka病毒在人二倍体细胞MRC-5上连续传代至50代,观察病毒的培养特性.选择32、34、38、42、46、50代病毒进行病毒滴度测定和鉴别试验,提取病毒DNA,对V-...

            【关键词】 水痘疫苗疫苗,减毒Oka株

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            【中文期刊】 任松涛  姚维成  等 《现代生物医学进展》 2010年10卷20期 3823-3826页ISTICCA

            【摘要】 目的:构建并制备携带靶向干扰Notch-1基因shRNA的重组腺相关病毒载体.方法:设计针对Notch-1的靶DNA序列,构建重组质粒pAAV-MCS2/siRNA-Notch-1,将该质粒和腺相关病毒包装质粒pAAV-RC,腺病毒辅助质粒...

            【关键词】 Notch-1基因小RNA重组腺相关病毒

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            【中文期刊】 温银田  张丙芳  等 《现代生物医学进展》 2010年10卷4期 606-609页ISTICCA

            【摘要】 目的:构建人肝癌靶向性CD80基因重组腺病毒载体.方法:首先,从人基因组DNA中克隆AFP增强子、启动子,利用腺病毒穿梭质粒pShuttle和pShutte-CMV,采用AFP增强子替换CMV启动子,构建含有AFP启动子和增强子的穿梭质粒,...

            【关键词】 肝癌靶向治疗CD80

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            【中文期刊】 张巨峰  陈艳娜  等 《现代生物医学进展》 2010年10卷7期 1205-1207页ISTICCA

            【摘要】 目的:包装携带人白细胞介素12(IL-12)的逆转录病毒,用于宫颈癌的治疗研究.方法:携带IL-12的逆转录病毒重组质粒pL35P40SN经PA317细胞包装,G418筛选.在NIH3T3细胞进行病毒滴度测定.然后用病毒感染人宫颈癌细胞He...

            【关键词】 IL-12基因逆转录病毒宫颈癌

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