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            【中文期刊】 冯国伟  刘霞  等 《法医学杂志》 2021年37卷2期 158-165页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 观察电击死大鼠皮肤超微结构,检测心肌细胞中缺氧诱导因子-2α(hypoxia-inducible factor-2α,HIF-2α)和心脏型脂肪酸结合蛋白(heart type-fatty acid-binding protein,H...

            【关键词】 法医病理学电击扫描电镜

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            【中文期刊】 田佳敏  莫奕豪  等 《天津农学院学报》 2021年28卷2期 43-46页

            【摘要】 为研究蚯蚓的不同处理对几种猪场常见有害菌的抑菌性能,从而将其运用到猪的饲料添加剂中.本试验利用纸片扩散法和紫外分光光度法对比研究蚯蚓匀浆液、电击蚯蚓获得的体腔液、诱导后电击蚯蚓所得的体腔液对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和猪链球菌的抑菌性能.通过...

            【关键词】 大平二号蚯蚓匀浆上清液电击上清液

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            【中文期刊】 张国忠  李瑞利  等 《法医学杂志》 2015年4期 262-265页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:观察电击死大鼠心脏超微结构及热休克蛋白70(heat shock protein 70,HSP70)、低氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)的表达变化,探讨其是否能作为电击死法医学鉴...

            【关键词】 法医病理学电击心脏

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            【中文期刊】 鞠康  李霞  等 《临床心身疾病杂志》 2013年19卷3期 193-196页CA

            【摘要】 目的 探讨急性应激抑郁模型大鼠血浆脑源性神经营养因子的水平及外周粒细胞与脑组织中脑源性神经营养因子的表达.方法 将16只成年雄性大鼠随机分为实验组与对照组,每组8只,实验组大鼠连续接受电击诱导3 d,采用旷场试验评价两组大鼠行为,安乐处死,...

            【关键词】 动物应激电击诱导大鼠

            浏览:303 被引:3 下载:44
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            【中文期刊】 敖敬群  王瑾雯  等 《生物化学与生物物理进展》 2003年30卷4期 629-633页SCIISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 伪狂犬病病毒囊膜糖蛋白E是一种在伪狂犬病根除计划中具有重要作用的糖蛋白.将伪狂犬病病毒闽A株gE基因去信号肽片段克隆到巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)表达载体pPICZαA中,获得的重组表达载体pPICZαA-FL电击转化野...

            【关键词】 伪狂犬病病毒,gE基因去信号肽片段,Pichia pastoris表达系统,抗原性

            浏览:269 被引:2 下载:17
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            【中文期刊】 王参军  陈克平  等 《生物学杂志》 2015年32卷6期 17-19,29页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 为探讨密码子优化的( GGGGS) 3对重组人血清白蛋白在毕赤酵母中表达的影响,分别用PCR的方法扩增出hsa和hsa-(ggggs)3,经BamHⅠ/EcoRⅠ双酶切后与 BamHⅠ/EcoRⅠ双酶切的 pPIC9K连接,构建成 pPIC...

            【关键词】 连接肽人血清白蛋白毕赤酵母

            浏览:458 被引:1 下载:28
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            【中文期刊】 李腾飞  孙秀萍  等 《中国实验方剂学杂志》 2012年18卷2期 132-135页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:探讨石菖蒲水提物(WERAT)在获得性无助模型上的抗抑郁作用及其对神经系统的作用机制.方法:在获得性无助实验中,将大鼠随机分为空白对照组、模型组、丙咪嗪(100 mg·kg-1)组、WERAT(100,200 mg·kg-1)组,连续...

            【关键词】 石菖蒲获得性无助5-羟色胺

            浏览:323 被引:50 下载:8
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            【中文期刊】 罗焕光  黎群  《实用医学杂志》 2010年26卷14期 2532-2534页ISTICPKUCA

            【摘要】 目的:观察依托咪酯以及异丙酚和琥珀胆碱在无抽搐电休克治疗(MECT)麻醉时对患者血钾升高和肌痛的影响.方法:60例首次住院的精神分裂症男性患者,随机双盲均分为A、B两组,每组30例,每例完成6次MECT.两组均首先术前30min肌肉注射阿托...

            【关键词】 依托咪酯丙泊酚琥珀胆碱

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            【中文期刊】 张变玲  张儒  等 《生物工程学报》 2008年24卷8期 1480-1484页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 利用重叠延伸PCR法克隆出人脂联素基因,连接至克隆栽体pGEM-T中,转化大肠杆菌DH5α,通过测序对其进行序列分析后,进一步构建毕赤酵母表达载体pPIC3.5K-ADPN,通过电击法转化毕赤酵母GS115,转化的重组酵母茵用甲醇诱导外源基...

            【关键词】 人脂联素重叠延伸PCR巴斯德毕赤酵母

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            【中文期刊】 王艾平  粟永萍  等 《第三军医大学学报》 2008年30卷4期 310-313页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 探索人α-防御素5成熟肽(mHD5)在酵母中高效分泌表达的可行性.方法 PCR扩增获得酵母菌偏好的mHD5密码子序列,应用基因重组方法构建表达质粒,电击转化酵母菌株GS115,应用G418浓度梯度、表型和PCR技术筛选高拷贝转化株.经...

            【关键词】 防御素酵母表达生物活性

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            【中文期刊】 周利苹  张莲芬  等 《生物技术通报》 2008年3期 71-75,80页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的构建重组表达人血清白蛋白(HSA)-C肽(CP)融合蛋白的毕赤酵母表达菌株.方法根据表达系统的密码子偏好性优化CP基因,酶切连接pBlue-HSA质粒(HSA1 800bp)和CP(100bp)基因,将HSA-CP融合基因双酶切后插入分...

            【关键词】 C肽人血清白蛋白融合蛋白

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            【中文期刊】 王俊  沈微  等 《中国生物工程杂志》 2007年27卷2期 14-18页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 利用重叠PCR技术拼接PTH和HSA基因,并将构建好的融合基因插入到载体pUC19测序后插入表达载体pPIC9K中,在启动子AOX Ⅰ和α交配因子信号肽的作用下,分泌表达融合蛋白PTH-HSA.重组质粒pPIC9K/PTH-HSA经Sal ...

            【关键词】 人甲状旁腺激素融合蛋白表达载体pPIC9K

            浏览:171 被引:6 下载:12
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            【中文期刊】 金科华  赵亚华  等 《解放军医学杂志》 2007年32卷7期 707-709页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 在毕赤酵母中表达唾液富组蛋白5(HRP5)基因原始序列hrp5及突变序列hrp5'(Lys17→Asn),比较表达量及抗白色念珠菌活性.方法 选用毕赤酵母偏爱密码子,设计3'端互补、5'端带酶切位点的两对引物,PCR合成hrp5和hr...

            【关键词】 唾液富组蛋白5念珠菌,白色基因表达

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            【中文期刊】 刘军  周成  等 《微生物学通报》 2007年34卷2期 232-235页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 用PCR方法从嗜热栖热菌(Thermus thermophilus)HB27中扩增出编码α-葡萄糖苷酶基因hbg,将其克隆到大肠杆菌(Escherichia coli)表达载体pET28a(+)上,电击转化E coli BL21(DE3),...

            【关键词】 嗜热栖热菌α-葡萄糖苷酶重组表达

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            【中文期刊】 赵玲  杜晓兰  等 《第三军医大学学报》 2007年29卷14期 1361-1363页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 应用Cre/loxP系统建立HIF-1α条件性基因敲除小鼠模型.方法 电击法将构建好的HIF-1α条件性基因敲除载体转染入小鼠ES细胞,用G418与Ganciclovir对转染的ES细胞进行正负筛选,经Southern杂交鉴定得到阳性...

            【关键词】 低氧诱导因子-1α条件性基因敲除同源重组

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            【中文期刊】 邹少兰  洪解放  等 《生物技术通报》 2007年2期 124-127,150页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 重组工程(recombineering)是近几年来兴起的一种基于体内同源重组的、新型的遗传工程技术.作为重组工程应用方式之一的空隙修复(gap-repair),是一种捕捉和克隆目的DNA的方法,具有操作简单、步骤少,没有突变、保真度高,不受...

            【关键词】 重组工程空隙修复捕捉DNA

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            【中文期刊】 魏骏飞  顾园  等 《首都医科大学学报》 2006年27卷2期 158-161页ISTICPKUCA

            【摘要】 目的优化旋毛虫抗原基因Ts87在毕赤酵母系统中的表达,提高其表达量.方法选择去除自身信号肽序列的Ts87基因构建天然N末端的重组质粒,电击转化经锂盐处理过的酵母细胞X-33,摸索诱导起始细胞浓度、甲醇诱导浓度及其添加的时间间隔、pH值及诱导...

            【关键词】 旋毛虫毕赤酵母Ts87

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            【中文期刊】 闫训友  赵洪亮  等 《微生物学通报》 2006年33卷1期 1-6页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 为了克隆人基质金属蛋白酶组织抑制剂-2(TIMP-2)基因,并在Pichia pastoris中表达,根据GenBank上的TIMP-2的氨基酸序列和毕赤酵母偏爱密码子,通过化学合成和PCR相结合的方法获得了人的TIMP-2基因全长序列,构...

            【关键词】 TIMP-2毕赤酵母表达

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            【中文期刊】 闫彩珍  李瑞利  等 《中国药理学与毒理学杂志》 2006年20卷1期 7-12页ISTICPKUCA

            【摘要】 目的观察大鼠吗啡成瘾及应激诱导成瘾复发是否与脑组织神经甾体水平的变化有关.方法给大鼠注射吗啡(5 mg·kg-1·d-1,ip, 18:00~20:00)并在条件性位置偏爱(CPP)箱中训练,每日1次,连续10 d,最后1次给药后24 h测...

            【关键词】 吗啡成瘾复发应激

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            【中文期刊】 孟亚鹏  徐敏  等 《四川动物》 2006年25卷1期 68-71页ISTICPKU

            【摘要】 将草鱼生长激素基因(cGH)的cDNA亚克隆到酵母表达载体pPIC9K中, 经电击转化导入毕赤巴斯德酵母GS115菌株,获得转化子.菌落PCR技术筛选证实cGH已经整合到了酵母染色体上.对重组酵母进行诱导表达, SDS-PAGE和Weste...

            【关键词】 草鱼生长激素基因pPIC9K表达载体

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            【中文期刊】 《中国生物工程杂志》 2006年26卷7期 13-18页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 利用重叠PCR技术在体外拼接IFNβ和HSA基因,将得到的融合基因插入到毕赤酵母分泌型表达载体pPIC9K中,置于启动子AOX1和α交配因子信号肽的作用下,分泌表达融合蛋白IFNβ-HSA.重组质粒pPIC9K-IFNβ-HSA经SalI线...

            【关键词】 β干扰素巴斯德毕赤酵母融合蛋白

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            【中文期刊】 宛传丹  黄宇烽  等 《生殖与避孕》 2005年25卷7期 391-395,403页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:克隆人睾丸精子蛋白SP22基因在毕赤氏酵母中表达,并对表达产物进行纯化和鉴定.方法:RT-PCR克隆出睾丸SP22基因,导入pGEM-T克隆载体.再亚克隆到酵母真核分泌型表达载体pHIL-S1.电击转化将重组质粒pHIL-S1/SP2...

            【关键词】 精子蛋白SP22基因克隆毕赤氏酵母表达系统

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            【中文期刊】 张杰  吴希  等 《微生物学报》 2005年45卷5期 720-723页MEDLINEISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 为了在毕赤酵母中获得抗菌肽CM4表达,将抗菌肽CM4基因克隆入表达质粒pPIC9,SacⅠ线性化的重组表达质粒pPIC9-CM4电击转化P.pastoris GS115(his-),采用MM、MD板和PCR法筛选Mut+表型,甲醇诱导表达;...

            【关键词】 抗菌肽CM4毕赤酵母表达

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            【中文期刊】 张朝春  梁伟锋  等 《微生物学报》 2004年44卷2期 210-214页MEDLINEISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 根据人神经营养素-3(Human neurotrohin-3,hNT-3)的基因序列,把编码氨基酸的密码子转换成毕赤酵母(Pichia pastoris)偏爱的形式,设计了10条36~59nt的寡聚核苷酸引物,通过5次连续PCR反应,获得了...

            【关键词】 神经营养素-3毕赤酵母偏爱密码子

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            【中文期刊】 李明春  孙颖  等 《生物工程学报》 2004年20卷1期 34-38页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 γ-亚麻酸(GLA)作为人体必需的不饱和脂肪酸,具有重要的营养和药用价值,Δ6-脂肪酸脱氢酶是γ-亚麻酸合成途径中的关键酶.为了在毕赤酵母中建立一种新的合成γ-亚麻酸的表达体系,将高山被孢霉Δ6-脂肪酸脱氢酶基因与胞内表达载体pPIC3.5...

            【关键词】 高山被孢霉Δ6-脂肪酸脱氢酶γ-亚麻酸

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            【中文期刊】 陈海旭  邹冠玉  等 《中国生物化学与分子生物学报》 2002年18卷4期 461-464页MEDLINEISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 用化学合成法合成了以酵母偏爱密码子编码的抗菌肽magainin基因片段,合成片段拼接后,与pUC19重组,获得magainin基因.Magainin基因与酵母表达载体pPIC3重组,构建胞内表达载体pPIC3-Mag,电击法转化GS115宿...

            【关键词】 抗菌肽酵母表达magainin

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            【中文期刊】 刘流  陈启智  等 《临床麻醉学杂志》 2001年17卷1期 7-9页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 研究强力宁、甘利欣对心内直视手术心肌缺血再灌注损伤的保护作用。方法 48例室间隔缺损需行心内直视手术患者分为四组,每组12例。强力宁组、甘利欣组在麻醉诱导后分别用10%葡萄糖100ml加入强力宁2.5mg/kg或甘利欣2.5mg/kg...

            【关键词】 强力宁甘利欣再灌注损伤

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            【中文期刊】 阎锡绿  汤健  等 《微生物学通报》 2001年1期 48-52页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 利用毕赤酵母系统表达抗1V型胶原酶人单链抗体。首先把目的基因克隆到毕赤酵母表达载体上,电击转化受体菌。在甲醇诱导下表达单链抗体。SDS-PAGE和免疫印迹显示毕赤酵母分泌表达人单链抗体,表达量约20mg/L酵母培金物。该表达系统与大肠杆菌相...

            【关键词】 人单链抗体毕赤酵母分泌表达

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            【中文期刊】 丁秀云  李春海  等 《生物工程学报》 2001年17卷6期 643-647页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 PCR方法扩增人基质金属蛋白酶-2(MMP-2)不含信号肽的表达序列,酶切和测序鉴定正确后,构建酵母重组表达质粒pPIC9/MMP-2,电击法转化毕赤酵母(Pichia pastoris)细胞得到阳性克隆,甲醇诱导获得含大量基质金属蛋白酶-...

            【关键词】 基质金属蛋白酶-2表达毕赤酵母

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            【中文期刊】 张冬梅  潘卫庆  等 《生物工程学报》 2000年16卷6期 723-726页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 恶性疟原虫裂殖子表面蛋白1是当今疟疾疫苗主要的候选抗原.由于天然MSP1基因AT含量异常高(为74%),使得克隆全长天然基因无法实现.本文已全合成了msp1基因(4940bp),解决了该天然基因在异源系统中不稳定的问题.为制备大量msp1重...

            【关键词】 毕赤酵母恶性疟原虫疟疾疫苗

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