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【中文期刊】 方园 屈建强 等 《西安交通大学学报（医学版）》 2013年34卷4期 541-544页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 构建含目的 基因多亮氨酸重复区免疫球蛋白样区1(LRIG1)的重组质粒pEGFP-C1-LRIG1,为胶质瘤等多种上皮源性肿瘤的分子治疗奠定基础.方法 采用RT-PCR方法,从人全血总RNA中,扩增出3282bp的LRIG1cDNA片...
【关键词】 基因克隆； 真核表达载体pEGFP-C1； 重组质粒；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 程津津 任萍萍 等 《实验动物科学》 2012年29卷1期 18-21页 ISTIC
【摘要】 目的 克隆BMP7基因及构建BMP7基因真核表达载体,稳定转染于H22细胞系,制备荷瘤小鼠.方法 应用RT-PCR技术从人胚肾细胞系293T细胞总RNA中成功扩增出1 293 bp包含BMP7基冈编码区的cDNA序列,在上下游加上BamHI...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 海玲 富红丹 等 《疾病监测与控制》 2015年9卷5期 301-302页
【摘要】 目的 提高构建携pEGFP-C1的目的基因真核表达载体的成功率.方法 通过理论研究结合实验操作经验.结果 利用该方法可以高效率的成功构建真核表达载体.结论 文章提出的方法简便、通用、高效,可以解决重组DNA载体构建技术中的一系列关键问题,为...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 徐杨 杜惠芬 等 《现代检验医学杂志》 2023年38卷4期 35-39页 ISTICCA
【摘要】 目的 构建再生基因 4(regenerating gene 4,REG4)的真核表达载体,转染人胚肾细胞 293T(human embryonic kidney 293T cells,HEK 293T),获得重组人再生胰岛衍生蛋白IV(re...
【关键词】 再生基因4； 再生胰岛衍生蛋白IV； 真核表达；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 王金冬 何俊明 等 《实用医学杂志》 2012年28卷9期 1422-1425页 ISTICPKUCA
【摘要】 目的:克隆大鼠组织因子(tissue factor,TF)基因,构建真核表达载体pEGFP-N1-TF,转染C6大鼠神经胶质瘤细胞并检测转染细胞内TF表达水平.方法:采用RT-PCR法从Wistar大鼠肺组织中扩增TF基因,克隆到真核表达载...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 代炜 李彦姝 等 《中国医科大学学报》 2011年40卷8期 684-687页 ISTICPKUCABP
【摘要】 目的 构建小鼠3D3/LYRIC真核表达载体并证实融合蛋白在细胞内的表达及定位.方法 提取小鼠乳腺上皮细胞系C127的mRNA,反转录为cDNA.PCR扩增m3D3/LYRIC全长编码基因,亚克隆至pEGFP-C1表达载体中.将构建的重组...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 张平 刘斌 等 《中国组织工程研究与临床康复》 2011年15卷7期 1169-1173页 ISTICPKUCA
【摘要】 背景:白细胞介素1受体拮抗蛋白能延缓骨性关节炎进程,通过转基因方法可以使白细胞介素1受体拮抗蛋白表达的增加.目的:观察重组人重组人白细胞介素1受体拮抗蛋白荧光质粒的构建及经脂质体转染软骨细胞的表达情况.方法:双酶切法切取重组人白细胞介素1受...
【关键词】 白细胞介素1受体拮抗蛋白； 基因转染； 荧光；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 李守帅 孙学军 等 《西安交通大学学报（医学版）》 2011年32卷1期 114-118,127页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 观察尾型同源盒基因-2(CDX2)对结肠癌细胞生物学性状的影响,探讨CDX2基因在结肠癌发生发展中的作用.方法 克隆人结肠CDX2基因,构建含CDX2的pEGFP-C1-CDX2表达载体,同时设pEGFP-C1空载体组及空白对照组.利...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 李洋 刘彤 等 《中国医科大学学报》 2010年39卷12期 995-997页 ISTICPKUCABP
【摘要】 目的 构建环指蛋白6(RNF6)真核表达栽体,并证实融合蛋白在细胞内的表达及定位.方法 提取工具细胞HEK-293的mRNA,反转录为cDNA.PCR扩增hRNF6全长编码基因,并将其克隆至pCDNA3.1-myc-his A及pEGFP-...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 赵彩霞 潘晓霞 等 《上海交通大学学报（医学版）》 2010年30卷7期 747-751页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 构建突变型CD2相关蛋白(CD2AP)荧光表达载体并转染肾小球足细胞,观察细胞内骨架蛋白F-actin分布的变化.方法 定点诱变真核表达质粒pcDNA6-V5-CD2AP致CD2AP第2外显子160G＞A杂合突变,测序鉴定.利用野生型...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 王海萍 王法财 等 《安徽医科大学学报》 2010年45卷6期 733-736页 ISTICPKUCA
【摘要】 目的 构建具有绿色荧光蛋白(GFP)标签的α1抗胰蛋白酶Z突变型(ATZ)的真核表达载体,在人胚胎肾细胞(HEK 293T)中验证表达情况及检测其对细胞的影响.方法以pcDNA3.1-zeo+-ATZ质粒为模版,设计引物,PCR扩增出ATZ...
【关键词】 细胞毒性；
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【中文期刊】 张长林 许桂平 等 《中国实验血液学杂志》 2010年18卷5期 1159-1162页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 本研究探讨ifi56基因在全反式维甲酸诱导急性早幼粒细胞白血病(APL)细胞分化中的表达,构建人ifi56真核表达载体并证实融合蛋白在细胞内表达及定位情况.用RT-PCR技术检测APL细胞NB4经维甲酸处理不同时间后ifi56的表达,并从白...
【关键词】 ifi56基因； 全反式维甲酸； 急性早幼粒细胞白血病；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 荆春霞 张洹 等 《中国病理生理杂志》 2010年26卷3期 533-538页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建血管内皮细胞生长因子的真核表达载体,探讨其对白血病细胞的增殖以及化疗药物敏感性的影响.方法:应用常规基因克隆方法构建pEGFP-C1-hVEGF_(165)真核表达载体,转染白血病细胞K562,采用CCK8法检测重组质粒对细胞增殖...
【关键词】 血管内皮细胞生长因子； 真核表达载体； K562细胞；
- 概要：
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【中文期刊】 郭成 张雷 等 《西安交通大学学报（医学版）》 2010年31卷1期 41-46页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 通过构建抑癌基因野生型p53(wtp53)与核转录因子junB的融合基因真核表达载体,为进一步研究联合基因疗法在肝癌中的应用奠定一定的基础.方法 运用PCR(polymerase chain reaction)、RT-PCR(reve...
- 概要：
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【中文期刊】 魏攀 李杰 等 《郑州大学学报（医学版）》 2010年45卷1期 4-8页 ISTICPKUCA
【摘要】 目的:探讨转染杜氏盐藻14-3-3基因对食管鳞癌EC9709细胞Bcl-2和Caspase-9蛋白表达的影响.方法:将杜氏盐藻14-3-3基因cDNA序列分别亚克隆入表达载体pEGFP-C1和pcDNA3.1(+)的Hind Ⅲ和Bam H...
- 概要：
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【中文期刊】 陈凤花 李一荣 等 《中国病理生理杂志》 2009年25卷12期 2366-2370页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:将构建成功的真核表达载体pEGFP-BMI-1转染宫颈癌细胞系HeLa,检测其对同源盒(HOX)基因表达和细胞周期的影响.方法: 采用脂质体转染法,将质粒pEGFP-BMI-1 DNA瞬时转染HeLa细胞,确定融合蛋白B细胞特异性莫洛...
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【中文期刊】 徐璐璐 郭述良 等 《中国免疫学杂志》 2009年25卷5期 430-433页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建人DC-SIGN绿色荧光融合蛋白的真核表达载体,在COS7细胞表面表达鉴定.方法:用RT-PCR从人外周血单个核细胞扩增DC-SIGN蛋白基因片段,连接到T载体.测序鉴定后切下相应片段,连接到pEGFP-C1表达载体,重组质粒(命...
- 概要：
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【中文期刊】 郭荫广 陈全 等 《生物技术通报》 2009年11期 89-91,97页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 构建与增强型绿色荧光蛋白基因相连的糖基化磷脂酰肌醇(glycosyl phosphatidylinositol,GPI)序列的真核表达质粒,并检测其在A549细胞中的表达.分离人外周血淋巴细胞,提取总RNA,以RT-PCR法扩增CD24基因...
- 概要：
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【中文期刊】 徐远久 熊异平 等 《重庆医科大学学报》 2009年34卷8期 1060-1062页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建人H2B基因与GFP融合的绿色荧光蛋白真核表达质粒,并在HEK293细胞中表达.方法:通过RT-PCR从HEK293细胞总RNA中扩增获得H2B基因的部分cDNA序列,与载体pEGFP-C1连接构建H2B基因与GFP融合表达的真核...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 戴大鹏 周晓阳 等 《中华老年心脑血管病杂志》 2009年11卷3期 194-197页 ISTICPKUCA
【摘要】 目的 构建肌细胞增强因子2A(MEF2A)/绿色荧光蛋白(GFP)融合表达载体,检测其在Hela和293T细胞中的表达,探讨MEF2A第11号外显子CAG三联核苷酸重复序列的改变与其细胞学定位功能的相关性.方法 用PCR法扩增野生型MEF2...
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【中文期刊】 邵阳光 李妍 等 《中国医科大学学报》 2009年38卷8期 565-568页 ISTICPKUCABP
【摘要】 目的 构建真核表达载体pEGFP-PAK4,利用它鉴定p21活化激酶4(PAK4)在胃癌细胞中的定位,并检测外源性和内源性PAK4在胃癌细胞中的表达.方法 以pCAN2-MYC-PAK4为模板,采用PCR法进行人PAK4编码序列的扩增,并将...
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【中文期刊】 黄栋 任伟 等 《重庆医科大学学报》 2009年34卷8期 988-991页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建肌腱膜纤维肉瘤肿瘤基因同系物A(MafA)真核表达载体pEGFP-N2/MafA,pEGFP-C1/MafA,观察MafA在人肝癌细胞HepG-2细胞内的表达.为研究Mafa基因功能和作用机制奠定基础.方法:提取胰腺总RNA,经R...
【关键词】 pEGFP-N2； pEGFP-C1； 肌腱膜纤维肉瘤肿瘤基因同系物A；
- 概要：
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【中文期刊】 陈科 莫朝晖 等 《细胞与分子免疫学杂志》 2007年23卷4期 309-311,316页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建insig 2基因的真核表达质粒, 转染3T3-L1细胞并观察对下游脂肪酸结合蛋白(AP2)mRNA、脂联素mRNA表达的影响.方法:采用RT-PCR法获取小鼠全长insig 2基因, 并克隆入真核表达载体pEGFP-C3中.酶切...
【关键词】 Pegfp-C3-insig2； 3T3-L1细胞； 表达；
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【中文期刊】 钟波 李静 等 《医学研究杂志》 2019年48卷10期 58-62页 ISTIC
【摘要】 目的 构建大鼠程序性细胞死亡因子4(programmed cell death 4,Pdcd4)基因真核表达载体,为进一步研究该基因的功能提供条件.方法 提取E3大鼠肺组织总RNA,RT-PCR扩增大鼠Pdcd4基因全长cDNA;经过双酶切...
【关键词】 程序性细胞死亡因子4； 基因重组； pEGFP-C1载体；
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【中文期刊】 张红艳 张健 等 《现代肿瘤医学》 2014年6期 1236-1238页 ISTICCA
【摘要】 目的：构建人Elf5真核细胞表达质粒，并研究其在乳腺癌MCF7细胞中的亚细胞定位。方法：PCR扩增人Elf5基因，将其克隆入真核表达载体pEGFP-C1中，构建含人Elf5基因的真核表达质粒pEGFP-hElf5。利用酶切鉴定，DNA测序，...
- 概要：
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【中文期刊】 伍飞马 钱晓龙 等 《生物技术通讯》 2012年23卷1期 15-19页 ISTICCA
【摘要】 目的:研究PC-1分子在前列腺癌细胞系LNCaP中的亚细胞定位.方法:利用常规PCR和重叠PCR技术在pEGFP-C1-PC-1上分别扩增PC-1的不同截短体及缺失体基因,PCR产物经酶切后克隆到真核表达载体pEGFP-C1中；经测序确定构...
【关键词】 PC-1； 亚细胞定位； LNCaP细胞载体构建；
- 概要：
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【中文期刊】 沈涛 杨礼庆 等 《东南大学学报（医学版）》 2012年31卷2期 162-165页 ISTICCA
【摘要】 目的:构建人Polo样激酶2(hPlk2)真核表达载体并证实该融合蛋白在细胞内的表达及定位.方法:提取工具细胞Hela的mRNA,反转录为cDNA.PCR扩增hPlk2基因cDNA全长,并将其亚克隆至pEGFP-C1表达载体中.然后将构建的...
【关键词】 人Polo样激酶2； Western blot； 绿色荧光蛋白；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 刘芙蓉 李彦姝 等 《解剖科学进展》 2011年17卷2期 140-143页 ISTICCA
【摘要】 目的 构建hERα真核表达载体并证实融合蛋白在细胞内表达及定位.方法 以pcDNA3.1-flaghERα仅重组质粒(Dr.Muyan M馈赠)为模板,PCR扩增hER α全长编码基因,亚克隆至pEGFP-C1表达载体.将构建的重组质粒测序...
【关键词】 人雌激素受体； 乳腺癌； Western blot；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 王桂玲 王孝会 等 《医学分子生物学杂志》 2011年08卷1期 36-39页 ISTICCA
【摘要】 目的 构建真核表达载体pEGFP-RIPX,并鉴定RIPX在胃癌细胞中的定位,并检测外源性RIPX的表达.方法 以pBluescriptR–RIPX为模板,采用PCR 法进行人RIPX 编码序列(ORF)的扩增,并将其克隆至真核表达载体pE...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 王洪涛 俞岚 等 《生物技术通讯》 2011年22卷2期 163-167页 ISTICCA
【摘要】 目的:通过构建带EGFP标签的SGEF基因DH结构域缺失的真核表达载体pEGFP-C1-SGEF-△DH并使其在293T细胞表达,观察DH结构域缺失后SGEF在293T细胞中的定位.方法:利用重叠PCR技术在pcDNA3.1-SGEF质粒上...
- 概要：
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