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【中文期刊】 倪君丽 刘欣超 等 《畜牧兽医学报》 2024年55卷11期 5159-5172页
【摘要】 为构建以鸡柔嫩艾美耳球虫EtAMA1、EtAMA2、EtMIC3、EtMIC4、EtMIC13、EtROP5和EtSAG1等入侵相关蛋白分子为抗原基础的多表位嵌合重组抗原ET seven真核表达质粒,同时验证其在DF-1细胞中的表达和通过不...
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【中文期刊】 范建超 赵成建 等 《四川动物》 2011年30卷6期 871-875页ISTICPKU
【摘要】 目的建立利用斑马鱼胚胎快速鉴定真核质粒中目的基因表达的实验体系.方法选20枚斑马鱼受精卵,在显微镜下每隔1h记录胚胎的发育情况.另选250枚单细胞期斑马鱼胚胎,平均分成5组,一组胚胎作为对照,剩余4组分别向胚胎的单细胞内注射pEGFP-N1...
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【中文期刊】 贺宇飞 张桂梅 等 《生物工程学报》 2004年20卷5期 699-703页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 PD-L/PD-1是参与肿瘤免疫逃避的一条抑制性信号途径.为了用可溶性的PD-1受体阻断PD-L-PD-1的相互作用,将小鼠PD-1胞外段(aal-aa167)作为独立可溶性分子进行了真核表达,并对其功能进行鉴定.构建了编码小鼠PD-1胞外...
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【中文期刊】 何多姣 刘雪晴 等 《东南大学学报（医学版）》 2011年30卷3期 491-494页ISTICCA
【摘要】 目的:构建不可分型流感嗜血杆菌(nontypeable Haemophilus influenzae,NTHi)外膜蛋白P6(outer membrane protein P6,P6)真核表达的重组质粒,并在HeLa细胞中表达,为核酸疫苗的...
【关键词】 不可分型流感嗜血杆菌；外膜蛋白P6；核酸疫苗；
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【中文期刊】 余新 刘天德 等 《山东医药》 2010年50卷34期 20-22页ISTICCA
【摘要】 目的 构建类泛素基因FAT10的真核表达质粒,观察其蛋白在转染人胚肾细胞系293T中的表达.方法 采用RT-PCR法扩增FAT10全长基因片段后,克隆至pMD18-T载体进行测序分析,将FAT10克隆至pcDNA5-FRT表达载体并行酶切鉴...
- 概要：
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- 结论：
【中文期刊】 张韡 潘庆春 等 《胃肠病学和肝病学杂志》 2010年19卷12期 1090-1091,1094页ISTICCA
【摘要】 目的 构建羧基端缺失30个氨基酸的HBx蛋白的真核表达质粒,并在真核细胞内稳定表达. 方法 提取HBV-DNA阳性血清总DNA,PCR扩增截短变异的HBx基因(HBx),克隆到真核质粒pEGFP-N3中,酶切及测序鉴定.利用脂质体将重组质粒...
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【中文期刊】 徐玫芳 臧盛兵 等 《福建医科大学学报》 2009年43卷3期 193-197页ISTIC
【摘要】 目的 构建KiSS-1基因重组真核质粒,将其导入人高转移肝癌MHCC97-H细胞中,获得瞬时表达的细胞株,为进一步研究KiSS-1基因对人肝癌细胞侵袭转移的影响奠定基础.方法 Trizol试剂法提取新鲜胎盘组织总RNA,经RT-PCR扩增目...
- 概要：
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【中文期刊】 赵征 黄征难 等 《上海口腔医学》 2007年16卷4期 404-409页MEDLINEISTICCSCDCA
【摘要】 目的:构建金属蛋白酶解离素28(ADAM28)真核表达质粒,转染人牙囊细胞(HDFC)后检测ADAM28在HDFC中的表达分布.方法:采用基因重组技术构建ADAM28真核表达质粒,通过细胞培养、脂质体Lipofectamine2000介导转...
【关键词】 金属蛋白酶解离素28；牙囊细胞；真核表达质粒；
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【中文期刊】 何永林 朱道银 等 《第四军医大学学报》 2006年27卷18期 1641-1644页ISTICCA
【摘要】 目的:构建能分泌表达人9 ku颗粒溶素(granulysin)的真核质粒,为下一步利用颗粒溶素基因治疗肿瘤奠定基础.方法:以含有颗粒溶素cDNA序列的质粒为模板,通过聚合酶链反应(PCR)扩增获得含分泌肽编码基因的9 ku的颗粒溶素基因片段...
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【中文期刊】 陈枫 王明勇 等 《实用预防医学》 2004年11卷5期 865-866页ISTICCA
【摘要】 目的比较人工合成的反义硫代寡核苷酸(asODN)和反义RNA真核表达质粒(PCEP4-ac)在乙型肝炎(HBV)病毒转基因小鼠体内的抗病毒作用.方法设计合成针对HBV-pre-c/c基因的反义硫代寡核苷酸5‘-CATGCCCCAAAGCCA...
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【中文期刊】 谭谦 陈曦 等 《东南大学学报(医学版)》 2003年22卷3期 144-147页ISTICCA
【摘要】 目的:构建含人血小板衍化生长因子-B(hPDGF-B)基因的真核表达质粒,为深入研究hPDGF-B在组织修复中的作用及其在皮肤组织工程中的应用提供物质基础.方法:从原代培养的人脐静脉内皮细胞中提取总RNA,通过逆转录-聚合酶链反应扩增出hP...
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【中文期刊】 柴倩璞 赵权 《吉林畜牧兽医》 2012年33卷4期 31-33页
【摘要】 为了构建猪囊尾蚴（Cysticercuscellulosae）热休克蛋白的真核表达载体，试验利用PCR技术扩增HSP35．6的基因，将其与增强型绿色荧光蛋白的基因先后连接到pVAXI真核表达载体上，得到pVAXI—HSP35．6-EGFP的...
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【中文期刊】 涂心明 郭绍芳 等 《河南科技大学学报（医学版）》 2012年30卷3期 178-179,182页
【摘要】 目的 验证MPEG-PLGA纳米胶囊在真核质粒转染细胞中应用的可行性.方法 利用直接溶解法将MPEG-PLGA溶解于4℃双蒸水中,加入绿色荧光载体混匀后静置于37℃恒温箱中30 min制成MPEG-PLGA/pEGFP-C3纳米胶囊复合物,...
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【中文期刊】 胡伊乐 郭绍芳 等 《河南科技大学学报（医学版）》 2012年30卷3期 180-182页
【摘要】 目的 观察真核质粒在机体细胞内的表达时效,为临床基因治疗的给药间隔提供理论依据.方法 取PCDNA3.1(+)-EGFP,pEGFP-C3,pIRES-GFP 3种绿色荧光真核质粒,利用脂质体2000转染机体细胞,观察绿色荧光蛋白在细胞的表...
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【中文期刊】 王荣 贾正平 等 《分析化学》 2007年35卷8期 1137-1141页
【摘要】 采用线性聚丙烯酰胺修饰石英毛细管的高效毛细管电泳无胶筛分技术,对原核/真核质粒用不同限制性内切酶酶切,运用限制性内切酶指纹-高效毛细管电泳激光诱导荧光(REF-HPCE-LIF)检测法同时对内切酶酶切后多个和较长DNA片段进行了检测,电泳缓...
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【中文期刊】 张进安 杨章民 等 《陕西师范大学学报（自然科学版）》 2006年34卷3期 80-83页
【摘要】 以表达人CTLA4Ig(hCTLA4Ig)的原核质粒为基础,采用限制性DNA内切酶,DNA连接酶等基因重组技术,构建了能表达该蛋白的真核质粒,ELISA法检出了受转染的真核细胞培养上清液中的蛋白表达.在此基础上构建了含hCTLA4Ig的穿梭...
- 概要：
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【中文期刊】 冯霞 刘湘涛 等 《中国兽医科技》 2005年35卷5期 363-367页
【摘要】 利用反转录和套式PCR技术,从猪瘟病毒(CSFV)石门血毒中扩增出了E2基因,将其用NotⅠ和XhoⅠ双酶切后,与同样处理的真核表达载体pBudCE4.1相连,获得了pBudCE Es2-22的阳性质粒.对后者再以HindⅢ和XbaⅠ双酶切...
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【中文期刊】 黎培员 林菊生 等 《中华肝脏病杂志》 2003年11卷12期 716-718页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的构建并表达分泌性内皮抑制素真核表达质粒,以此对肝癌进行基因治疗. 方法人工合成Igκ信号肽序列,和内皮抑制素编码序列一起克隆入pcDNA3.1质粒.重组质粒转染上清液作用于ECV304内皮细胞,MTT法检测内皮细胞的增殖.局部注射重组质...
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【中文期刊】 张丽娜 巴隆 等 《吉林大学学报（医学版）》 2025年51卷1期 51-57页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建含有小鼠血清和糖皮质激素诱导激酶(SGK)1基因的真核表达载体pcDNA3.1-MYC-SGK1-mcherry,并观察载体在转染HEK293细胞后的表达情况.方法:PCR法扩增SGK1目的基因片段,并与经过Hind Ⅲ和Sbf ...
【关键词】 血清和糖皮质激素诱导激酶1；真核表达载体；HEK293细胞；
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【中文期刊】 李慧 姚思 等 《科技与创新》 2023年2期 5-7页
【摘要】 为制备结核分枝杆菌Ag85B的多克隆抗体,采用微针注射法将前期构建好的真核表达质粒pcD-Ag85B经大腿肌肉免疫SD大鼠;采用间接ELISA法检测抗体滴度;初免后42 d,经腹主动脉取血并分离血清,采用Protein G柱分离纯化Anti...
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【中文期刊】 董宇璠 金宏凯 等 《中国兽医杂志》 2023年59卷6期 55-59页
【摘要】 为了实现猪圆环病毒2型(PCV-2)和3型(PCV-3)Cap蛋白在昆虫细胞-杆状病毒系统中表达,本试验利用刚性连接肽连接PCV-2和PCV-3 Cap基因,构建杆状病毒转移载体pFastBac-PCV-2-3-Cap,双酶切验证正确后,将...
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【中文期刊】 张宇 李超 等 《中国兽医杂志》 2023年59卷9期 49-59页
【摘要】 为了分析小鼠泛素特异性蛋白酶2(USP2)2种主要转录本(Usp2-45和Usp2-69)及其编码蛋白的理化特性,构建Usp2-45真核表达载体和Usp2启动子荧光素酶报告质粒,探究生物钟系统对Usp2不同转录本启动子的调控作用,本试验利用...
- 概要：
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【中文期刊】 姚来娣 吴香菊 等 《山东农业科学》 2023年55卷9期 10-16页
【摘要】 本研究构建了猪TRIM56(sTRIM56)全长及其截短体的真核表达质粒,并检测了其融合蛋白的表达和定位.首先,根据sTRIM56基因序列及结构特点,设计扩增全长及4个截短体的引物,提取猪肺泡巨噬细胞3D4/21的总RNA,RT-PCR扩增...
- 概要：
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【中文期刊】 张强哲 秦曦明 等 《生物化学与生物物理进展》 2003年30卷3期 483-487页SCIISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 血凝素蛋白(HA)基因是禽流感病毒(AIV)重要的保护性抗原基因.为了研究 HA基因疫苗,用PCR扩增H5亚型AIV HA基因,将其克隆到质粒pcDNA4/HisMax和pRc/CMV上得到真核表达质粒pC4H5和pCMVH5.采用TfxT...
- 概要：
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【中文期刊】 郭许情 王黎霞 等 《中国兽医杂志》 2022年58卷4期 45-48,55页
【摘要】 为了构建真核重组荧光质粒pEGFP-N1-Et HP,并筛选出Lipofectamine 2000介导的高效转染细胞,本试验将柔嫩艾美尔球虫假定蛋白(Et HP)基因扩增后插入真核荧光表达载体pEGFP-N1,构建真核重组荧光质粒pEGFP...
【关键词】 柔嫩艾美尔球虫假定蛋白；真核重组荧光质粒；DF-1细胞；
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【中文期刊】 杨倩 李婷 等 《吉林畜牧兽医》 2022年43卷1期 6-7页
【摘要】 本实验成功构建了真核表达质粒pVAX1-IL-2,并对质粒进行PCR,双酶切及测序鉴定,RT-PCR成功验证了目的基因在MDBK细胞中能够转录,同时ELISA验证目的基因在MDBK细胞中能表达.研究结果为pVAX1-IL-2作为核酸疫苗的细...
- 概要：
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【中文期刊】 李方琳 王慧慧 等 《甘肃畜牧兽医》 2022年52卷3期 37-40页
【摘要】 目的:为后续进一步研究H1N1病毒DNA疫苗对小鼠免疫系统的影响提供技术支撑.方法:应用PCR方法体外扩增血凝素(HA)基因全序列,并利用pcDNA3.1(+)载体构建甲型流感病毒(H1N1)血凝素(HA)的真核表达质粒(pcDNA3.1(...
- 概要：
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【中文期刊】 黄娟 明露 等 《中国药理学通报》 2019年35卷3期 440-443页ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 目的 建立稳定表达TRPA1的HEK-293T细胞模型,并鉴定模型构建是否成功.方法 构建TRPA1真核表达质粒,采用脂质体转染法将其转入HEK-293T细胞中,经G418筛选稳定表达株,采用RT-PCR、免疫组化技术,检测HEK-293T...
【关键词】 TRPA1通道；克隆；HEK-293T细胞；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 吴蕊辛 郑薇 等 《山东医药》 2021年61卷16期 1-5页ISTICCA
【摘要】 目的 构建编码胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)α亚单位基因的重组真核表达质粒.方法 根据GenBank中人IGF-1Rα亚单位基因编码序列设计并合成引物,用TRIzol一步法从Graves病患者甲状腺组织中提取总RNA,逆转录成cDN...
【关键词】 Graves病；Graves眼病；胰岛素样生长因子1受体；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 冯敏 温俊平 等 《中国糖尿病杂志》 2017年25卷7期 649-654页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 构建pCMV-脂联素(APN)真核表达质粒,观察转染小鼠肾系膜细胞后APN的表达以及对高糖环境下肾系膜细胞增殖的影响. 方法 通过RT-PCR扩增小鼠肾系膜细胞中APN基因片段,经酶切、纯化后与pcDNA3.1质粒连接构建pCMV-A...
- 概要：
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