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            【中文期刊】 陈德强  黄丽  等 《工业微生物》 2025年55卷4期 139-143页ISTICCA

            【摘要】 文章运用RT-PCR方法,从芒果亚洲炭疽菌(Colletotrichum asianum)中克隆了 4 个CFEM候选效应蛋白基因(编号Cacfem1-Cacfem4),并将其分别与植物表达载体pCAMBIA1300 连接后转入农杆菌GV3...

            【关键词】 亚洲炭疽菌CFEM效应蛋白瞬时表达

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            【中文期刊】 杜春  平怀磊  等 《西北植物学报》 2024年44卷10期 1577-1588页ISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 [目的]滇牡丹作为牡丹育种材料,具有丰富的花色资源,研究其MYB转录因子对花色的调控作用可为牡丹花色分子育种工作提供帮助.[方法]以黄色及红色滇牡丹花部组织为材料进行徒手切片,并以其转录组数据为基础进行序列比对,得到1个MYB转录因子编码基...

            【关键词】 滇牡丹PdMYB57基因克隆

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            【中文期刊】 李敏  王亢宗  等 《世界科学技术-中医药现代化》 2022年24卷5期 1802-1810页ISTICPKUCSCD

            【摘要】 目的 刺五加三萜皂苷是我国传统中药刺五加的主要活性成分之一,具有抗炎、抗癌、抗疲劳、抗氧化等多种功效.但由于刺五加自然资源缺乏,难以满足对三萜皂苷的需求,急需寻求可持续资源利用新模式.目前,生物合成已成为植物次生代谢物积累的重要途径,为此,...

            【关键词】 刺五加β-香树脂醇合酶三萜皂苷

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            【中文期刊】 祁碧菽  李春光  等 《生物化学与生物物理进展》 2005年32卷9期 876-882页SCIISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 Ca2+/H+反向转运体作为一类Ca2+外向转运器,在植物的营养和信号转导中起着非常重要的作用.克隆了水稻Ca2+/H+反向转运体基因OsCAX3,序列分析表明OsCAX3具有11个跨膜区,其中在第6和第7个跨膜区之间有一个17个氨基酸组成...

            【关键词】 水稻Ca2+/H+反向转运体RT-PCR

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            【中文期刊】 朱佳瑛  刘维仲  等 《遗传学报》 2007年34卷3期 229-238页SCIMEDLINEISTICCSCDCABP

            【摘要】 用RT-PCR技术从小立碗藓中(Physcomitrella patens)克隆了核编码的MinE基因,命名为PpMinE,并克隆了该基因的基因组DNA.序列比对显示该基因编码的蛋白质与真细菌和绿藻叶绿体编码的MinE蛋白具有较高的相似性....

            【关键词】 小立碗藓质体分裂PpMinE

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            【中文期刊】 单丽波  李义文  等 《遗传学报》 2000年27卷1期 65-69页SCIMEDLINEISTICCSCDCABP

            【摘要】 报道了玉米花色素苷合成调节基因C1-R在小麦幼胚、玉米愈伤组织、水稻愈伤组织、烟草叶片中的瞬时表达情况.由于调节基因C1-R激活了植物体细胞内花色素苷的合成,因此不需任何生色底物,即可活体观察到花色素苷的表达.结果表明,对于目前仍主要通过基...

            【关键词】 花色素苷瞬时表达基因枪

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            【中文期刊】 孟妮  刘雅莉  等 《西北植物学报》 2018年38卷6期 1017-1023页ISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 蝴蝶兰花器官中基因功能的研究受遗传转化效率低和遗传转化周期长的制约,而花瓣瞬时表达体系是一种快速分析基因功能的有效手段.该研究以蝴蝶兰'大辣椒'花瓣和萼片为实验材料,通过农杆菌介导的瞬时转化方法,分析了侵染的菌液浓度、侵染时间、乙酰丁香酮浓...

            【关键词】 蝴蝶兰花器官农杆菌转化

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            【中文期刊】 舒小娟  温腾建  等 《西北植物学报》 2015年35卷6期 1262-1268页ISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 为了建立葡萄原生质体进行遗传转化的技术,该研究以葡萄品种‘黑香蕉’的叶片和愈伤组织为材料,分析纤维素酶和离析酶的浓度与配比、渗透压和酶解时间等主要因素对葡萄原生质体分离的影响,探讨建立稳定、高效的葡萄原生质体分离与瞬时转化体系,为鉴定目标基...

            【关键词】 葡萄原生质体叶片

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            【中文期刊】 郭焱  瞿新明  等 《中国免疫学杂志》 2014年30卷1期 73-76页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:构建含有组织型纤溶酶原激活剂(tPA)信号肽的人卵透明带3(HuZP3)蛋白核心抗原核酸疫苗质粒并进行体外瞬时表达.方法:将HuZP3基因用PCR方法扩增并分别引入限制性内切酶酶切位点,然后克隆入pIRESIneo载体中获得核酸疫苗质...

            【关键词】 HuZP3核心抗原核酸疫苗瞬时表达

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            【中文期刊】 杨丽萍  金太成  等 《遗传》 2013年35卷1期 111-117页MEDLINEISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 由于瞬时表达系统的局限性使其不利于规模化生产的应用,本文介绍了一种新型的瞬时表达侵染技术 -种子吸收法在植物中进行外源蛋白的表达.利用种子自然吸收来源于TMV 病毒载体的农杆菌重悬液在番茄 中成功的表达了报告基因GFP,并优化了影响基因表达...

            【关键词】 植物生物反应器瞬时表达系统种子吸收法

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            【中文期刊】 谭小力  诸葛锐军  等 《生物学杂志》 2012年29卷6期 93-96页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 实验以甘蓝型油菜宁油16为材料,绿色荧光蛋白(GFP)为报告基因,建立了农杆菌介导的油菜子叶瞬时表达系统.我们构建了GFP表达载体pB2GW7.0-gfp,并成功转化农杆菌.实验中通过添加P19来提高GFP在油菜子叶中的瞬时表达量.并提取了...

            【关键词】 甘蓝型油菜子叶农杆菌

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            【中文期刊】 莫倩珍  麦荣嘉  等 《南方医科大学学报》 2012年32卷6期 772-777页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 构建适用于快速高效植物瞬时表达系统的实验室烟草无土栽培体系.方法 优化烟草的无土栽培条件,基于Geminivirus新型植物高效瞬时表达系统,观察烟草品种、侵染时机、侵染工程菌浓度、侵染后叶片采收时间对无土栽培烟草表达绿色荧光蛋白(G...

            【关键词】 烟草瞬时表达无土栽培

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            【中文期刊】 秦丽  张惠华  等 《中国病理生理杂志》 2011年27卷2期 293-299页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:获得人早期生长反应1(EGR1)基因,并在人骨肉瘤细胞中瞬时表达,研究该基因在人骨肉瘤细胞中的作用,并探讨其可能的作用机制.方法:以人胎盘组织为模板,巢式PCR(nest PCR)扩增获得EGR1全长基因,克隆入真核表达载体pcDNA...

            【关键词】 基因早期生长反应瞬时表达

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            【中文期刊】 胡迪超  张爱华  等 《中国免疫学杂志》 2011年27卷7期 648-653页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:构建抗人CD25嵌合抗体基因并在哺乳动物细胞中进行瞬时表达和初步鉴定.方法:采用RLM-RACE法克隆WuTac抗体可变区和信号肽序列,并利用基因拼接法构建嵌合抗体基因.用脂质体法瞬时转染三种哺乳动物细胞,并使用ELISA、FCM、W...

            【关键词】 CD25RLM-RACE基因拼接

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            【中文期刊】 关峰  韦正乙  等 《基因组学与应用生物学》 2011年30卷5期 571-576页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 内含子是基因的重要组成部分,它与功能基因表达之间的关系越来越被重视.本研究以pCAMBIA3301为载体,利用玉米泛素启动子Ubi1和水稻肌动蛋白启动子Actin1构建两个GUS基因表达载体p33U1和p33A1,同时设置3个对照载体.通过...

            【关键词】 内含子GUS基因瞬时表达

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            【中文期刊】 王帅  吴颖  等 《生物技术通报》 2011年9期 72-75,89页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 以玉米基因组DNA为模板,通过PCR技术扩增得到了腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶AGPase基因编码区上游1912 bp的启动子(AGPasep)序列.该序列包含TATA-box,CAAT-box等一些高等植物特有的启动子基本核心序列,推断其为...

            【关键词】 玉米AGPase启动子GUS瞬时表达

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            【中文期刊】 黄海军  高其双  等 《生物技术通报》 2011年4期 112-115,132页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 采用PCR方法从猪外周血液淋巴细胞cDNA中扩增出与预期设计大小相符的GM-CSF基因特异性条带,PCR产物经EcoR Ⅰ和Xho Ⅰ双酶切后,插入到载体pIRES2-EGFP构建成真核表达载体pIRES2-EGFP-GM-CSF.经PCR...

            【关键词】 猪粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子克隆真核表达载体

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            【中文期刊】 赵群力  闵娟  等 《山东大学学报(医学版)》 2010年48卷9期 29-33,39页ISTICPKUCA

            【摘要】 目的 构建重组真核表达载体pVAX1-SPreS2作为基因佐剂,用以增强或调节弓形虫DNA疫苗的体液及细胞免疫效果.方法 采用重叠延伸PCR技术,扩增乙肝病毒表面抗原S和PreS2基因,引入编码GSGSGS柔性多肽序列作为接头拼接S和Pre...

            【关键词】 基因佐剂基因,SPreS2真核表达载体

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            【中文期刊】 陶俊  李丹  等 《中国免疫学杂志》 2010年26卷10期 876-880页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:将一株人源性中和性抗bFGF单链抗体基因转入真核表达载体,进行真核瞬时表达,通过细胞试验进一步验证其中和活性.方法:将1A scFv 抗体基因克隆到真核表达载体pIgG中(编码全长人源性IgG1类抗体),T4 连接酶连接后,转化大肠杆...

            【关键词】 bFGF人源性抗体瞬时表达

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            【中文期刊】 徐耀瑜  胡玲玲  等 《中国免疫学杂志》 2009年25卷2期 114-117页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:CHO细胞表达抗人CD80鼠-人嵌合抗体ch4E5,并研究其在体外阻断CD80介导的共刺激信号转导的生物学功能.方法:构建含有嵌合重、轻链基因的表达载体pIRES/ch4E5;表达载体先转染293T细胞,FCM检测到ch4E5抗体的瞬...

            【关键词】 CD80嵌合抗体瞬时表达

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            【中文期刊】 徐凤萍  杨君  等 《植物研究》 2009年29卷2期 230-233页ISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 通过转化缓冲溶液调整转化系统的渗透压,实现了含有smGFP基因的最小线性化元件在洋葱表皮细胞中的直接转化和瞬时表达.利用荧光显微镜在细胞质和细胞核中观察到很强的绿色荧光蛋白的表达,表明smG-FP线性化元件顺利导入细胞内,并维持了表达元件的...

            【关键词】 smGFP直接转化瞬时表达

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            【中文期刊】 马赛箭  苏乔  等 《中国生物工程杂志》 2008年28卷8期 69-73页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 磷酸胆碱是合成磷脂酰胆碱和甘氨酸甜菜碱的重要前体,磷酸乙醇胺N-甲基转移酶(PEAMT)是磷酸胆碱合成的关键酶.根据已知的SePEAMT cDNA5′端序列设计2个基因特异的反向引物(PP1,PP2),通过锚定PCR获得了PEAMT起始密码...

            【关键词】 磷酸乙醇胺N-甲基转移酶锚定PCR启动子

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            【中文期刊】 张金辉  龙海  等 《应用与环境生物学报》 2008年14卷3期 328-331页ISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 植物雄性器官特异表达启动子的克隆是作物杂种优势利用分子育种的基础.根据水稻花药特异表达RA8基因序列设计引物,从水稻(Oryza sativa L.)品种日本晴中克隆得到水稻花药特异表达基因RA8启动子Tsp2,该启动子为RA8基因翻译起始...

            【关键词】 花药特异基因启动子PCR

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            【中文期刊】 杨凤萍  王宏芝  等 《西北植物学报》 2008年28卷2期 217-222页ISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 利用马铃薯PVX病毒载体构建了外源人工融合乙肝表面抗原HBsAg基因的表达载体,在烟草中利用农杆菌介导进行瞬时表达,以快速鉴定外源基因瞬时表达的状况以及重组蛋白的免疫活性.利用PCR技术从含有人工融合HBsAg基因的表达载体中分别扩增出LP...

            【关键词】 PVX病毒载体瞬时表达融合HBsAg基因

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            【中文期刊】 程钢  陈永井  等 《复旦学报(医学版)》 2007年34卷4期 482-485页ISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 目的 构建及瞬时表达抗人CD28鼠-人嵌合抗体.方法 采用基因工程技术,从分泌鼠抗人CD28单克隆抗体的杂交瘤细胞株(克隆号:2F5)中克隆出抗体重链和轻链可变区基因及相应信号肽编码序列.分别与人免疫球蛋白IgG1恒定区重、轻链基因拼接,构...

            【关键词】 CD28单克隆抗体嵌合抗体

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            【中文期刊】 周文林  曹广力  等 《昆虫学报》 2007年50卷6期 547-554页ISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 家蚕Bombyx mori丝素蛋白轻链(fibroin light-chain, fib-L)基因fib-L具有在后部丝腺组织专一性、高效性表达的特点.为了利用其启动子构建能够表达外源基因的丝腺生物工厂,本实验对fib-L启动子活性进行了研...

            【关键词】 家蚕丝素轻链基因启动子

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            【中文期刊】 王云  叶向群  等 《昆虫学报》 2006年49卷2期 167-171页ISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 以红色荧光蛋白基因(RFP)为报告基因,构建含4种不同启动子的重组表达质粒,用脂质体介导法转染家蚕Bombyx mori细胞(Bm-e-HNU5),观察家蚕细胞质肌动蛋白4基因启动子(A4)、α微管蛋白基因启动子(α-tub)、蚕丝心蛋白重...

            【关键词】 家蚕启动子RFP报告基因

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            【中文期刊】 郭小兵  张钦宪  《郑州大学学报(医学版)》 2006年41卷5期 879-881页ISTICPKUCA

            【摘要】 目的:构建ret基因真核表达载体pcDNA3.0-RET,为制作转基因动物提供实验基础.方法:利用HandⅢ及NotⅠ限制性核酸内切酶,消化pSK-RET及pcDNA3.0空质粒,获得目的基因及相应载体;通过T4连接酶重组DNA;通过氨苄青...

            【关键词】 ret基因表达载体瞬时表达

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            【中文期刊】 朱晓燕  岳保红  等 《郑州大学学报(医学版)》 2006年41卷3期 457-460页ISTICPKUCA

            【摘要】 目的:构建组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)真核表达载体,并检测其在乳癌细胞系MCF-7中的瞬时表达.方法:以含t-PA cDNA的质粒PETPFR为模板,PCR扩增目的片段t-PA,HindⅢ和Sal Ⅰ双酶切t-PA,HindⅢ和xhoⅠ...

            【关键词】 组织型纤溶酶原激活剂真核表达载体转化

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            【中文期刊】 汲逢源  王戈亮  等 《植物生态学报》 2006年30卷2期 330-334页ISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 大豆(Glycine max)下胚轴作为大豆遗传转化的外植体材料,能快速高频再生不定芽.然而,在遗传转化过程中褐化影响基因转化效率.在该研究中,我们用含有GUS染色基因和hpt Ⅱ(Hygromycin phosphotransferase...

            【关键词】 大豆下胚轴农杆菌

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