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          【中文期刊】 王海震  王秀花  等 《中国生物工程杂志》 2004年24卷8期 54-58页ISTICPKUCSCDCA

          【摘要】 应用RT-PCR方法扩增了编码猪瘟病毒石门株(CSFV shimen strain)囊膜糖蛋白E2全基因,然后将其克隆到pMD-18T质粒中,获得重组质粒pMD-E2.再以pMD-E2为模板,另行设计两对引物,同时扩增其中一段适于在E.co...

          【关键词】 猪瘟病毒石门E2基因原核表达

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          【中文期刊】 王艳秋  齐强  等 《黑龙江科技信息》 2013年28期 270-270页

          【摘要】 为了研究猪瘟病毒石门株主要保护性抗原性质,根据猪瘟病毒石门株基因组序列设计合成引物,应用RT-PCR技术,扩增出猪瘟病毒石门株E2基因,大小为383bp,经电泳、酶切分析、核苷酸序列测定,证实所扩增片段为E2基因特异性片段。

          【关键词】 猪瘟病毒石门E2基因克隆序列分析

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          【中文期刊】 田宏  张彦明  等 《畜牧兽医学报》 2005年36卷10期 1038-1042页

          【摘要】 以猪瘟C-株弱毒疫苗株、经典强毒石门株和C-株全长cDNA为试验材料,以免疫荧光技术为主;结合ELISA和RT-PCR检测技术,对其在培养细胞中的增殖特性和表达规律进行了比较研究.同时筛选猪瘟病毒及其全长cDNA的敏感细胞,探索其增殖表达规...

          【关键词】 猪瘟病毒C-石门全长cDNA

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          【中文期刊】 赵耘  王在时  等 《中国兽医杂志》 2002年38卷7期 7-10页

          【摘要】 利用RT-PCR及序列测定对猪瘟病毒石门株不同代次毒株E2基因主要抗原编码区及同一代次不同年代主要抗原编码区序列进行了分析,结果所有毒株E2基因主要抗原编码区序列呈现较高的同源性,石门株不同代次毒株E2基因主要抗原编码区核苷酸及氨基酸同源性...

          【关键词】 猪瘟病毒石门序列分析同源性

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          【中文期刊】 黄茜华  张楚瑜  《华中农业大学学报》 1999年18卷2期 154-157页

          【摘要】 根据已发表的猪瘟病毒序列,设计并合成了3对引物,利用RT-PCR技术,从猪瘟病毒石门株感染猪血中成功扩增了各cDNA片段,覆盖整个NS5A基因,片段大小各为774,685,917bp.克隆后测序.序列比较结果显示,该基因在CSFV中较为保守...

          【关键词】 猪瘟病毒石门NS5A基因序列测定

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          【中文期刊】 王宁  傅烈振  等 《中国农业科学》 1999年1期 74-78页

          【摘要】 经非猪瘟免疫猪增殖猪瘟病毒石门株,从抗凝血中直接提取病毒RNA进行RT-PCR,获得了猪瘟病毒石门株E2基因片段.克隆后测序,结果表明石门株的E2囊膜糖蛋白与国外报道的5株猪瘟病毒的E2囊膜糖蛋白具有相同的骨架结构,即均具有15个半胱氨酸残...

          【关键词】 猪瘟病毒石门E2基因序列分析

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          【中文期刊】 王宁  张楚瑜  等 《中国兽医杂志》 1999年1期 8-9页

          【摘要】 本文采用RT-PCR技术从感染猪血中成功扩增了我国猪瘟病毒强毒石门株E2基因,大小为1184bp,与预期大小一致.经巢式PCR和酶切鉴定证实所扩增的片段为E2基因特异性片段.将扩增的E2基因克隆到PGEM-T载体,采用限制性内切酶鉴定和PC...

          【关键词】 猪瘟病毒石门RT-PCRE2基因

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          【中文期刊】 王海震  李学仁  等 《中国生物工程杂志》 2004年24卷2期 51-54页ISTICPKUCSCDCA

          【摘要】 根据已发表文献及DNAstar软件分析,选取双拷贝Shimen 株猪瘟病毒E2基因A,D区和猪IgG重链中可与SPA非特异性结合的区域作为目的基因进行串联表达.根据GenBank发表的序列,Primer5 0软件的辅助下分别设计三对引物,并...

          【关键词】 猪瘟病毒石门 保护抗原E2 IgG 表达

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          【学位论文】 作者:吴海祥 导师:张楚瑜   武汉大学   武汉大学   生物学 生物学、微生物学(博士) 2003年

          【摘要】 我们对引起温和型猪瘟的持续感染毒株CSFV39进行了全基因组序列测定,并将CSFV39与Shimen强毒株和兔化弱毒疫苗株HCLV进行了序列比较.全基因组和蛋白组序列比较结果证实CSFV39与中国标准强毒Shimen株具有更高的同源性.推测...

          【关键词】 石门基因组感染性克隆

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          【中文期刊】 王养会  李谱华  等 《病毒学报》 2008年24卷1期 59-63页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

          【摘要】 应用PCR从质粒pMD18-T-E0中扩增编码CSFV E0蛋白的基因片段,定向克隆到重组鸡痘病毒表达载体FPV-P11上,进一步构建出重组鸡痘病毒转移载体FPV-pSY-E0.用脂质体将该质粒转染至鸡痘病毒感染的鸡胚成纤维细胞(CEF)后...

          【关键词】 猪瘟病毒E0基因鸡痘病毒

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          【中文期刊】 孙永科  杨玉艾  等 《病毒学报》 2007年23卷2期 137-142页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

          【摘要】 应用PCR从pMD18-T-E2质粒中扩增编码猪瘟病毒(CSFV)E2蛋白的基因片段,定向克隆到重组腺病毒Adeasy-1系统的穿梭质粒pAdTrack-CMV上,采用细菌内同源重组"两步转化法"构建携带CSFV E2基因的重组腺病毒基因组...

          【关键词】 腺病毒猪瘟病毒E2基因

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          【中文期刊】 赵耘  秦玉明  等 《微生物学通报》 2006年33卷3期 82-87页ISTICPKUCSCDCA

          【摘要】 建立了套式RT-PCR与限制性内切酶酶切相结合的区别猪瘟兔化弱毒疫苗株与猪瘟病毒田间分离株的诊断方法.通过对猪瘟兔化弱毒疫苗株与猪瘟石门株E2基因主要抗原编码区序列进行限制性内切酶酶切位点分析,分别找出猪瘟兔化弱毒疫苗株与猪瘟石门株各自独有...

          【关键词】 猪瘟兔化弱毒猪瘟田间分离毒RT-PCR

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          【中文期刊】 王毅  吴海祥  等 《病毒学报》 2005年21卷1期 43-47页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

          【摘要】 为了建立研究猪瘟病毒的技术平台,利用RT-PCR技术构建了猪瘟病毒中国石门株(Shimen)的全长有感染性cDNA克隆pT7SM.通过体外转录线性化的pT7SM并将转录的RNA转染至PK-15细胞中,获得了猪瘟病毒粒子.再用间接免疫荧光法测...

          【关键词】 猪瘟病毒全长cDNA克隆体外转录

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          【中文期刊】 余兴龙  涂长春  等 《生物工程学报》 2003年19卷4期 439-443页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

          【摘要】 用重组PCR技术对猪瘟病毒石门株E2基因进行了定点突变, 然后将突变后的基因克隆至表达载体质粒pET-28a(+)中,构建成重组质粒pETE2.将pETE2转入受体菌BL21(DE3)plysS中,在IPTG的诱导下, 重组转化菌可高效表达...

          【关键词】 猪瘟病毒E2基因定点突变

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          【中文期刊】 王家富  张楚瑜  等 《微生物学报》 2000年40卷1期 32-37页ISTICPKUCSCDCABP

          【摘要】 参考已发表的猪瘟病毒序列,设计并合成了一对引物,应用RT-PCR技术,扩增了猪瘟兔化弱毒(Hog cholera VIllAS lapinized Chlnese strain,HCLV)和石门强毒株的EO糖蛋白基因,并将其克隆到pGEM-...

          【关键词】 猪瘟病毒EO基因克隆

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          【中文期刊】 雷建林  杜明亮  等 《中国预防兽医学报》 2016年38卷6期 484-488页

          【摘要】 本实验室前期构建了具有标记特征的腺病毒/甲病毒复制子嵌合载体猪瘟疫苗rAdV-SFV-E2,效力评价结果表明该嵌合疫苗的免疫原性与C株相当,并且能够完全提供对猪瘟病毒(CSFV)强毒石门株的攻毒保护.为进一步确定该疫苗的免疫效力是否受其母源...

          【关键词】 猪瘟嵌合载体疫苗免疫效力

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          【中文期刊】 孙永科  胡超英  等 《动物医学进展》 2016年37卷6期 13-17页

          【摘要】 为了解猪瘟病毒(CSFV)石门(Shimen)株连续传代后变异情况,根据已发表的 CSFV E0基因序列(AF092448.2),设计合成引物,以在 ST 细胞中连续传代培养的 CSFV 石门株细胞毒总 RNA 为模板,每5代通过 RT-P...

          【关键词】 猪瘟病毒连续传代ST细胞

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          【中文期刊】 朱长康  徐璐  等 《中国兽医杂志》 2014年50卷7期 3-5,前插1页

          【摘要】 本研究对2011年我国部分地区养猪场采集的疑似猪瘟病料组织样本209份,分别用FQ-RT-PCR和RT-nPCR两种方法检测猪瘟病毒(CSw).结果FQ-RT-PCR检测出55份猪瘟阳性,RT-nPCR检测出53份阳性,2种方法符合率达96...

          【关键词】 猪瘟病毒E2基因分子流行病学

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          【中文期刊】 孙永科  孔令富  等 《中国预防兽医学报》 2012年34卷3期 167-171页

          【摘要】 为研究猪瘟病毒-(CSFV)云南株(YN株)突变位点在致非典型性猪瘟中的作用,本研究在CSFV石门株全长感染性克隆的基础上,利用分子克隆技术,将CSFV YN株的1 510位~1 532位、2 471位~2 658位、3 152位~3 17...

          【关键词】 猪瘟感染性克隆嵌合病毒

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          【中文期刊】 鲁絮  张彦明  等 《中国预防兽医学报》 2008年30卷6期 464-468页

          【摘要】 在大肠杆菌Rosetta(DE3)中表达猪瘟病毒石门株NS3基因部分功能片段,以纯化的重组NS3(p80)蛋白免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,经间接ELISA筛选及3次连续克隆化获得了4株可分泌抗NS3单抗的...

          【关键词】 猪瘟病毒NS3基因表达

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          【中文期刊】 孙金福  史子学  等 《中国兽医科学》 2008年38卷4期 342-345页

          【摘要】 为了解猪瘟病毒(CSFV)石门株强毒感染对免疫细胞的影响以及免疫细胞的变化动力学,用流式细胞仪对人工感染猪的白细胞凋亡以及CD4+和CD8+ T淋巴细胞亚群的动态变化规律进行了检测.结果表明,攻毒后CD4+和CD8+T淋巴细胞比例急剧下降,...

          【关键词】 猪瘟病毒CD4+T淋巴细胞CD8+T淋巴细胞

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          【中文期刊】 解林红  郭抗抗  等 《中国预防兽医学报》 2008年30卷6期 411-414,419页

          【摘要】 利用DNA重组技术将猪瘟病毒石门株囊膜蛋白E2基因定向插入逆转录病毒载体pBABE-puro中,构建重组逆转录病毒载体pBABE-puro-E2.将pBABE-puro-E2和辅助质粒pVSV-G经磷酸钙共沉淀法转染293GP包装细胞系,将...

          【关键词】 猪瘟病毒E2基因永生化猪血管内皮细胞

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          【中文期刊】 朱妍  李素  等 《中国兽医科学》 2008年38卷4期 293-296页

          【摘要】 采用间接免疫荧光方法,用19株抗猪瘟病毒单克隆抗体对猪瘟病毒石门株与疫苗株(兔化弱毒株)的抗原性进行分析.结果显示,9株抗猪瘟病毒E2蛋白的单抗中有4株与2株病毒均反应,但反应程度略有差别;9株抗猪瘟病毒Erns蛋白的单抗中只有3株与2株病...

          【关键词】 猪瘟病毒单克隆抗体抗原性分析

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          【中文期刊】 戴志红  赵耘  等 《中国预防兽医学报》 2008年30卷9期 694-698,726页

          【摘要】 为探索一种相对客观、稳定的方法鉴定猪瘟病毒(CSFV)FJFQ-39株的毒力.本研究采用2×103TCID50的FJFQ-39株分别肌肉接种6头敏感猪,通过RT-nPCR 检测扁桃体和血液监测动物感染情况,对动物临床症状和病理变化进行系统评...

          【关键词】 猪瘟病毒毒力临床症状评分

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          【中文期刊】 郑加宾  张志  等 《中国动物检疫》 2008年25卷3期 23-25页

          【摘要】 本实验参照已发表的猪瘟病毒(CSFV)石门株、HCLV株、Paderborn株、GXWZ02株等的基因组序列设计合成了11对引物,通过RT-PCR方法从广西一株流行猪瘟病料中直接扩增得到了11个片段,将所得片段克隆至PGEM-Teasy载体...

          【关键词】 猪瘟基因组序列同源性分析

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          【中文期刊】 郭抗抗  徐浩  等 《畜牧兽医学报》 2008年39卷6期 746-751页

          【摘要】 对筛选的转录猪瘟病毒石门株3′-UTR shRNA的PK-15细胞株P-1(114~132位)、P-2(136~154位)和P-3(209~227位)分别接种猪瘟病毒(CSFV),在接毒后第72和96小时用半定量反转录-聚合酶链式反应(RT...

          【关键词】 半定量RT-PCRELISA猪瘟病毒

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          【中文期刊】 邓雨修  宋延华  等 《广东畜牧兽医科技》 2008年2期 29-32页

          【摘要】 运用RT-PCR技术对3株广东省近期流行的猪瘟野毒的E2基因进行了扩增,并进行核苷酸序列分析,同时与国内外参考毒株的抗原序列进行了比对分析,绘制系统发育进化树.结果表明,3株流行毒株E2基因间核苷酸序列的相似性为81.9%~90.9%,所推...

          【关键词】 猪瘟病毒E2基因序列分析

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          【中文期刊】 夏照和  彭伍平  等 《中国兽医科学》 2008年38卷9期 757-761页

          【摘要】 采用环磷酰胺免疫抑制法制备特异性识别猪瘟病毒(CSFV)野毒株的单克隆抗体,用纯化的杆状病毒表达的重组HCLV-E2蛋白作为耐受原,Shimen-E2蛋白作为免疫原,免疫BALB/c小鼠,取其脾淋巴细胞与SP2/O骨髓瘤细胞融合,获得了1株...

          【关键词】 猪瘟病毒E2蛋白重组杆状病毒

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          【中文期刊】 温元鹏  张彦明  等 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 2008年36卷8期 31-35页

          【摘要】 [目的]研究猪瘟病毒(CSFV)E2基因在猪脐静脉血管内皮细胞中多次传代后的遗传变异情况,为CSFV的致病机理研究提供理论依据.[方法] 分离并培养猪脐静脉血管内皮细胞,接种猪瘟病毒石门株脾毒后继续培养,染毒细胞经3次连续传代后全部死亡、脱...

          【关键词】 猪瘟病毒E2基因猪脐静脉血管内皮细胞

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          【中文期刊】 赵耘  秦玉明  等 《中国兽医杂志》 2007年43卷2期 3-6页

          【摘要】 猪瘟病毒、猪细小病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒及猪伪狂犬病病毒均能导致猪繁殖障碍,对养猪生产影响很大.本研究通过设计4对针对这4种病毒的特异引物建立了多重PCR方法,分别对其最佳反应条件、特异性及敏感性进行了测定,结果表明:其敏感性可达到CS...

          【关键词】 猪瘟病毒猪细小病毒猪繁殖与呼吸综合征病毒

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