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【中文期刊】 孙丹妮 刘欣悦 等 《空军军医大学学报》 2025年46卷4期 526-532页
【摘要】 目的 利用PiggyBac转座系统构建稳定表达NLRC5的BEAS-2B细胞系,为后续针对病毒抗原提呈功能的研究提供有力的工具.方法 根据NLRC5基因信息扩增目的基因蛋白编码序列,构建目的基因NLRC5的转座子质粒,将辅助质粒和转座子质粒...
【关键词】 NLRC5；PiggyBac转座子；基因过表达；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 蒋明正 万阳 等 《成都医学院学报》 2024年19卷4期 573-577页ISTICCA
【摘要】 目的 构建稳定表达Cas9蛋白的工具细胞,并利用短回文重复序列/相关蛋白9(CRISPR/Cas9)编辑技术改造1型单纯疱疹病毒(HSV-1),获得ICP34.5基因敲除的oHSV-1/Ecfp重组病毒.方法 利用慢病毒包装体系,将包装Ca...
【关键词】 短回文重复序列/相关蛋白9基因编辑技术；稳定表达；基因敲除；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 郭旺 彭光众 等 《畜牧兽医学报》 2024年55卷11期 5310-5316页
【摘要】 旨在通过慢病毒表达系统构建稳定表达marco基因的HD11细胞系,为研究marco基因的抗病毒免疫功能提供重要工具.首先,以HD11细胞为模板,通过PCR扩增获得marco基因编码区序列,并将其克隆到慢病毒载体上,获得重组慢病毒质粒pLV3...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 贾雪霞 刘莹 等 《中国动物传染病学报》 2022年30卷2期 56-60页
【摘要】 本研究利用PCR方法扩增小反刍兽疫病毒(PPRV)的衣壳蛋白(N蛋白)基因,并将其插入真核表达载体pcDNA3.1中,构建重组表达质粒pcDNA3.1-pN.利用电转的方法将该重组质粒转入非洲绿猴肾(Vero)细胞,并使用抗生素G418进行...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 周慧芳 陆小鹏 等 《动物学研究》 2008年29卷4期 421-426页SCIMEDLINEISTICCSCDBP
【摘要】 Human immunodeficiency virus-1(HIV-1)辅助蛋白在其感染和艾滋病发病过程中起着非常重要的作用.Regulator of expression of virion proteins(Rev)作为HIV-1辅助...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 曾飒 秦晓东 等 《华西口腔医学杂志》 2016年34卷5期 443-447页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 通过慢病毒法建立稳定表达外源性人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因的口腔黏膜上皮细胞(OMECs),探索构建高效、稳定的永生化OMECs细胞系的方法.方法 提取293T细胞总RNA,应用聚合酶链反应(PCR)法扩增hTERT基因全长,构...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 姜颖越 杜寿文 等 《中国免疫学杂志》 2016年32卷3期 372-376,381页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的：为深入研究IFITM3抗禽流感病毒作用及其分子机制提供细胞模型，建立稳定表达人IFITM3蛋白的A549细胞株。方法：首先合成引物，分离人外周血单个核细胞，PCR扩增IFITM3基因，进行DNA测序分析。测序正确后，将其克隆至慢病毒表...
【关键词】 干扰素诱导跨膜蛋白3；稳定表达；禽流感病毒；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 伊兴旭 陈敬贤 等 《安徽医科大学学报》 2015年3期 259-263,264页ISTICPKUCA
【摘要】 目的：真核细胞稳定表达水痘-带状疱疹病毒( VZV)糖蛋白E( gE)的胞外域基因,应用gE抗原建立VZV感染的血清学试验来评价VZV疫苗的免疫效果。方法构建含有VZV gE胞外域基因的真核表达质粒pCDNA3．1-gE,测序后脂质体转染 ...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 杜晶春 朱蕊 等 《中国组织工程研究》 2013年23期 4272-4278页ISTICPKUCA
【摘要】 <篇首><篇首>背景：以间充质干细胞为载体的基因治疗新方法具有广阔的应用价值。目的：利用慢病毒感染方法将肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体导入人羊水来源的间充质干细胞，以期获得稳定表达肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体的人羊水间充质干细胞。方法：首先利用多位点...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 王桂芬 周英泽 等 《中国实验动物学报》 2013年21卷2期 75-77,后插3页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 构建稳定表达β-synuclein的SH-SY5Y细胞株.方法 利用脂质体转染技术将质粒pcDNA3.1-β-synuclein转染SH-SY5Y细胞,通过Zeocin进行抗性筛选.采用原位免疫荧光、免疫组织化学染色及Western ...
【关键词】 β-synuclein；帕金森病；稳定表达；
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 张欢 方瑞 等 《生物技术通报》 2012年5期 93-98页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 采用RT-PCR方法从BALB/c胚鼠成纤维细胞克隆FAPα基因,将其连接至表达栽体pTd-FL-N,转化Stbl3感受态.筛选重组质粒,经酶切、PCR检测及测序鉴定,证实表达质粒构建正确.将表达载体转染HEK293细胞,经G418筛选单克...
【关键词】 FAPα；pTd-FL-N表达栽体；G418筛选；
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 王健 邹宁 等 《生物技术通报》 2011年11期 212-215页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 旨在构建能稳定表达HLA-A33蛋白的细胞系,并观察其在细胞中的表达水平.首先克隆取得HLA-A33基因,并将其插入慢病毒载体,经酶切和测序鉴定,确定载体构建正确.通过慢病毒系统感染正常RD细胞,将HLA-A33基因整合进RD细胞的基因组....
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 张蕊 苑玉和 等 《中国药理学通报》 2011年27卷12期 1765-1770页ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 目的 建立稳定表达CaMKⅡα/β的PC12稳定细胞株,以便进一步研究钙/钙调素依赖性蛋白激酶CaMKⅡα/β不同亚型的生理功能.方法 通过脂质体介导的方法将构建的表达载体pEGFP-CaMKⅡα/β转染入PC12细胞中,然后用含G418抗...
【关键词】 钙-钙调素依赖性蛋白激酶CaMKⅡα/β；稳定细胞株；突触囊泡蛋白的表达；
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 程岚 束蓉 等 《上海交通大学学报（医学版）》 2011年31卷8期 1108-1112页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 构建含人釉原蛋白(hAm)基因的重组真核表达质粒并转染哺乳动物细胞NIH3T3,建立稳定表达重组hAm的细胞株,为临床应用奠定基础.方法 利用限制性内切酶EcoR Ⅰ和BamH Ⅰ将hAm基因插入真核表达载体pcDNA3.1/myc-...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 鲍慧慧 陈琦 等 《中国组织工程研究与临床康复》 2011年15卷50期 9433-9436页ISTICPKUCA
【摘要】 背景:热休克蛋白22的应激表达可能对缺氧复氧内皮具有一定的保护作用.目的:建立稳定表达人热休克蛋白22基因的内皮细胞株.方法:EcoRⅠ/kpnⅠ双酶切鉴定真核表达重组质粒pEGFP-N1-HSP22.脂质体法以重组质粒pEGFP-N1-H...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 郑和鸣 蔡秀军 《中国免疫学杂志》 2010年26卷4期 341-344页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:通过逆转录病毒介导,建立能稳定高效表达白介素2的肝干细胞WB-F344.方法:构建逆转录病毒载体Plpcx-IL-2质粒,转染包装细胞PT67,收集细胞培养上清,检测病毒的滴度.将高滴度的PT67/Plpcx-IL-2病毒液感染肝干细...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 孙杰 刘玉华 等 《中国免疫学杂志》 2010年26卷5期 387-391页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建含有人CXCR3基因的重组逆转录病毒载体,获得稳定表达人CXCR3分子的基因转染细胞株L929-CXCR3,研究CXCR3与其配体Mig、IP-10及I-TAC相互作用引起的L929-CXCR3的迁移效应.方法:TRIzol一步法...
- 概要：
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【中文期刊】 张一折 王鹏 等 《郑州大学学报（医学版）》 2009年44卷1期 145-148页ISTICPKUCA
【摘要】 目的:构建能稳定表达HIV-1 GagPol基因的真核表达载体.方法:用PCB方法扩增HIV-1 GagPol基因,克隆入pMD18-T,然后亚克隆人真核表达质粒pcDNA3.2(一)中,将构建的重组质粒pcDNA3.1(-)/GagPol...
【关键词】 HIV-1GagPol基因；稳定表达；病毒样颗粒疫苗；
- 概要：
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- 结论：
【中文期刊】 杨春辉 杜珍武 等 《中国老年学杂志》 2009年29卷6期 697-699页ISTICPKUCA
【摘要】 目的 构建人碱性成纤维生长因子(bFGF)真核表达载体,观察其在人骨髓间充质干细胞(MSCs)内的表达.方法 应用RT-PCR从人胎盘组织中扩增出bFGF,并将其构建于pcDNA3.1真核表达载体上.利用脂质体将基因转染MSCs内,利用G4...
- 概要：
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【中文期刊】 杨俊霞 袁成福 等 《中国药理学通报》 2008年24卷3期 294-299页ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 目的 构建人MCHR2基因真核表达载体,在CHO 细胞中进行稳定表达,并分析MCHR2介导的信号转导通路.方法 采用PCR方法,以人胎脑cDNA文库为模板扩增人MCHR2基因的全长cDNA编码区序列,定向插入到真核表达载体pcDNA3.1(...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 张琴 卜友泉 等 《第二军医大学学报》 2008年29卷8期 896-899页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建黑色素浓集激素受体2(MCHR2)真核表达载体pcDNA3.1(+)MCHR2,转染SHG-44细胞,建立稳定、高效表达人MCHR2的SHG-44细胞系.方法:PCR法从人胎脑cDNA文库扩增MCHR2全长cDNA片段.用基因重组...
【关键词】 MCHR2；真核表达载体；稳定转染的SHG-44细胞系；
- 概要：
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【中文期刊】 蒋玲琳 刘丽 等 《南京医科大学学报（自然科学版）》 2007年27卷7期 647-650页ISTICPKUCA
【摘要】 目的:建立稳定表达甘氨酸受体α1亚基(GlyRα1)真核表达载体的人胚肾细胞(HEK293)细胞系.方法:构建pcDNA3.1-GlyRα1真核表达载体,应用脂质体介导的转染技术将该质粒导入HEK293细胞,再用G418筛选表达稳定的细胞系...
- 概要：
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- 结论：
【中文期刊】 尹晓玲 林海波 等 《中国肿瘤临床》 2007年34卷8期 470-473页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:建立稳定表达小鼠IL-12(mIL-12)的小鼠Lewis肺癌(Lewis lung carcinoma,LLC)细胞系LLC/mIL-12,为进一步研究mIL-12的免疫调节机制及其抗肿瘤作用奠定基础.方法:构建真核表达质粒pcDN...
【关键词】 稳定表达；小鼠白介素-12；小鼠Lewis肺癌细胞系；
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【中文期刊】 郭佳 鄢然 等 《生物工程学报》 2007年23卷6期 995-999页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 丙型肝炎病毒(HCV)与宿主细胞因子的相互作用已经成为国内外研究的热点和难点.近期研究已经证实HCV的感染对宿主多种途径中基因的转录均能产生影响.为了进一步研究究竟是HCV中的哪些功能基因在与特定细胞因子的相互作用中起主导作用,构建了分别含...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 刘小斌 张凯伦 等 《生物医学工程学杂志》 2007年24卷6期 1330-1333页MEDLINEISTICPKUCA
【摘要】 为建立稳定表达组织型纤溶酶原激活因子(t-PA)基因的人脐静脉内皮细胞株,为其在基因修饰的组织工程血管中的应用奠定基础.首先构建t-PA基因的真核表达载体pcDNA3.1-Myc-His B(-)/t-PA,将该表达载体用阳离子脂质体介导,...
【关键词】 血管组织工程；组织型纤溶酶原激活因子；阳离子脂质体；
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 赵伟 姚文兵 等 《中国药科大学学报》 2007年38卷1期 80-83页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:在大肠杆菌中高效、稳定地表达复合干扰素(con-IFN).方法:根据大肠杆菌密码子的偏爱性,合成了复合干扰素基因、克隆至表达载体pBV220和转化大肠杆菌DH5α.筛选高表达菌株并传代105次.表达产物经过复性和离子交换;凝胶过滤层析...
- 概要：
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【中文期刊】 高其双 黄海军 等 《生物技术通报》 2007年6期 113-116页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 构建稳定表达人α-HNP-1的转基因细胞系,为稳定生产α-HNP-1并将其应用于医药开发提供生产细胞源.方法 真核表达载体pcDNA3.1(-)/HNP-1经酶切和测序鉴定后,用脂质体转染法转染昆明白小鼠胚胎干细胞来源的上皮细胞,通过...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 李素萍 张惠 等 《中国生物化学与分子生物学报》 2007年23卷5期 388-393页MEDLINEISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 建立稳定表达外源PC-1基因的人前列腺癌骨转移C4-2B细胞模型,初步探讨PC-1基因表达对前列腺癌发展的影响.通过脂质体介导的方法,将融合PC-1基因的真核表达载体pcDNA3.1-PC-1稳定转染C4-2B细胞,Western印迹和RT...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 周时勇 杨明峰 等 《细胞与分子免疫学杂志》 2006年22卷4期 427-429,432页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的: 构建稳定表达人CXCR4基因的L929细胞株,分析CXCR4分子对转基因细胞迁移能力的影响.方法: TRIzol一步法抽提人外周血单个核细胞(PBMC)总RNA,RT-PCR扩增出CXCR4基因,双酶切装入逆转录病毒载体pEGZ-T...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 杜红延 王捷 等 《解放军医学杂志》 2005年30卷5期 410-412页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的构建骨唾液蛋白(BSP)非融合荧光表达载体,建立稳定高效表达BSP和荧光蛋白的乳腺癌细胞系,为进一步研究BSP在乳腺癌细胞骨转移中的作用奠定基础.方法从构建好的pB-hBSP载体中用PCR方法扩增hBSP基因,通过Bgl Ⅱ和Pst Ⅰ...
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