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【中文期刊】 徐容 沈毅珺 等 《生物化学与生物物理进展》 2005年32卷6期 535-543页 SCIISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 Protein A和protein L是细菌产生的两种结构和功能均不同的免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)结合分子,在细菌的致病中起重要作用.用含Sac Ⅰ位点的特定引物PCR分别扩增制备protein A的A、B、C、D抗体...
【中文期刊】 曾骏 刘慈懿 等 《中华核医学杂志》 2007年27卷4期 210-214页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 证明99Tcm标记联肼尼克酰胺(HYNIC)多肽"显像剂"文库是99Tcm显像剂研制中的有效方法.方法 八肽组合文库采用人工点阵方式合成.HYNIC多肽通过C末端以及双β丙氨酸(连接体)共价连接在纤维膜上.用阻断剂阻断非特异结合位点后...
【中文期刊】 杨华 李连青 等 《第二军医大学学报》 2005年26卷4期 396-401页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建由免疫球蛋白结合分子单结构域随机组合的噬菌体展示文库,为应用各种类型免疫球蛋白对该文库进行体外分子进化筛选研究打下基础.方法:PCR扩增制备分别编码Protein A的A、D结构域、Protein G的B2结构域和Protein ...
【中文期刊】 曾骏 刘慈懿 等 《中华核医学杂志》 2005年25卷6期 337-341页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的建立组织靶向化合物的体内完全随机高通量筛选模型.方法以氨基酸为原料,采用固相合成法合成C端氨化三肽组合文库.99Tcm标记文库的结构通量为8000,即含有8000种不同化学结构的99Tcm标记三肽化合物.体内筛选采用定位扫描和重复模式....
【中文期刊】 曾骏 《上海第二医科大学学报》 2005年25卷12期 1213-1217页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 利用生物靶分子在体外对组合文库进行筛选是人为化的理想条件,不能准确模拟体内各种生物分子互相作用(如代谢)的真实情况,且药物的诊疗效果与药物在靶组织的分布密切相关.因此,体内高通量药物筛选已经成为迫切需要.理论上,核素示踪技术可以为体内高通量...
【中文期刊】 田朝伟 杨晓仪 等 《中国病理生理杂志》 2005年21卷6期 1198-1202页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:应用噬菌体展示技术构建人源性抗D二聚体噬菌体抗体抗体组合文库. 方法: 从不同人群外周血淋巴细胞中提取总RNA,经反转录后,以免疫球蛋白信号肽序列引物和家族特异性免疫球蛋白可变区基因引物,进行半套式PCR扩增人全套抗体基因片段,并克隆...
【中文期刊】 田朝伟 杨晓仪 等 《广州医学院学报》 2005年33卷1期 19-22页 ISTIC
【摘要】 目的:从人源性噬菌体抗体库中筛选抗人D二聚体单克隆抗体并进行可溶性表达.方法:以人D二聚体标准品为抗原对所构建的噬菌体抗体库进行两轮"吸附-洗脱-扩增"筛选,从中筛选出抗人D二聚体的噬菌体Fab抗体,并在大肠杆菌细胞中进行可溶性表达.结果:...
【中文期刊】 王字玲 赵敬湘 等 《中国输血杂志》 2002年15卷6期 371-374页 ISTICCA
【摘要】 目的应用噬菌体表面呈现表达系统构建一个经血小板主动免疫的人抗体组合文库,并筛选与人血小板结合的噬菌体抗体(Fab片段).方法从一反复输注血小板并出现血小板输注无效的患者的外周血分离淋巴细胞,提取mRNA, 逆转录合成cDNA,用半巢式PCR...
【关键词】 血小板; 抗体,血小板/组合文库; 抗体,噬菌体;
【中文期刊】 沈毅珺 潘卫 等 《生物化学与生物物理进展》 2005年32卷1期 75-80页 SCIISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 淋巴毒素(lymphotoxin,LT)通过TNFR1受体传递凋亡信号,从而发挥抗肿瘤活性.对LT的受体结合区域进行多点随机突变,利用噬菌体展示重组人淋巴毒素(rhLT)R46,S106,L130三点随机突变组合文库和S106~F110区域...
【中文期刊】 吴莉莉 祁培培 等 《安徽医科大学学报》 2013年48卷8期 867-872页 ISTICPKUCA
【摘要】 目的 使用人和羊不同物种IgG来诱导噬菌体展示免疫球蛋白结合分子单结构域随机组合文库进行体外分子进化筛选,判断不同的Fc段构像是否具有特异的结合优势,同时探索其优势结合序列的组合特点.方法 通过PCR获得金黄色葡萄球菌蛋白A(SpA)的A、...
【中文期刊】 唐萍 潘卫 等 《安徽医科大学学报》 2009年44卷2期 141-146页 ISTICPKUCA
【摘要】 目的 应用噬菌体展示免疫球蛋白(Ig)结合分子组合文库,进化筛选获得与兔IgG结合的代表性序列,测定其与兔IgG及人IgG结合活性的差异,以判断筛选获得的代表性序列对不同种属Ig的结合是否存在倾向性的差别.方法 应用包含Ig效应子结合蛋白P...
【中文期刊】 何俊 周霞 等 《安徽医科大学学报》 2007年42卷2期 128-132页 ISTICPKUCA
【摘要】 目的 构建噬菌体展示免疫球蛋白结合分子定点随机突变组合文库,为应用各种类型免疫球蛋白对该文库进行体外分子进化筛选及结构和功能的研究打下基础.方法 应用overlapping PCR制备Protein A的Z结构域.用含随机核苷酸序列的引物,...
【中文期刊】 温宗梅 潘卫 等 《安徽医科大学学报》 2006年41卷4期 361-364页 ISTICPKUCA
【摘要】 目的 构建噬菌体展示IgA亲和体随机组合文库,研究IgA结合分子结构与功能的关系.方法 基因合成IgA亲和体ZA1、ZA2片段.片段两端引入Kpn I酶切位点,3'端引入随机连接肽序列,Kpn I酶切,随机连接,克隆于噬菌粒展示载体pCAN...
【关键词】 细菌噬菌体/遗传学;
【中文期刊】 沈毅珺 潘卫 等 《生物工程学报》 2004年20卷1期 43-48页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 构建重组人淋巴毒素(rhLT)随机点突变组合文库以进行体外分子进化及结构和功能的研究.应用含随机核苷酸序列的引物,通过Overlap PCR的方法分别对rhLT 的46、106和130位氨基酸进行定点随机突变,获得各单点随机突变体库.通过基...
【中文期刊】 李小冬 杨娜 等 《中国生物工程杂志》 2012年32卷8期 107-110页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目前,表面展示工程作为一种新型的极具应用潜力的技术手段,在组合文库的筛选、蛋白质工程、燃料乙醇的生产和生物修复等技术中已经扮演了极其重要的角色.介绍了表面展示工程在酒精发酵方面的应用,重点阐述酒精发酵过程中酶类展示原理和全细胞催化的应用前景...
【中文期刊】 祁培培 丁莹莹 等 《生物工程学报》 2012年28卷9期 1093-1105页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 金黄色葡萄球菌蛋白A (Staphylococcal protein A,SpA)和链球菌蛋白G(Streptococcal protein G,SpG)是细菌产生的特异结合宿主抗体的细菌免疫球蛋白结合蛋白(Immunoglobulin(I...
【中文期刊】 温宗梅 曹洁 等 《第二军医大学学报》 2010年31卷1期 1-6页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 构建IgA亲和体随机组合文库并进行体外分子进化,研究IgA亲和体分子结构与功能的关系.方法 基因合成两个IgA亲和体片段.3′ 端引入3个随机连接肽序列随机连接,克隆于噬菌粒展示载体pCANTAB5S,构建噬菌体展示随机组合分子文库....
【中文期刊】 于彦杰 詹希美 等 《热带医学杂志》 2012年12卷9期 1049-1052页 ISTICCA
【摘要】 目的 以广州管圆线虫感染的小鼠脾细胞为源,构建抗广州管圆线虫抗体库,并筛选可用于广州管圆线虫病早期诊断的目的抗体.方法 提取感染广州管圆线虫的小鼠脾细胞RNA,并逆转录合成cDNA第一链,PCR扩增出抗体轻链和重链基因,将轻、重链基因先后连...
【中文期刊】 张咪 柳淑君 等 《上海交通大学学报(医学版)》 2022年42卷4期 510-517页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的·在单点突变文库筛选结果和多个简并引物引入组合突变的基础上,建立一种高效获得高通量的哺乳动物细胞膜表面展示IgG抗体Fc(fragment crystallizable domain)组合突变文库的方法.方法·单点突变文库经流式细胞术分...
【中文期刊】 詹林盛 邵宁生 等 《生物化学与生物物理进展》 2003年30卷1期 151-155页 SCIISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 指数富集配基的系统进化(SELEX)技术是一种新的组合化学技术. 体外构建了一个长度为81 nt、含有35个随机序列的单链DNA(ssDNA)文库,优化了ssDNA文库扩增为双链DNA(dsDNA)文库的PCR反应条件.通过对比不对称PCR...
【关键词】 随机ssDNA文库; 指数富集配基的系统进化(SELEX); 寡核苷酸适配子;
【中文期刊】 裴武红 舒翠玲 等 《生物化学与生物物理进展》 2001年28卷4期 556-559页 SCIISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 为了合理评价化合物的促神经再生活性.用 (MTT)、分化计数、图象处理等方法,借助FK506、GPI1046阳性化合物,建立了一个基于PC12细胞存活和分化的化合物筛选系统.结果表明,无论在细胞存活实验还是在分化实验中,FK506、GPI1...
【中文期刊】 李易 黄薇 等 《动物学研究》 2006年27卷3期 325-330页 SCIMEDLINEISTICCSCDBP
【摘要】 为筛选出与认知、记忆相关的脑部表达基因及基因家族,利用TRIzol试剂从恒河猴大脑前额叶组织抽提总RNA,再用纯化试剂盒从总RNA中成功纯化出mRNA.按照Stratagene公司的cDNA Synthesis Kit(200401)、ZA...
【中文期刊】 林子玉 丁莹莹 等 《安徽医科大学学报》 2015年50卷9期 1262-1267页 ISTICPKUCA
【摘要】 目的 使用人免疫球蛋白G( IgG)对金黄色葡萄球菌蛋白A( SPA)单结构域突变体组合文库进行体外分子进化筛选,判断不同突变体组合的特异结合优势,探索优势组合分子结构与功能间的关系. 方法 通过 Overlap PCR获得SPA中A和C单...
【中文期刊】 徐文竹 丁莹莹 等 《安徽医科大学学报》 2014年9期 1227-1232,1233页 ISTICPKUCA
【摘要】 目的判断不同亚类小鼠IgG Fc段构像及与SpA或SpG的结合特点,采用不同亚类小鼠IgG对SpA和SpG单结构域构成的随机组合噬菌体展示文库进行亲和筛选。方法不同亚类小鼠IgG对噬菌体文库进行亲和筛选,获得具有结合优势的单结构域排列组合,...