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【中文期刊】 唐晔盛 李英 等 《生物化学与生物物理进展》 2002年29卷2期 316-318页 SCIISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 一种利用菌落直接PCR扩增DNA并用于测序的实验方法.通过对引物的设计和菌液浓度控制,使PCR反应后的内容物对测序干扰减到最小.与传统的测序过程比较,它省去了抽提模板DNA一步,节省了大量时间和实验成本.另外此方法可对BAC亚克隆库构建时由...
【中文期刊】 黄雪冰 陈雅娟 《福建农业科技》 2022年53卷12期 26-30页
【摘要】 建立能够快速提取金黄色葡萄球菌菌落DNA用于PCR扩增的通用方法,并比较不同提取方法对菌落DNA的提取效果.通过煮沸法、冻融法、微波法处理金黄色葡萄球菌的菌落,提取DNA,观察PCR扩增效果,比较3种方法获得DNA的最短时间以及处理10 s...
【中文期刊】 水燕 徐增洪 等 《生态学报》 2019年39卷10期 3597-3606页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 宁夏自治区是我国受到土壤次生盐渍化危害的重点区域,然而对该地区盐碱化形成机制及影响因素的研究资料较少.在宁夏石嘴山地区采集土壤样本,采用基于16S rRNA的PCR-DGGE技术对不同深度土壤的细菌群落多样性和优势种群进行分析,以期从土壤生...
【中文期刊】 章熙东 《生物学通报》 2021年56卷8期 51-53页 ISTICCA
【摘要】 通过在高中生物学课堂开展菌落PCR的实验教学,优化实验过程,重关键能力培养,将PCR实验引入常规课堂,让学生由"实验原理"的学习进入到"实验技术"的体验,感受"问题解决"的快乐.学生在"寻找高效解磷菌,缓解土壤缺磷"的现实问题情境中,提升问...
【中文期刊】 李亚飞 罗春雨 等 《大理大学学报》 2021年6卷10期 32-36页
【摘要】 目的:从大理地区泡菜中分离筛选出对阴沟肠杆菌具有抑制优势的乳酸菌菌种,丰富传统乳酸发酵食品潜在的减肥功能.方法:在大理地区收集泡菜样本,用BBL琼脂培养基进行培养分离,通过革兰氏染色、聚合酶链式反应(PCR)鉴定、抑菌活性分析,经条带切胶回...
【中文期刊】 何莉莉 杨慧敏 等 《生态学报》 2014年34卷15期 4288-4294页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 为评价生物炭对农田土壤细菌群落多样性的影响,对不同施肥方式农田土壤细菌总DNA进行提取和16S rDNA特异性扩增,运用变性梯度凝胶电泳DGGE的分子生物学技术,对施肥土壤细菌群落的多样性进行表征.DGGE电泳结果表明,不同处理均可得到20...
【关键词】 细菌菌落； 多样性； 变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)；
【中文期刊】 王淼淼 张晓利 等 《临床皮肤科杂志》 2013年42卷11期 646-648页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:建立快速准确鉴别常见致病念珠菌菌落的PCR-限制性内切酶片段长度多态性(RFLP)方法.方法:结合直接菌落PCR检测技术,使用通用引物扩增6种念珠菌(包括白念珠菌、克柔念珠菌、近平滑念珠菌、光滑念珠菌、热带念珠菌和季也蒙念珠菌)ITS...
【关键词】 念珠菌； 菌落PCR； 限制性内切酶片段长度多态性；
【中文期刊】 顾洪雁 袁晓伟 《生物学杂志》 2010年27卷2期 36-39页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 利用热激PCR法和菌落直接PCR法进行大肠杆菌和农杆菌的鉴定,筛选含有GFP-linker-C-TAPa或wtGPA1-C-TAPa的pCAMBIA2300EC的阳性克隆,比较热激PCR法和菌落直接PCR法的优劣.热激PCR法阳性检出率是1...
【中文期刊】 赵耘 杜昕波 等 《微生物学通报》 2008年35卷6期 989-993页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 参照文献报道的产气荚膜梭菌α,β,ε,τ毒素基因cpa、cpb,etx及iA序列合成了针对4种毒素基因的4对特异引物,建立了一种简单的产气荚膜梭菌定型的菌落多重PCR方法.结果本所保存的A,B,c,D,E各型产气荚膜梭菌参考菌株均扩增出了相...
【中文期刊】 张明珠 李超伦 等 《上海交通大学学报（医学版）》 2007年27卷2期 152-155页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 探索口腔微生物定量分析的理想方法.方法 选择3种口腔常见微生物变异链球菌、牙龈卟啉单胞菌和具核梭杆菌的标准菌种厌氧培养24 h,经倍比稀释,涂板菌落形成单位(CFU)计数.将相应体积的菌液固定后,分别运用3种非培养方法对上述细菌进行定...
【中文期刊】 陈书霞 王晓武 等 《微生物学通报》 2006年33卷3期 52-56页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 利用单菌落PCR法直接筛选含有GFP、LTB-ST外源基因的重组克隆,阳性克隆可以扩增出目的条带,和质粒PCR扩增的结果一致.同时,单菌落PCR法也可应用于重组质粒转化后的农杆菌的筛选,单菌落PCR法的扩增结果和农杆菌液扩增的结果一致.结果...
【中文期刊】 徐淑红 闫玉清 等 《植物生理学通讯》 2006年42卷2期 291-292页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 文章采用菌落PCR的技术,快速扩增发根农杆菌Ri质粒rol(包括rolA、rolB、rolC)基因的DNA片段并用于测序分析.克服了由于Ri质粒过大,提取困难等问题.
【中文期刊】 江晓 陈晓蔚 等 《现代预防医学》 2005年32卷12期 1629-1630页 ISTICPKUCA
【摘要】 目的:探讨一种简易快速酸奶中双歧杆菌的鉴别方法.方法:在MRS培养基中添加一定量X-Gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-α-D-半乳糖苷),通过对标准双歧杆菌和乳酸菌混合菌及双歧杆菌和乳酸菌发酵的酸奶进行检测,对该培养基上不同颜色的菌落提取D...
【中文期刊】 李守新 刘尚勤 等 《华中科技大学学报（医学版）》 2005年34卷5期 642-643页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的探索菌落PCR差异筛选cDNA片段文库的可行性. 方法在用抑制性PCR构建cDNA片段文库的同时,分别制备正、反向减法杂交探针并用碱性磷酸酶直接标记.随后用这些探针与菌落PCR的产物杂交,从而筛选出差异表达克隆,并再次用RT-PCR证实...
【中文期刊】 张思河 包国强 等 《解放军医学杂志》 2004年29卷3期 248-250页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的评价菌落PCR法鉴定噬菌体抗体库阳性重组率的可靠性. 方法鼠抗体基因Lc片段、Fd片段经酶切、纯化后,依次克隆入pComb3载体上相应的酶切位点,电转化XL1-blue菌后建立鼠源性Fab噬菌体抗体库.比较菌落PCR法、质粒PCR法及质...
【中文期刊】 齐俊英 万齐全 等 《中华医院感染学杂志》 2003年13卷4期 305-307页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的研究外源指导序列(external guide sequence, EGS)在体外逆转大肠埃希菌临床分离株耐药菌为敏感菌中的作用与能力.方法构建针对β-内酰胺酶并含卡那霉素抗性基因的EGS重组质粒,常规CaCl2法将重组质粒导入临床分离...
【中文期刊】 蔡传奇 方荣祥 《生物工程学报》 2001年17卷2期 155-160页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 毕赤酵母是日益受到重视的基因工程受体菌,但是目前尚没有一种简便、高效的转化方法,也没有一种稳定、可靠的菌落PCR方法.本文通过在通常筛选重组子的MD培养基中增添lmol/L山梨糖醇使毕赤酵母电穿孔转化效率提高10倍以上.并比较系统地分析了其...
【中文期刊】 刘芳 王彩霞 等 《贵州医科大学学报》 2019年44卷7期 762-766页 ISTIC
【摘要】 目的:通过对常规菌落PCR方法进行优化,探索提高幽门螺杆菌(H.pylori)菌落PCR扩增效率的方法.方法:提取H.pylori 26695基因组DNA作为阳性对照组,以未经任何处理的H.pylori 26695菌落作为阴性对照组,经煮沸...
【中文期刊】 陈晓玲 邱亮 等 《渔业研究》 2020年42卷1期 22-28页
【摘要】 近年来,对虾急性肝胰腺坏死病(AHPND)在全球范围内暴发,给对虾养殖业造成了严重的损失.为了进一步掌握中国明对虾AHPND的暴发与池塘水体中弧菌数量的关系,本文采用套式PCR法以及TCBS选择培养基法,分别对2018年4-9月采集的样品进...
【中文期刊】 赵宁 魏春燕 等 《中国预防兽医学报》 2019年41卷6期 645-648页
【摘要】 为研究巴什拜羊和盘羊杂交羊的重组肺表面活性物质相关蛋白A (rSP-A)对体外培养的绵羊肺炎支原体(MO)增殖的影响,本研究利用不同浓度(10μg/mL、20 μg/mL和40 μg/mL)巴什拜羊和盘羊杂交羊的rSP-A添加于MO培养液中...
【关键词】 巴什拜羊； 盘羊杂交羊； 肺表面活性物质相关蛋白A；
【中文期刊】 刘超 韩雅婷 等 《天津医科大学学报》 2016年22卷3期 256-258,261页 ISTIC
【摘要】 目的:利用PCR法鉴定酿酒酵母a、α单倍体或a/α双倍体三种接合型.方法:根据酿酒酵母a、α或a/α三种接合型MAT基因座及附近序列信息,分别设计特异的寡核苷酸引物.提取酿酒酵母DNA作为模版和利用单菌落PCR法,进行特异性PCR扩增.结果...
【中文期刊】 胡景玉 杜红丽 等 《临床肺科杂志》 2013年18卷2期 290-292页 ISTIC
【摘要】 目的 了解衡水地区大肠埃希菌的药敏情况以及qnr基因的存在情况.方法 采用肉汤稀释法测15种抗菌药物最低抑菌浓度(MIC)并计算其MIC50和MIC90;采用聚合酶链反应(PCR)检测qnr基因.结果 15种抗菌药物中仅亚胺培南、哌拉西林/...
【中文期刊】 陈怡文 周巍 等 《食品安全质量检测学报》 2018年9卷21期 5642-5646页
【摘要】 目的 对GB 4789.2-2016菌落总数测定方法的重要影响因素进行了系统分析.方法 使用大肠埃希氏菌ATCC25922、金黄色葡萄球菌ATCC6538和枯草芽孢杆菌ATCC6633的新鲜菌株和冻干样品评价PCA培养基的倾注温度(45℃和...
【中文期刊】 余传星 赵自云 等 《福建中医学院学报》 2009年19卷6期 51-53页 ISTICCSCD
【摘要】 目的 研究结核杆菌微菌落培养中细菌繁殖的周期.方法 利用荧光定量PCR对微菌落形成前后细菌DNA的拷贝教进行检测分析,在基因水平判定结核杆菌生长繁殖一代所需要的时间以及观察微菌落形成的最短时间.结果 对培养前后的拷贝数进行t检验,t值分别为...
【中文期刊】 王雪峰 何援利 《广东医学》 2008年29卷5期 747-749页 ISTICCA
【摘要】 目的 克隆大鼠Bcl-2基因(B cell lymphoma)全长cDNA,快速筛选重组pMD18-T-Bcl-2阳性克隆.方法 采用RT-PCR的方法从大鼠脾脏组织中扩增全长Bcl-2cDNA,将扩增产物克隆至pMD18-T栽体中,用单菌...
【中文期刊】 姚琴 丛玲 等 《生物技术》 2006年16卷1期 5-7页 ISTICCA
【摘要】 为了获得胚乳组织特异性表达八氢番茄红素的转基因小麦,以拟南芥幼叶RNA为模板,由特异型引物通过RT-PCR一步法得到大小约为1.3kb的基因片段,将此片段连接在克隆载体pMD18-T进行测序,结果表明,该基因片段为八氢番茄红素合成酶基因(p...
【中文期刊】 廖世奇 张春梅 等 《医学研究通讯》 2003年32卷7期 47-48页 ISTIC
【摘要】 PCR扩增的小片段DNA用T载体连接,转化受体菌后观察不到典型的蓝/白斑.用插入片段的特异性引物对菌落进行PCR来筛选阳性重组子,测序鉴定结果吻合率达100%,说明当利用颜色特性挑选阳性克隆成为困难时,菌落PCR技术是一种简便、快速、可靠的...
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