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            【中文期刊】 刘利娅  李淑慧  等 《国际检验医学杂志》 2012年33卷9期 1025-1027页ISTICCA

            【摘要】 目的 获得高纯度和高免疫原性的猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)病毒非结构蛋白7(nsp7).方法 nsp7编码DNA片段是PRRS病毒基因组裂解产物,酶切后连接至克隆质粒pET-28a构建为表达质粒pET-28a-nsp7,转化至大肠杆菌B...

            【关键词】 猪呼吸与生殖综合征病毒病毒非结构蛋白质原核细胞

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            【中文期刊】 吴云华  杨盼春  等 《中南民族大学学报(自然科学版)》 2018年37卷3期 23-27页

            【摘要】 目的:对转录激活子样效应因子(TALE)蛋白进行特异性标记. 方法:通过分子生物学技术,在TALE蛋白的C-端融合了一种具有优异光学性能的萤光素酶. 结果:融合蛋白不仅可对目的DNA进行特异性识别,还可产生萤光素酶的特征光谱. 结论:萤光素...

            【关键词】 转录激活子样效应因子蛋白重组蛋白质蛋白质表达纯化

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            【中文期刊】 王欢欢  张绍城  《中国保健营养》 2016年26卷26期 18-19页

            【摘要】 目的:通过对鞭毛蛋白质fliH的克隆表达及热稳定性分析,为深入分析细菌感染的分子机制以及新的特异性抗菌药物和快速诊断方法的研发提供基础.方法:利用PCR技术扩增fliH基因,构建重组质粒pET-28a-fliH-His6,并在大肠杆菌(Es...

            【关键词】 鞭毛蛋白质fliH表达纯化热稳定性

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            【中文期刊】 诸葛尧尧  董静  等 《临床医药实践》 2025年34卷4期 285-290页

            【摘要】 目的:制备并鉴定针对新布尼亚病毒(SFTSV)JS2012-70株N端糖蛋白(Gn)的单克隆抗体,为深入研究SFTSV的致病机制和开发检测及治疗策略提供工具.方法:通过生物信息学分析Gn蛋白的免疫原性,去除跨膜域后构建pET—28a(+)—...

            【关键词】 新布尼亚病毒Gn蛋白蛋白表达纯化

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            【中文期刊】 孙雪珂  丁培阳  等 《河南农业科学》 2023年52卷6期 131-138页

            【摘要】 为构建稳定表达猪δ冠状病毒(PDCoV)S1蛋白的CHO细胞系,利用电转染技术将重组质粒pCGS3-S1转染至CHO细胞,通过有限稀释法筛选稳定表达重组S1蛋白的单克隆细胞系.利用阴离子交换层析和凝胶过滤层析方法对重组S1蛋白进行纯化,采用...

            【关键词】 猪δ冠状病毒S1蛋白CHO细胞

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            【中文期刊】 章杰  刘琼明  等 《生物化学与生物物理进展》 2009年36卷4期 391-397页SCIISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 主要介绍了目前在生物芯片表面进行蛋白质无细胞表达与定向制备蛋白质芯片的研究进展,包括各种基因植入芯片的方法、蛋白质体外不同表达的途径、蛋白质固定的策略以及可能的应用发展前景等.蛋白质芯片以其高通量、高灵敏和检测迅速等优点正成为蛋白质组学研究...

            【关键词】 蛋白质芯片无细胞蛋白质表达体外蛋白质表达

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            【中文期刊】 钟英成  石爽  等 《生物化学与生物物理进展》 2007年34卷1期 93-99页SCIISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 哺乳动物细胞表达的人类新细胞因子--趋化素样因子超家族成员-2(CKLFSF2)存在分泌形式,位于CKLFSF2分子的羧基端,具有细胞趋化作用.为进一步研究CKLFSF2羧基端蛋白的结构和生物学功能及抗体制备,构建了GST-CKLFSF2C...

            【关键词】 趋化素样因子超家族成员-2重组蛋白纯化多克隆抗体

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            【中文期刊】 朱志勇  谭波  等 《生物化学与生物物理进展》 2004年31卷7期 655-658页SCIISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 报道了带有His-tag的仓鼠二氢叶酸还原酶基因的克隆和在DB序列增强下T7启动子调控该基因在大肠杆菌中的可溶性高效表达,SDS-PAGE分析表明,带有His-tag的仓鼠二氢叶酸还原酶的含量可占大肠杆菌细胞总蛋白质含量的46%.该酶的纯化...

            【关键词】 蛋白质表达二氢叶酸还原酶pET-DB载体

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            【中文期刊】 李淑蓉  粟永萍  等 《生物化学与生物物理进展》 2004年31卷9期 791-795页SCIISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 糖皮质激素受体(GR)在严重创伤早期及全身性炎症反应中具有重要作用,为寻找与 GR相互作用的新的蛋白质,以期调节GR的功能活性,应用酵母双杂交技术,以糖皮质激素受体配体结合区(GR-LBD)为诱饵蛋白,在人骨髓cDNA文库中筛选到42个阳性...

            【关键词】 糖皮质激素受体干扰素诱导蛋白P56酵母双杂交系统

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            【中文期刊】 陆承荣  李勇  等 《生物化学与生物物理进展》 2001年28卷4期 528-531页SCIISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 利用酵母双杂交方法,用肝细胞生成素(HPO)作为诱饵蛋白在人胎肝cDNA文库中筛选到能与HPO相互作用的蛋白:AP-1辅助激活因子JAB1.并用PCR方法从人胎肝cDNA文库中扩出JAB1全长cDNA,进行GST-JAB1原核融合蛋白表达与...

            【关键词】 肝细胞生成素c-Jun结合蛋白转录因子

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            【中文期刊】 刘新光  梁念慈  等 《生物化学与生物物理进展》 2000年27卷2期 201-205页SCIISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 将构建成功的人蛋白激酶CK2β亚基cDNA的重组质粒, 转化大肠杆菌BL21 (DE3), 在IPTG诱导下表达. 表达蛋白大多数以不溶形式存在. 6L(约10.2 g)表达菌抽提得到约20 mg的可溶性表达产物, 通过P11磷酸纤维素一步...

            【关键词】 人蛋白激酶CK2β亚基表达载体pT7-7原核表达

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            【中文期刊】 秦万昌  黄书奇  等 《天津医科大学学报》 2022年28卷6期 598-601,608页ISTIC

            【摘要】 目的:建立稳定的实验室多克隆抗体制备流程,选择Smarcad1作为目的基因进行重组蛋白表达纯化与多克隆抗体制备,并对其进行特异性验证.方法:以本实验室的pcDNA3.1-Flag-Smarcad1质粒作为模板,构建pET-16b-Smarc...

            【关键词】 基因克隆原核蛋白表达纯化多克隆抗体制备

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            【中文期刊】 李冬民  蒋小英  等 《中国医学教育技术》 2022年36卷4期 420-425页

            【摘要】 为方便学生线上自主学习,又便于线上线下混合教学,并可对学习效果进行评估,提高学生学习的效率,设计开发基于虚拟仿真技术的"蛋白质表达纯化及其结构解析"虚拟仿真金课.该文介绍此虚拟仿真实验课程的相关网络及安全要求,实验内容、原理及操作说明,实施...

            【关键词】 虚拟仿真金课实验教学

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            【中文期刊】 刘勇  安艳芳  等 《中国感染控制杂志》 2016年15卷6期 361-366页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:评估细胞穿透肽 CCL 融合蛋白构建的可能性。方法将 CCL6-PEP-6XHis 构建至 pABP 质粒,然后提取 pABP-CCL6-PEP 质粒进行人胚肾 HEK293细胞转染表达,以及 CCL6-PEP-6XHis 蛋白层析纯...

            【关键词】 细胞穿透肽CCL基因表达

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            【中文期刊】 许静  任百光  等 《中国防痨杂志》 2015年37卷5期 478-486页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 为了改变结核分枝杆菌蛋白质的结构与功能研究由于受结核分枝杆菌蛋白难以可溶性表达和纯化的影响而进展缓慢的问题.方法 将多个能促进可溶性表达的蛋白标签与高通量的Gateway克隆技术相结合,构建结核分枝杆菌蛋白可溶性表达快速通量的筛选平台...

            【关键词】 结核分枝杆菌重组融合蛋白质高通量筛选分析

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            【中文期刊】 孙毅凡  李海成  等 《中国防痨杂志》 2012年34卷8期 523-526页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 克隆结核分枝杆菌Rv3803c和Rv846基因,并在大肠埃希菌(E.coli)中进行表达和纯化.方法 以结核分枝杆菌H37Rv基因组 DNA为模板,应用PCR方法扩增出Rv803c和R73846基因片段,克隆至pGEX-6P-1表达...

            【关键词】 分枝杆菌,结核抗原,细菌细菌蛋白质

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            【中文期刊】 李邦印  孙卫国  等 《中国防痨杂志》 2010年32卷11期 752-755页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 从H37Rv标准株克隆出结核菌Rv2653c基因并进行表达与初步分析.方法 根据H37Rv基因组序列合成引物,以PCR方法钓取Rv2653c基因,克隆到pGEM-T上,挑取阳性克隆进行测序,将正确编码基因克隆到pET24b载体上,在B...

            【关键词】 分枝杆菌,结核大肠埃希菌细菌蛋白质

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            【中文期刊】 赵玉霞  杨国俊  等 《郑州大学学报(医学版)》 2009年44卷1期 125-129页ISTICPKUCA

            【摘要】 目的:在大肠杆菌TB1(pMAL-c2X)中表达幽门螺杆菌(Hp)UreB-Omp11融合蛋白,并探索其免疫学活性,为Hp基因工程疫苗的研制奠定基础.方法:以重组质粒pET30a(+)-ureB-omp11为模板获得融合基因ureB-omp...

            【关键词】 幽门螺杆菌Ure B-Omp11免疫学

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            【中文期刊】 杨立彬  李树蕾  等 《吉林大学学报(医学版)》 2008年34卷3期 415-419页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:构建人肿瘤坏死因子样分子1A(TL1A)原核表达质粒并诱导其表达,纯化及鉴定目的蛋白.方法:人HUVECs总RNA经逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增TL1A基因,克隆到pTA2载体,酶切和测序鉴定正确后构建重组原核表达质粒pQ...

            【关键词】 TL1A克隆,分子原核表达

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            【中文期刊】 张卫军  郭刚  等 《第三军医大学学报》 2008年30卷17期 1587-1590页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 克隆表达幽门螺杆菌外膜蛋白烷基过氧化氢还原酶ahpC、ureB414功能片段基因,与大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位构建融合基因ahpC-ureB414-ltB(aul).方法 采用重叠延伸PCR的方法,以AhpC做为融合蛋白前端,与Ur...

            【关键词】 幽门螺杆菌不耐热肠毒素B亚单位融合蛋白

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            【中文期刊】 廖丹  谢建平  等 《微生物学报》 2007年47卷5期 932-936页ISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 膜蛋白是一类与生物膜相互作用、具有重要功能和独特结构的蛋白质.异源表达纯化一直是了解膜蛋白结构和功能的重要瓶颈.结核分枝杆菌作为典型的胞内致病菌,其膜蛋白的研究具有很好的代表性以及重要意义.目前用于表达膜蛋白的有大肠杆菌、酵母、哺乳动物细胞...

            【关键词】 结核分枝杆菌膜蛋白异源表达

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            【中文期刊】 李昕  于顺  等 《首都医科大学学报》 2007年28卷3期 333-336页ISTICPKUCA

            【摘要】 目的 克隆编码大鼠α-突触核蛋白的cDNA,探讨α-突触核蛋白基因在原核细胞中的表达过程并制备基因重组型α-突触核蛋白.方法 设计合成含适当酶切位点的DNA片段作为引物,采用RT-PCR法从Wistar大鼠脑总RNA中扩增编码α-突触核蛋白...

            【关键词】 α-突触核蛋白纯化

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            【中文期刊】 田宇  鲁红  等 《中国组织工程研究与临床康复》 2007年11卷2期 219-221页ISTICPKUCA

            【摘要】 目的:获得高纯度的重组人成釉蛋白C端肽.方法:实验于2001-01/2004-06在解放军第四军医大学口腔内科实验室解放军第四军医大学基础部生物化学与分子生物学实验室完成.①转化pRSET-A/成釉蛋白原核表达质粒入BL21(DE3)细菌进...

            【关键词】 牙釉质蛋白质类/分离和提纯色谱法,亲和色谱法,离子交换

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            【中文期刊】 田宇  鲁红  等 《中国组织工程研究与临床康复》 2007年11卷1期 18-20页ISTICPKUCA

            【摘要】 目的:制备抗人成釉蛋白抗体,观察成釉蛋白在各组织中的表达.方法:实验于2002-03在解放军第四军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室完成.以重组、纯化的成釉蛋白C端肽为抗原,混入完全/不完全弗氏佐剂,免疫新西兰大白兔,经5次免疫后,颈动...

            【关键词】 印迹法,蛋白质牙胚

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            【中文期刊】 孟凡红  金贞姬  等 《中国生物工程杂志》 2006年26卷12期 11-17页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 优化人血清白蛋白(human serum albumin,HSA)基因的密码子,合成基因连接到用于汉逊酵母(Hansenula polymorpha)表达的表达载体上,构建成重组人血清白蛋白(recombinant human serum ...

            【关键词】 人血清白蛋白汉逊酵母蛋白质纯化

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            【中文期刊】 李兴鑫  周跃  等 《第三军医大学学报》 2006年28卷7期 648-651页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的分别构建含蛋白转导域(protein transduction domain,PTD)TAT与小鼠心肌营养素-1(CT-1)及TAT与增强绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)融合...

            【关键词】 心肌营养素-1重组融合蛋白质蛋白转导域

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            【中文期刊】 岑洪  林茂芳  等 《中国病理生理杂志》 2006年22卷2期 412-414页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:克隆可溶性巨噬细胞集落刺激因子受体(sMR)基因,在大肠杆菌中表达,经纯化、复性后获得活性蛋白.方法:从人骨髓细胞中提取总RNA,在sMR基因引物两端分别加上NdeⅠ和BamHⅠ酶切位点,利用RT-PCR技术扩增sMR基因,经NdeⅠ...

            【关键词】 受体,可溶性巨噬细胞集落刺激因子克隆原核表达

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            【中文期刊】 杨思睿  卫红飞  等 《吉林大学学报(医学版)》 2006年32卷1期 11-14页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:构建热休克蛋白65(HSP65)与沙眼衣原体(C.trachomatis,Ct)主要外膜蛋白(MOMP)T细胞表位(简称ctm1)融合蛋白(简称H-ctm1)的原核表达载体,并将其表达及纯化.方法:用PCR技术获得HSP65基因和ct...

            【关键词】 热休克蛋白65衣原体,沙眼表位,T淋巴细胞

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            【中文期刊】 周爱萍  张祖昌  等 《四川大学学报(医学版)》 2006年37卷3期 369-372页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的在大肠杆菌中表达重组沙门菌侵袭蛋白A,并对表达产物进行分离和纯化.方法提取沙门菌基因组模板,PCR扩增侵袭因子 invA 基因目的片段,插入表达质粒载体pET-30c(+)中,构建pET-invA重组子,经双酶切和测序证实后,转化表达宿...

            【关键词】 沙门菌侵袭蛋白A重组蛋白质原核表达

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            【中文期刊】 刘毅  韩金祥  等 《山东大学学报(医学版)》 2005年43卷6期 473-477页ISTICPKUCA

            【摘要】 目的:构建Ⅰ型单纯疱疹病毒型特异性包膜糖蛋白G基因片段的表达载体,进行原核表达,并纯化目的蛋白.方法:用PCR法扩增HSV1-gG强抗原决定簇的基因片段,将该段基因克隆于PBV221表达载体,转化大肠杆菌DH5α,温控诱导目的蛋白表达,表达...

            【关键词】 单纯疱疹病毒Ⅰ型,人包膜糖蛋白G重组蛋白质

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