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【中文期刊】 王俊 沈微 等 《中国生物工程杂志》 2007年27卷2期 14-18页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 利用重叠PCR技术拼接PTH和HSA基因,并将构建好的融合基因插入到载体pUC19测序后插入表达载体pPIC9K中,在启动子AOX Ⅰ和α交配因子信号肽的作用下,分泌表达融合蛋白PTH-HSA.重组质粒pPIC9K/PTH-HSA经Sal ...
【关键词】 人甲状旁腺激素；融合蛋白；表达载体pPIC9K；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 孟亚鹏 徐敏 等 《四川动物》 2006年25卷1期 68-71页ISTICPKU
【摘要】 将草鱼生长激素基因(cGH)的cDNA亚克隆到酵母表达载体pPIC9K中, 经电击转化导入毕赤巴斯德酵母GS115菌株,获得转化子.菌落PCR技术筛选证实cGH已经整合到了酵母染色体上.对重组酵母进行诱导表达, SDS-PAGE和Weste...
【关键词】 草鱼；生长激素基因；pPIC9K表达载体；
- 概要：
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【中文期刊】 刘煜 吴国祥 等 《中国药科大学学报》 2003年34卷6期 577-581页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:采用基因工程方法构建基因工程菌制备人VEGF165蛋白.方法:自人肿瘤组织中获取人VEGF165 cDNA,构建pPIC9K酵母表达载体,采用Pichia酵母真核表达系统表达目的蛋白.结果:SDS-PAGE及Western-blot结...
【关键词】 血管内皮生长因子165；巴氏毕赤酵母；pPIC9K酵母表达载体；
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【中文期刊】 范建华 赵建阳 等 《同济大学学报(医学版)》 2004年25卷1期 11-14页ISTIC
【摘要】 目的采用基因工程方法构建基因工程菌制备人EGFR配体结合区蛋白.方法自人肿瘤细胞SK中获取人EGFR cDNA,构建pPIC9K酵母表达载体,采用Pichia酵母真核表达系统表达目的蛋白.结果 SDS-PAGE及Western-blot结果...
【关键词】 表皮生长因子受体；巴氏毕赤酵母；pPIC9K酵母表达载体；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 韩雅莉 林非凡 等 《广东工业大学学报》 2017年34卷1期 19-23页
【摘要】 采用PCR技术,以含有TFP(Tenebrio Fibrinolyric Proteins, TFP) cDNA质粒作为模板,扩增出TFP基因片段.将克隆获得的目的基因插入到毕赤酵母表达载体pPIC9K中,经测序无误后,获得重组表达质粒pP...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 孟志刚 张锐 等 《西北农业学报》 2005年14卷4期 166-170页
【摘要】 为了解决酵母发酵时贫氧限制目的蛋白表达量,利用透明颤菌血红蛋白基因vgb设计毕赤酵母分泌型表达载体pPIC9K-vgb,并以人乳铁蛋白基因为目的基因转入毕赤酵母GS115.研究结果表明,该表达载体具有转化操作简单、后期工程菌筛选简便、菌体耐...
【关键词】 透明颤菌血红蛋白基因vgb；毕赤酵母；表达载体pPIC9K；
- 概要：
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【中文期刊】 白凤霞 娄世峰 《细胞与分子免疫学杂志》 2011年27卷1期 106-108页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建大肠杆菌·毕赤酵母表达载体Ppic9k-IL3-Linker-PE38KDEL.方法:用PCR的方法扩增所需要的目的片段IL3及PE38KDEL,再通过酶切和连接的方法定向克隆到载体Ppic9k-Linker中,得到融合基因Ppi...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【学位论文】 作者：时纪元 导师：李兆申 许国铭 第二军医大学 临床医学 内科学(消化系病)（博士） 2007年
【摘要】 目的： 人工合成SHH蛋白N末端基因的Pichia酵母表达，制备多克隆抗体。 方法： 构建人工合成SHH蛋白N末端基因的Pichia酵母表达载体，获得酵母表达株，甲醇诱导表达目的蛋白，免疫Balb/c小鼠制备多...
【关键词】 Hedgehog信号通路 ； 人工合成SHH蛋白N末端基因 ；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【学位论文】 作者：唐键 导师：谢琪璇 暨南大学 生物学 发育生物学（硕士） 2004年
【摘要】 透明带(ZP)是哺乳类动物卵细胞膜外包被的一层特殊的非细胞结构,是精子与卵细胞识别和结合的部位。人卵透明带蛋白ZP3是精卵识别和结合过程中的初级精子受体,因而成为研究孕前型避孕疫苗的潜在靶抗原。体内自身透明带抗体的存在会导致卵巢功能紊乱.....
【关键词】 人卵透明带ZP3蛋白 ； 载体pPIC9K ；
- 概要：
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【中文期刊】 王岚 贾国超 《中国免疫学杂志》 2024年40卷7期 1501-1506页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:观察IGFBP-3抗原在不同真核细胞中的表达差异,筛选最优的IGFBP-3抗原进行IGFBP-3抗原诊断试剂盒开发的校准品性能分析.方法:将人IGFBP-3基因分别克隆至毕赤酵母表达载体pPIC9K及哺乳动物细胞表达载体pCMV中,分...
- 概要：
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【中文期刊】 盛彦敏 肖丽娟 等 《长春中医药大学学报》 2024年40卷12期 1342-1346页ISTIC
【摘要】 目的 表达纯化人线粒体DNA聚合酶γ(Pol γ),并分析其活性,以应用于核苷(酸)类抗病毒药的毒副作用检测与筛选.方法 以质粒PCMV-SPORT6-POLG为模板,PCR扩增人线粒体DNA聚合酶γ基因(POLG),并克隆至pPIC9K载...
【关键词】 人线粒体DNA聚合酶γ；GS115毕赤酵母；表达纯化；
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【中文期刊】 蔡思泽 王斌 《现代食品科技》 2023年39卷3期 129-137页
【摘要】 胶原蛋白在人体内有重要作用,并且在食品、保健品、医疗等方面有广泛应用.该研究针对毕赤酵母的密码子偏好性对人源Ⅲ型胶原蛋白基因进行了密码子优化,在此基础上构建了人源Ⅲ型胶原蛋白单串联、二串联和二串联四拷贝表达载体pPIC9K-COL3-S、p...
- 概要：
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【中文期刊】 徐艳艳 廖志银 等 《浙江大学学报（理学版）》 2022年49卷6期 753-759页
【摘要】 人溶菌酶(human lysozyme,hLYZ)是一种天然活性蛋白质,具有抗菌性,目前主要应用于食品添加剂、动物饲料、药物治疗领域.根据毕赤酵母表达偏爱密码子特点,通过优化hlyz基因密码子,人工合成目的基因,构建了分泌表达载体pPIC9...
- 概要：
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【中文期刊】 于松尼 贾鹏飞 等 《农业生物技术学报》 2022年30卷7期 1385-1393页
【摘要】 粉红聚端孢(Trichothecium roseum)是一种重要的菌寄生真菌,能够通过菌寄生作用抑制病原微生物的生长,可以有效防治多种植物病原真菌.几丁质酶(chitinase,chi)在粉红聚端孢寄生和抑菌过程中发挥重要作用,本研究旨在实...
【关键词】 粉红聚端孢；几丁质酶Trchi2；毕赤酵母；
- 概要：
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【中文期刊】 韩秀娥 秦兰霞 等 《中国食品学报》 2022年22卷4期 76-82页
【摘要】 为确定玉米谷氨酰胺转氨酶基因在毕赤酵母中的最佳诱导表达条件,将构建好的重组表达载体pPIC9K-TGZ经Sac I线性化处理,电转入巴斯德毕赤酵母GS115,利用抗生素Zeocin筛选阳性克隆,聚合酶链式反应扩增验证,甲醇诱导表达.通过正交...
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【中文期刊】 马建荣 余永红 等 《生物学杂志》 2011年28卷5期 60-64,69页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 采用PCR的方法对AGAP(anti-cancer analgesic peptide,抗癌镇痛肽)的N端进行了基因改造,保留了Kex2初步切割信号序列,去除了Ste13的切割序列,加入了对蝎毒蛋白抗癌镇痛活性无影响的氨基酸作为linker...
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【中文期刊】 王强 彭开松 等 《生物学杂志》 2011年28卷2期 43-46页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 利用RT-PCR技术,从鸡肺脏总RNA中克隆了Gal-2 eDNA全序列,以克隆载体为模板PCR扩增Gal-2成熟肽eDNA,将成熟肽eDNA插入到分泌型表达载体pPIC9k中,构建pPIC9k-Gal-2成熟肽表达载体;通过电转化方法将表...
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【中文期刊】 李忠清 王亮 《生物技术通报》 2011年6期 145-149页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 利用巴斯德毕赤酵母系统表达抗菌肽牛乳铁蛋白肽衍生肽简称LfcinBD,获得的表达产物具有较强的抗菌活性.将人工设计的用化学合成法合成的以酵母偏爱密码子编码的LfcinBD基因片段克隆到巴斯德毕赤酵母分泌型表达载体pPIC9K中,获得的重组质...
【关键词】 牛乳铁蛋白肽衍生肽(LfcinBD)；毕赤酵母表达系统；抗菌活性；
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【中文期刊】 杨湘越 张惠菊 等 《医学研究生学报》 2011年24卷9期 908-912页ISTICPKU
【摘要】 目的 人自身抗原U1RNP 70K通常采用组织提取法或原核表达获得.文中用基因克隆技术,在毕赤酵母中表达人U1RNP 70K自身抗原,并建立斑点免疫金渗滤检测法.方法 PCR扩增U1RNP 70K基因,与酵母表达载体pPIC9k重组,构建表...
- 概要：
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【中文期刊】 胡廷章 肖国生 等 《生物技术通报》 2011年2期 146-150,183页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 将番茄脂氧合酶基因TomloxD克隆至酵母表达载体pPIC9K中,转化毕赤酵母GS115菌株,构建组成型表达T0mloxD的酵母工程菌株.SDS-PAGE和western blot分析表明,经甲醇诱导,TomloxD蛋白在酵母中得到表达,表...
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【中文期刊】 张梅 邬敏辰 等 《生物技术通报》 2009年7期 117-121页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 构建人甲状旁腺激素(1-34)二联体与人血清白蛋白融合蛋白的表达载体,并表达得到该融合蛋白.通过设计强特异性的引物,利用重叠PCR技术,定向定量的拼接得到hPTH(1-34)二联体-HSA融合蛋白的基因;将构建好的融合基因插入表达载体pPI...
【关键词】 人甲状旁腺激素(1-34)二联体；人血清白蛋白；融合蛋白；
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【中文期刊】 杨珺 张家敏 等 《中国药理学通报》 2009年25卷7期 915-919页ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 目的 构建IL-24基因的真核表达载体,在毕赤酵母GS115中高效表达,研究重组N-糖基化IL-24蛋白体外诱导肿瘤细胞凋亡的活性.方法 借助过渡质粒α/pUC18,将IL-24基因插入到质粒pPIC9K的BamH Ⅰ和EcoR Ⅰ之间,构...
- 概要：
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【中文期刊】 姜丽华 卢海蓉 等 《生物工程学报》 2006年22卷6期 1036-1039页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 PBD-1是猪防御系统起重要作用的抗菌小肽,为实现其在毕赤酵母中的表达,根据已发表的猪β防御素1(PBD-1)氨基酸序列和酵母偏好密码子,用PCR方法获得PBD-1基因,克隆到分泌型表达载体pPIC9K信号序列α因子之后,构建重组表达质粒p...
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【中文期刊】 张新国 郭广君 等 《生命科学研究》 2018年22卷6期 475-482页ISTICCA
【摘要】 δ-睡眠肽(delta sleep inducing peptide,DSIP)的相对分子质量较小,在体内半衰期较短,因此本研究将蛋白质转导结构域(protein transduction domain,PTD)、人血清白蛋白(human ...
【关键词】 δ-睡眠肽(DSIP)；人血清白蛋白(HSA)；连接肽；
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【中文期刊】 蔡海莺 张婷 等 《中国食品学报》 2018年18卷6期 262-271页
【摘要】 通过密码子优化改造编码sn-1,3位置专一性疏绵状嗜热丝孢菌脂肪酶(TLL)基因,同时通过重叠PCR技术合成该基因,并将其克隆到巴斯德毕赤酵母的表达载体pPIC9K中.结果表明,TLL脂肪酶被高效胞外表达,在摇瓶中发酵168 h得到的发酵液...
【关键词】 疏绵状嗜热丝孢菌脂肪酶；重组表达；密码子优化；
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【中文期刊】 王圣钧 郁慧丽 等 《生物技术》 2011年21卷4期 29-33页ISTICCA
【摘要】 目的:构建GLP-1-IgG Fc融合蛋白分子并在毕赤酵母中实现高效表达.方法:使用蛋白质工程技术改造GLP -1,去除其蛋白酶降解位点,然后利用重叠延伸PCR方法得到改造后的GLP -1与人IgG-Fc片断的嵌合体基因并将其插入pPIC9...
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【中文期刊】 尹慧祥 易国辉 等 《工业微生物》 2011年41卷2期 43-46页ISTICCA
【摘要】 用套叠PCR法扩增里氏木霉(Trichoderma reesei)的葡聚糖内切酶II(egⅡ)基因.扩增基因经EcoR I和Not I双酶切后克隆进P.pastoris表达载体pPIC9k,获得重组表达质粒pPIC9K-egⅡ.通过电转法将...
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【中文期刊】 张娟 罗长财 《生物技术通讯》 2011年22卷2期 182-187页ISTICCA
【摘要】 目的:克隆黑曲霉β-甘露聚糖酶基因,研究该基因在毕赤酵母中的表达情况.方法:运用RT-PCR从黑曲霉AN070902中克隆β-甘露聚糖酶cDNA片段,与载体pPIC9K相连,构建重组载体VMAN-pPIC9K,电转化毕赤酵母GS115,筛选...
- 概要：
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【中文期刊】 康雪燕 张莉 等 《生物技术通讯》 2010年21卷2期 222-226页ISTICCA
【摘要】 目的:利用巴斯德毕赤酵母表达系统表达猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)纤突糖蛋白S.方法:根据GenBank中猪TGEV纤突耱蛋白S全基因设计一对引物,并在5'引物和3'引物中引入EcoR Ⅰ、Not Ⅰ酶切位点,2.2 kb的目的基因S经PC...
- 概要：
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【中文期刊】 吕爽 雷连成 等 《中国实验诊断学》 2010年14卷3期 372-375页ISTIC
【摘要】 目的 用PCR技术特异扩增人溶菌酶基因hLYZ cDNA序列,克隆至质粒pMD18-T中,获得重组质粒pMD18-T-hLYZ.方法 采用EcoR Ⅰ/Not Ⅰ双酶切及PCR确认正确后,将人溶菌酶基因cDNA目的片段亚克隆到毕赤酵母表达载...
- 概要：
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