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            【中文期刊】 许博楠  冯佳  等 《生物技术通报》 2022年38卷12期 100-114页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 无细胞蛋白合成系统(cell-free protein synthesis,CFPS)是一种体外蛋白质合成的高效平台,与体内蛋白合成系统相比,它突破了活细胞的限制,使蛋白合成反应可以在试管中进行,具有灵活、高效、可控性强的特点.近几年来,合...

            【关键词】 无细胞蛋白合成细胞提取质粒DNA模板

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            【中文期刊】 钟义军  吴晓玉  等 《微生物学通报》 2011年38卷6期 847-852页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 采用十二烷基硫酸钠和提高生长温度结合法、紫外线涂布平板法、冻融法、吖啶橙法和黄芩甙提取液消除法等方法消除洋葱伯克霍尔德菌T1828菌株质粒,探讨适合洋葱伯克霍尔德菌质粒消除的方法,并研究最佳质粒消除条件。结果表明十二烷基硫酸钠和提高生长温度...

            【关键词】 洋葱伯克霍尔德菌T1828质粒消除质粒提取

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            【中文期刊】 庞浩  封毅  等 《微生物学通报》 2009年36卷5期 768-772页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 堆肥环境中高浓度腐殖酸的存在阻碍了对这个环境中的未培养微生物的宏基因组研究.我们提出了一个确实可行的提取堆肥环境DNA的方法,这个方法通过使用Sephadex G200+酸洗PVPP层析柱与电洗脱两步纯化的方法成功地纯化堆肥环境来源的DNA...

            【关键词】 堆肥宏基因组DNA提取纯化

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            【中文期刊】 于耀洋  赵佳  等 《中草药》 2019年50卷10期 2371-2376页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 探讨南蛇藤提取物(COE)联合miR-302对人食管癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响及对PI3K/Akt信号通路的调控作用.方法 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测人正常食管上皮细胞Het-1A及不同食管癌细胞株中miR-302表达...

            【关键词】 南蛇藤提取miR-302食管癌细胞

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            【中文期刊】 张雪  陈萍  等 《吉林大学学报(医学版)》 2013年39卷4期 690-693页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:对木糖氧化产碱菌中亚硝酸盐还原酶基因(nir)进行克隆并表达,并测定酶的活力,探讨亚硝酸盐还原酶(NiR)对亚硝酸盐的降解特性.方法:提取木糖氧化产碱菌DNA,根据GenBank公布的nir基因序列设计引物,利用PCR技术扩增nir基...

            【关键词】 亚硝酸盐还原酶克隆基因表达

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            【中文期刊】 宋丽华  齐力  等 《吉林大学学报(医学版)》 2013年39卷4期 759-762,后插4页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:构建携带Hath1基因的真核表达载体并转染神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y),观察其在SH-SY5Y细胞中的表达.方法:从人全血中提取DNA,克隆Hath1基因,同时扩增绿色荧光蛋白(GFP) gfp基因;利用引物GFP-R和Hath...

            【关键词】 Hath1基因gfp基因真核表达

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            【中文期刊】 张红艳  王春玉  等 《吉林大学学报(医学版)》 2012年38卷2期 202-206页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:构建pcDNA3.lmyc-HisA-Smad2/3/4真核表达质粒,证实融合蛋白在细胞内表达.方法:以pcDNA3.1-Smad2/3和pGEX2T-Smad4质粒为模板,设计特异性引物,PCR扩增Smad2/3/4全长编码基因,亚...

            【关键词】 Smad蛋白免疫印记融合蛋白

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            【中文期刊】 吴晓莉  张婷  等 《中草药》 2012年43卷1期 143-147页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 从大蒜鳞茎中克隆蒜氨酸酶基因,构建蒜氨酸酶真核表达载体,并在毕赤酵母系统中表达,进一步探讨重组蒜氨酸酶的生物学活性.方法 利用RT-PCR方法克隆大蒜鳞茎蒜氨酸酶基因,通过pPIczaC载体构建pPIczaC-蒜氨酸酶真核表达质粒,电...

            【关键词】 蒜氨酸酶克隆毕赤酵母

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            【中文期刊】 庞鑫  马春林  等 《中国生物化学与分子生物学报》 2011年27卷11期 1067-1072页MEDLINEISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 本文对小鼠肝脏microRNA进行分离制备及相关性功能研究.采用poly(A)加尾方法,分离提取小鼠肝脏中的microRNA;利用T4 RNA连接酶,在microRNA两端加上连接引物,通过RT-PCR制备microRNA的cDNA文库;经...

            【关键词】 微小RNA小鼠肝脏poly(A)加尾法

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            【中文期刊】 李毅  郭学军  等 《吉林大学学报(医学版)》 2011年37卷2期 370-374页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:对大肠杆菌表达的放线共生放线杆菌菌毛重组蛋白LTB-FAP进行提取和纯化,为其用于牙周病的治疗提供理论依据.方法:将重组质粒pET28a/LTB和pET28a/LTB-FAP分别转化到大肠杆菌中进行表达,通过超声裂解法获得以包涵体形式...

            【关键词】 放线共生放线杆菌LTB-FAP提取

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            【中文期刊】 黎万顺  冯国忠  等 《昆虫知识》 2010年47卷1期 53-58页ISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 葱蝇Delia atttiqua(Meigen)具有冬滞育的特性且与黑腹果蝇Drosophila melanogaster近缘.该研究目的在于构建葱蝇冬滞育蛹的全长cDNA文库,为进一步的冬滞育专化基因筛选、克隆、和表达分析奠定基础.利用R...

            【关键词】 葱蝇冬滞育蛹全长cDNA文库

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            【中文期刊】 孙宗涛  田兵  等 《生物工程学报》 2010年26卷10期 1451-1455页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 为了鉴定耐辐射奇球菌类胡萝卜素C3',4'-脱氢酶(DR2250)催化底物的特异性,利用PCR方法将dr2250基因的克隆到载体pUC19上,形成了重组载体pUC-CRTD.利用质粒共转化方法将不同组合的质粒pACCRT-EBIEu、pRK...

            【关键词】 耐辐射奇球菌类胡萝卜素C3',4'-脱氢酶

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            【中文期刊】 陈章宝  向少能  等 《微生物学通报》 2010年37卷1期 147-154页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 鸡肠道微生物菌群经PCR-DGGE分析,回收PCR-DGGE分析胶上的一条DNA片段,回收的DNA片段再重复进行2次PCR-DGGE分析,以及分别用PCR反复循环扩增和PCR高保真酶扩增后再进行DGGE分析等方法研究PCR-DGGE分析中多...

            【关键词】 PCR-DGGE技术多条带原因分析

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            【中文期刊】 王新新  张颖  等 《微生物学通报》 2009年36卷4期 563-568页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 采用水-硅油双相系统,从辽河流域浑河沈阳段底泥中筛选得到一株三氯乙烯降解菌FT17.综合形态特征、生理生化特征、16S rRNA Blast分析和系统发育分析结果,将该菌株鉴定为Sporosarcina ginsengisoli.菌株FT1...

            【关键词】 三氯乙烯生物降解筛选

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            【中文期刊】 陆蕴松  高忠礼  等 《吉林大学学报(医学版)》 2009年35卷2期 318-321页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:构建重组人HIF-Ia真核表达质粒,为进行人HIF-1α基因的克隆与表达做准备.方法:从人外周血细胞中提取总RNA,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法反转录合成cDNA.分别以含有绿色荧光蛋白(EGFP)片段的质粒PIREGFP质粒...

            【关键词】 缺氧诱导因子1载体质粒

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            【中文期刊】 姜秋  倪雪岩  等 《吉林大学学报(医学版)》 2008年34卷6期 990-993页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:建立表达白血病抑制因子(LIF)的胚胎成纤维细胞的方法体系,为建立转基因动物模型提供理论依据.方法:以13.5 d ICR小鼠胚胎为材料,采用胰酶消化方法,培养小鼠原代胚胎成纤维细胞.利用脂质体介导方法,将线性化的pcDNA3.1-L...

            【关键词】 白血病抑制因子成纤维细胞转染

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            【中文期刊】 章广玲  李宏杰  等 《肿瘤防治研究》 2012年39卷8期 931-935页ISTICCA

            【摘要】 目的 利用双荧光蛋白报告基因分析系统,验证miR-663的直接靶基因TGFB1,探讨miR-663促进肺癌细胞A549增殖的可能机制.方法 实时定量RT-PCR检测10对肺癌组织和正常肺组织中miR-663的表达水平;利用细胞计数和集落形...

            【关键词】 肺癌A549miR-663

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