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【中文期刊】 宋英 董明敏 等 《郑州大学学报(医学版)》 2010年6期 972-977页ISTICPKUCA
【摘要】 目的：构建同时表达VEGF、c-myc、survivin和hTERT基因的shRNA真核表达质粒,研究其对人鼻咽癌细胞系CNE-2Z的干扰作用。方法：根据VEGF、c-myc、survivin和hTERT基因序列,各设计2条寡核苷酸序列,合...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 王晓闻 蔡宏 等 《中国人兽共患病学报》 2006年22卷11期 1031-1034页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 对结核分枝杆菌的一种分泌蛋白MPT51的基因进行克隆,表达,纯化与鉴定,为核酸疫苗的研制与应用打下基础.方法 以结核杆菌H37Rv株基因组DNA为模板,用PCR法对编码MPT51蛋白的抗原基因进行扩增,产物克隆到表达载体pET22b中...
- 概要：
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【中文期刊】 葛以跃 崔仑标 等 《医学分子生物学杂志》 2008年5卷4期 319-322页ISTICCA
【摘要】 目的 构建志贺毒素1-A亚单位(Stxl-A)原核表达质粒,使其在大肠埃希菌中表达,对表达的重组蛋白进行纯化,并探讨其抗原性及应用价值.方法 以大肠埃希菌0157 DNA为模板扩增Stxl-A基因,重组克隆入原核表达载体pET32a(+),...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 李钰婷 王衡平 等 《中国兽医杂志》 2025年61卷9期 63-70页
【摘要】 为制备猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)核衣壳(N)蛋白的单克隆抗体.本试验构建和鉴定重组表达质粒pET28a(+)-sumo-N,以原核表达并纯化的N蛋白免疫BALB/c小鼠,应用单B细胞筛选技术获得分泌针对N蛋白的特异性抗体的单B细胞...
【关键词】 猪繁殖与呼吸综合征(PRRSV)；N蛋白；单克隆抗体；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 张瑜 孙美琪 等 《宁夏医科大学学报》 2024年46卷4期 353-359页ISTIC
【摘要】 目的 应用生物信息学方法分析线粒体呼吸链复合体Ⅰ结构亚基烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶(泛素)铁硫蛋白6(NDUFS6)的理化性质,构建pCV702-NDUFS6过表达质粒并进行鉴定,为进一步研究NDUFS6蛋白功能奠定基础.方法 利用Expa...
【关键词】 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶(泛素)铁硫蛋白6；生物信息学分析；心肌细胞；
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【中文期刊】 卢晓晴 李蕊 等 《广东医科大学学报》 2024年42卷2期 152-156页
【摘要】 目的 构建pLKO.1-ZNF703 shRNA质粒靶向敲低ZNF703.方法 根据人和鼠ZNF703基因序列中的外显子区在RNA干扰平台上(broadinstitute.org)设计shRNA的靶向序列,并根据pLKO.1中Age I和E...
- 概要：
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【中文期刊】 施鹏 林晓晨 等 《生物学杂志》 2023年40卷6期 7-11页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 人诺如病毒(norovirus,NoV)在体外难以培养,不宜采用经典疫苗的方式进行疫苗研发,以腺病毒为载体的重组腺病毒疫苗为诺如病毒疫苗的研发提供另一种路线选择.构建表达人GⅡ.4型诺如病毒VP1蛋白的重组腺病毒为该技术路线的疫苗研发奠定基...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 方梓鹏 卢晓晴 等 《广东药科大学学报》 2023年39卷1期 115-121页ISTICCA
【摘要】 目的 构建plenti-Crispr V2 ZNF703 sgRNA质粒.方法 根据人和鼠ZNF703基因序列中的外显子区设计sgRNA的靶向序列,并在靶序列的两端加上plenti-Crispr V2质粒构建所要求的黏性末端,得到并合成ZN...
【关键词】 ZNF703；plenti-Crispr V2质粒；肿瘤；
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【中文期刊】 黄凯 王豪 等 《动物医学进展》 2023年44卷1期 1-7页
【摘要】 A型塞内卡病毒(SVA)是近年来新流行的一种传染性病原,与口蹄疫病毒(FMDV)具有相似的基因组结构,所致临床症状也十分相似.为了研发一种新型的基因工程活载体疫苗,用于预防塞内卡病毒感染和口蹄疫,以SVA全长感染性克隆pSVA-GX01为基...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 丁国伟 李甜甜 等 《国外畜牧学（猪与禽）》 2023年43卷1期 52-57页
【摘要】 为构建一种能够用于开发猪细小病毒病毒样颗粒疫苗的猪细小病毒VP2蛋白的重组杆状病毒.根据GeneBank数据库中的猪细小病毒全基因组序列设计并合成了1对能扩增VP2基因的引物,采用PCR扩增猪细小病毒BJ-2株的VP2基因,并将其克隆到杆状...
- 概要：
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【中文期刊】 石龙 胡璇 等 《贵州畜牧兽医》 2023年47卷6期 51-54页
【摘要】 为了构建猪源APOBEC3F-N端结构域真核载体,探究APOBEC3F与猪繁殖与呼吸综合征(PRRSV)作用的功能区域,以猪源APOBEC3F-N端结构域为研究对象,根据APOBEC3F蛋白二级结构预测结果设计APOBEC3F-N端结构域引...
【关键词】 APOBEC3F-N端；结构域；真核表达；
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【中文期刊】 王秋实 孙岳 等 《宁夏医科大学学报》 2022年44卷4期 332-336,342页ISTIC
【摘要】 目的 构建稳定表达肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)基因重组腺相关病毒过表达质粒载体,制备并纯化HGF过表达的高滴度重组腺相关病毒.方法 合成HGF基因并利用PCR扩增,退火形成双链,与pAAV-IT...
- 概要：
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【中文期刊】 郝南 农德勇 等 《西部医学》 2022年34卷8期 1115-1120页ISTIC
【摘要】 目的 构建人前列腺癌细胞PFK FB4基因短发夹RNA(shRNA)干扰慢病毒载体,建立稳定干扰的人前列腺癌细胞株.方法 通过GenBank检索人PFK FB4基因序列,根据shRNA引物设计原则,设计并合成PFK FB4-shRNA序列,...
- 概要：
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【中文期刊】 邵淑玉 李佳 等 《中国畜牧兽医》 2022年49卷10期 3756-3763页
【摘要】 [目的]构建猪神经介素B受体(NMBR)基因慢病毒过表达载体,并检测其在猪Leydig细胞中的表达,为研究NMBR基因过表达在猪睾丸间质(Leydig)细胞中的功能提供参考.[方法]根据猪NMBR基因(GenBank登录号:KM058699...
【关键词】 神经介素B受体(NMBR)；慢病毒；过表达；
- 概要：
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【中文期刊】 战映璇 王环 等 《精准医学杂志》 2022年37卷4期 342-346页
【摘要】 目的 利用巴斯德毕赤酵母获得具有可溶性、免疫原性的重组PD-L1蛋白.方法 根据巴斯德毕赤酵母表达系统的密码子使用偏好,优化人PD-L1基因序列,将优化后的序列构建至质粒pPIC9K,合成重组质粒pPIC9K-PDL1.使用SacⅠ-HF将...
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【中文期刊】 林小枫 刘梅雪 等 《中国兽医杂志》 2022年58卷5期 16-21,28页
【摘要】 本试验旨在获得临床上逐渐增多的猪圆环病毒2d基因型毒株(PCV2d),并对其引入生物素标记.首先从陕西咸阳某临床发病猪场采集了 2头发病仔猪和15头未发病仔猪的组织样本,对其进行猪圆环病毒2型(PCV2)检测,并对阳性样本进行测序及序列比对...
【关键词】 猪圆环病毒2型；原核生物素连接酶-生物素受体肽系统；基因型；
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【中文期刊】 刘金宜 富炜琦 等 《中国药理学通报》 2019年35卷5期 733-739页ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 目的 构建ST8Sia1基因过表达载体,建立稳定过表达ST8Sia1的细胞株,检测ST8Sia1的表达及对细胞增殖的影响.方法 通过PCR反应扩增ST8Sia1基因片段,双酶切目的基因片段和pEGFP-C1载体以及pHBLV-CMV-MCS...
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【中文期刊】 牛夏忆 李淼 等 《中国免疫学杂志》 2019年35卷16期 1992-1998页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:原核表达和分离纯化人β-catenin(138-781 aa)蛋白并制备特异性大鼠抗人β-catenin多克隆抗体.方法:利用PCR扩增β-catenin基因片段并克隆至pET-30a(+)表达载体构建重组质粒.将重组质粒转化到大肠杆...
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【中文期刊】 田瑞阳 黄玉辉 等 《动物学报》 2004年50卷3期 401-407页SCIMEDLINEISTICCSCDBP
【摘要】 从人肝脏和肾脏cDNA文库中扩增了人IgG1 Fc与B淋巴细胞刺激因子(BLyS)的受体TACI及BCMA的胞外编码区,构建了TACI-Fc及BCMA-Fc融合表达质粒pSec1-Fc-TACI与pSec1-Fc-BCMA,并使用电穿孔法转...
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【中文期刊】 薛士鹏 吴建勇 等 《中国人兽共患病学报》 2017年33卷8期 744-747,752页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 构建结核分枝杆菌rBCG-Rv2029c重组疫苗并鉴定.方法 通过PCR扩增Rv2029c抗原编码基因,然后用双酶切法将Rv2029c和pMV261质粒酶切,再将酶切产物连接成rpMV261-2029c重组质粒,用电穿孔法将该质粒导入...
- 概要：
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【中文期刊】 柯友群 程里 等 《安徽医科大学学报》 2017年52卷6期 791-796页ISTICPKUCA
【摘要】 目的 构建热激启动子(pHSP)驱动的靶向敲低Polo样蛋白激酶1(PLK1)的真核表达质粒,并观察其对骨肉瘤U2OS细胞增殖的影响.方法 首先合成热休克蛋白HSP70的启动子,克隆至带有绿色荧光蛋白(GFP)标签的真核表达质粒pEGFP-...
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【中文期刊】 李子希 卢颖洁 等 《华中科技大学学报（医学版）》 2017年46卷4期 369-373页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 构建神经元特异性人apoE4(1-272)片段的真核表达质粒,并转染小鼠神经母细胞瘤细胞(N2a细胞)验证其表达,为后续利用该质粒构建转基因小鼠,并探讨其作用奠定实验基础.方法 以同济医学院生物化学与分子生物学系实验室已有的人apoE...
【关键词】 apoE4(1-272)；神经元特异性表达；Gateway技术；
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【中文期刊】 郑传宜 陈政纲 等 《中南大学学报（医学版）》 2016年41卷5期 455-462页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:筛选出人GLUT3基因有效的RNA干扰(RNA interference,RNAi)序列,并构建出慢病毒RNAi载体.方法:根据GLUT3基因mRNA序列设计合成siRNA片段4个,分别定向克隆至pLV-shRNA载体上,并将构建的质...
- 概要：
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【中文期刊】 张军峰 史利利 等 《西安交通大学学报（医学版）》 2016年2期 190-194页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的：构建与鉴定含有5个拷贝缺氧反应元件(five copies of hypoxia responsive elements,5 HRE)的缺氧调控表达的神经营养因子-3(neurotrophin-3,NT-3)的逆转录病毒载体。方法用 ...
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- 方法：
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【中文期刊】 刘勇 安艳芳 等 《中国感染控制杂志》 2016年15卷6期 361-366页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的：评估细胞穿透肽 CCL 融合蛋白构建的可能性。方法将 CCL6-PEP-6XHis 构建至 pABP 质粒，然后提取 pABP-CCL6-PEP 质粒进行人胚肾 HEK293细胞转染表达，以及 CCL6-PEP-6XHis 蛋白层析纯...
- 概要：
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【中文期刊】 彭亮 潘嘉韵 等 《中华医院感染学杂志》 2015年5期 961-964页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的：构建奇异变形菌（PMI）聚磷酸盐激酶1（polyphosphate kinase 1，PPK1）基因缺失株，为研究 ppk1基因在PM I致尿路感染中的作用及其机制奠定基础。方法通过融合PCR将目的基因上游及下游同源臂连接成一个片段，...
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【中文期刊】 王婵 王新敏 等 《西安交通大学学报（医学版）》 2015年4期 558-564页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的：研究髓样细胞白血病-1(myeloid cell leukemia-1,Mcl-1)基因在小鼠巨噬细胞 Raw264.7和人巨噬细胞THP-1中的表达情况,筛选出表达含量高的细胞株作为实验用细胞,根据筛选的结果构建靶向小鼠 Mcl-1...
【关键词】 髓细胞白血病-1 基因；Raw264.7 细胞；THP-1 细胞；
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- 结论：
【中文期刊】 阎秀林 陈钰文 等 《中国医科大学学报》 2015年3期 226-229,233页ISTICPKUCABP
【摘要】 目的：构建小鼠Sema3A基因过表达慢病毒载体。方法通过体外合成小鼠全长Sema3A cDNA，采用Gateway技术将其基因插入到pDown?mSema3A?IRES/EGFP质粒中，再交换重组获得重组质粒pLV/EXPNZ?puro?m...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 陈镭 李成朋 等 《中国人兽共患病学报》 2015年31卷6期 519-521,526页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 构建弓形虫核苷三磷酸水解酶-Ⅱ (NTPase-Ⅱ)基因真核表达质粒pcDNA3.1(+)-NTPase-Ⅱ并在COS-7细胞中进行瞬时表达.方法 以pBAD-HisB-NTPase-Ⅱ质粒为模板,PCR扩增NTPase-Ⅱ目的基因,...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 刘蕾 肖伟 《中国医科大学学报》 2015年3期 217-220页ISTICPKUCABP
【摘要】 目的：构建Notch1基因胞内活化部分真核表达载体p3XFLAG?CMV7?NICD1，为进一步研究和解析Notch1基因在促进人晶状体上皮细胞间质化过程的作用做准备。方法从SRA01/04细胞中提取总RNA，RT?PCR法反转录合成cDN...
【关键词】 Notch1信号通路；NICD1；上皮间质转化；
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