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            【中文期刊】 孟姝  《生物化学与生物物理进展》 2011年38卷11期 995-1000页SCIISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 大鼠胚胎干细胞(ES)的成功建立使大鼠的遗传学操作成为可能,运用同源重组原理改造ES细胞的基因,为建立时空特异性的基因敲除大鼠模型提供了基础.本文主要回顾了大鼠ES细胞的建立过程,总结了大鼠ES的培养、鉴定技术,分析了各种大鼠基因敲除技术的...

            【关键词】 ES细胞遗传操作基因敲除

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            【中文期刊】 刘涛  王晓婕  等 《微生物学通报》 2019年46卷2期 398-406页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 冰岛硫化叶菌是古菌研究中常用的模式菌株,为人们研究古菌复制、细胞周期以及CRISPR-Cas系统等作出了巨大贡献.冰岛硫化叶菌遗传操作体系的建立与完善对古菌学的全面深入研究起至关重要的作用.本文介绍了冰岛硫化叶菌遗传操作体系所使用的质粒载体...

            【关键词】 冰岛硫化叶菌遗传操作基因敲除

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            【中文期刊】 田雨顺  罗鹏  等 《微生物学通报》 2017年44卷2期 473-482页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 利用重组酶和辅助蛋白共同作用于DNA片段上,使不同基因重新组合以完成基因重组的现象在细菌中广泛存在,基因重组对于细菌的遗传多样性、进化等具有重要意义.目前,细菌基因重组主要分为同源重组、位点特异性重组和转座重组3种类型.本文主要对细菌重组系...

            【关键词】 细菌重组重组酶

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            【中文期刊】 高煜  刘家辉  等 《生物工程学报》 2017年33卷10期 1674-1692页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 斑马鱼已经成为在发育生物学与疾病模型研究中应用最广泛的实验动物之一,其中多种遗传操作方法和高分辨率活体成像技术对斑马鱼的应用起了重要推动作用.斑马鱼在功能基因组学研究上有许多优势,如可以快速便捷地鉴定脊椎动物新基因的功能.本文尝试以示意图来...

            【关键词】 斑马鱼遗传操作突变

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            【中文期刊】 曾斯雨  施天穹  等 《中国生物工程杂志》 2016年36卷7期 112-116页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 高山被孢霉是一种重要的产油丝状真菌,其油脂积累量高达细胞干重的50%,其中具有重要生理活性的多不饱和脂肪酸含量较高且种类丰富.近年来,针对高山被孢霉遗传操作系统建立的分子生物学研究进展迅速,这为进一步提高其多不饱和脂肪酸合成水平奠定了基础....

            【关键词】 高山被孢霉遗传操作系统筛选标记

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            【中文期刊】 张晓立  郑小梅  等 《生物技术通报》 2015年3期 171-177页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 黑曲霉是柠檬酸工业化生产的主要发酵菌株。尽管现代遗传操作技术在黑曲霉的实验室菌株、蛋白质生产菌株等的应用中获得了成功,但是柠檬酸工业菌株遗传转化异常困难,成为柠檬酸工业持续升级的重要限制因素。以柠檬酸工业生产实际应用的黑曲霉菌株为研究对象,...

            【关键词】 黑曲霉柠檬酸遗传操作系统

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            【中文期刊】 朱旭军  李一凡  等 《微生物学通报》 2015年42卷12期 2440-2447页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 枯草芽孢杆菌是革兰氏阳性菌的模式生物,长期以来在代谢工程和工业微生物领域扮演重要角色.枯草芽孢杆菌无标记遗传操作技术对后基因组时代的基因功能研究和菌株生理特性的改造起着关键作用.综述枯草芽孢杆菌无标记遗传操作所使用的负筛选标记基因,总结目前...

            【关键词】 枯草芽孢杆菌无标记遗传操作负筛选标记

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            【中文期刊】 李雪  于志君  等 《病毒学报》 2015年31卷4期 404-409页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 本研究利用基因工程技术探索B型流感病毒NS1蛋白羧基端缺失对病毒致病性的影响,并利用反向遗传学技术从体外拯救NS1蛋白羧基端缺失的B型流感病毒,评估去除NS1蛋白羧基端对B型流感病毒致病性的影响,探究B型流感病毒致病性变异的分子基础.通过全...

            【关键词】 B型流感病毒反向遗传操作致病性

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            【中文期刊】 顾阳  杨晟  等 《生物工程学报》 2013年29卷8期 1133-1145页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 产溶剂梭菌是一类重要的工业微生物.通过遗传改造以优化产溶剂梭菌的发酵性能一直是溶剂制造技术研究的重要课题,但长期受限于该类菌并不完善的遗传操作工具,未见明显突破.近年来,随着TargeTron基因中断、大片段基因整合等新技术和新方法的出现,...

            【关键词】 产溶剂梭菌分子遗传操作遗传改造

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            【中文期刊】 杨聪慧  韩辉林  等 《昆虫学报》 2012年55卷9期 1082-1092页ISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 为了探讨DNA条形码技术在夜蛾物种鉴定中的可行性,本研究利用条形码通用引物扩增了北京百花山地区43种夜蛾75个样本的线粒体细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ(mitochondrial cytochrome c oxidase subunit Ⅰ,CO...

            【关键词】 鳞翅目夜蛾分子分类

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            【中文期刊】 丛蕾蕾  彭超  等 《生物工程学报》 2010年26卷9期 1232-1238页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 花生四烯酸作为一种重要的多价不饱和脂肪酸,因其具有多种生理功能而被认为是潜在的食品添加剂和药物. 近年来,利用高山被孢霉合成花生四烯酸已成为研究热点.前期相关研究主要集中在菌种选育及发酵调控方面.随着 研究的不断深入,关于高山被孢霉合成花生...

            【关键词】 花生四烯酸高山被孢霉关键酶

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            【中文期刊】 郭艳梅  郑平  等 《生物工程学报》 2010年26卷10期 1410-1418页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 黑曲霉是一种重要工业微生物,在酶制剂、异源蛋白、有机酸等领域应用广泛.2007年黑曲霉基因组的公布将黑曲霉的研究引入后基因组时代,各种组学数据如雨后春笋般涌现,人们对黑曲霉高效生产机制的理解上升到系统、分子层次;与此同时,黑曲霉遗传操作系统...

            【关键词】 黑曲霉细胞工厂系统生物学

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            【中文期刊】 董红军  张延平  等 《生物工程学报》 2010年26卷10期 1372-1378页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 丙酮丁醇梭菌是极具潜力的替代燃料--生物丁醇的合成茵,受到各国研究者的普遍关注.丙酮丁醇梭菌菌株改造是生物丁醇产业化进程中的一项重要工作,其中遗传操作是核心内容之一.以下对丙酮丁醇梭菌的遗传操作系统的发展历史、种类和原理进行了综述,分析了目...

            【关键词】 丙酮丁醇梭菌丁醇菌株改造

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            【中文期刊】 王飞雁  张松涛  等 《微生物学报》 2009年49卷11期 1418-1423页ISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 遗传操作系统,是研究基因和基因产物功能的一个极为重要的工具.超嗜热古菌遗传操作系统方面的研究落后于甲烷菌及嗜盐古菌中的研究,主要原因是选择标记的缺乏.然而,近十年来,在以硫化叶菌(Sulfolobus)为代表的超嗜热泉古菌和Thermoco...

            【关键词】 超嗜热古菌遗传操作系统Sulfolobus

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            【中文期刊】 周媛  贾润清  等 《中华实验和临床病毒学杂志》 2010年24卷1期 62-64页MEDLINEISTICCSCDCA

            【摘要】 目的 构建新城疫病毒LaSota株NP、P基因的真核表达载体,为研究NP、P蛋白机理及反向遗传操作系统奠定基础.方法 利用RT-PCR法扩增出新城疫病毒LaSota株的NP、P基因,并将其克隆到pGEM-T easy载体中,并再次亚克隆到真...

            【关键词】 新城疫病毒病毒蛋白质类反向遗传操作系统

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            【中文期刊】 吴果果  宋淑婷  等 《中国生物工程杂志》 2019年39卷11期 78-86页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 为进一步简化放线菌的遗传操作流程,缩短重组菌株的筛选周期,在对杀真菌链霉菌(Streptomyces fungicidicus ATCC 21013)进行遗传操作的过程中引入了一个反向筛选标记基因——尿嘧啶磷酸核糖转移酶基因(upp).并通...

            【关键词】 杀真菌链霉菌反向筛选标记尿嘧啶磷酸核糖转移酶

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            【中文期刊】 张晓婷  张妍  等 《生物工程学报》 2019年35卷3期 472-481页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 异戊酰螺旋霉素(Isovalerylspiramycin,ISP)Ⅰ是必特螺旋霉素(Bitespiramycin,BT)的一种主组分,其抗菌活性与BT相似,而且作为单一组分在质控和剂型上更具优势,目前正在进行临床前研究.原有的ISP Ⅰ工程...

            【关键词】 异戊酰螺旋霉素Ⅰ酰基转移酶基因CRISPR-Cas9系统

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            【中文期刊】 乔龙亮  庞建虎  等 《生物技术通报》 2018年34卷5期 32-40页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 链霉菌(Streptomyces)以产生多种抗生素而著称,长期以来都是生命科学与医学、药学及工业领域的研究热点.然而,链霉菌的遗传操作十分困难,传统的基因编辑手段因效率低、实验周期长及操作步骤繁琐等原因正逐渐被素有"魔剪"之称的CRISPR...

            【关键词】 CRISPR/Cas9基因组编辑特异性

            OA
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            【中文期刊】 王跃强  Avinash Bhandoola  《生物技术通报》 2018年34卷5期 64-70页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 小鼠(Mus musculus)免疫系统包含种类众多、功能各异的细胞群体.为了研究小鼠免疫系统的发育机制,需要建立高效的遗传操作技术方法.首先选择Cas9敲入小鼠的DN细胞(CD4-CD8-double negative thymocyte...

            【关键词】 小鼠免疫干细胞

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            【中文期刊】 李红  谢卡斌  《生物工程学报》 2017年33卷10期 1700-1711页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 在过去的4年中,CRISPR/Cas9基因组编辑技术成为生命科学领域的革命性工具,为植物学基础研究和农作物遗传改良提供了高效、快速而又廉价的遗传操作工具.利用CRISPR/Cas9系统可以实现精准的knock-out和knock-in等遗传...

            【关键词】 CRISPR/Cas9农作物靶向基因

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            【中文期刊】 陈奇  秦湘静  等 《微生物学报》 2017年57卷7期 1095-1105页ISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 [目的]定位Marinactinospora thermotolerans SCSIO 00652基因组中负责marinacarbolines甲基化修饰的基因mcbD并鉴定其功能.[方法]游离M.thermotolerans SCSIO 0...

            【关键词】 marinacarboline甲基化生物合成

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            【中文期刊】 付益修  孔庆明  等 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 2017年35卷3期 299-304页MEDLINEISTICPKUCSCD

            【摘要】 CRISPR/Cas9是一种有效的基因组靶向修饰系统,能够实现对基因组特定位点的基因敲除、定点插入和基因修复等遗传操作,为寄生虫的基因功能分析、药物靶点和疫苗分子筛选等研究提供了技术创新平台.本文对CRISPR/Cas9系统的原理及其在刚地...

            【关键词】 CRISPR/Cas9系统基因编辑寄生虫

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            【中文期刊】 章美琴  孙兵兵  等 《微生物学通报》 2017年44卷10期 2463-2469页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 鲍曼不动杆菌作为一种医院内感染的病原菌,因其易于引起各类感染且耐药性强而受到广泛关注.快速改造鲍曼不动杆菌基因组的工具可有效促进其耐药机制的研究.本文就近些年来适用于鲍曼不动杆菌的遗传操作方法进行了总结,包括各种外源基因转入方法(电转化、自...

            【关键词】 鲍曼不动杆菌基因改造DNA重组工程

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            【中文期刊】 林艳梅  李瑞杰  等 《生物技术通报》 2016年32卷9期 225-231页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 旨在优化深绿木霉(Trichoderma atroviride)菌株 HP35-3原生质体制备和转化条件,便于对该菌株进行遗传操作以提高其纤维素酶产量。分别对制备深绿木霉原生质体的菌龄、酶解时间、酶组分及比例和转化条件进行优化。结果显示,利...

            【关键词】 深绿木霉丝状真菌原生质体制备

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            【中文期刊】 杨毅  李治  等 《中国生物工程杂志》 2012年32卷8期 100-106页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)是一种重要的植物根际促生菌,它能够产生藤黄绿脓菌素、2,4-二乙酰基藤黄酚、硝吡咯菌素、吩嗪-1-羧酸等抗生性次级代谢产物,可抑制多种病原物,在农作物土传病害的生物防治研究中具有...

            【关键词】 荧光假单胞菌植物根际促生菌抗生性次级代谢产物

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            【中文期刊】 汪章勋  赵静  等 《中国热带医学》 2012年12卷2期 171-173页ISTICPKUCA

            【摘要】 目的 建立日本血吸虫机械断尾尾蚴制备的童虫的体外培养,并用于相关的遗传操作.方法 采用常规1 640培养基和添加激素等成分,建立日本血吸虫机械童虫的体外培养,并采用电穿孔技术将外源的小RNA分子导入到日本血吸虫机械童虫.结果 成功体外连续培...

            【关键词】 日本血吸虫机械童虫体外培养

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            【中文期刊】 刘颖  王莹  等 《生物工程学报》 2011年27卷2期 147-155页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 多胺是一类小分子生物活性物质,广泛存在于生物体内,与植物的生长发育、衰老及抗逆性都有着密切的联系.目前,在植物中的多胺合成途径已经基本揭示,其生理作用在分子水平上逐步得到阐明.对多胺合成突变体和各种转基因植物的研究也使得人们更深入地了解了多...

            【关键词】 多胺代谢途径生物合成途径

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            【中文期刊】 姜天翼  李理想  等 《生物工程学报》 2010年26卷10期 1419-1425页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 微生物代谢工程和合成生物学是当今微生物技术领域研究的热点,微生物的生长速度快、容易进行大规模培养;遗传背景清楚、遗传操作简便可靠等性质使其在与人类生活相关的多个领域中起到重要的作用.微生物细胞工厂是指人工设计的能够进行物质生产的微生物代谢体...

            【关键词】 微生物细胞工厂代谢工程多基因表达

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            【中文期刊】 张胜珍  客绍英  等 《中药材》 2009年32卷5期 664-666页MEDLINEISTICPKUCA

            【摘要】 目的:探讨菘蓝原生质体分离的最佳条件.方法:用纤维素酶和离析酶的混合酶液提取菘蓝无菌苗幼叶原生质体,对影响原生质体提取得率及活力的因素进行分析.结果:适宜菘蓝叶片原生质体游离的条件为:CPW+0.5%PVP+3 mmol/L MES+1.0...

            【关键词】 菘蓝原生质体分离

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            【中文期刊】 范青锋  丁洁  《中华肾脏病杂志》 2007年23卷8期 549-551页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 <篇首> 斑马鱼(zebrafish)为小型热带鱼类,具有世代周期短(2~3 个月)、产卵量大、形体较小(成体仅长3~4 cm)的特点,尤其是卵子体外受精,胚胎发育速度快,仅需2.5 d就可发育为幼鱼.此外,斑马鱼的精子还可通过冷冻来保存,而且...

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