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            【中文期刊】 于平  任倩  等 《菌物学报》 2018年37卷11期 1489-1497页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 探讨重组巴斯德毕赤酵母发酵生产内切几丁质酶的最适培养条件,以期获得最佳的内切几丁质酶活力.以内切几丁质酶活力为指标,通过部分因子试验设计以及响应面法优化确定重组巴斯德毕赤酵母高产内切几丁质酶的最适培养条件.部分因子试验设计筛选的影响重组巴斯...

            【关键词】 内切几丁质酶重组巴斯毕赤酵母培养条件优化

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            【中文期刊】 谷洋  连佳长  等 《微生物学通报》 2020年47卷2期 606-614页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 巴斯德毕赤酵母是一种重要的蛋白表达系统,基因编辑技术作为代谢工程的基本工具,对于毕赤酵母的代谢改造十分重要.近十年基因编辑技术发展迅速,除传统的同源重组和Cre/loxP重组外,相继出现了许多新的基因编辑技术,例如ZFN、TALEN和CRI...

            【关键词】 巴斯德毕赤酵母基因编辑同源重组

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            【中文期刊】 于平  顾董璐  等 《菌物学报》 2020年39卷7期 1410-1420页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 采用响应面法在摇瓶水平对重组巴斯德毕赤酵母合成内切几丁质酶的培养基组分进行优化,并探讨重组内切几丁质酶降解几丁质的最佳反应条件.首先对培养基中显著影响内切几丁质酶活力的关键组分通过Plackett-Burman试验设计进行筛选;然后通过Bo...

            【关键词】 重组巴斯毕赤酵母内切几丁质酶培养基组分

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            【中文期刊】 战春君  李翔  等 《中国生物工程杂志》 2017年37卷7期 48-55页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:分离确认巴斯德毕赤酵母中甘油转运体并初步研究其功能.方法:通过生物信息学方法从NCBI数据库中查找可能的甘油转运体(gt1,GeneID:8197545),并通过DAS软件对其跨膜结构域进行预测.通过PCR方法扩增该基因并将其与EGF...

            【关键词】 巴斯德毕赤酵母甘油转运体甘油阻遏

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            【中文期刊】 韩彦锋  冷希岗  《国际生物医学工程杂志》 2007年30卷1期 Ⅳ-Ⅶ页ISTICCA

            【摘要】 巴斯德毕赤酵母表达系统是一种优秀的重组蛋白表达系统,近年来被广泛应用于重组蛋白的表达.本文介绍了巴斯德毕赤酵母表达系统的特点及其用于外源蛋白表达的基本策略.随后重点讨论了发酵过程中影响外源蛋白表达的主要环境因素、影响机制及控制策略,这些影响...

            【关键词】 巴斯德毕赤酵母表达系统重组蛋白糖基化

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            【学位论文】 作者:董鲁 导师:谢琪璇   暨南大学   生物学 发育生物学(硕士) 2003年

            【摘要】 为了在巴斯德毕赤酵母中表达人巨细胞病毒gp52C末端和pp150C末端串联片段的嵌合肽,将构建好的hCMVp-pPIC9K重组质粒分别经Sac Ⅰ和Bg1 Ⅱ酶切,电打孔法导入毕赤酵母GS115后,在缺组氨酸的MD板上筛选出转化子.然后根据...

            【关键词】 重组人巨细胞病毒嵌合肽巴斯德毕赤酵母

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            【学位论文】 作者:宋丽雅 导师:卜凤荣   中国人民解放军军事医学科学院   基础医学 免疫学(硕士) 2003年

            【摘要】 抗凝血酶Ⅲ(antithrombinⅢ,AT-Ⅲ)是一种抗凝血糖蛋白,对维持血凝平衡起重要作用,其缺乏易导致血栓形成.血浆中提取的AT-Ⅲ浓缩物广泛应用于临床.但是,在爱滋病、肝炎等血液传播性疾病肆虐的今天,血液制品的安全性成为人们关注的重...

            【关键词】 抗凝血酶Ⅲ巴斯德毕赤酵母

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            【中文期刊】 张群  楼觉人  《中国生物制品学杂志》 2011年24卷7期 818-823页ISTICCSCDCABP

            【摘要】 目的 制备表达轮状病毒(Rotavirus,RV)类病毒颗粒(Virus-like particle,VLP)的重组巴斯德毕赤酵母.方法 优化并合成人RV VP2、VP6、VP4(P8血清型)和VP7(G1血清型)结构基因,分别转入改造的p...

            【关键词】 轮状病毒属类病毒毕赤酵母

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            【中文期刊】 黄金金  王艳  等 《菌物学报》 2019年38卷5期 686-697页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 本研究利用巴斯德毕赤酵母Pichia pastoris蛋白表达体系表达了药用担子菌桦褐孔菌的一个二肽酶基因.该二肽酶基因编码区全长1 814bp,包含6个内含子,编码465个氨基酸.生物信息学分析发现,二肽酶基因编码的蛋白中不含信号肽序列,...

            【关键词】 桦褐孔菌二肽酶巴斯德毕赤酵母表达体系

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            【中文期刊】 王迎政  喻晓蔚  等 《微生物学报》 2018年58卷1期 91-108页ISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 [目的]基于转录组学技术研究表达磷脂酶A2的毕赤酵母重组菌在甲醇诱导表达外源蛋白时的基因表达差异,从而解析外源蛋白高效诱导表达机制,为进一步工程菌株的改造提供理论支撑.[方法]以一株产磷脂酶(PLA2)的毕赤酵母为出发菌株,采用RNA-Se...

            【关键词】 毕赤酵母转录组甲醇诱导

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            【中文期刊】 杨青  汪斌  等 《中国生物工程杂志》 2017年37卷8期 15-22页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 木聚糖酶和甘露聚糖酶是两种主要的半纤维素酶,广泛应用于诸多领域.选择了3种毕赤酵母内源信号肽Scw11、Dse4和Exg1,以α-factor为参照,分别在毕赤酵母X33中用于表达实验室前期获得的耐热木聚糖酶DSB和耐热甘露聚糖酶ManA,...

            【关键词】 信号肽巴斯德毕赤酵母木聚糖酶(DSB)

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            【中文期刊】 冯雪  高香  等 《中国生物工程杂志》 2017年37卷7期 42-47页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 αB-晶状体蛋白属于小热休克蛋白家族,具有分子伴侣活性.在阿尔茨海默病大脑中,星形胶质细胞表达的βB-晶状体蛋白明显上调,并且这些上调的αB-晶状体蛋白紧密地分布在β-淀粉样蛋白沉积周围.为了在分子水平上研究胞外αB-晶状体蛋白在阿尔茨海默...

            【关键词】 αB-晶状体蛋白基因巴斯德毕赤酵母密码子优化

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            【中文期刊】 宁秀哲  寇志华  等 《中华微生物学和免疫学杂志》 2016年36卷4期 294-299页ISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 目的:利用毕赤酵母系统表达一种基于蛇毒蛋白triflin的致病相关蛋白1( PR-1)功能区蛋白 TFPR1。方法从质粒 pUC57-TFPR1中 PCR 扩增目的基因,插入毕赤酵母表达载体pPICZαA,构建重组表达质粒pPICZαA-T...

            【关键词】 佐剂致病相关蛋白毕赤酵母系统

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            【中文期刊】 陈韵  牛纯青  等 《生物技术通报》 2016年32卷9期 246-252页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 吸血蝙蝠唾液纤溶酶原激活剂(Desmodus salivary plasminogen activators,DSPAs)共有4种:DSPAα1、α2、β及γ。其中, DSPAα含有指形区(F)、表皮生长因子区(E)、kringle 区(K...

            【关键词】 DSPAα1SOE-PCR缺失突变体

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            【中文期刊】 金城  《微生物学通报》 2012年39卷6期 872页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 突变库容量和高通量筛选方法是影响酶分子定向进化的两个决定因素,虽然巴斯德毕赤酵母pPIC9K表达系统已被广泛使用[1],但由于外源基因可通过单插入整合入基因组,产生多拷贝突变基因,从而干扰后续重组子的筛选;另一方面,pPIC9K表达系统需要...

            【关键词】 脂肪酶高通量筛选

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            【中文期刊】 智晓燕  汪小锋  等 《中国生物工程杂志》 2012年32卷2期 82-89页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:构建高效表达白地霉脂肪酶的毕赤酵母重组菌株,并对筛选得到的菌株进行摇瓶发酵条件优化和分批补料高密度发酵工艺研究.方法:将诱导型表达载体pPIC9K-gcl电转化至毕赤酵母GS115.通过橄榄油-罗丹明B平板和摇瓶发酵筛选高脂肪酶活力的...

            【关键词】 巴斯德毕赤酵母白地霉脂肪酶基因拷贝数

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            【中文期刊】 吴蒙  刘宇鸽  等 《中国公共卫生》 2011年27卷1期 37-39页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 克隆和表达H5N1型流感病毒血凝素(HA)基因和神经氨酸酶(NA)基因,为制备抗体和亚单位疫苗打基础.方法 采用PCR技术扩增H5N1型流感病毒H5A和N1A基因,克隆人含有醇氧化酶-1(AOX1)启动子和分泌信号肽序列的巴斯德毕赤酵...

            【关键词】 流感病毒H5N1毕赤酵母

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            【中文期刊】 施碧红  陈明  等 《中国生物工程杂志》 2011年31卷11期 64-68页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 为改善扩展青霉FS1884碱性脂肪酶的活性及酶学性质,利用连续两轮易错PCR对扩展青霉FS1884脂肪酶基因PEL进行随机突变,在大肠杆菌JM109中构建突变文库.含突变脂肪酶基因的重组质粒电击转化巴斯德毕赤酵母GS115,经过YPOM板初...

            【关键词】 易错PCR脂肪酶酶活

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            【中文期刊】 杜国俊  刘晓飞  等 《中国生物工程杂志》 2010年30卷10期 86-93页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 蛇毒是许多具有独特生物活性的蛋白质与酶的混合物,在基础科学研究和临床上有重大应用价值,但是通过从蛇毒中分离获取活性组分具有局限性.巴斯德毕赤酵母表达系统是最为常用的真核表达系统之一,其真核加工、折叠、翻译后修饰等能力使得所表达的重组蛋白具有...

            【关键词】 蛇毒蛋白家族毕赤酵母表达

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            【中文期刊】 张定勇  孙蕾  等 《生物工程学报》 2010年26卷12期 1652-1659页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 为了研究猪β防御素2(PBD-2)与猪γ干扰素(PoIFNγ),采用重叠延伸PCR法合成嵌合编码序列PBD-2-PoIFNγ,在此序列的基础上扩增PoIFNγ基因,并分别克隆入毕赤酵母表达载体pPICZαA,构建重组表达质粒pPICZαA-...

            【关键词】 重叠延伸PCR猪β防御素2猪γ干扰素

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            【中文期刊】 李洋  李晖  等 《中国生物工程杂志》 2010年30卷4期 54-59页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 将萝卜磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶(RsPHGPx)基因插入到分泌表达载体pPIC9K中,转化巴斯德毕赤酵母GS115细胞,筛选具有G418抗性的单拷贝转化子.经过优化表达条件,RsPHGPx在1%甲醇、pH6.0、28℃条件下诱导60h后得到...

            【关键词】 分泌表达蛋白纯化质谱鉴定

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            【中文期刊】 李小波  王婷婷  等 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 2010年28卷5期 332-336页MEDLINEISTICPKUCSCD

            【摘要】 目的 构建家蝇抗菌肽(攻击素, attacin)成熟肽的重组表达质粒并转化巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115,诱导attacin表达.方法 PCR扩增家蝇抗菌肽attacin基因成熟肽编码区,克隆至酵母表达载体pPI...

            【关键词】 家蝇抗菌肽攻击素

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            【中文期刊】 杨湘越  吴文冰  等 《微生物学通报》 2009年36卷1期 149-153页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 通过PCR扩增SmD1基因,与酵母表达载体pPIC9k重组,构建表达质粒pPIC9k-SmD1.用电穿孔法转化酵母菌SMD1168,在MD平板上筛选重组克隆,用G418快速筛选高拷贝转化子,阳性克隆经甲醇诱导表达后,培养上清用十二烷基硫酸钠...

            【关键词】 SmD1抗原克隆表达巴斯德毕赤酵母

            OA
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            【中文期刊】 陈武  莫炜  等 《中国生物工程杂志》 2009年29卷10期 18-22页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:研究重组人纤溶酶原丝氨酸蛋白酶结构域(rhPLG-SP)的酵母表达、纯化及理化性质.方法:采用7.5 L发酵罐对巴斯德毕赤酵母(Pichic pastoris)工程菌rbPLG-SP/GS115进行高密度培养、甲醇诱导表达rhPLG-...

            【关键词】 巴斯德毕赤酵母丝氨酸蛋白酶区纤溶酶原

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            【中文期刊】 杨湘越  兰小鹏  等 《中华检验医学杂志》 2008年31卷10期 1178-1181页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 通过基因克隆在巴斯德毕赤酵母中表达人自身抗原Sm B'.方法 PCR扩增Sm B'基因,与酵母表达载体pPIC9k重组,构建表达质粒pPIC9k-Sm B'.用电穿孔法转化酵母菌Sm D1168,在MD平板上筛选重组克隆,用G418快...

            【关键词】 毕赤酵母自身抗原免疫酶技术

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            【中文期刊】 王崧  王军平  等 《第三军医大学学报》 2008年30卷21期 2037-2040页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 实现TPO模拟肽(thrombopoietin mimetic peptide,TMP)与人生长激素(human growth hormone,hGH)的重组融合蛋白rTMP-GH在巴氏毕赤酵母中的高效表达.方法 以含有rTMP-GH...

            【关键词】 rTMP-GH毕赤酵母表达

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            【中文期刊】 王玉  朱艳平  等 《中国生物制品学杂志》 2011年24卷9期 1064-1067页ISTICCSCDCABP

            【摘要】 目的 修饰犬干扰素α1(Canine interferon alpha1,CaIFNα1)基因,提高其在毕赤酵母中的表达水平及抗病毒活性.方法 根据巴斯德毕赤酵母表达系统对密码子的偏爱性,将CaIFNα1基因改造后,克隆至分泌表达载体pP...

            【关键词】 干扰素α基因修饰

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            【中文期刊】 陈彦球  魏明旭  等 《现代生物医学进展》 2009年9卷10期 1805-1808页ISTICCA

            【摘要】 目的:探索小鼠核迁移蛋白C(mNUDC)在毕赤酵母分泌表达的方法.方法:应用PCR扩增本实验室所构建的重组质粒PET28b-his-mNUDC中的mNUDC基因,使用基因重组方法构建毕赤酵母真核表达栽体pPICZaA-his-mNUDC,电...

            【关键词】 mNUDC毕赤酵母分泌表达

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            【中文期刊】 董永红  吕云福  等 《中华实验外科杂志》 2009年26卷4期 530页ISTICCA

            【摘要】 <篇首> 肝细胞生长因子(HGF)具有促进肝细胞再生、抑制肝纤维化及肝细胞凋亡、溶解硬变肝脏纤维组织、减轻肝损害等功能[1].其活性结构为α链与β链通过二硫键连接而形成的异二聚体.

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            【会议论文】张丽红 吉林省第六届科学技术学术年会 2010年

            【摘要】 本文在本实验室成功获得表达凝乳酶的重组巴斯德毕赤酵母G4-3-35的基础上,对其表达外源蛋白的发酵条件进行了优化.实验研究表明,重组菌发酵产酶的最佳条件为:每隔12h补加一次终浓度为1.0%的甲醇、诱导时间为96h;重组菌的最佳初始诱导菌浓...

            【关键词】 微小毛霉

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