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【中文期刊】 陈玮 鲍朗 等 《华西医科大学学报》 2002年33卷1期 35-39页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的构建分泌性表达结核分枝杆菌抗原蛋白ESAT-6的重组卡介苗.方法分别以卡介苗(BCG)和结核分枝杆菌H37Rv株基因组DNA为模板,通过PCR扩增得到约117bp的BC Gα抗原(α-Ag)信号肽序列和285bp的结核杆菌esat-6基...
【关键词】 结核分枝杆菌；ESAT-6；重组穿梭质粒PCR扩增；
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【中文期刊】 刘海涛 孙晓文 等 《上海医学》 2004年27卷5期 309-311页ISTICCA
【摘要】 目的构建分泌性表达白介素(IL)-2的重组卡介苗(BCG).方法分别以BCG和IL-2 cDNA为模板,通过PCR扩增得到约117 bp的BCG抗原85B(BCG-Ag85B)信号肽序列和399 bp的IL-2基因序列.将BCG-Ag85B...
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【中文期刊】 周晓燕 冯永堂 等 《潍坊医学院学报》 2006年28卷5期 321-323,Ⅰ页
【摘要】 目的 构建分泌性表达IFN-α2a的卡介苗重组质粒.方法 分别以卡介苗(BCG)和IFN-α2a cDNA为模板,通过PCR扩增得到约117bp的BCG-Ag85B信号肽序列和495bp的IFN-α2a基因序列.将BCG-Ag85B信号肽序...
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【学位论文】 作者：刘春雨 导师：马腾骧 天津医科大学 临床医学 泌尿外科学（博士） 2003年
【摘要】 该课题采用基因工程技术,将GFPcDNA利用穿梭质粒作为载体转导到BCG中,使其表达GFP蛋白,以用于对BCG的作用过程、机制以及最后命运的探讨.表达GFP重组BCG在探讨BCG的作用过程方面与电镜或荧火体标记等方法相比有以下优点:(a)不...
- 概要：
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【中文期刊】 刘强 顾金金 等 《南方医科大学学报》 2013年33卷2期 202-206页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 构建稳定表达成熟miRNA-30a和miRNA-30e腺病毒表达载体.方法 小鼠基因组中分别扩增出带有酶切位点的mmu-miR-30a、mmu-miR-30e目的基因,目的基因连接到穿梭质粒pSES-HUS,带有目的基因的穿梭质粒重组...
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【中文期刊】 周建民 王勤章 等 《临床与实验病理学杂志》 2012年28卷1期 33-37页ISTICPKUCA
【摘要】 目的 构建含有人干细胞白血病(stem cell leukemia,SCL)基因的重组腺病毒载体,并观察其对豚鼠膀胱Cajal样间质细胞的转染及其介导SCL基因的表达.方法 采用PCR方法从含人SCL基因质粒中扩增SCL基因,连接到腺病毒穿...
- 概要：
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【中文期刊】 史静 胡晶 等 《南方医科大学学报》 2011年31卷11期 1806-1811页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 构建表达SH2-DED融合基因的新型重组腺病毒Ad5F35-SD-EGFP,观察其对K562细胞增殖的抑制作用.方法 重叠PCR扩增SH2-DED融合基因并克隆至腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV中,构建成穿梭质粒pAdT-SD-...
- 概要：
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【中文期刊】 朱佑明 罗永艾 等 《中国人兽共患病学报》 2011年27卷4期 303-306页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 构建和鉴定铜绿假单胞菌重组双歧杆菌(rBb)-OprF疫苗.方法 以铜绿假单胞菌PAOl标准株提取总RNA为模板,自行设计引物,RT-PCR扩增获得OprF抗原编码基因,经酶切、连接定向克隆入大肠埃希菌-双歧杆菌穿梭表达载体pGEX-...
- 概要：
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【中文期刊】 娄小丽 黄英 等 《重庆医科大学学报》 2010年35卷4期 579-581页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:制备能够表达大鼠血清淀粉样物质P(Serum amyloid P component,SAP)的重组腺病毒.方法:采用RT-PCR扩增的方法获取大鼠SAP,并将该基因采用定向克隆的方法克隆进入穿梭质粒pAdTraee-TO4中,进一步...
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【中文期刊】 李丙蓉 郑宏庭 等 《重庆医科大学学报》 2010年35卷11期 1676-1680页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建含有人脂联素基因apM1的重组腺病毒载体,制备能表达人脂联素蛋白的重组腺病毒,为脂联素用于体内外干预动脉粥样硬化奠定基础.方法:自质粒pGEM-T-apM1上扩增两端带有Sal Ⅰ和Hind Ⅲ酶切位点的全长apM1基因,将PCR...
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【中文期刊】 张灵霞 吴雪琼 等 《实用医学杂志》 2009年25卷4期 517-520页ISTICPKUCA
【摘要】 目的:获得结核分枝杆菌esat6-卡介苗重组疫苗.方法:通过基因工程重组技术将结核分枝杆菌保护性抗原esat6的编码基因与穿梭质粒载体pYUB295重组,通过电穿孔技术导入卡介苗中,应用PCR扩增、PAGE电泳鉴定重组卡介苗.结果:通过PC...
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【中文期刊】 曹海霞 诸琦 等 《实用医学杂志》 2009年25卷2期 174-176页ISTICPKUCA
【摘要】 目的:克隆人类真核翻译延长因子1A2(EEF1A2)基因全长.构建其重组腺病毒载体.方法:应用RT-PCR方法从人胰腺癌组织中扩增人EEF21A2基因全长,经T-A克隆后,亚克隆到腺病毒穿梭质粒pDC316,构建穿梭质粒pDC316-EEF...
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【中文期刊】 周必英 陈雅棠 等 《中国人兽共患病学报》 2009年25卷6期 502-506页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 构建和鉴定细粒棘球绦虫(Eg)重组双歧杆菌(Bb)-Eg95-EgA31融合基因疫苗.方法 自行设计引物,从细粒棘球蚴包囊中分离原头节,超声粉碎后提取总RNA为模板,通过RT-PCR分别扩增Eg95和EgA31抗原编码基因,然后采用基...
【关键词】 细粒棘球绦虫；重组Bb-Eg95-EgA31融合基因疫苗；构建；
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【中文期刊】 贺鹏 段莉 《东南大学学报（医学版）》 2016年35卷1期 6-10页ISTICCA
【摘要】 目的:构建稳定表达成熟miRNA-140腺病毒表达载体.方法:从人类基因组中扩增出带有酶切位点的miRNA-140目的基因,将目的基因连接到穿梭质粒pDC316-mCMV-EGFP,进一步将带有目的基因的穿梭质粒重组到骨架质粒AdEasy,...
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【中文期刊】 何春耒 刘午阳 等 《中华临床医师杂志（电子版）》 2012年6卷2期 338-341页ISTICCA
【摘要】 目的 探讨构建携带人血管内皮细胞生长因子(hVEGF)的重组腺病毒载体,为进一步的基因转染构建组织工程骨的血管化提供实验基础.方法 采用RT-PCR扩增的方法获得人源性的hVEGF165,并克隆入穿梭质粒pAdTraek CMV.构建的质粒...
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【中文期刊】 黄庆娟 朱惠明 等 《海南医学》 2012年23卷5期 1-5页ISTICCA
【摘要】 目的 构建携带有凋亡素(Apoptin、VP3)、内皮抑素(Endostatin)双基因的重组腺病毒载体,为其在肿瘤治疗的应用研究打下基础.方法 将VP3基因和Endostatin基因克隆入腺病毒穿梭质粒pDC316中,将该穿梭质粒与腺病毒...
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【中文期刊】 张怡堃 王华 等 《中国医药生物技术》 2012年07卷1期 20-25页ISTIC
【摘要】 目的 制备携带miR29c的重组腺病毒Ad5F 11 p-miR29c,评价miR29c对骨髓瘤细胞凋亡的影响.方法 巢式PCR扩增得到hsa-miR29c,将hsa-miR29c基因克隆到腺病毒穿梭质粒pShuttle-CMV,得到pSh...
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【中文期刊】 谢楚海 吴波以 等 《广东医学》 2012年33卷5期 583-586页ISTICCA
【摘要】 目的 构建携带凋亡抑制蛋白Livinα和绿色荧光蛋白(GFP)基因的重组腺病毒pAd-Livinα.方法 PCR扩增Livinα基因片段,克隆至穿梭质粒pAdTrack-CMV中,再与骨架质粒pAdEasy-1在大肠杆菌BJ5183中同源重...
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【中文期刊】 高军 范亚川 等 《西南国防医药》 2011年21卷10期 1045-1048页ISTICCA
【摘要】 目的 包装负载人miR-29a前体全长cDNA(pre-miR-29a)的复制缺陷型腺病毒载体(Ad-miR29a).方法 将pre-miR-29a全基因合成后,插入腺病毒穿梭质粒pDC315,与腺病毒包装质粒pBHGloxDeltaE1、...
【关键词】 微小RNAs；hsa-miR-29a；人胚肾293细胞；
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【中文期刊】 徐兰兰 游莉 等 《重庆医学》 2011年40卷22期 2231-2233页MEDLINEISTICCA
【摘要】 目的 制备人S100A9(hS100A9)重组腺病毒载体,为进一步研究人S100A9蛋白的分子生物学作用奠定基础.方法 从pHAHA-hS100A9中PCR扩增hS100A9片段,亚克隆至穿梭质粒pAdTrack-TOX,获得重组穿梭质粒p...
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【中文期刊】 王慧 张迪 等 《江苏大学学报(医学版)》 2011年21卷3期 241-244,248页ISTICCA
【摘要】 目的:应用基因重组技术,构建表达chemerin基因的重组腺病毒载体.方法:经PCR方法扩增得到chemerin基因,将其插入到带有绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)基因的穿梭载体pShuttle-I...
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【中文期刊】 李来邦 李立 等 《中国普外基础与临床杂志》 2011年18卷2期 131-136页ISTICCA
【摘要】 目的 克隆大鼠galectin-9基因全长cDNA,构建含大鼠galectin-9基因的重组腺病毒载体,并予以鉴定.方法 从大鼠的肝脏组织中用RT-PCR的方法克隆扩增大鼠galectin-9基因,再定向插人到带Not Ⅰ和HindⅢ酶切的...
【关键词】 大鼠；galectin-9；基因克隆；
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【中文期刊】 王衍刚 窦以河 等 《齐鲁医学杂志》 2011年26卷6期 494-496,498页ISTIC
【摘要】 目的 构建表达分泌型肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体( TRAIL)基因的重组腺病毒载体.方法 采用PCR技术从人肝脏cDNA文库中扩增出编码114～281位氨基酸的TRAIL基因片段.将扩增的TRAIL插入含有分泌性信号肽IL-2的腺病毒穿...
【关键词】 TNF相关凋亡诱导配体；重组腺病毒；聚合酶链反应；
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【中文期刊】 王占伟 乔卫军 等 《宁夏医科大学学报》 2011年33卷2期 119-121,129页ISTIC
【摘要】 目的 构建大鼠增殖抑制基因(rat hyperplasia suppressor gene,rHSG)腺病毒穿梭质粒,为进一步研究体内诱导rHSG在恶性胶质瘤的特异性表达奠定基础.方法 提取SD大鼠心肌总RNA,利用RT-PCR方法扩增大鼠...
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【中文期刊】 杨明花 王帅 等 《解剖科学进展》 2011年17卷5期 445-449页ISTICCA
【摘要】 目的 体外构建含有人4-IBBL基因的重组腺病毒载体,并检测其在HEK293细胞中的表达.方法 设计一对含有Sfil酶切位点的4-1BBL因上下游引物,以质粒pCR4-TOP0-4-1BBL为模板,通过PCR扩增获得4-1BBL基因全序列....
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【中文期刊】 邱红 朱月蓉 等 《江苏大学学报（医学版）》 2010年20卷1期 42-45,60页ISTICCA
【摘要】 目的: 构建携带人白细胞介素10(hIL-10)和人肝细胞生长因子(hHGF)双基因的重组腺病毒载体.方法: 分别以pDC316-hIL10-EGFP和pCDNA3-hHGF重组质粒为模板,PCR扩增获得hIL-10和hHGF基因片段,与p...
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【中文期刊】 石蓓 宋付凯 等 《遵义医学院学报》 2010年33卷4期 330-332页ISTIC
【摘要】 目的 构建携带人受体活性修饰蛋白-1(RAMP1)基因的腺病毒表达载体,为进一步深入研究RAMP1的功能奠定基础.方法 通过基因工程技术将RAMP1基因克隆到穿梭质粒pShuttle-GFP-CMV中;I-Ceu I+I-Sce I双酶切穿...
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【中文期刊】 郭洁 骈亚亚 等 《生物技术通讯》 2010年21卷3期 347-350页ISTICCA
【摘要】 目的:构建2型猪链球菌强毒株05ZYH33毒力岛89K上的Ⅳ型分泌系统组分gene0969敲除突变体,初步分析其活性,为进一步研究猪链球菌假想毒力因子在致病中的作用提供实验基础.方法:以05ZYH33基因组为模板,PCR扩增gene0969...
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【中文期刊】 唐宁 阙海平 等 《生物技术通讯》 2010年21卷5期 637-640页ISTICCA
【摘要】 目的:在COS7细胞中表达脊髓损伤修复相关10号蛋白(SCIRR10),并对表达产物进行纯化和鉴定.方法:在实验室前期研究基础上,用PCR方法扩增SCIRR10基因,将其克隆入pcDNA3.1/myc-HisA穿梭质粒中,转染COS7细胞进...
【关键词】 脊髓损伤修复相关10号蛋白；真核表达；COS7细胞；
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【中文期刊】 李晖 彭劼 等 《广东医学》 2009年30卷2期 166-168页ISTICCA
【摘要】 目的 构建乙型肝炎痛毒聚合酶基因(RT/RNaseH区段)腺病毒表达系统并初步鉴定其转录表达.方法 采用PCR方法从pUC19-1.24HBV质粒中扩增RT/RNaseH区段,将该片段与pCMV-Tag2B载体连接构建腺病毒穿梭载体,将其在...
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