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【中文期刊】 刘金宜 富炜琦 等 《中国药理学通报》 2019年35卷5期 733-739页ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 目的 构建ST8Sia1基因过表达载体,建立稳定过表达ST8Sia1的细胞株,检测ST8Sia1的表达及对细胞增殖的影响.方法 通过PCR反应扩增ST8Sia1基因片段,双酶切目的基因片段和pEGFP-C1载体以及pHBLV-CMV-MCS...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 石岩岩 丁士刚 等 《山东大学学报（医学版）》 2010年48卷11期 41-45页ISTICPKUCA
【摘要】 目的 克隆人硫氧还蛋白-1(human thioredoxin-1,hTrx1)基因,并构建含有该目的 基因的重组载体.方法 以人胃癌细胞系BCG823、MNK45的总RNA为模板,设计含有酶切位点的特异性引物,用逆转录PCR的方法,扩增h...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 杨天燕 王乃平 等 《中国组织工程研究与临床康复》 2010年14卷37期 6908-6912页ISTICPKUCA
【摘要】 背景:增强型绿色荧光蛋白作为报告基因可在活细胞中表达发光蛋白.研究表明通过促进表达增强的Kozak序列可促进基因编码的蛋白质在真核细胞中的表达.目的:构建含增强型绿色荧光蛋白报告基因EGFP与促进表达增强的Kozak序列的pLXSN-Koz...
- 概要：
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【中文期刊】 李祥勇 罗海清 等 《医学研究生学报》 2010年23卷12期 1240-1243页ISTICPKU
【摘要】 目的 慢病毒载体技术已被广泛应用于基因功能分析、信号转导通路和基因治疗的研究.文中应用慢病毒系统构建凋亡抑制基因Bi-1的慢病毒表达载体并检测其在NIH3T3细胞中的表达,为后续的以Bi-1基因为靶点的肿瘤基因治疗研究奠定基础. 方法 根据...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 张耀方 张睿娟 等 《中国实验血液学杂志》 2010年18卷3期 686-689页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 本研究针对klf4基因,利用AdEasy腺病毒载体系统构建人klf4反义基因重组腺病毒载体.klf4基因片段反向克隆到穿梭质粒pShuttle-CMV,利用同源重组技术在大肠杆菌BJ5183内构建重组腺病毒Ad-反义klf4,酶切线性化重组...
- 概要：
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- 结论：
【中文期刊】 范伟全 包晓群 等 《中国老年学杂志》 2010年30卷10期 1393-1395页ISTICPKUCA
【摘要】 目的 利用黄芪毛状根表达人胸腺素α1.方法 合成人胸腺素α1基因,构建重组载体pCAMBIA1301-hTα1,以黄芪下胚轴为外植体,通过发根农杆菌C58C1介导转入黄芪毛状根中,取潮霉素抗性毛状根用PCR法检测人胸腺素α1基因的整合,SD...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 朱成楚 陈仕林 等 《浙江大学学报（医学版）》 2009年38卷4期 370-376页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建携带血管形成素-1(ANG-1)基因腺相关病毒(AAV)载体,通过病毒包装和纯化及滴定,获得高纯度高感染性的病毒液,并转染到乳猪骨髓干细胞中,获得有效表达,为进行血管再生的基因治疗研究奠定基础.方法:利用PCR技术,获取目的基因A...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 魏明敏 邱德文 等 《生物技术通报》 2009年4期 91-94,102页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 构建嗜线虫致病杆菌Xna基因的同源重组载体和建立该细菌的遗传转化体系.扩增嗜线虫致病杆菌XNA基因的左右同源片段及质粒PEASY-T1上的卡那抗性基因Km;利用重叠延伸引物PCR法将这3个片段连接起来,然后将其克隆至自杀性载体PJQ200....
【关键词】 嗜线虫致病杆菌；同源重组载体；重叠延伸引物PCR法；
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- 结论：
【中文期刊】 程桂芝 李芳 《细胞与分子免疫学杂志》 2009年25卷8期 748-750页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的: 构建人类核糖核酸酶9 (human ribonuclease 9,hRNase 9) 的重组表达载体方法: 从成年人附睾组织提取了总RNA,通过RT-PCR扩增了hRNase 9编码成熟肽的基因片段,将其克隆入载体pET25b(+)...
- 概要：
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- 结论：
【中文期刊】 张越 杨洋 等 《中国老年学杂志》 2008年28卷6期 564-566页ISTICPKUCA
【摘要】 目的 构建磷酸钠协同转运蛋白基因SLC34A2的真核表达重组载体pcDNA3.1(+),并进行酶切鉴定.方法 查得人SLC34A2 cDNA全序列,设计合成相应特异性引物,引入BamHⅠ和EcoRⅠ酶切位点,通过RT-PCR获得SLC34A...
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【中文期刊】 赵亮 姚丽娟 等 《安徽医科大学学报》 2008年43卷4期 357-361页ISTICPKUCA
【摘要】 目的 构建重组融合蛋白TumstatinTNF-α的分泌型真核表达载体并检测其在中国仓鼠卵巢细胞(CHO-K1)中的稳定表达.方法 以人胚肾293细胞为材料,提取总RNA,用RT-PCR方法合成人turristatin cDNA,将该cDN...
- 概要：
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【中文期刊】 董智勇 李忱 等 《细胞与分子免疫学杂志》 2008年24卷11期 1072-1073,1078页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:分离大鼠神经营养素-3(NT-3)基因, 构建pLEGFP-NT3逆转录病毒表达载体.方法:利用RT-PCR技术钓取大鼠NT-3基因, 克隆到测序载体pMD18-T中, 测序后再亚克隆到逆转录病毒载体pLEGFP-C1中, 通过Lip...
- 概要：
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【中文期刊】 黄正蔚 刘正 《华西口腔医学杂志》 2006年24卷1期 70-72页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的构建luxS基因的同源重组克隆载体以备将来进行luxS基因同源重组knockout突变株的研究.方法利用高保真的pfu DNA聚合酶,通过嵌套式PCR的方法,分别扩增出变形链球菌luxS基因的上下游片段(Xup,Xdn)以及大肠杆菌pH...
- 概要：
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【中文期刊】 孙丽翠 王雅梅 等 《首都医科大学学报》 2006年27卷5期 623-626页ISTICPKUCA
【摘要】 目的 构建含人血管内皮细胞生长因子(VEGF)基因的杆状病毒表达载体,并对其表达产物的生物学活性进行测定.方法 用Hind Ⅲ对pcDNA3.1/VEGF进行酶切,回收575 bp的VEGF片段;pFast a载体用Hind Ⅲ酶切回收,与...
【关键词】 人血管内皮细胞生长因子；重组杆状病毒载体；Western blot；
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【中文期刊】 魏增涛 卢爱英 等 《实用妇产科杂志》 2005年21卷10期 594-596页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:探讨联合应用内皮抑素基因和重组干扰素-α(IFN-α)蛋白对鼠卵巢癌移植瘤的抑制作用.方法:利用人卵巢上皮癌细胞株(3AO细胞)制备卵巢癌移植瘤动物模型,以重组IFN-α和脂质体介导分泌型内皮抑素重组载体基因(pVAX-sEn)瘤内及...
【关键词】 内皮抑素；分泌型内皮抑素重组载体基因；干扰素；
- 概要：
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【中文期刊】 李志刚 江元森 等 《中山大学学报（医学科学版）》 2004年25卷z1期 25-27页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 [目的]构建包含人乙型肝炎病毒(HBV)S基因与PreS2/S基因的重组载体.[方法]设计合成2对寡核苷酸引物,以adr亚型HBV质粒pHBVDNA为模板,采用PCR法分别扩增HBVS基因、PreS2/S基因片段;用HindⅢ和BamHⅠ双...
- 概要：
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【中文期刊】 刘凤娟 俞守义 等 《中国公共卫生》 2004年20卷10期 1193-1195页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的克隆卡介苗(BCG)D2株32-kDa分泌蛋白基因(fbpA基因),构建重组植物表达载体pBI121-fbpA,为研制转基因植物口服疫苗奠定基础.方法采用PCR法从BCGD2株基因组DNA中分离fbpA基因,构建重组克隆载体pUCm-T...
- 概要：
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【中文期刊】 杨文宇 黄宗海 等 《第一军医大学学报》 2004年24卷2期 164-167页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的采用"两步转化法"高效制备含胞嘧啶脱氨酶(CD)自杀基因的腺病毒重组载体.方法将质粒pAdEasy-1线性化后转化于BJ5183菌,制备AdEasy-1细菌;自载体pBS-CD中切出CD基因,亚克隆至穿梭质粒pAdtrackCMV上,构...
- 概要：
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【中文期刊】 李志全 朱庆生 等 《细胞与分子免疫学杂志》 2004年20卷3期 344-347页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的: 分别构建含人神经营养素3(NT3)基因和脑源性神经营养因子(BDNF)基因的重组四环素可诱导的腺病毒载体, 并进行PCR和酶切鉴定.方法: 将NT3和BDNF基因依次分别亚克隆到pIND载体和pTRE-Shuttle2载体中, 构建...
- 概要：
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【中文期刊】 檀卫平 黄嘉凌 等 《中山大学学报（医学科学版）》 2004年25卷6期 546-548,553页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 [目的] 构建小鼠 T-bet基因重组腺病毒载体,为 T-bet基因在支气管哮喘治疗中的作用研究提供有效的 T-bet生物表达系统.[方法] 采用内切酶从质粒 T-bet/GFP-RV中切获约 1.7 kb的小鼠 T-betcDNA片段,与...
【关键词】 小鼠 T-bet基因；重组腺病毒载体；
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【中文期刊】 姜政 黄爱龙 等 《重庆医科大学学报》 2003年28卷4期 414-416,420页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:获取含人幽门螺杆菌(Hp)热休克蛋白A编码基因并构建其重组载体,进行核苷酸序列分析,为在E coli BL21中表达,疫苗的开发奠定基础.方法:利用分子克隆技术从Hp DNA染色体中,扩增热休克蛋白A编码基因片段.将目的基因与pET3...
- 概要：
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【中文期刊】 蒲丹 姜政 等 《重庆医科大学学报》 2002年27卷2期 130-132,135页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建幽门螺杆菌26kDa外膜蛋白的基因重组载体,为Hp的疫苗开发、快速诊断试剂盒的研究奠定基础.方法:用PCR从Hp染色体DNA基因组扩增26kDa外膜蛋白的基因片段,将26kDa目的基因、pET32a(+)载体同时经BamHI、Hi...
- 概要：
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【中文期刊】 明文玉 银巍 等 《中国免疫学杂志》 2001年17卷5期 228-231页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的：构建人的ureb1(hureb1)原核高效表达重组质粒，以此表达的外源蛋白为抗原制备抗ureb1的抗体。方法：用XhoI/Not I从pGU-2质粒酶切得到hureb1的ORF与pGEX-4T-2的XhoI/NotI大片段连接，构建表...
【关键词】 人ureb1DNA重组原核表达载体抗体；
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【中文期刊】 王晓东 刘友生 等 《第三军医大学学报》 2001年23卷6期 637-640页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的构建人N端截断型脂多糖结合蛋白（tLBP）基因的杆状病毒表达载体，为后续的蛋白表达及其抗内毒素保护作用研究奠定基础。方法采用PCR技术从人全长LBP基因cDNA中扩增长度为695bp的基因片段，经pGEM-T载体亚克隆筛选和序列分析后，...
【关键词】 截断型脂多糖结合蛋白；基因克隆；重组载体；
- 概要：
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【中文期刊】 邢卉春 徐小元 等 《中国性病艾滋病防治》 2001年7卷6期 338-340,342页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的构建趋化因子受体CCR5反义RNA真核表达载体以用于抗HIV-1的研究.方法用RT-PCR从健康人外周血单个核细胞(PBMCs)中获得趋化因子受体CCR5翻译起始区的基因片段,用基因重组技术将此目的基因以正、反两个方向定向插入到逆转录病...
- 概要：
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【中文期刊】 姚雪兵 杨林 等 《南昌大学学报（医学版）》 2017年57卷4期 9-13页ISTIC
【摘要】 目的 分别构建绿色荧光蛋白(GFP)与氨基端或羧基端缺失突变乙型肝炎病毒X蛋白(hepatitis B virus X protein,HBx)的重组表达载体,建立稳定表达GFP/HBxn、GFP/HBxc融合蛋白的HepG2细胞系,以进一...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 Syed Hameed Ali Shah 何大伟 等 《江苏大学学报（医学版）》 2017年27卷6期 466-469页ISTICCA
【摘要】 目的:构建pcDNA3.1(+)/EMC6真核表达载体,并将其在人肝L-02细胞株中过表达.方法:查询PubMed上EMC6的基因序列,针对该序列设计引物,提取L-02细胞的总RNA、聚合酶链式反应(PCR)扩增目的片段,采用基因重组技术将...
【关键词】 内质网膜蛋白复合体亚基-6；重组质粒；载体构建；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 张振颖 侯彬彬 等 《中国真菌学杂志》 2015年3期 163-167页ISTICCSCD
【摘要】 目的：获得一种适于丝状真菌基因研究用的、由根癌农杆菌介导的RNA干扰方法。方法采用基因重组及菌株干扰体系筛选的方法。结果获得适于根癌农杆菌转染的重组载体PCB309?pfgrt，并将其成功用于对孢子丝菌双组份信号组氨酸蛋白激酶DRK1基因的...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 陈建国 韩跃武 《国际检验医学杂志》 2014年24期 3297-3299,3303页ISTICCA
【摘要】 目的：构建 BAG-1、Bcl-2双靶区反义 RNA 重组载体 pVITRO2-AsBAG-1-Bcl-2及单表达重组载体 pVITRO2-As-BAG-1和 pVITRO2-AsBcl-2，并初步研究它们对人胃癌细胞株 SGC-7901增...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 刘昆梅 郭乐 等 《现代肿瘤医学》 2014年22卷12期 2778-2784页ISTICCA
【摘要】 目的:设计靶向AEG-l序列的人鼠通用的siRNA,并构建沉默AEG-1表达的shRNA和过表达AEG-1的重组表达载体,以改变肿瘤细胞中AEG-1的表达,探讨AEG-1对肿瘤细胞迁移的影响.方法:首先设计靶向AEG-1的siRNA并转染细...
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