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【中文期刊】 李欣悦 金月 等 《中国热带医学》 2025年25卷3期 328-332页ISTICPKUCA
【摘要】 目的 构建人淋巴细胞激活基因3(lymphocyte activation gene 3,LAG3)慢病毒重组表达载体,并转染小鼠成纤维细胞3T3以获得LAG3优势表达的单克隆细胞株.方法 提取人外周血单核细胞总RNA并逆转录为cDNA,以...
- 概要：
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- 概要：
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【中文期刊】 毛灵琪 李存治 等 《生物技术通报》 2016年32卷4期 203-209页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 旨在建立一种适合环己胺降解菌NyZ12基因无痕敲除的可靠方法。通过overlapping PCR技术将目的基因上下游同源臂融合并克隆到自杀载体pEX18km上，将重组质粒转化到大肠杆菌S17 pir中，再通过接合转移到假单胞菌NyZ12菌株...
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【中文期刊】 殷子斐 王丽娜 等 《生物技术通报》 2015年9期 49-59页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 重组型腺相关病毒（recombinant adeno-associated virus，rAAV）载体是目前基因治疗研究中常用的、非常有前景的载体之一。欧洲第一个批准上市的基因治疗药物正是基于rAAV。然而，rAAV的转导效率相对有限，导致...
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【中文期刊】 李景传 薛博夫 等 《生物工程学报》 2015年31卷3期 411-420页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 为大量制备β-NGF,构建了一种稳定、高效表达重组人神经生长因子(Recombinant human nervegrowth factor,rh-β-NGF)的真核表达载体及含该重组载体的HEK293细胞株.首先,构建重组质粒pCMV-β-...
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【中文期刊】 占申标 唐明青 等 《生物技术通报》 2015年12期 63-69页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 重组腺相关病毒（rAAV）作为唯一一种通过欧盟FDA认证的基因治疗载体，具有宿主范围广、转染效率高、非致病性、免疫原性低、能够长期表达外源基因的优点。随着以rAAV基因治疗临床试验的深入与扩大，传统rAAV包装系统产能不足的缺点逐渐凸显出来...
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【中文期刊】 张旻 姜绍通 等 《生物工程学报》 2015年31卷8期 1203-1218页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 为了建立适合米根霉的遗传转化体系,应用重叠延伸PCR的方法构建了以潮霉素B抗性为选择标记的单交换整合型表达载体pBS-hygro-ldhA;分别采用PEG/CaCl2介导的原生质体转化、原生质体电转化及萌发孢子电转化的方法将表达载体pBS-...
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【中文期刊】 王子杰 邓忠磊 等 《南京医科大学学报（自然科学版）》 2015年35卷2期 173-177页ISTICPKUCA
【摘要】 目的:构建小鼠B、T淋巴细胞衰减子(BTLA)基因重组慢病毒载体,探讨BTLA基因过表达对小鼠脾T淋巴细胞增殖及活化的影响.方法:以小鼠脾脏组织总RNA为模板,逆转录为cDNA,通过PCR技术扩增BTLA基因,构建pWPTS-mBTLA慢病...
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【中文期刊】 左颀 赵心清 等 《生物工程学报》 2014年30卷4期 669-673页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 染色体整合表达可获得稳定遗传的基因工程菌,是工业酿酒酵母育种的重要手段.pAUR135整合载体是抗生素标记基因可循环使用的载体,添加特定的同源臂后可构建在酵母染色体上稳定遗传的菌株.目前对酵母菌的分子育种常需要对多个基因进行过表达,利用pA...
【关键词】 同源重组；pAUR135整合载体；工业酿酒酵母；
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【中文期刊】 余希尧 钟泽民 等 《微生物学通报》 2014年41卷5期 849-856页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 [目的]构建里氏木霉分泌型表达载体,通过表达绿色荧光蛋白论证载体的可行性并初步观察绿色荧光蛋白在里氏木霉中的分泌过程.[方法]应用PCR及分子克隆技术将里氏木霉(Trichoderma reesei)纤维二糖水解酶(CBHl)的启动子及CB...
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【中文期刊】 肖素勤 孙振 等 《植物科学学报》 2012年30卷5期 528-544页ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 通路(Gateway)克隆技术是根据λ噬菌体基因组和大肠杆菌基因组之间的位点专一性重组分子机制开发的一套分子克隆新技术.利用该技术LR反应构建目的基因的表达载体时不需要经过酶切和连接等繁琐而又费时的过程,因此,可以节省很多时间.为了扩大Ga...
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【中文期刊】 殷瑛 徐俊杰 等 《生物工程学报》 2010年26卷4期 431-438页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 乙型肝炎病毒核心蛋白(Hepatitis B virus coreprotein,HBc)可以形成二十面体对称的颗粒样结构,由于其N端、C端和主要免疫显性区域(Major immunodominant region,MIR)允许一定程度的缺...
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【中文期刊】 李军华 韩翠芹 等 《生物工程学报》 2010年26卷12期 1696-1703页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 利用DNA同源重组方法(基因打靶)对动物基因组进行修饰是转基因研究的重要手段之一.为了构建一个高效的通用型基因打靶载体,本研究以pBS246质粒为骨架,在两个LoxP序列之间插入正筛选标记新霉素磷酸转移酶(neo)基因和绿色荧光蛋白(EGF...
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【中文期刊】 吴扬 李玉琴 等 《吉林大学学报（医学版）》 2009年35卷5期 898-901页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建人纤溶酶真核表达载体以用于抗栓、溶栓的研究.方法:人胎肝组织经PCR技术扩增人纤溶酶基因,定向克隆至真核表达质粒pC-DNA-3后测序.经测序鉴定正确后构建人纤溶酶真核表达重组质粒,利用PCR和酶切方法鉴定重组真核表达质粒的正确性...
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【中文期刊】 陈伟业 曲林茂 等 《生物工程学报》 2009年25卷4期 496-502页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 本研究旨在构建表达小反刍兽疫H蛋白的重组山羊痘病毒,并评价其免疫效力.利用筛选基因gpt和eGFP并结合空斑技术,纯化筛选了重组小反刍兽疫H基因的重组山羊痘病毒(rGPV-PPRV-H),经过PCR鉴定重组病毒已纯化.免疫荧光和蛋白印迹都表...
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【中文期刊】 李江 张俊芳 等 《吉林大学学报（医学版）》 2009年35卷3期 415-418页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:通过基因重组方法构建pCMV-Myc-PIASxa质粒,在真核细胞中高效表达重组蛋白并进行检测.方法:用Sal Ⅰ和Not Ⅰ将PIASxβ片段从pGADT7载体中酶切后,利用DNA重组技术将其定向插入pCMV-Myc载体中.获得正确...
【关键词】 PIASxβ；pCMV-Myc载体；重组质粒；
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【中文期刊】 苏毅 何雅丽 等 《南京医科大学学报(自然科学版)》 2008年28卷12期 1533-1536,1577页ISTICPKUCA
【摘要】 目的:构建重组人白细胞介素1受体拮抗剂(rhIL-1ra)基因真核表达载体pEGFP-N1/hIL-1ra,瞬时转染人牙龈成纤维细胞并检测其表达,为牙周炎症的基因治疗提供实验基础.方法:TRIzol法提取人乳腺癌组织总RNA进行RT-PCR...
【关键词】 重组人白细胞介素1受体拈抗剂；真核表达载体；瞬时转染；
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【中文期刊】 李冉琪 李雅淑 等 《中草药》 2024年55卷1期 232-239页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 人参Panaxginseng中构建烟草脆裂病毒(tobacco rattle virus,TRV)介导的基因沉默体系,为人参中基因功能的验证提供新方法.方法 通过序列比对得到人参中八氢番茄红素脱氢酶(phytoene desatura...
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【中文期刊】 崔琳琳 薛仁宇 等 《生物化学与生物物理进展》 2011年38卷8期 724-729页SCIISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 为了探讨非转座子载体介导转基因家蚕表达外源基因的可能性,将hIL-28A克隆进昆虫细胞表达载体pIZT/V5-His,构建了重组载体pIZTN5-His-hIL-28A.利用精子介导法将该重组载体导入家蚕卵,通过绿色荧光筛选并结合PCR、D...
【关键词】 非转座子载体pIZT/V5-His；转基因家蚕；hIL-284；
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【中文期刊】 李书祥 韩睿 等 《生物化学与生物物理进展》 2011年38卷8期 751-758页SCIISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 通过截短玉米黑粉菌CYP51(P450-14DM,UmCYP51)基因(去除编码跨膜区部分)和选取不同的表达载体,构建了9种重组表达质粒,在大肠杆菌中进行UmCYP51基因的表达,发现只有BL21(DE3)/PET32-Um-35重组表达工...
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【中文期刊】 李玲 白娟娟 等 《生物技术通报》 2019年35卷2期 1-8页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 转录因子CNR(Colourless non-ripening)在果实的发育和成熟过程中起重要作用.目前关于番茄转录因子CNR的研究主要集中在转录水平,然而蛋白水平才是CNR发挥作用的水平.通过对CNR进行原核表达和纯化,并制备CNR的多克...
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【中文期刊】 何思雨 成文玉 等 《生物技术通报》 2017年33卷8期 174-179页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 为提高利福霉素的产量,构建了S-丙二酰转移酶基因失活的地中海拟无枝酸菌.利用融合PCR构建S-丙二酰转移酶基因的同源重组载体,通过电击转化导入到地中海拟无枝酸菌中,使之发生同源重组,以安普霉素为标记,筛选了S-丙二酰转移酶基因失活菌株,并对...
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【中文期刊】 李光磊 张娟 等 《生物技术通报》 2016年32卷8期 152-160页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 将嗜麦芽寡养单胞菌 BBE11-1来源的角蛋白酶基因 kerD 进行毕赤酵母密码子优化，构建重组载体 pPIC9k-kerD ；整合该重组载体到毕赤酵母 SMD1168基因组，筛选到 Mut+型重组子；对利用 G418抗性筛选到的重组子进行...
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【中文期刊】 李凤娥 郝峰 等 《吉林大学学报（医学版）》 2013年39卷2期 273-277,后插2页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建以增强型绿色荧光蛋白(EGFP)为报告基因的重组真核表达载体pEGFP-aquaporin-4,以EGFP示踪aquaporin-4在Fisher大鼠甲状腺滤泡上皮细胞(FRT细胞)中的表达和定位,为进一步研究aquaporin-...
【关键词】 aquaporin-4；转染；FRT细胞；
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【中文期刊】 胡玥 褚志礼 等 《中国生物化学与分子生物学报》 2012年28卷3期 240-247页MEDLINEISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 生殖系α因子(Figla)是最早表达的生殖细胞特异性转录因子之一,对卵泡的发育、Zp基因的表达和透明带的形成具有调节作用.Figla基因异常会引起卵巢早衰的发生.本研究通过PCR自小鼠基因组中扩增出Figla基因,将其克隆到真核报告载体pD...
【关键词】 生殖系α因子(Figla)；生殖特异性基因；胚胎干细胞；
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【中文期刊】 杨艳明 刘林林 等 《吉林大学学报（医学版）》 2012年38卷3期 398-403,封2页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建Egr1介导的人分泌型肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(hsTRAIL)重组表达载体pEgr1-hsTRAIL,探讨其对人肺腺癌A549细胞的生长抑制作用.方法:利用基因重组技术构建Egr1介导的hsTRAIL重组载体,PCR、酶切...
【关键词】 Egr1；分泌型肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体；基因重组；
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- 结论：
【中文期刊】 孙涛 申宁 等 《微生物学通报》 2011年38卷7期 1090-1097页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 来源于极端嗜热菌海栖热袍菌(Thermotoga maritima MSB8)的木聚糖酶B具有极高的热稳定性,在饲料、造纸、能源和食品医药行业具有巨大应用潜力.携带酶基因xynB64的pET28a(+)重组载体在宿主大肠杆菌BL21(DE3...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 肖佳佳 张凤凤 等 《生物工程学报》 2011年27卷6期 963-968页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 为了构建包含牛c-myc基因编码序列的重组载体,以胎牛原始生殖嵴为材料,用RT-PCR方法克隆出牛c-myc基因的编码序列,将其亚克隆至pMD19-T栽体,再从酶切鉴定和测序正确的质粒上切下目的片段,定向克隆到plRES2-AcGFP1-N...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 李鹏 马艳娇 等 《吉林大学学报（医学版）》 2011年37卷4期 582-586页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建pcDNA3.1(+)-CCNL1、pVAX Ⅰ -CCNL1和pEGFP-C1-CCNL1三组重组载体,鉴定其在MDA-MB-231细胞中的表达情况.方法:用PCR方法扩增得到CCNL-1基因,然后用EcoR Ⅰ、HindⅢ酶切...
【关键词】 乳腺肿瘤；真核表达载体；细胞周期调节蛋白—1；
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- 方法：
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【中文期刊】 张剑 肖乐 等 《现代预防医学》 2011年38卷22期 4684-4686页ISTICPKUCA
【摘要】 [目的]构建真核表达载体pEGFP-N 1/rCNP并转染体外培养的人脐静脉内皮细胞,观察CNP基因在其中的表达.[方法]利用RT-PCR方法从家兔腹主动脉组织扩增获得CNP基因全场全长编码区,克隆到含有增强型绿色荧光蛋白报告基因的真核表达...
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