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【中文期刊】 姚军 钱翠娟 等 《中国热带医学》 2009年9卷4期 632-635页ISTICPKUCA
【摘要】 目的 构建重组逆转录病毒表达载体pCLNRX-ICN,研究Notch1过度活化对人宫颈癌HeLa细胞生长的影响,并探讨其作用机制. 方法 通过逆转录病毒感染,将Notch1(ICN)基因导入并整合到HeLa细胞的基因组中.MTT法检测稳定表...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 周雪美 原慧萍 等 《中华微生物学和免疫学杂志》 2009年29卷9期 786-791页ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 目的 建立体外稳定表达脑源性神经生长因子(BDNF)的神经干细胞(NSCs).方法 采用有限稀释法纯化体外培养的NSCs.用重组和空白逆转录病毒感染NSCs,分别采用荧光定量PCR法和ELISA法检测3组(pLXSN-BDNF病毒感染组、p...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 李佳楣 龙大宏 等 《中华神经医学杂志》 2006年5卷5期 462-464页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的构建脑源性神经营养因子(BDNF)基因重组逆转录病毒表达载体.方法根据BDNF基因已知序列,设计合成一对引物并导入HindⅢ和BamH Ⅰ酶切位点;从大鼠海马组织提取总RNA,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)获得编码BDNF的基因片段...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 袁捷 刘德莉 等 《上海第二医科大学学报》 2004年24卷4期 235-237,266页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的应用绿色荧光蛋白(GFP)标记技术,观察组织工程化骨体内形成过程中种子细胞的变化与转归.方法用GFP重组逆转录病毒载体(GFP-RV)转染犬骨髓基质干细胞(BMSCs),将其接种于β-磷酸三钙(β-TCP),形成细胞-材料复合物,移植于...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 王义生 王宸 等 《中华实验外科杂志》 2013年30卷11期 2367-2370页ISTICCA
【摘要】 目的 将重组人降钙素基因相关肽α(hCGRPα)逆转录病毒载体(pLNCX2-hCGRPα)感染人骨髓间充质干细胞(hBMSCs),观察其对hBMSCs增殖与成骨活性的影响.方法 采用Ficoll淋巴细胞分离液梯度离心法获得自体原代hBMS...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 武向梅 卜友泉 等 《第四军医大学学报》 2009年30卷13期 1195-1198页ISTICCA
【摘要】 目的:研究BNA干扰(RNAi)抑制Bmi-1基因表达后对乳腺癌细胞株MCF-7凋亡和增殖的影响.方法:将表达Bmi-1短发夹RNA(shRNA)的重组逆转录病毒载体pSuper-retro/Bmi-1 si瞬时转染MCF-7乳腺癌细胞株,...
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【学位论文】 作者：许建导师：陈昭烈 中国人民解放军军事医学科学院 生物学 细胞生物学（硕士） 2008年
【摘要】 逆转录病毒表达系统是近年来新兴起的一种高效表达系统,它由逆转录病毒载体,包膜蛋白载体和包装细胞系构成.由于逆转录病毒和宿主细胞基因组的重组倾向于发生在转录活性区,口炎疱疹病毒G蛋白能有效扩大逆转录病毒感染宿主细胞的范围、提高逆转录病毒的感染...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 蔡善保 马庆军 等 《中华医学杂志(英文版)》 2002年115卷6期 914-918页SCIMEDLINEISTICCSCDCABP
【摘要】 目的构建人VEGF121逆转录病毒表达载体,探讨应用血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)基因治疗骨科缺血性疾患的可行性.方法采用分子克隆技术从pCDⅠ/VEGF121质粒获得...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 左祥生 李果 等 《中华医学杂志(英文版)》 2001年114卷9期 916-920页SCIMEDLINEISTICCSCDCABP
【摘要】 目的应用重组逆转录病毒载体介导小鼠过氧化物酶体增殖体激活的受体γ2(mPPARγ2)基因在NIH3T3成纤维细胞中表达,并进一步研究其功能.方法从经荧光测序证实含正确mPPARγ2 cDNA序列的重组质粒pcDNA3/mPPARγ2中,双酶...
【关键词】 过氧化物酶体增殖体激活的受体γ2；成纤维细胞；逆转录病毒；
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【中文期刊】 王季石 陈子兴 等 《中华医学杂志(英文版)》 2001年114卷1期 25-29页SCIMEDLINEISTICCSCDCABP
【摘要】 目的为探讨转染醛脱氢酶基因（ALDH1）和多药耐药基因 (MDR1)的人脐血CD34+细胞能否同吮增强对活性环磷酰胺（4-HC）和P-gp转运泵靶药的抗性。方法构建了同时含ALDH1和MDR1双耐药基因的逆转录病毒表达质粒G1Na-ALDH...
【关键词】 基因疗法醛脱氢酶基因(ALDH1)多药耐药基因 (MDR1) 逆转录病毒载体基因共表达造血干细胞脐血；gene therapy；aldehyde-dehydrogenase-class1gene (ALDH-1)；
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【中文期刊】 李坤平 王穗海 等 《中华肝胆外科杂志》 2017年23卷12期 841-844页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 构建可诱导表达RN181的逆转录病毒载体,探讨其在肝癌细胞中的表达,为进一步研究RN181基因的生物学功能奠定基础.方法 基于基因克隆技术,构建pRetrox-TRE3 G/RN181重组载体.常规鉴定后,反应质粒pRetroX-TR...
【关键词】 肝癌；锌指蛋白,RN181；蛋白表达；
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【中文期刊】 郝伟明 徐庆刚 等 《中华微生物学和免疫学杂志》 2013年9期 711-716页ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 Ⅰ型人类免疫缺陷病毒（ human immunodefi-ciency virus type 1， HIV-1）是引起全世界范围艾滋病（ AIDS）流行的最主要病原体。 HIV-1属逆转录病毒科，其基因组由两条相同的正链RNA构成。要完成自...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 杨国红 姬文婕 等 《细胞与分子免疫学杂志》 2012年28卷7期 677-679页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建重组大鼠△N△C/VEGF-C/Cys152Ser (ddVEGF-C)逆转录病毒载体,建立稳定表达ddVEGF-C的PT67包装细胞株,并验证其表达.方法:利用PCR从pSecTag-ddVEGF-C中获取大鼠ddVEGF-C基...
【关键词】 △N△C/VEGF-C/Cys152Ser；逆转录病毒载体；PT67；
- 概要：
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【中文期刊】 高美华 王娟 等 《细胞与分子免疫学杂志》 2012年28卷1期 40-42,45页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:利用RNAi表达载体法构建并筛选携带针对CD3ξ基因的pSUPER retro RNAi逆转录病毒载体及稳定产毒的细胞克隆.方法:利用.DNA重组技术,设计3条60bp能转录产生靶向CD3ξ小发卡RNA(shRNA)的寡核苷酸序列,以...
- 概要：
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【中文期刊】 秦笙 王玉涛 等 《病毒学报》 2011年27卷6期 587-593页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 获得稳定表达RSV病毒NS1基因的HEp-2-NS1细胞株并对其生物学特性进行初步研究.采用RT-PCR方法从RSV病毒中获得NS1全长基因,克隆到逆转录病毒载体pBABE-puro中,重组载体与包装质粒PIK通过磷酸钙共沉淀法转染包装细胞...
- 概要：
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【中文期刊】 王晓辉 惠玲 等 《细胞与分子免疫学杂志》 2011年27卷10期 1143-1145页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建钙整合素结合蛋白(CIB)的逆转录病毒表达载体,并建立包装细胞系.方法:质粒pet32-CIB经EcoR I和Xho I双酶切后亚克隆至逆转录病毒载体pLXSN,构建重组逆转录病毒表达载体pLXSN-CIB,PCR及双酶切鉴定后,...
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【中文期刊】 孙大康 安新业 等 《中国生物工程杂志》 2011年31卷12期 57-62页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建人Trim22的重组逆转录病毒载体,观察过表达Trim22对脂多糖(LPS)诱导的巨噬样细胞促炎细胞因子产生的影响.方法:经PCR法扩增,把Trim22克隆入逆转录病毒载体MSCV2.2 IRES-GFP(MSCV),并对重组载体...
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【中文期刊】 方道奎 袁建辉 等 《现代预防医学》 2011年38卷23期 4921-4923页ISTICPKUCA
【摘要】 [目的]构建XRCC1基因的发卡样siRNA(small interfere RNA)真核表达载体,为建立XRCC1缺陷的细胞株,及进一步研究XRCC1的功能奠定基础. [方法]根据GenBank提供的XRCC1基因cDNA序列及软件构建发...
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【中文期刊】 王大涛 赵海平 等 《兽类学报》 2011年31卷1期 103-107页MEDLINEISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 为了研究梅花鹿S100A4(S100 calcium binding protein A4)基因在鹿茸生长过程中的作用.用RT-PCR法从生茸骨膜细胞总RNA中克隆了梅花鹿S100A4基因,在NCBI中对基因序列进行比对;将完整的基因序列与...
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【中文期刊】 陈思翀 姚辰 等 《细胞与分子免疫学杂志》 2010年26卷2期 121-124页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:利用重新构建的人逆转录病毒四载体系统共转染人胚肾细胞获得携带IL-24的复制缺陷型重组人泡沫病毒(HFV-IL24)颗粒,探讨复制缺陷型人泡沫病毒介导IL-24对肿瘤细胞生长分化的抑制作用.方法:重组构建含IL-24的人泡沫病毒载体质...
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【中文期刊】 靳雪源 赵平 等 《中国生物工程杂志》 2010年30卷2期 39-43页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建表达重组反义p73基因的重组逆转录病毒,观察其对人肝癌细胞HepG2的凋亡诱导活性,并进一步探讨其作用机制.方法:克隆p73基因的反义片段,重组法构成逆转录病毒载体pBabe-p73(pBP73),以脂质体Lipolfectami...
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【中文期刊】 黄轶 杨梅华 等 《第三军医大学学报》 2010年32卷13期 1379-1382页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 构建靶向GW112 siRNA逆转录病毒载体并筛选特异高效的RNAi靶点,研究GW112基因沉默后对胃癌SGC-7901细胞体外增殖的影响.方法 应用逆转录病毒载体psilencer 5.1-H1 Retro 构建针对GW112基因3...
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【中文期刊】 楚元奎 吕长荣 等 《生物工程学报》 2010年26卷4期 448-453页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 为构建表达人神经元素3基因(neurogenin 3,ngn3)的重组逆转录病毒载体,建立稳定表达ngn3的包装细胞株,本研究以流产人胎儿胰腺组织为材料,通过RT-PCR方法克隆出人ngn3基因,将其连接到pMD18-T载体上并测序,结果表...
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【中文期刊】 袁成福 程莉 等 《第二军医大学学报》 2009年30卷4期 450-453页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:建立逆转录病毒介导的MCPH1基因RNA干扰表达体系并观察其在宫颈癌细胞(HeLa)中对MCPH1表达的影响.方法: 将人MCPH1基因RNA干扰双链DNA片段重组到逆转录病毒质粒pSilencer5.1-H1 Retro中,构建携带...
- 概要：
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【中文期刊】 胡元 黄仁魏 等 《中华肿瘤防治杂志》 2009年16卷11期 821-824页ISTICPKUCA
【摘要】 目的:构建bcr/abl融合基因的逆转录病毒载体,通过细胞包装获取高滴度含bcr/abl基因的逆转录病毒.方法:RT-PCR法克隆K562细胞bcr/abl基因断裂点DNA片段,构建pLXSN-bcr/abl表达载体;阳离子脂质体法将重组体...
【关键词】 DNA,互补；逆转录病毒科/遗传学；质粒；
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【中文期刊】 王洛夫 靳风烁 等 《第三军医大学学报》 2009年31卷6期 515-517页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 将前列腺特异性启动子驱动的自杀基因导入到雄激素非依赖性前列腺癌(androgen independent prostale Cancer,ALPC)细胞,观察其对AIPC细胞的杀伤作用.方法 将rPB-DR(6)启动子驱动的胞嘧啶脱氨...
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【中文期刊】 王丛笑 赵跃然 等 《中华肿瘤防治杂志》 2009年16卷18期 1391-1393页ISTICPKUCA
【摘要】 目的:构建编码反叉人端粒酶RNA组分的重组逆转录病毒栽体,以用于肿瘤的基因治疗.方法:用PCR方法获得目的基因一人端粒酶RNA组分(hTERC),酶切分析及DNA测序进行鉴定,用T4连接酶连接酶切产物,PCR以及EcoR1和BamH1双酶切...
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- 方法：
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【中文期刊】 王征 陈治中 等 《中华检验医学杂志》 2009年32卷2期 214-216页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 <篇首> 逆转录病毒载体广泛用于基因靶向治疗,干细胞基因工程,以及感染其他方法难以转染的细胞系,如某些肿瘤细胞,神经细胞,原代培养细胞等.重组小鼠干细胞病毒(recombinant murine stem cell virus,rMSCV)是一...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 肖时湘 张宁 《中国生物工程杂志》 2009年29卷11期 7-11页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建表达重组人骨形成蛋白7(bone morphogenic protein 7,BMP7)基因的重组逆转录病毒,观察其对人肝癌细胞HepG2的凋亡诱导活性,并探讨其作用机制.方法:克隆BMP7基因,以loxP同源重组法构成逆转录病毒...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 蒋奎荣 苗毅 等 《中华肝胆外科杂志》 2008年14卷7期 485-488页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 探讨反义K-ras癌基因对胰腺癌细胞增殖和凋亡及Fas/FasL、Bcl-2、Bax表达的影响.方法 将重组逆转录病毒载体pLXSN转染包装细胞PT-67,获得重组逆转录病毒.在细胞和动物水平将该重组逆转录病毒分别感染PC-3和BxP...
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