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【中文期刊】 邢德峰 李新玲 等 《中国生物工程杂志》 2002年22卷5期 75-78页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 从固体平板挑取转化带有目的基因的单菌落,用特异引物通过聚合酶链式反应可直接扩增和标记目的基因,不需经过菌的液体培养、质粒提取和酶解反应等复杂过程,能快速获得目的基因扩增产物和进行目的基因探针的标记.
【关键词】 聚合酶链式反应; 原位标记法; PCR-DIG标记法;
【中文期刊】 刘玉清 陆立鹤 等 《中国分子心脏病学杂志》 2003年2期 100-103页 ISTICCA
【摘要】 建立亚急性和慢性心衰SD大鼠模型,用RNA-RNA原位杂交方法观察新基因FWA116在心脏组织的表达.以重组质粒FWA116/PGEM-T线性cDNA为模板,在T7或SP6RNA聚合酶作用下,体外合成地高辛(DIG)半抗原标记的FWA116...
【关键词】 地高辛(DIG)标记; cRNA探针; 原位杂交;
【中文期刊】 陆苹 李晖 等 《上海免疫学杂志》 2001年21卷6期 324-326页 ISTIC
【摘要】 采自上海郊县某发病鸡场的法氏囊病料,用单克隆抗体(McAb)沉淀法从冻融的上清液提纯IBD病毒.用SDS-蛋白酶K法提纯核酸,得到高纯度的IBDV RNA后,再用特异性引物进行逆转录和PCR扩增,得到长度为147bp的IBDV cDNA片段...
【中文期刊】 唐恩洁 杨宗琪 等 《川北医学院学报》 2000年15卷3期 1-3页 ISTICCA
【摘要】 为探索SLE发生、发展与Fas表达的关系,本文采用降落PCR技术、分子克隆技术和Fas特异性引物,将从人肝细胞cDNA文库中扩增的Fas cDNA插入T- easy vector中,转染JM109,经耐药性和lacZ插入失活筛选,快速细胞裂...
【中文期刊】 王进科 吴婷婷 等 《南京师大学报(自然科学版)》 2000年23卷2期 94-96,101页
【摘要】 运用Hae Ⅲ/33.6、HaeⅢ/33.15、Hinf Ⅰ/33.6、Hinf Ⅰ/33.15 4种限制酶/探针组合对奥利亚罗非鱼、美国尼罗罗非鱼、沙市尼罗罗非鱼三种群体罗非鱼进行非放射性DNA指纹图谱研究,结果表明在三种罗非鱼群体中4种...
【中文期刊】 倪灿荣 张顺民 《诊断病理学杂志》 2011年18卷3期 封3页 ISTIC
【摘要】 <篇首> 本文着重介绍应用GS无醛无苯全程处理液制备的石蜡切片进行HE染色、免疫组化染色、免疫荧光组化双重标记和原位杂交效果的比较. 1材料与方法 1.1材料 300例人体组织标本,100例实验动物组织样本. 1.2试剂 ①GS标本套...
【中文期刊】 霍涌玮 邱曙东 等 《西安交通大学学报(医学版)》 2011年32卷1期 131-134页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 研究制备地高辛(DIG)标记的Tex13(testis expressed gene 13)基因非放射性原位杂交探针,用于检测小鼠性腺Tex13基因的表达.方法 采用RT-PCR方法扩增Tex13靶序列,将其插入带SP6和T7 RNA...
【中文期刊】 李艳欢 吴新荣 《生物学杂志》 2010年27卷3期 53-55,87页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 克隆斑马鱼基质金属蛋白酶11b(MMP11b)基因,并研究其在斑马鱼胚胎早期发育中的时空表达状况.收集不同发育时期的斑马鱼胚胎,制备DIG标记的MMP11b RNA探针,采用全胚胎原位杂交方法研究MMP11b基因在斑马鱼胚胎的表达.MMP1...
【关键词】 斑马鱼; 基质金属蛋白酶11b; 原位杂交;
【学位论文】 作者: 马春泉 导师:李海英 黑龙江大学 生物学 生物化学与分子生物学(硕士) 2005年
【摘要】 本文在栽培甜菜与白花甜菜连续杂交和回交的过程中,分离到具有无融合生殖特性的带有白花甜菜9号染色体的M14品系,在连续四代的染色体传递率分析中发现,根据对M14遗传学及胚胎学研究结果,采用抑制消减杂交技术,在甜菜花期发育的三个关键时期进行取材...
【学位论文】 作者: 石宏 导师:毕胜利 北华大学 临床医学 临床检验诊断学(硕士) 2000年
【摘要】 为了建立丙肝病毒(HCV)感染者血清HCV RNA含量的检测方法,进而研究其临床应用价值.本课题采用地高辛掺入法对血清HCV RNA进行定量检测.即在逆转录PCR的过程中加入地高辛标记的Dutp(DIG-DUTP),使其渗入到PCR产物中,...
【关键词】 丙肝病毒(HCV); 地高辛标记(DIG-DUTP);
【中文期刊】 韩勇军 吴新荣 《广东药学院学报》 2010年26卷6期 628-631页 ISTICCA
【摘要】 目的 克隆斑马鱼COX-1、COX-2a基因,研究其在斑马鱼胚胎早期发育中的表达情况.方法 提取24 h斑马鱼胚胎的总RNA,制备DIG标记的COX-1、COX-2a RNA反义探针,整胚原位杂交研究COX-1、COX-2a在斑马鱼胚胎早期...
【中文期刊】 赵稳兴 梁祟礼 等 《中国应用生理学杂志》 2001年17卷3期 305-307页 MEDLINEISTICCSCDCA
【摘要】 目的:建立一种新的前胶原基因探针制备方法,并用其检测HSC的前胶原mRN A表达。方法:从NCBI Gene Bank查询Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型前胶原基因的序列,根据基因序列用OLIGO软件设计其引物;RT-PCR扩增基因,并用不对称PCR方法和DI...
【中文期刊】 王东东 顾节清 等 《中国畜牧兽医》 2010年37卷3期 167-170页
【摘要】 本研究旨在运用原位杂交检测方法检测鸡的肿瘤病.根据GenBank中登录的MDV、ALV-J和REV参考毒株序列,设计并合成3对引物,经PCR方法扩增出相应的片段,并进行了克隆测序.将测序正确的片段亚克隆至pSPT-18,经转录得到DIG标记...
【中文期刊】 张永霞 王金福 等 《中国畜牧兽医》 2010年37卷12期 229-231页
【摘要】 N蛋白是犬瘟热病毒核衣壳的主要构成成分,又是保守性较强的免疫原性蛋白.本研究对犬瘟热病毒N基因重组质粒酶切、凝胶回收目的DNA进行DIG标记制备探针,用此探针斑点杂交检测40只疑似犬瘟热患病犬鼻液和20只病死犬脾脏、肝脏、心脏、肺脏、肾脏、...
【中文期刊】 林石明 陈青 等 《检验检疫科学》 2004年14卷z1期 42-44页
【摘要】 根据百合无症病毒(LSV)的核苷酸序列设计一对特异性引物,利用RT-PCR技术扩增得到了一条与目的片段大小一致的条带;进一步克隆测序表明,该序列与已知的LSV序列有96%的同源性.用随机引物法合成地高辛标记的cDNA探针,建立了核酸斑点杂交...
【关键词】 LSV; RT-PCR; Dig-cDNA探针;
【中文期刊】 韩勇军 吴新荣 《第三军医大学学报》 2011年33卷4期 389-391页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 克隆斑马鱼前列腺素E合酶3a(prostaglandin E synthase 3a, ptges3a)基因,研究其在斑马鱼胚胎早期发育中的表达情况.方法 提取斑马鱼胚胎的总RNA,制备DIG标记的ptges3a RNA反义探针,整胚...
【中文期刊】 王兆芬 蒋秀高 等 《中国媒介生物学及控制杂志》 2009年20卷4期 341-343页 ISTICCA
【摘要】 目的 用Dot blotting杂交技术检测蛙类钩端螺旋体(钩体),为动物钩体的流行病学监测和调查提供一种比较理想的方法.方法 根据钩体赖株DNA合成1对flaB引物,用PCR技术对钩体菌株、疫区现场蛙肾材料等进行flaB基因扩增,用地高辛...