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            【中文期刊】 张晓 张锐  等 《生物技术通报》 2011年9期 205-210页 ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目前,基于DIG-化学发光法的Southern blot技术已在生物实验室广泛应用,但在试验过程中经常会遇到背景黑、目的信号弱等问题,以致不能获得理想结果.在棉花线拉体基因组RFLP分析过程中结合前人经验对基于DIG -化学发光法的Sout...

            【关键词】 Southern blotDIG标记化学发光法

            浏览:184 被引:10 下载:0

            【中文期刊】 邢德峰 李新玲  等 《中国生物工程杂志》 2002年22卷5期 75-78页 ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 从固体平板挑取转化带有目的基因的单菌落,用特异引物通过聚合酶链式反应可直接扩增和标记目的基因,不需经过菌的液体培养、质粒提取和酶解反应等复杂过程,能快速获得目的基因扩增产物和进行目的基因探针的标记.

            【关键词】 聚合酶链式反应原位标记PCR-DIG标记

            浏览:114 被引:2 下载:0

            【中文期刊】 刘玉清 陆立鹤  等 《中国分子心脏病学杂志》 2003年2期 100-103页 ISTICCA

            【摘要】 建立亚急性和慢性心衰SD大鼠模型,用RNA-RNA原位杂交方法观察新基因FWA116在心脏组织的表达.以重组质粒FWA116/PGEM-T线性cDNA为模板,在T7或SP6RNA聚合酶作用下,体外合成地高辛(DIG)半抗原标记的FWA116...

            【关键词】 地高辛(DIG)标记cRNA探针原位杂交

            浏览:235 被引:0 下载:0

            【中文期刊】 陆苹 李晖  等 《上海免疫学杂志》 2001年21卷6期 324-326页 ISTIC

            【摘要】 采自上海郊县某发病鸡场的法氏囊病料,用单克隆抗体(McAb)沉淀法从冻融的上清液提纯IBD病毒.用SDS-蛋白酶K法提纯核酸,得到高纯度的IBDV RNA后,再用特异性引物进行逆转录和PCR扩增,得到长度为147bp的IBDV cDNA片段...

            【关键词】 IBDVBT-PCRDIG-标记探针

            浏览:124 被引:3 下载:0

            【中文期刊】 唐恩洁 杨宗琪  等 《川北医学院学报》 2000年15卷3期 1-3页 ISTICCA

            【摘要】 为探索SLE发生、发展与Fas表达的关系,本文采用降落PCR技术、分子克隆技术和Fas特异性引物,将从人肝细胞cDNA文库中扩增的Fas cDNA插入T- easy vector中,转染JM109,经耐药性和lacZ插入失活筛选,快速细胞裂...

            【关键词】 FascDNA文库Dig标记

            浏览:155 被引:22 下载:0

            【中文期刊】 王进科 吴婷婷  等 《南京师大学报(自然科学版)》 2000年23卷2期 94-96,101页

            【摘要】 运用Hae Ⅲ/33.6、HaeⅢ/33.15、Hinf Ⅰ/33.6、Hinf Ⅰ/33.15 4种限制酶/探针组合对奥利亚罗非鱼、美国尼罗罗非鱼、沙市尼罗罗非鱼三种群体罗非鱼进行非放射性DNA指纹图谱研究,结果表明在三种罗非鱼群体中4种...

            【关键词】 DNA指纹图谱罗非鱼DIG标记

            浏览:0 被引:2 下载:0

            【中文期刊】 李季 鲁旭  等 《生物技术通报》 2014年8期 76-81页 ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 以地高辛标记的Southern杂交技术已广泛应用于多个物种中。选择橡胶树为材料,就基因组DNA的提取、探针标记方法的选择以及具体的杂交操作过程等方面对该体系进行了优化。结果表明,至少40μg高质量的DNA在300μL的大酶切体系中,酶切12...

            【关键词】 橡胶树转基因Southern blot

            OA
            浏览:175 被引:4 下载:0

            【中文期刊】 倪灿荣 张顺民  《诊断病理学杂志》 2011年18卷3期 封3页 ISTIC

            【摘要】 <篇首> 本文着重介绍应用GS无醛无苯全程处理液制备的石蜡切片进行HE染色、免疫组化染色、免疫荧光组化双重标记和原位杂交效果的比较. 1材料与方法 1.1材料 300例人体组织标本,100例实验动物组织样本. 1.2试剂 ①GS标本套...

            【关键词】 环保型试剂HEIHC

            浏览:309 被引:1 下载:27

            【中文期刊】 霍涌玮 邱曙东  等 《西安交通大学学报(医学版)》 2011年32卷1期 131-134页 ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 研究制备地高辛(DIG)标记的Tex13(testis expressed gene 13)基因非放射性原位杂交探针,用于检测小鼠性腺Tex13基因的表达.方法 采用RT-PCR方法扩增Tex13靶序列,将其插入带SP6和T7 RNA...

            【关键词】 Tex13生殖细胞减数分裂

            浏览:174 被引:0 下载:8

            【中文期刊】 李艳欢 吴新荣  《生物学杂志》 2010年27卷3期 53-55,87页 ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 克隆斑马鱼基质金属蛋白酶11b(MMP11b)基因,并研究其在斑马鱼胚胎早期发育中的时空表达状况.收集不同发育时期的斑马鱼胚胎,制备DIG标记的MMP11b RNA探针,采用全胚胎原位杂交方法研究MMP11b基因在斑马鱼胚胎的表达.MMP1...

            【关键词】 斑马鱼基质金属蛋白酶11b原位杂交

            浏览:173 被引:1 下载:6

            【学位论文】 作者: 刘芳 导师:高必达 王锡峰  湖南农业大学  植物保护 植物病理学(硕士) 2005年

            【摘要】 本研究运用反转录PCR与5’和3’RACE的方法,分别首次测定了在中国分离得到由麦长管蚜和麦二叉蚜和禾谷溢管蚜传播的大麦黄矮病毒PAV的基因组核苷酸全序列(GenBank登录号:AY855920)以及辣椒轻斑驳病毒中国分离物的基因组核苷.....

            【关键词】 大麦黄矮病毒基因组全序列

            浏览:0 被引:8 下载:0

            【学位论文】 作者: 马春泉 导师:李海英  黑龙江大学  生物学 生物化学与分子生物学(硕士) 2005年

            【摘要】 本文在栽培甜菜与白花甜菜连续杂交和回交的过程中,分离到具有无融合生殖特性的带有白花甜菜9号染色体的M14品系,在连续四代的染色体传递率分析中发现,根据对M14遗传学及胚胎学研究结果,采用抑制消减杂交技术,在甜菜花期发育的三个关键时期进行取材...

            【关键词】 无融合生殖抑制消减杂交

            浏览:0 被引:13 下载:0

            【学位论文】 作者: 石宏 导师:毕胜利  北华大学  临床医学 临床检验诊断学(硕士) 2000年

            【摘要】 为了建立丙肝病毒(HCV)感染者血清HCV RNA含量的检测方法,进而研究其临床应用价值.本课题采用地高辛掺入法对血清HCV RNA进行定量检测.即在逆转录PCR的过程中加入地高辛标记的Dutp(DIG-DUTP),使其渗入到PCR产物中,...

            【关键词】 丙肝病毒(HCV)地高辛标记(DIG-DUTP)

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            浏览:0 被引:0 下载:0

            【中文期刊】 韩勇军 吴新荣  《广东药学院学报》 2010年26卷6期 628-631页 ISTICCA

            【摘要】 目的 克隆斑马鱼COX-1、COX-2a基因,研究其在斑马鱼胚胎早期发育中的表达情况.方法 提取24 h斑马鱼胚胎的总RNA,制备DIG标记的COX-1、COX-2a RNA反义探针,整胚原位杂交研究COX-1、COX-2a在斑马鱼胚胎早期...

            【关键词】 斑马鱼COX-1基因COX-2a基因

            浏览:172 被引:8 下载:5

            【中文期刊】 赵稳兴 梁祟礼  等 《中国应用生理学杂志》 2001年17卷3期 305-307页 MEDLINEISTICCSCDCA

            【摘要】 目的:建立一种新的前胶原基因探针制备方法,并用其检测HSC的前胶原mRN A表达。方法:从NCBI Gene Bank查询Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型前胶原基因的序列,根据基因序列用OLIGO软件设计其引物;RT-PCR扩增基因,并用不对称PCR方法和DI...

            【关键词】 前胶原基因探针DIG

            浏览:126 被引:0 下载:0

            【中文期刊】 王东东 顾节清  等 《中国畜牧兽医》 2010年37卷3期 167-170页

            【摘要】 本研究旨在运用原位杂交检测方法检测鸡的肿瘤病.根据GenBank中登录的MDV、ALV-J和REV参考毒株序列,设计并合成3对引物,经PCR方法扩增出相应的片段,并进行了克隆测序.将测序正确的片段亚克隆至pSPT-18,经转录得到DIG标记...

            【关键词】 原位杂交cRNA探针地高辛

            浏览:1 被引:3 下载:0

            【中文期刊】 张永霞 王金福  等 《中国畜牧兽医》 2010年37卷12期 229-231页

            【摘要】 N蛋白是犬瘟热病毒核衣壳的主要构成成分,又是保守性较强的免疫原性蛋白.本研究对犬瘟热病毒N基因重组质粒酶切、凝胶回收目的DNA进行DIG标记制备探针,用此探针斑点杂交检测40只疑似犬瘟热患病犬鼻液和20只病死犬脾脏、肝脏、心脏、肺脏、肾脏、...

            【关键词】 斑点杂交犬瘟热病毒N基因

            浏览:1 被引:7 下载:0

            【中文期刊】 林石明 陈青  等 《检验检疫科学》 2004年14卷z1期 42-44页

            【摘要】 根据百合无症病毒(LSV)的核苷酸序列设计一对特异性引物,利用RT-PCR技术扩增得到了一条与目的片段大小一致的条带;进一步克隆测序表明,该序列与已知的LSV序列有96%的同源性.用随机引物法合成地高辛标记的cDNA探针,建立了核酸斑点杂交...

            【关键词】 LSVRT-PCRDig-cDNA探针

            浏览:0 被引:12 下载:0

            【中文期刊】 韩勇军 吴新荣  《第三军医大学学报》 2011年33卷4期 389-391页 ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 克隆斑马鱼前列腺素E合酶3a(prostaglandin E synthase 3a, ptges3a)基因,研究其在斑马鱼胚胎早期发育中的表达情况.方法 提取斑马鱼胚胎的总RNA,制备DIG标记的ptges3a RNA反义探针,整胚...

            【关键词】 斑马鱼前列腺素E合成酶胚胎发育

            OA
            浏览:174 被引:0 下载:0

            【中文期刊】 王兆芬 蒋秀高  等 《中国媒介生物学及控制杂志》 2009年20卷4期 341-343页 ISTICCA

            【摘要】 目的 用Dot blotting杂交技术检测蛙类钩端螺旋体(钩体),为动物钩体的流行病学监测和调查提供一种比较理想的方法.方法 根据钩体赖株DNA合成1对flaB引物,用PCR技术对钩体菌株、疫区现场蛙肾材料等进行flaB基因扩增,用地高辛...

            【关键词】 斑点核酸杂交钩端螺旋体

            OA
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