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【中文期刊】 邓阳 张毕奎 等 《中国医院药学杂志》 2015年35卷4期 283-288页 ISTICPKUCA
【摘要】 目的:建立测定小鼠肝脏中16种胆汁酸浓度的LC-MS/MS法,并将测定结果应用于比较Nrf2野生型和基因敲除型小鼠胆汁酸代谢谱.方法:小鼠肝脏样品加入70%乙腈匀浆,用甲醇沉淀匀浆液中的蛋白并高速离心,取上清液置进样瓶,用XtimateTM...
【中文期刊】 刘宣 季青 等 《第二军医大学学报》 2015年36卷3期 256-260页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 利用CRISPR/Cas9基因编辑技术建立miRNA敲除小鼠模型.方法 根据miRNA基因序列,设计针对miR-301a的gRNA引物序列(双靶点),PCR扩增获得针对miR-301a的体外转录模板DNA和构建Cas9体外转录模板,然...
【关键词】 CRISPR/Cas9; 基因编辑; miR-301a;
【中文期刊】 龚秀芳 胡丹 等 《微生物学通报》 2015年42卷9期 1717-1726页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 [目的]通过构建2型猪链球菌(SS2)强毒株05ZYH33的SSU0448基因缺失突变株△0448和互补株C△0448,探索SSU0448基因缺失对细菌基本生物学特性和细菌毒力的影响.[方法]用同源重组基因敲除方法构建筛选强毒株05ZYH3...
【中文期刊】 安朝 徐志云 《第二军医大学学报》 2015年36卷11期 1238-1241页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 急性主动脉夹层(AAD)是由主动脉壁中层撕裂所致的急症,往往高度致命.目前对于遗传性AAD的发病机制了解较多,但非遗传性AAD的发病机制仍不明确.肌腱蛋白-C(TnC)为细胞外基质(ECM)中的一种六聚体糖蛋白,有多项研究表明组织受机械压力...
【中文期刊】 陈恬 李明 等 《微生物学通报》 2014年41卷4期 794-801页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 [目的]构建高致病性2型猪链球菌05ZYH33菌株plcR基因敲除株,通过比较突变株与野生株生物学特性的差异,研究plcR基因在2型猪链球菌致病过程中的作用.[方法]利用同源重组技术敲除plcR基因,多重交叉PCR及RT-PCR鉴定并测序验...
【中文期刊】 任国君 孙杰 等 《吉林大学学报(医学版)》 2014年4期 753-756页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:利用胰腺β细胞组织特异性生长激素受体(GHR)基因敲除小鼠结合链脲佐菌素(STZ )诱导1型糖尿病模型,从基因水平研究胰腺β细胞 GHR缺失对1型糖尿病的影响。方法:实验小鼠分4组,包括LLc对照组[胰腺β细胞特异敲除 GHR小鼠(β...
【中文期刊】 严涛 赵锦芳 等 《生物工程学报》 2013年29卷7期 937-945页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 为实现可同时利用木糖和葡萄糖进行生产发酵,以产乙醇的大肠杆菌工程菌SZ470为出发菌株(△pflB,△frdABCD,△ackA,△ldhA),采用同源重组技术,敲除葡萄糖转运基因ptsG,以构建不受葡萄糖抑制效应影响的菌株SZ470P.S...
【中文期刊】 郭欣坤 方慧英 等 《生物工程学报》 2013年29卷9期 1290-1300页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 2,3-丁二醇是克雷伯氏菌发酵产1,3-丙二醇的主要副产物,为减少2,3-丁二醇的产生,利用Red重组技术对克雷伯氏菌2,3-丁二醇合成途径关键酶基因budC和budA进行了敲除.突变株发酵性能实验结果表明,所获得的两株突变株生长性能受到不...
【中文期刊】 张晓雷 毛立群 等 《第二军医大学学报》 2013年34卷6期 671-675页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 构建尿路致病性大肠杆菌(UPEC) W140菌株的黏附素基因iha缺陷株,分析iha基因缺失对UPEC生物膜形成的影响.方法 采用Red重组系统的3种质粒(pKD46、pKD3、pCP20)敲除W140菌株的iha基因.pKD46表达...
【中文期刊】 朱莹 胥武剑 等 《第二军医大学学报》 2013年34卷8期 890-893页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 通过制备Rtn4-A/B基因敲除小鼠,探索Rtn4-B基因的生物学功能.方法 用细菌人工染色体(BAC)载体构建Rtn4-A/B基因打靶载体并使其线性化,通过电转化法将其转入129SvEv品系雄性小鼠胚胎干细胞(embryonic s...
【中文期刊】 兰翀 任丽娜 等 《生物工程学报》 2013年29卷12期 1847-1854页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 在制备转基因家畜过程中的一个关键步骤是使用选择标记基因(Selectable marker genes,SMGs)将转基因整合细胞从大量的正常细胞中筛选出来,这导致了SMGs整合入家畜的基因组内持续传递给后代.SMGs已被证明能够显著影响基...
【中文期刊】 卢利莎 白杨 等 《中国细胞生物学学报》 2015年37卷4期 535-541页 MEDLINEISTICCSCDCA
【关键词】 MEIS2; CRISPR/Cas9系统; 基因敲除;

【中文期刊】 周金伟 王灵慧 等 《中国细胞生物学学报》 2013年35卷11期 1672-1680页 MEDLINEISTICCSCDCA
【关键词】 类转录激活因子效应物(TALE); TALENs; 基因敲除;
【中文期刊】 张海林 程胖 等 《生物工程学报》 2010年26卷3期 297-304页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 利用正负筛选策略(Positive-negative selection,PNS)对中靶细胞进行富集是提高体细胞基因打靶效率常用的策略之一.将动物的朊蛋白基因prnp敲除,使其不能表达朊蛋白(传染性海绵状脑病的致病蛋白),从而使其具有抵抗P...

【中文期刊】 俞凌燕 王毅 等 《中国中药杂志》 2009年34卷3期 336-339页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:提出一种基于"组分剔除"思想的实验研究方法用于发现中药有效组分.方法:组分剔除法借鉴了基因敲除方法的原理,采用与传统活性追踪方法不同的实验流程,通过设计各组分的有序配伍,并采用方差分析等方法判定缺失某一组分对全方药效的影响,最终评价该...
【中文期刊】 叶添文 郑晋华 等 《第二军医大学学报》 2012年33卷1期 10-15页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 建立瞬时性受体电位通道香草酸受体亚型6(Trpv6)基因敲除小鼠模型,为在体研究Trpv6的生物学功能及其与骨代谢关系奠定基础.方法 从Ensembl数据库中获得小鼠Trpv6基因组序列.设计基因敲除策略,构建基因敲除载体pBR322...
【中文期刊】 赵妍 余涛 等 《中国生物化学与分子生物学报》 2010年26卷2期 95-103页 MEDLINEISTICPKUCSCDCABP
【中文期刊】 沈冬钱 冯晓雨 等 《生物工程学报》 2009年25卷9期 1345-1351页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 为了利用大肠杆菌构建模式"细胞工厂",必须了解在构建过程中各种因素的影响.本研究选用敲除了lpdA基因的大肠杆菌作为模型细胞,考察了该突变菌在合成培养基中利用葡萄糖、果糖、木糖和甘露糖累积丙酮酸的能力.结果显示,在初始糖浓度为10 g/L的...
【中文期刊】 李七一 韩旭 等 《南京医科大学学报(自然科学版)》 2009年29卷9期 1237-1241页 ISTICPKUCSCDCA
【关键词】 通心络胶囊; ApoE(-/-)小鼠; 冠状AS;
【中文期刊】 程军 李金平 等 《第三军医大学学报》 2009年31卷13期 1281-1283页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 探讨肝X受体(liver X receptor,LXR)激动剂T0901317对高脂饲养ApoE基因敲除(apolipoprotein E gene knockout,ApoE-/-)小鼠在动脉粥样硬化病变形成的早期动脉壁内C-反应蛋...
【关键词】 肝X受体; ApoE基因敲除小鼠; C-反应蛋白;
【中文期刊】 刘学荣 胡耀敏 等 《新乡医学院学报》 2009年26卷2期 109-111页 ISTICCA
【摘要】 目的 通过脂蛋白脂肪酶(LPL)基因敲除杂合子EVE(+/-)小鼠模型脂质代谢的动态观察,进一步明确LPL在脂代谢中的关键作用.方法 野生型16周龄C57小鼠6只(对照组)、16周龄LPL(+/-)小鼠6只[LPL(+/-)16周龄组]、2...