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【中文期刊】 杨加伟 李伟 等 《遵义医学院学报》 2014年37卷4期 387-392页ISTIC
【摘要】 目的 克隆马铃薯块茎特异性的高效启动子Ppatatin并构建其驱动的人白细胞介素-12(hIL12)植物表达载体.方法 提取马铃薯基因组DNA作为模板,根据Genebank数据库信息设计Ppatatin序列特异性引物,通过PCR扩增获得Pp...
【关键词】 Ppatatin启动子；人白细胞介素-12；表达载体；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 陈观平 汪一帆 等 《温州医学院学报》 2013年43卷11期 719-722,726页ISTICCA
【摘要】 目的:构建植物双元表达载体pMCPO-FC-IL-1ra转化根癌农杆菌GV3101并侵染胡萝卜悬浮细胞,筛选得到的阳性细胞24孔板培养1周后,检测上清中FC-IL-1ra蛋白的表达.方法:用PCR的方法扩增得到含组织型纤溶酶原激活物(tPA...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 徐洁森 魏建和 等 《生物技术通讯》 2012年23卷4期 537-541页ISTICCA
【摘要】 目的:克隆北柴胡中可能参与柴胡皂苷生物合成的细胞色素P450酶基因,构建其过量表达载体,为通过转基因验证其功能奠定基础.方法:在454高通量测序获得5'和3'端部分cDNA序列的基础上,利用LD-PCR方法获得全长cDNA,根据全长cDNA...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 吴家媛 马欣荣 等 《遵义医学院学报》 2011年34卷4期 341-343,347页ISTIC
【摘要】 目的 构建变异链球菌表面蛋白PAc A区与霍乱毒素B亚单位的植物表达载体,为可食嵌合体防龋疫苗的进一步研究提供实验基础.方法从中间载体pBPC55获得含35s启动子、NOS终止子和多克隆位点的片段,定向连接到植物双元表达载体pCAMBIA2...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 于彦婷 任丽 等 《中国医药生物技术》 2011年06卷2期 121-126页ISTIC
【摘要】 目的 探讨SQE基因对人参皂苷合成的影响.方法 根据SQE基因保守区序列,分别设计合成其正反义片段引物行RT PCR扩增,扩增产物分别与pMD 18-T质粒连接后转化Ecoli DH5a,获得的pMD18-TSQE-S、pMD 18-TSQ...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 万小荣 莫爱琼 等 《生物技术》 2010年20卷6期 18-23页ISTICCA
【摘要】 目的:克隆拟南芥AtNCED2基因启动子区域序列,并分析其组织器官特异性及对外界刺激的响应.方法:通过PCR从拟南芥基因组中克隆AtNCED2基因5'侧翼2295bp启动子区域序列(AtNCED2p),并进行生物信息学分析.构建AtNCED...
【关键词】 拟南芥AtNCED2基因；双元载体构建；启动子克隆及活性分析；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 沙丽娜 郭兆奎 等 《生物技术》 2009年19卷4期 6-9页ISTICCA
【摘要】 目的:对拟南芥CBF4基因序列进行克隆.方法:用限制性内切酶将CBF4基因从pMD18-T CBF4载体上切下,定向连接到含超强启动子的pC2301-35S-OCS表达载体上,成功构建了CBF4基因植物表达载体pC2301-35S-OCS-...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 邓力华 于元杰 等 《生物技术》 2008年18卷1期 9-13页ISTICCA
【摘要】 目的:为了获得水稻的广谱抗虫性,同时也避免由潮霉素抗性基因引起的安全性问题.构建以抗除草剂基因(Epsps 基因)为筛选标记的多基因抗虫植物表达载体 pCTSK.方法:以双元载体pCAMBIA1300为基础,将潮霉素抗性基因hpt替换成携带...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 佟友丽 赵飞 等 《生物技术通讯》 2007年18卷2期 205-208页ISTICCA
【摘要】 目的:研究转录因子DREB1A在植物抗渗透胁迫反应中的作用,并探讨利用Gateway克隆技术构建植物表达载体的方法.方法:根据GenBank中登录的DREBlA基因的全长mRNA序列设计引物,克隆了拟南芥的转录因子DREBIA基因.根据Ga...
【关键词】 转录因子DREB1A；Gateway克隆技术；植物表达载体；
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 郝丽梅 龚伟 等 《生物技术通讯》 2006年17卷6期 888-890页ISTICCA
【摘要】 目的:建立农杆菌Ti质粒介导的转化赤霉菌的新方法.方法:以农杆菌Ti质粒pCAMBIA0390为基础,构建带有潮霉素抗性基因表达盒的双元载体,并用农杆菌介导的方法转化赤霉菌.结果:构建了双元载体pCAMBIA0390-hph(PgpdA),...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 李莹 刘宝辉 等 《生物信息学》 2005年3卷2期 66-68,72页ISTIC
【摘要】 利用RT-PCR方法从玉米幼苗叶片总RNA中克隆出玉米的蔗糖磷酸合成酶(SPS)基因的全长cDNA片段.该片段与文献报道的序列具有99%的同源性.并分别构建了以双GaMV35S为启动子,以Tnos为终止子的植物双元表达载体PBISPS和以P...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 彭志强 俞守义 等 《生物技术》 2001年11卷4期 6-8页ISTICCA
【摘要】 构建含CTB基因的植物双元表达载体.采用高保真PCR方法调出CTB基因,经测序证实核酸序列正确后,再亚克隆到含植物表达调控原件的载体上,采用冻融法和电击法,将含CTB的植物表达载体转入根癌农杆菌中.通过一系列分子克隆的方法获得含CTB基因的...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 彭志强 贺竹梅 等 《生命科学研究》 2001年5卷3期 259-264页ISTICCA
【摘要】 将霍乱肠毒素B亚单位(CT-B)基因及内质网引导序列(SEKDEL)克隆到质粒pRTL2和pBI121中,分别构建植物双元表达载体pBI-CTB和pBI-CTBK, CT-B 基因由Ca35S 启动子控制表达. 采用叶盘法经根癌农杆菌介导转...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 莫爱琼 文了 等 《华南师范大学学报（自然科学版）》 2016年48卷4期 50-56页
【摘要】 根据番茄基因组DNA序列信息设计引物进行PCR扩增了Micro-Tom中番茄红素β-环化酶(Lycopeneβ-cyclase,LcyB)基因起始密码子上游1 534 bp启动子区域序列(LcyBp),生物信息学分析表明,该启动子序列中存在...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 尹蕾 唐凯悦 等 《湖北农业科学》 2016年3期 759-763页
【摘要】 依据RNA干扰机制构建多病毒基因靶向的RNA干涉双元载体系统,为培育抗病毒复合侵染的番茄品种提供遗传转化载体.以烟草病毒病(TMV)、黄瓜花叶病毒(CMV)病毒外壳蛋白基因作为RNA干扰靶标基因,针对病毒株系间外壳蛋白基因同源区域设计靶序列...
【关键词】 烟草病毒病(TMV)；黄瓜花叶病毒(CMV)；番茄；
- 概要：
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- 结论：
【中文期刊】 李頔 唐晓凤 等 《四川大学学报（自然科学版）》 2015年52卷4期 871-878页
【摘要】 研究通过对番茄MSI2-like蛋白序列与其它模式植物的蛋白序列进行同源性比对,发现番茄MSI2-like与马铃薯的同源性最高;另外还预测了其蛋白质的理化性质及三级结构.酵母双杂交实验证明,MSI2-like与UV-Damaged DNA ...
【关键词】 番茄；MSI2-like基因；酵母双杂交；
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 梁芸 魏凤菊 《华北农学报》 2015年4期 43-46页
【摘要】 为了研究拟南芥 CPK10发挥功能的分子机理，通过 PCR 扩增克隆了 CPK10基因，将该基因连接到带有FLAG 和 HA 标签的双元串联亲和层析载体上，构建成 pCM1307-3FLAG-3HA-CPK10植物表达载体，进而通过 PEG...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 张桂芳 丁在松 《北京农业》 2015年5期 1-2页
【摘要】 从玉米基因组DNA中克隆了玉米C4型磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶（Phosphoenolpyruvate Carboxylase，PEPC）基因的启动子pZmp，将其与稗草根型PEPCase基因（Ecppc）联接，以Nos为终止子装入双元载体pC...
【关键词】 磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶；玉米；启动子；
- 概要：
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【中文期刊】 季必云 安颖慧 等 《上海交通大学学报（农业科学版）》 2014年32卷5期 1-4,11页
【摘要】 CAL编码MADS-box转录因子,参与控制花分生组织的特性,在拟南芥中发生突变时没有明显的表型;不过花椰菜的BobCAL由于终止密码子提前出现导致花球的形成,而甘蓝的BoCAL可以编码完整CAL蛋白;可见,CAL同源基因在十字花科不同种的...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 刘天巍 任丽 等 《东北农业大学学报》 2013年4期 83-87页
【摘要】 在克隆人参鲨烯环氧酶基因保守区约364 bp片段基础上，构建该基因的RNAi植物双元表达载体pMHZ111-SE，并利用农杆菌介导的遗传转化方法转化人参愈伤组织，通过HPLC方法测定转基因和非转基因人参愈伤组织中6种单体皂苷的含量。结果表明...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 李春艳 刘建宁 等 《家畜生态学报》 2013年34卷1期 25-28页
【摘要】 从东方山羊豆(Galega.orientalis L.)中克隆出的GoMIPS(肌醇-1-磷酸合成酶)基因序列设计合成1对带有NeoI和SpeI酶切位点的引物,用RT-PCR方法从东方山羊豆幼嫩叶片总RNA中扩增出GoMIPS基因的eDNA...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 曹旸 刘永翔 等 《西南农业学报》 2013年26卷6期 2509-2513页
【摘要】 为给谢瓦氏曲霉间型变种(Aspergillus chevalieri var.intermedius)多基因功能的研究提供新的选择标记,利用MYA培养基测G418敏感性后,以质粒pcDNA3.1(+)为中间载体构建nptⅡ基因表达元件,利用...
- 概要：
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【中文期刊】 李继刚 陈永利 等 《河南农业科学》 2013年42卷5期 110-113页
【摘要】 为了改进农杆菌介导丝状真菌遗传转化用的Ti双元载体,将质粒pUCATPH上真菌trpC基因启动子驱动的潮霉素B抗性基因(hygB)表达盒转移到Ti质粒pPZP111上,构建成用于丝状真菌遗传转化的Ti载体pATZ.将植物表达载体pDL916...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 胡兰 隋世慧 等 《中国兽医杂志》 2013年49卷7期 11-13,17页
【摘要】 为了建立有效抑制MSTN基因表达的方法,本试验利用基因克隆技术构建MSTN RNAi双元表达载体,并利用脂质体介导转染成肌细胞、用SDS-PAGE和Western blottingf法检测蛋白质的表达.试验结果表明,以TA载体为克隆载体,p...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 张贵林 李臻 等 《山东农业科学》 2013年45卷1期 19-24页
【摘要】 针对水稻黑条矮缩病毒S6、S10两条RNA双链,参考相关文献,设计了2对引物,通过RT-PCR获得了2条干扰片段,将这些干扰片段分别构建到RNA干扰载体中,进一步将整个RNA干扰片段构建入以玉米泛素Ubi为启动子、以生物安全性的bar基因为...
【关键词】 水稻黑条矮缩病；RNA干扰(RNAi)；Ubi启动子；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 马成成 刘学群 等 《广东农业科学》 2012年39卷13期 146-148,封4页
【摘要】 利用烟草糖基转移酶基因sm-ngt1序列的氨基端(N’-GT)和羧基端(C’-GT)的部分序列与双元载体pCAMBIA1302 连接,构建了含有N ’-GT、C’-GT的缺失片段与绿色荧光蛋白(GFP)的融合基因.通过农杆菌介导的叶盘转化法...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 岳智亮 马惠斌 等 《河北大学学报（自然科学版）》 2012年32卷4期 393-398页
【摘要】 利用RNAi技术,构建了AtPLC4基因的RNAi双元载体,并进行了拟南芥的遗传转化,通过抗性筛选及PCR鉴定,获得20株遗传转化株系.进一步通过RT-PCR检测,得到3株AtPLC4基因表达降低的转基因植株,为运用反向遗传学的方法深入研究...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 熊磊 谭艳平 等 《农业科学与技术：英文版》 2012年13卷10期 2055-2057页
【摘要】 [目的]克隆水稻线粒体基因atp6,构建转基因表达载体,获得35S∷Rf1b5′∷atp6转基因水稻植株。[方法]设计目的基因的特异引物,采用TRIzol法提取水稻叶片总RNA,借助Toyobo反转录试剂盒反转录为cDNA,通过PCR扩增得...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 刘萍 郑慧玲 等 《湖北农业科学》 2012年51卷24期 5801-5803,5816页
【摘要】 以潮霉素抗性基因hph为筛选标记,以双元载体pPK2为基本骨架,将增强型绿色荧光蛋白基因egfp置于组成型启动子PgpdA和色氨酸C终止子TtrpC之间,构建了组成性表达egfp的载体pPK2EGFP,利用根癌农杆菌介导的遗传转化法,转入贵...
【关键词】 贵阳腐霉(Pythium guiyangense)；基因转化；绿色荧光蛋白；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 熊磊 谭艳平 等 《安徽农业科学》 2012年40卷25期 12376-12378页
【摘要】 [目的]克隆水稻线粒体基因atp6,构建转基因表达载体,获得35S∷Rf1b5′∷atp6转基因水稻植株.[方法]设计目的基因的特异引物,采用TRIzol法提取水稻叶片总RNA,借助Toyobo反转录试剂盒反转录为cDNA,通过PCR扩增得...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 冷翔 谭艳平 等 《广东农业科学》 2012年39卷12期 1-2,7,封2页
【摘要】 以TRIzol法提取的水稻幼苗总RNA反转录的cDNA为模板,以重组PCR技术扩增得到nad5的ORF.构建含有线粒体信号肽Rf1b5′的nad5双元超表达载体pCAMBIA1305.1∷35S∷Rflb5′∷nad5,以农杆菌介导的愈伤组...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 李臻 张贵林 等 《华北农学报》 2012年27卷4期 144-148页
【摘要】 水稻黑条矮缩病是由水稻黑条矮缩病毒引起的水稻病害,该病可导致病株生长迟缓、矮化,抽穗结实困难,严重影响了水稻的生产.在水稻黑条矮缩病毒基因组不同双链RNA序列的基础上,分别设计了5对特异性引物,通过RT-PCR获得了相应片段,结合基因沉默的...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 闫晓红 王慧 等 《分子植物育种》 2012年10卷3期 371-379页
【摘要】 在农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导的植物遗传转化中,常常需要用到植物表达双元载体.为便于基因工程操作并能在获得转基因植物后方便将标记基因删除,我们构建了植物表达双元载体pYBA100,以满足用于生产安全转基因...
【关键词】 LoxP-FRT融合位点；植物表达双元载体；农杆菌介导；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 刘南南 王宝琴 等 《广东农业科学》 2012年39卷16期 149-151页
【摘要】 参考GenBank中发布的水稻品种日本晴位于10号染色体的F3;H基因序列设计特异引物,用PCR方法从水稻基因组中克隆F3'H基因片段,并将该片段克隆到pMD18-T载体进行测序和序列分析.结果表明,克隆的F3'H基因全长1789 bp,G...
【关键词】 水稻；类黄酮3'-羟化酶(F3'H)基因；PCR扩增；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 王贵君 郑月 等 《安徽农业科学》 2011年39卷17期 10194-10196页
【摘要】 [目的]克隆颠茄(Atropa belladonna)H6H基因并构建高效植物表达载体.[方法]采用RT-PCR方法从颠茄中克隆莨菪碱-6β-羟化酶和1,4-丁二胺-氮-甲基转移酶基因编码区,插入经改造后获得双元三价植物高效表达载体p230...
【关键词】 颠茄；莨菪碱-6β-羟化酶；高效植物表达载体；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 李炜 谭艳平 等 《农业科学与技术：英文版》 2011年12卷7期 963-965页
【摘要】 [目的]克隆线粒体相关基因nad1,获得转nad1的转基因水稻植株。[方法]采用TRIzol法提取水稻幼苗总RNA,以反转录的cDNA为模板,扩增得到nad1;将nad1接到线粒体信号肽Rf1b的5 （Rf1b5 ）,装载到pCAMBIA1...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 李君武 宫君原 等 《华北农学报》 2011年26卷2期 1-6页
【摘要】 构建包含编码结核杆菌Esat6基因和乙肝病毒大包膜蛋白(L蛋白)基因的植物双元表达载体,并转化根癌农杆菌LBA4404.分别以质粒pPIC9K-L和结核杆菌基因组为模板进行PCR扩增,获得L和Esat6基因,然后运用部分重叠聚合酶链式反应扩...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 李海青 柳絮 等 《华北农学报》 2011年26卷2期 114-118页
【摘要】 白藜芦醇是植物遭受胁迫时自身分泌的一种可抵御病菌感染的抗菌素,对真菌具有一定的抑制作用.而白藜芦醇合成酶在白藜芦醇合成途径中具有关键性的作用.水稻稻瘟病作为一种由真菌引起的严重病害,具有高发性、毁灭性的特点,对水稻品质及生产危害极大.本研究...
【关键词】 白藜芦醇；白藜芦醇合成酶基因PNRSC；水稻稻瘟病；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 刘海浩 吴立柱 等 《河北农业大学学报》 2011年34卷2期 40-42,47页
【摘要】 本研究以拟南芥(Arabido psis thaliana.Columbia ecotype)为材料,运用PCR方法从其基因组中扩增得到了TUA2基因的序列,将其连接到表达载体GV3101上,构建成双元载体.把该质粒用基因枪转化法转化洋葱表...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 李炜 谭艳平 等 《安徽农业科学》 2011年39卷28期 17158-17160页
【摘要】 [目的]克隆线粒体相关基因nadl,获得转nad1的转基因水稻植株.[方法]采用TRIzol法提取水稻幼苗总RNA,以反转录的cDNA为模板,扩增得到nad1；将nad1接到线粒体信号肽Rflb的5’(Rflb5’),装载到pCAMBIA1...
- 概要：
- 方法：
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