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            【中文期刊】 杨振兴  何于雯  等 《动物医学进展》 2023年44卷11期 8-14页

            【摘要】 目前世界范围内仅分别从日本西南的与那国岛(2015年)及中国云南省景洪市勐罕镇(2019年)的哨兵动物牛上分离到过新型环状病毒Yonaguni orbivirus(YONOV),但尚缺乏该病毒核酸的特异性检测方法.该研究对比我国分离的YON...

            【关键词】 环状病毒实时荧光定量PCR常规RT-PCR

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            【中文期刊】 李望东  李勇  等 《中国动物检疫》 2023年40卷9期 98-103页

            【摘要】 为建立传染性脾肾坏死病毒(infection spleen and kidney necrosis virus,ISKNV)的定量快速检测方法,根据GenBank中的ISKNV衣壳蛋白(MCP)编码基因保守序列设计一对特异性引物和探针,建立...

            【关键词】 传染性脾肾坏死病毒TaqMan荧光定量PCR定量检测

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            【中文期刊】 刘师文  熊英  等 《中国人兽共患病学报》 2021年37卷6期 478-483页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 建立一种汉滩病毒(Hantaan virus,HTNV)和汉城病毒(Seoul virus,SEOV)双重实时定量荧光RT-PCR检测方法.方法 根据HTNV和SEOV S基因设计引物和探针、优化反应条件,建立2种汉坦病毒的双重实时荧...

            【关键词】 汉滩病毒汉城病毒双重实时荧光定量RT-PCR

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            【中文期刊】 张驰宇  徐顺高  等 《生物化学与生物物理进展》 2005年32卷9期 883-888页SCIISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 为建立一种新颖、简便的荧光实时RT-PCR相对定量方法,根据实时定量标准曲线,推导出相对定量基因表达的公式.公式显示相对表达指数只与CT值和标准曲线的斜率相关.构建标准曲线的标准品需要通过克隆和体外转录获得,实验过程繁琐.当人为成比例增减标...

            【关键词】 荧光实时定量RT-PCR相对定量绝对定量

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            【中文期刊】 陈苏红  张敏丽  等 《生物化学与生物物理进展》 2004年31卷3期 249-254页SCIISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 为建立一种快速、准确、特异的SARS病毒RNA定量检测方法,根据复合探针荧光定量分析原理,对SARS病毒核酸进行实时荧光定量RT-PCR检测.借助计算机辅助,对SARS病毒基因靶序列以及检测引物和探针进行了优化筛选;利用体外转录SARS病毒...

            【关键词】 非典型性肺炎SARS病毒荧光定量RT-PCR

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            【中文期刊】 刘少平  高艳  等 《临床消化病杂志》 2022年34卷1期 45-49页ISTICCA

            【摘要】 [目的]定量检测胃癌(gastric cancer,GC)患者血清microRNA;497(miR-497)表达量,探讨其与GC侵袭转移及预后的关系.[方法]以实时荧光定量RT-PCR检测70例GC患者(GC组)术前及术后、30例萎缩性胃炎...

            【关键词】 胃癌microRNA-497实时荧光定量RT-PCR

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            【中文期刊】 刘影  闫若潜  等 《中国预防兽医学报》 2022年44卷11期 1189-1195页

            【摘要】 为建立检测猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪δ冠状病毒(PDCoV)和猪急性腹泻综合征冠状病毒(SADS-CoV)的多重荧光定量RT-PCR方法,本研究针对PEDV、PDCoV、SADS-CoV的M基因、M基因、N基因序列保守区分别设计特异性...

            【关键词】 猪流行性腹泻病毒猪δ冠状病毒猪急性腹泻综合征冠状病毒

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            【中文期刊】 陈浩  鞠永政  等 《中国动物检疫》 2022年39卷9期 110-114页

            【摘要】 为快速、准确、灵敏检测猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV),以PEDV N基因为靶标设计引物,建立了一种PEDV SYBR Green I荧光定量RT-PCR检测方法.该方法最低可以检...

            【关键词】 猪流行性腹泻病毒染料法荧光定量RT-PCR

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            【中文期刊】 马玲  孟菲  等 《南方农业学报》 2022年53卷6期 1734-1741页

            【摘要】 [目的]建立检测新型阿卡斑病毒(AKAV)的SYBR Green I荧光定量RT-PCR,并结合序列测定开展广西边境地区蚊携带新型AKAV调查,了解其流行趋势及遗传进化特征,为建立重要蚊媒病毒病预警机制提供技术支持.[方法]分别针对新型AK...

            【关键词】 新型阿卡斑病毒(AKAV)蚊媒病毒SYBR Green I荧光定量RT-PCR

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            【中文期刊】 施开创  谢守玉  等 《中国动物传染病学报》 2022年30卷2期 84-92页

            【摘要】 为建立鉴别检测A型塞尼卡病毒(SVA)与O型、A型、亚洲I型口蹄疫病毒(FMDV)的方法,针对SVA 3D基因与O型、A型、亚洲I型FMDV VP1基因,分别设计特异性引物和TaqMan探针,经优化反应条件,建立了同时检测SVA与O型、A型...

            【关键词】 A型塞尼卡病毒口蹄疫病毒荧光定量RT-PCR

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            【中文期刊】 周昱行  汤承  等 《中国预防兽医学报》 2022年44卷10期 1059-1065页

            【摘要】 牛鼻病毒(BRV)是引起牛呼吸道疾病综合征(BRDC)的重要病原,分为基因A型(BRAV)和基因B型(BRBV).为建立同时检测BRAV和BRBV的双重荧光定量RT-PCR方法,本研究根据BRAV 5'非翻译区(5'NTR)和BRBV 3'...

            【关键词】 牛鼻病毒基因A型基因B型

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            【中文期刊】 沈艳  何长生  等 《中国动物检疫》 2022年39卷8期 1-5,45页

            【摘要】 为了解安徽省禽群呼吸道病毒感染情况,2021年3—11月从12个县(市、区)17个家禽屠宰点和1个农贸市场收集472份喉头气管组织样本,运用荧光定量RT-PCR方法,对诱发家禽呼吸道疾病的主要病毒性病原进行检测.结果显示:除未检出高致病性禽...

            【关键词】 呼吸道病毒流行病学荧光定量RT-PCR

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            【中文期刊】 赵文华  李富祥  等 《中国兽医杂志》 2022年58卷2期 27-33,38页

            【摘要】 为了能够同时开展对小反刍兽疫病毒(PPRV)、蓝舌病血清8型病毒(BTV8)、鹿流行性出血热血清1型病毒(EHDV1)和非洲马瘟病毒(AHSV)4种外来动物疫病病原体的核酸检测,本试验根据GenBank中相关病毒序列设计引物和探针,建立多重...

            【关键词】 小反刍兽疫病毒蓝舌病病毒8型流行性出血热病毒1型

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            【中文期刊】 卓晓菲  何苹萍  等 《水生生物学报》 2019年43卷6期 1203-1209页ISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 为了解析miRNA及靶基因在凡纳滨对虾低温适应过程中的分子调控机制,研究开展了凡纳滨对虾常温(28℃)及低温锻炼(16℃,6d)下肝胰腺小RNA文库的测序和分析.从常温对虾的小RNA文库测序获得18—32 nt的高质量序列10690259条...

            【关键词】 凡纳滨对虾低温胁迫miRNA

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            【中文期刊】 田娜  何丽雯  等 《重庆医科大学学报》 2019年44卷12期 1635-1641页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:建立实时荧光定量RT-PCR检测方法,普查重庆市实验小鼠诺如病毒(munne Norovirus,MNv)的感染情况及其对BABL/c-nu小鼠免疫功能影响的初步研究.方法:①根据GenBank中收录的MNV全基因组序列,设计MNV特...

            【关键词】 小鼠诺如病毒实时荧光定量RT-PCRBABL/c-nu小鼠

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            【中文期刊】 李荣  江佳佳  等 《临床检验杂志》 2021年39卷9期 650-655页ISTICCA

            【摘要】 目的 建立胃癌患者癌组织、血浆和血浆外泌体中hsa_circ_002059表达的检测方法,探讨其在胃癌组织与循环血液中表达的临床应用价值.方法 应用circ2Traits和starBase v2.0数据库预测胃癌相关环状RNA hsa_ci...

            【关键词】 实时荧光定量RT-PCR环状RNAhsa_circ_002059

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            【中文期刊】 杜晨光  杨燕燕  等 《动物学研究》 2008年29卷2期 134-138页SCIMEDLINEISTICCSCDBP

            【摘要】 为了明确ghrelin是否参与了卵母细胞成熟及胚胎早期发育进程,本研究利用免疫荧光技术和实时定量RT-PCR技术检测了绵羊卵母细胞和体内早期胚胎中ghrelin蛋白的表达定位和ghrelin mRNA水平相对表达变化规律.免疫荧光染色结果表...

            【关键词】 Ghrelin绵羊卵母细胞胚胎

            浏览:132 被引:8 下载:13
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            【中文期刊】 尹萍  季金强  等 《动物学研究》 2008年29卷6期 603-607页SCIMEDLINEISTICCSCDBP

            【摘要】 采用RT-PCR法从新西兰大白兔卵巢中克隆出BMP15基因部分cDNA片段,经blast分析后,发现其与猪、牛、绵羊、山羊、人和小鼠的同源性达到了83%-90%.同时,利用实时荧光定量RT-PCR方法检测了BMP15mRNA在卵母细胞体外成...

            【关键词】 骨形态发生蛋白15卵母细胞

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            【中文期刊】 曹艳红  章镇  等 《实验生物学报》 2004年37卷6期 487-493页SCIMEDLINEISTICCSCDBP

            【摘要】 以成熟苹果果实的RNA为模板,经RT-PCR扩增并克隆苹果多酚氧化酶(APPO)长度为710bp的反义、正义基因片段.以副球菌中类胡罗卜素合成有关的(crtW+crtY)融合基因片段YYT为间隔区,将APPO反义基因片段、YYT和APPO正...

            【关键词】 双链RNAi APPO基因 载体构建 遗传转化 苹果 荧光定量 RT-PCR

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            【中文期刊】 王清云  李渊  等 《中国实验血液学杂志》 2018年26卷1期 8-15页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:探讨急性淋巴细胞白血病(ALL)患者骨髓细胞HB-1基因的表达水平以及HB-1基因在监测ALL微小残留病(MRD)方面的意义.方法:建立实时荧光定量RT-PCR方法(Taqman探针),检测HB-1基因的表达水平,并对其灵敏度、特异性...

            【关键词】 急性白血病HB-1基因实时荧光定量RT-PCR

            浏览:241 被引:7 下载:72
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            【中文期刊】 陈凯  王月亮  等 《中国免疫学杂志》 2017年33卷5期 684-687页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:比较黄连乙醇提取物与盐酸小檗碱体外抗炎活性,探索体外抗炎机制.方法:通过脂多糖体外刺激小鼠单核巨噬细胞建立细胞炎症模型,给药干预后,LPS长时间刺激RAW264.7细胞,MTT比色法分析黄连乙醇提取物及盐酸小檗碱对RAW264.7细胞...

            【关键词】 黄连乙醇提取物RAW264.7细胞炎性因子

            浏览:206 被引:41 下载:19
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            【中文期刊】 邓坤仪  范汉恭  等 《实用医学杂志》 2017年33卷11期 1861-1864页ISTICPKUCA

            【摘要】 目的:研究中山市2011-2015年儿童手足口病流行特征,为防控儿童手足口病的发生提供依据.方法:回顾性分析中山市博爱医院2011-2015年手足口病患儿临床资料,及其肠道病毒核酸检测结果.结果:2011-2015年共诊断手足口病患儿311...

            【关键词】 手足口病实时荧光定量PCR柯萨奇病毒A16型

            浏览:241 被引:24 下载:93
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            【中文期刊】 李幽幽  龚双燕  等 《中国人兽共患病学报》 2017年33卷11期 1002-1006,1017页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 建立一种快速检测猪戊型肝炎病毒(HEV)的方法.方法 针对HEVORF2基因保守序列设计1对引物,基于SYBR GreenⅡ染料,建立了检测HEV的实时荧光定量RT-PCR方法.结果 该方法只能对猪戊型肝炎病毒检测到荧光,对猪繁殖与呼...

            【关键词】 猪戊型肝炎病毒SYBR GreenⅡ荧光定量RT-PCR

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            【中文期刊】 王颜颜  夏茂宁  等 《中国人兽共患病学报》 2017年33卷6期 508-512页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 将诺卡氏菌属细菌的一段特异性DNA设计成分子信标探针,用于该细菌的PCR检测.方法 将诺卡氏菌属细菌、戈登氏菌属细菌及红球菌属细菌菌株分别接种于脑心浸液琼脂培养基分离培养,观察其生长情况,提取菌株DNA作为扩增模板;设计诺卡氏菌属细菌...

            【关键词】 诺卡氏菌属SecA1基因分子信标探针

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            【中文期刊】 余进德  熊宏  等 《广西植物》 2017年37卷9期 1096-1100页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 油质蛋白基因对种子中油体的形成至关重要,该研究通过实时荧光定量PCR,对麻疯树的两个油质蛋白基因JcOle14.3和JcOle16.6在种子不同发育时期的表达模式进行了分析.结果表明:两个基因在种子发育初期(10~30 d)表达量逐渐升高,...

            【关键词】 麻疯树种子油质蛋白

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            【中文期刊】 陈玉连  张涛  等 《广西植物》 2017年37卷8期 1008-1018页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 谷胱丙肽在作物耐低磷中起重要作用,而选择稳定的内参基因是保证实时荧光定量PCR(RT-qPCR)结果准确的前提.该研究检测了低磷和正常条件下两个不同磷效率的大豆品种根叶中15个内参基因的表达,GeNorm、NormFinder、BestKe...

            【关键词】 大豆内参基因实时荧光定量PCR

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            【中文期刊】 林鹏  吴毓薇  等 《微生物学通报》 2025年52卷4期 1810-1829页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 [背景]人星状病毒(human Astrovirus,HAstV)和人札幌病毒(human Sapovirus,HuSaV)是引起人类急性胃肠炎的重要病原体,尤其对婴幼儿、老年人和免疫力低下等人群造成严重的威胁.目前尚无疫苗和特异性手段防控...

            【关键词】 人星状病毒人札幌病毒双重荧光定量RT-PCR检测方法

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            【中文期刊】 黄婷  杨桂玲  《西安交通大学学报(医学版)》 2016年37卷1期 98-102页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 分析急性髓系白血病(AML)患者骨髓细胞中miR-21的表达情况及其在白血病发生发展中的可能作用及临床意义.方法 应用实时荧光定量PCR检测40例初治AML患者、22例完全缓解期AML(AML CR)患者、13例难治复发患者、20例非...

            【关键词】 急性白血病miR-21骨髓细胞

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            【中文期刊】 莫祥兰  殷舞  等 《实用医学杂志》 2016年32卷15期 2462-2464页ISTICPKUCA

            【摘要】 目的:探讨miR-451a 在鼻咽癌中的表达及与预后关系。方法:用实时荧光定量RT-PCR方法检测89例广西地区人群鼻咽未分化非角化性癌(鼻咽癌)组织中miR-451a 的表达情况,分析其表达强度与预后的关系。结果:鼻咽癌组织表达miR-4...

            【关键词】 鼻咽肿瘤MiR-451a荧光定量RT-PCR

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            【中文期刊】 钟峰  赵俊  等 《安徽医科大学学报》 2016年51卷3期 324-328页ISTICPKUCA

            【摘要】 目的 建立实时荧光定量逆转录PCR(Real time RT-qPCR)方法,检测外周血中人巨细胞病毒(HCMV)pP67 mR-NA的拷贝数,用于临床快速诊断HCMV活动性感染.方法 采用RT-qPCR测定86份癌症患者外周血标本中的HC...

            【关键词】 人巨细胞病毒pp67 mRNA实时荧光定量RT-PCR

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            【中文期刊】 王亚婷  何彩霞  等 《西安交通大学学报(医学版)》 2016年37卷1期 113-117页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 检测人类婆罗双树样基因4 (SALL4)在肝癌中的表达情况,探讨SALL4表达与原发性肝细胞癌(HCC)患者预后的相关性.方法 应用免疫组织化学法检测60例石蜡HCC标本及其中32例癌旁组织标本SALL4蛋白的表达,分析其与HCC患者...

            【关键词】 肝癌SALL4基因免疫组织化学

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            【中文期刊】 许建林  梁晓燕  等 《西安交通大学学报(医学版)》 2016年2期 260-263页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:观察钠碘同向转运体(sodium/iodide symporter,NIS)mRNA 在分化型甲状腺癌组织中的表达,并进一步探讨其在分化型甲状腺癌诊治中的作用和价值。方法利用实时荧光定量 PCR 方法观察 NIS mRNA 在21例结...

            【关键词】 分化型甲状腺癌钠碘同向转运体(NIS)放射性碘治疗

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            【中文期刊】 徐娇阳  司马玲  等 《西安交通大学学报(医学版)》 2016年37卷4期 556-559页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:研究低压低氧暴露条件下肺动脉高压(HPH)模型大鼠循环microRNA(miRNA)表达的变化。方法利用基因芯片技术定量检测、分析 HPH组及对照组大鼠血清中潜在的循环miRNA的表达及其差异。基于病例‐对照设计,采用荧光定量PCR技...

            【关键词】 低氧性肺动脉高压循环miRNA基因芯片

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            【中文期刊】 彭灵娟  丛喆  等 《中国比较医学杂志》 2016年26卷4期 41-45页ISTICPKUCA

            【摘要】 目的:研究SIV在感染CEMx174细胞过程中,SAMHD1在基因和蛋白水平的变化与病毒水平之间的相关性。方法 SIVmac239病毒感染CEMx174细胞后,每天收集上清和细胞,应用TaqMan探针实时荧光定量RT-PCR方法,检测细胞内...

            【关键词】 SAMHD1HIV-1SIV

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            【中文期刊】 冉伟  田宇  等 《中国预防兽医学报》 2021年43卷4期 394-398页

            【摘要】 为建立猪流行性腹泻病毒(PEDV)的荧光定量RT-PCR检测方法,本研究参照已有的研究报告,对PEDV ORF3基因序列进一步比较优化,选择PEDV ORF3更为保守的序列设计引物,经PCR扩增目的片段后构建了 PEDVORF3基因的重组质...

            【关键词】 猪流行性腹泻病毒荧光定量RT-PCRORF3基因

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            【中文期刊】 谢守玉  刘惠心  等 《中国预防兽医学报》 2021年43卷9期 952-958页

            【摘要】 为建立鉴别检测鸭坦布苏病毒(DTMUV)、新型鸭呼肠孤病毒(NDRV)及番鸭呼肠孤病毒(MDRV)的方法,本研究分别针对DTMUV E基因与NDRV、MDRV S3基因,设计特异性引物和TaqMan探针,经优化反应条件,建立了同一体系中同时...

            【关键词】 鸭坦布苏病毒新型鸭呼肠孤病毒番鸭呼肠孤病毒

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            【中文期刊】 杨鸣发  马云云  等 《中国动物检疫》 2021年38卷12期 91-98页

            【摘要】 为建立一种准确、快速、敏感性更高的小反刍兽疫病毒(peste des petits ruminants virus,PPRV)检测方法,建立了一种芯片式数字PCR(cdPCR)检测方法.根据GenBank中公布的PPRV Nigeria75...

            【关键词】 小反刍兽疫病毒(PPRV)芯片式数字PCR(cdPCR)实时荧光定量PCR(RT-qPCR)

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            【中文期刊】 刘梦瑶  王展慧  等 《畜牧兽医学报》 2021年52卷7期 1942-1952页

            【摘要】 利用多重荧光定量RT-PCR(real-time RT-PCR)方法,提高对多病原检测的速度和灵敏度,促进对犊牛腹泻的快速诊断和及时治疗.分别在牛星状病毒(BAstV)OR F2基因,牛病毒性腹泻病毒1型(BVDV-1)5'端非编码区,牛冠...

            【关键词】 牛星状病毒牛病毒性腹泻病毒牛冠状病毒

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            【中文期刊】 李昕岳  杨涛涛  等 《中国预防兽医学报》 2021年43卷8期 838-842页

            【摘要】 为建立检测盖他病毒(GETV)的敏感、特异且快速的方法,本研究根据GETVE1基因的保守区域设计引物,通过反应条件的优化,建立了快速检测GETV的SYBR GreenⅠ荧光定量RT-PCR方法.利用该方法对GETV以及临床猪常见病毒(PRR...

            【关键词】 盖他病毒荧光定量RT-PCRSYBR Green Ⅰ

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            【中文期刊】 于德斌  曹存  等 《中国预防兽医学报》 2021年43卷4期 399-404,424页

            【摘要】 为建立检测牛轮状病毒(BRV)快速特异的荧光定量RT-PCR方法,本研究针对BRV NSP5基因设计了一对特异性引物经PCR扩增目的片段,并克隆于pCI载体作为重组质粒标准品(pCI-NSP5),经优化反应条件,建立了基于NSP5基因的BR...

            【关键词】 牛轮状病毒NSP5基因荧光定量RT-PCR

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