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【中文期刊】 杨小敏 杨刚毅 等 《中国老年学杂志》 2012年32卷23期 5173-5175页ISTICPKUCA
【摘要】 目的 构建含FGF-21 siRNA基因的重组腺病毒载体并鉴定.方法 首先用BamH Ⅰ+HindⅢ双酶切本课题组前期构建的质粒pSi-lencerl.0-shFGF-21,得到0.3 bp的目的片段,并将目的片段亚克隆入穿梭质粒(pShu...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 逄坤芳 陈鹤翔 等 《华中科技大学学报（医学版）》 2012年41卷3期 329-332,352页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 构建大鼠δ阿片受体(delta opioid receptor,DOR)基因小发卡RNA(shRNA)及人前脑啡肽原基因(human preproenkephalin gene,hPPE)双表达慢病毒载体并鉴定.方法 根据大鼠DOR ...
- 概要：
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【中文期刊】 赵红 王苏平 等 《实用医学杂志》 2012年28卷4期 526-529页ISTICPKUCA
【摘要】 目的:转录因子Olig1调控了少突胶质前体细胞的分化和成熟,并参与了脱髓鞘损伤后的修复,是治疗脱髓鞘疾病的候选基因,在缺血性脑血管病的治疗中具有极大的应用价值.本实验旨在构建携带Olig1基因的重组腺病毒载体.方法:pDC315-Olig1...
- 概要：
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- 结论：
【中文期刊】 陈琳 何深一 等 《山东大学学报（医学版）》 2012年50卷8期 62-67页ISTICPKUCA
【摘要】 目的 构建弓形虫棒状体蛋白18(ROP18)和微线体蛋白2(MIC2)的基因融合的重组真核表达质粒,并在转录和翻译水平进行鉴定.方法 利用分子克隆技术构建重组真核表达质粒pBudCE4.1-ROP18-MIC2,经PCR、酶切及测序鉴定正确...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 彭智 贾振华 等 《中国组织工程研究》 2012年16卷2期 311-314页ISTICPKUCA
【摘要】 背景:人端粒酶催化亚基与c-myc在喉鳞状细胞癌中有密切的相关性.目的:构建含有c-myc启动子的人端粒酶催化亚基的重组腺病毒载体,观察人端粒酶催化亚基在细胞中表达后对细胞增长的影响.方法:按照人工合成中反向转录的方法设计基因合成引物,用复...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 武媛 张壮 等 《中国组织工程研究》 2012年16卷20期 3763-3767页ISTICPKUCA
【摘要】 背景:Rac1是通过信号转导来调节癌细胞的侵袭、增殖,它在各种肿瘤中都有表达.目的:构建RAC1基因RNA干扰慢病毒载体,并检测其干扰效率.方法:应用Western blot检测Rac1基因在舌癌细胞中的表达.针对筛选确定的Rac1基因RN...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 郑红 李秀华 等 《中国组织工程研究与临床康复》 2011年15卷19期 3459-3462页ISTICPKUCA
【摘要】 背景:雌激素受体β是否参与介导骨髓间充质干细胞的增殖与分化需进一步实验论证.目的:以RNAi技术寻找和验证对大鼠骨髓基质干细胞雌激素受体β基因表达抑制的有效序列.方法:根据GeneBank 数据库提供的SD大鼠雌激素受体β基因核苷酸序列,选...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 王勇 王志中 等 《中国组织工程研究与临床康复》 2011年15卷41期 7719-7722页ISTICPKUCA
【摘要】 背景:抗炎药物高通量筛选体系的建立,可为相关药物的研究提供一个理想的技术平台.目的:构建以核因子B 顺式作用元件4×CCL20 基序为增强子,以SV40 为启动子,以ZsGreen1-DR 为报告基因的真核表达载体p4CCL20-ZsGre...
【关键词】 载体构建；CC 亚族趋化因子配体20；不稳定型绿色荧光蛋白；
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【中文期刊】 陈敏 项红兵 等 《华中科技大学学报(医学版)》 2011年40卷1期 75-79页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 构建表达DREAM基因的小分子干扰RNA(siRNA)重组腺相关病毒(rAAV)载体,并观察感染PC12细胞后DREAM蛋白表达受抑制情况.方法 设计并合成shRNA对应的2条互补的寡核苷酸链,pDC316-EGFP-U6质粒经Bam...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 张晓茹 匡文华 等 《基因组学与应用生物学》 2011年30卷2期 190-196页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 采用RT-PCR方法从水牛外周血白细胞总RNA中扩增出髓样分化因子88 (mydoid differentiation factor 88,MyD88) cDNA序列,PCR产物分离纯化后,与pMD20-T载体连接,重组质粒经PCR、酶切鉴...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 贾庆华 哈小琴 等 《重庆医科大学学报》 2011年36卷1期 64-67页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建携带角化细胞生长因子(Kemtinocyte growth factor,KGF)的腺病毒载体并观察其在细胞中的表达.方法:通过PCR从pcDNA3-KGFpIRES2-EGFP-KGF质粒中扩增出目的片段KGF,定向克隆至穿梭质...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 刘丽杰 高学娟 等 《生物技术通报》 2011年11期 172-176页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 构建GST-HRB重组质粒,进行融合蛋白的表达、纯化及鉴定.利用PCR扩增及基因重组技术,以pcDNA-3.1-HRB为模板扩增出HRB全基因序列,并将其插入带有GST(谷胱甘肽巯基转移酶)标签的原核表达载体pGEX-6P-1中,构建GST...
- 概要：
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【中文期刊】 陈伟 董震 等 《医学研究生学报》 2011年24卷3期 237-241页ISTICPKU
【摘要】 目的 CD146基因表达增高与涎腺腺样囊性癌(adenoid cystic carcinoma,ACC)嗜神经侵袭(perineural invasion,PNI)的临床症状相关.为进一步研究CD146基因的功能,构建人CD146短发夹RN...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 程筱雯 梁俊波 等 《中国医学科学院学报》 2011年33卷6期 632-637页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 构建含有蛋白激酶Nemo样激酶(NLK)的重组腺病毒载体.方法 采用RT-PCR方法在人胚肾细胞系HEK293T细胞中扩增NLK基因及其突变体K155M、T286V和C425Y,同时在目的基因的C端添加便于蛋白表达检测的FLAG ta...
【关键词】 蛋白激酶Nemo样激酶；重组腺病毒载体；同源重组；
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 赵善民 江鹰 等 《中国人兽共患病学报》 2011年27卷2期 104-107页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 构建结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)RpfA的原核表达质粒,并在大肠杆菌中表达、纯化和鉴定.方法 用PCR方法从结核分枝杆菌H37Rv基因组中扩增出编码RpfA蛋白的Rv0867c基因,通过...
- 概要：
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- 结论：
【中文期刊】 方潇碧 张春鸿 等 《实用医学杂志》 2011年27卷12期 2108-2110页ISTICPKUCA
【摘要】 目的:构建针对人鼻咽癌CNE-2Z细胞Bcl-2基因pENTR-CMV-EGFP-hsa-mir-16.1/15a真核表达质粒,转染至CNE-2Z细胞并检测其表达.方法:采用PCR法从重组质粒PGH-16-1/15a中获得16-1/15a-...
【关键词】 质粒；16-1/15a-X2370G；CNE-2Z；
- 概要：
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【中文期刊】 吕元景 苗素生 等 《中华肿瘤杂志》 2011年33卷1期 13-17页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 构建人基因的重组survivin腺病毒载体,为喉癌的基因治疗研究提供实验基础.方法 聚合酶链反应(PCR)克隆survivin基因,PCR产物与克隆载体连接、转化,鉴定阳性克隆测序后再与腺病毒骨架质粒同源重组,对重组克隆行PCR鉴定和...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 季爱加 宁喜斌 《微生物学杂志》 2011年31卷4期 69-73页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 以质粒PEGFP-N3中增强型绿色荧光蛋白(Enhanced Green Fluorescent protein,EGFP)基因片段为模板,利用PCR技术扩增得到EGFP基因片段,并设计引物在其2端引入酶切位点EcoRⅠ和HindⅢ,对引入...
- 概要：
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- 结论：
【中文期刊】 卜慧莲 温晓岩 等 《华中科技大学学报(医学版)》 2011年40卷1期 37-40,46页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 构建携带β-arrestin 2抗基因RNA的慢病毒表达载体并对其进行鉴定.方法 将线性化的慢病毒载体pGC-FU与抗基因RNA在In-Fusion交换酶作用下构建目的质粒pGC-agRNA,转化感受态细胞,对长出的克隆应用菌落PCR...
- 概要：
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【中文期刊】 袁绍辉 刘伟 等 《中国组织工程研究与临床康复》 2011年15卷50期 9419-9424页ISTICPKUCA
【摘要】 背景:有研究表明骨形成蛋白(bone morphogenetic protein,BMP)异源二聚体比同源二聚体的活性高20倍,但相关BMP 4/7融合基因的相关病毒载体的构建至今少有报道.目的:构建重组人BMP-4/7 融合基因腺相关病毒...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 张倩 齐共健 等 《中国实验血液学杂志》 2011年19卷5期 1250-1254页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 本研究旨在构建促Treg细胞生成及活化的重组分子的原核表达我体,并鉴定其表达.应用RT-PCR获得人TGF-βl及HIV被膜蛋白gpl20的C2-C4区基因并将其克隆至pCR2.1 T载体,酶切制备人TGF-β1及C2-C4区DNA片段,通...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 刘芳 李清宝 等 《医学与哲学》 2011年32卷12期 59-61页ISTICPKU
【摘要】 以pE1A质粒为模板,扩增EIA基因,然后将EIA cDNA片段插入前期已经构建好的真核表达载体plRES-Rb94的MCSB的Sall与NotI之间,获得真核双基因表达质粒p1RES-Rb94-ElA,转染肺腺癌A549细胞后,采用RT-...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 赵培庆 曲忠花 等 《山东大学学报（医学版）》 2010年48卷2期 67-71页ISTICPKUCA
【摘要】 目的 构建2种包含乙肝病毒核心蛋白(HBc)基因的真核表达载体,检测其在人肝癌细胞系BEL7402中的表达.方法 以质粒pUC19/3.0HBV作为模板,PCR扩增HBc基因,分别以pcDNA3.0和pEGFP-N1为母本,构建含HBc基因...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 岳恺 张文超 等 《中国肿瘤临床》 2010年37卷10期 550-553页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建CXCL12-KDEL融合基因绿色荧光蛋白表达载体并鉴定其在人舌癌细胞株Tb3.1(以下简称Tb3.1)中的表达.方法:设计特定引物,以人基因组DNA为模板,PCR扩增目的基因CXCL12-KDEL,经纯化的目的基因连接19T载体...
【关键词】 CXCL12-KDEL；绿色荧光蛋白；基因表达；
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 韩建军 胡三元 等 《山东大学学报（医学版）》 2010年48卷3期 78-82页ISTICPKUCA
【摘要】 目的 构建白介素24(IL-24)与内皮抑素(ES)的真核双基因表达栽体,检测它们在体外的表达.方法 从外周血和人胎肝组织中经RT-PCR分别扩增IL-24与ES cDNA序列,并将其定向克隆至真核双基因表达质粒pIRES中,重组质粒pIR...
- 概要：
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【中文期刊】 毛沛沛 陈宝安 等 《中国实验血液学杂志》 2010年18卷1期 127-131页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 本研究构建并鉴定靶向mdr-1基因的短发夹RNA(shRNA)真核表达载体.根据Genbank数据库提供的mRNA序列,选择设计3个能转录短发夹RNA(shRNA)的DNA序列,体外分别合成3对互补并编码mRNA基因的特异性shRNA序列的...
【关键词】 mdr-1基因；短发夹RNA；K562/A02细胞；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 石岩岩 丁士刚 等 《山东大学学报（医学版）》 2010年48卷11期 41-45页ISTICPKUCA
【摘要】 目的 克隆人硫氧还蛋白-1(human thioredoxin-1,hTrx1)基因,并构建含有该目的 基因的重组载体.方法 以人胃癌细胞系BCG823、MNK45的总RNA为模板,设计含有酶切位点的特异性引物,用逆转录PCR的方法,扩增h...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 谢晓斌 陈小卫 等 《实用医学杂志》 2010年26卷4期 544-547页ISTICPKUCA
【摘要】 目的:构建靶向人血管内皮生长因子-C(VEGF-C)基因的shRNA真核表达载体并检测其对靶基因的沉默效应.方法:根据靶基因VEGF-C序列,设计、合成编码其shRNA的互补寡核苷酸序列,克隆至线性化的pSIREN-RetroQ载体中并对重...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 许波群 李瑛 等 《医学研究生学报》 2010年23卷2期 117-122页ISTICPKU
【摘要】 目的 SET基因表达产物是SET/TAF-1β蛋白,功能涉及基因表达调控、染色质修饰、翻译后修饰等生物过程,多水平、多通路地调节靶因子,其表达异常与多种疾病相关.为研究SET基因与临床多种疾病发生发展的关系,文中构建表达人SET基因的小分子...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 蒋宇 胡巢凤 等 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 2010年31卷2期 140-144页ISTICPKUCA
【摘要】 目的:构建人RIP2基因启动子的绿色荧光蛋白表达载体.方法:根据特定限制性内切酶位点,以人基因组DNA为模板,PCR扩增含人RIP2基因启动子不同长度2段序列,构建含人RIP2基因启动子驱动的绿色荧光蛋白载体pEGFP-C2-RIP2(75...
【关键词】 受体相互作用蛋白2启动子(RIP2启动子)；载体；绿色荧光蛋白；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 李丙蓉 郑宏庭 等 《重庆医科大学学报》 2010年35卷11期 1676-1680页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建含有人脂联素基因apM1的重组腺病毒载体,制备能表达人脂联素蛋白的重组腺病毒,为脂联素用于体内外干预动脉粥样硬化奠定基础.方法:自质粒pGEM-T-apM1上扩增两端带有Sal Ⅰ和Hind Ⅲ酶切位点的全长apM1基因,将PCR...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 付海霞 张晓辉 《中国实验血液学杂志》 2010年18卷6期 1609-1612页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 本研究旨在构建ha1基因慢病毒载体并获得稳定的产毒细胞,为进一步研究异基因造血干细胞移植后ha1介导的GVHD和GVL的分离机制奠定基础.将已构建好的T-ha1质粒酶切获得目的基因后,将目的基因定向克隆入慢病毒表达质粒pRRLSIN、cPP...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 田运娇 易岂建 等 《重庆医科大学学报》 2010年35卷1期 10-13页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建并鉴定靶向大鼠gnas基因的小干扰RNA(short hairpin RNA,shRNA)真核表达载体.方法:根据大鼠gnas基因mRNA序列设计并合成3条shRNA特异性寡核苷酸片段,退火形成双链后克隆进入线性化pGenesil...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 王玉梅 盛光耀 《郑州大学学报（医学版）》 2010年45卷3期 443-447页ISTICPKUCA
【摘要】 目的:构建人PTEN基因RNA干扰(RNAi)及其逃避RNAi策略结构(RESC)救援的慢病毒载体.方法:利用Invitrogen公司在线软件,针对已筛选确定的PTEN基因RNAi有效靶序列,设计并合成靶序列的oligoDNA,退火形成双链...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 彭亮权 王大平 等 《中国组织工程研究与临床康复》 2009年13卷20期 3942-3946页ISTICPKUCA
【摘要】 背景:目前报道的重组腺病毒构建方法较复杂,构建周期长,导致重组腺病毒构建的成功率较低.GatewayTM技术是基于λ噬菌体的位点特异性高效重组系统,其构建重组病毒载体具有快捷高效的特点.目的:构建含人骨形态发生蛋白2基因的重组腺病毒载体,为...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 黄捷 谢良地 等 《中国药理学通报》 2009年25卷4期 488-492页ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 目的 构建大鼠的热休克蛋白27 (heat shock protein 27, HSP27)RNA干扰慢病毒载体.方法 设计并合成3对互补针对大鼠HSP27 mRNA的oligoDNA片段.磷酸化和退火后,分别克隆入pSUPER-basic...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 吕承育 谷雅川 等 《中国组织工程研究与临床康复》 2009年13卷31期 6089-6092页ISTICPKUCA
【摘要】 背景:研究表明,通过抑制α1,3-半乳糖基转移酶的生成而减少甚至避免供体Gala(1,3)Gal的生成,是渡过器官移植后超急性排斥反应的一条切实可行的方法.目的:构建小鼠α1,3-半乳糖基转移酶基因的RNA干扰慢病毒载体,有效沉默小鼠血管内...
【关键词】 α1,3-半乳糖基转移酶；RNA干扰；质粒；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 曾琪 胡巢凤 等 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 2009年30卷2期 128-132页ISTICPKUCA
【摘要】 目的:构建人NOD8基因启动子的绿色荧光蛋白表达载体.方法:用特定的限制性内切酶位点,以人基因组DNA为模板,PCR扩增含有人NOD8基因启动子不同长度2段序列,并进行酶切以切除启动子的pEGFP-C2作框架结构,插入表达载体pEGFP-C...
【关键词】 核苷酸结合寡聚化结构域8启动子(NOD8启动子)；载体；绿色荧光蛋白；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 王翔 胡治平 等 《西安交通大学学报（医学版）》 2009年30卷1期 22-26页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 构建人转化生长因子-β1(TGFβ1)基因RNAi质粒载体.方法 根据人TGFβ1 mRNA序列选择3个靶序列并设计合成相应3对寡核苷酸序列,同时合成1对阴性对照寡核苷酸序列;将以上4对寡核苷酸序列退火后连入pRNA-U6.2/Len...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 蔡鑫泽 顾卉 等 《中国医科大学学报》 2009年38卷11期 816-819页ISTICPKUCABP
【摘要】 目的 构建hLMO1真核表达载体并证实融合蛋白在细胞内的表达及定位.方法 以人胎脑文库cDNA为模板,PCR扩增hLMO1基因cDNA全长,亚克隆至pEGFP表达载体中.将构建的重组质粒进行酶切测序鉴定,并转染到人上皮细胞---HEK293...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
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