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            【中文期刊】 肖艳  李官成  等 《生物化学与生物物理进展》 2008年35卷8期 947-953页SCIISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 体外致敏并用Ebv转化肝癌患者的PBMC.用PCR分别扩增VH和VL基因并组成ScFv基因.将ScFv基因与载体fuse5连接后,电击转化大肠杆菌MC1061,构建噬菌体呈现型ScFv库.用人肝癌细胞及人肝细胞对初级噬菌体抗体库进行亲和富集...

            【关键词】 EB病毒转化噬菌体抗体库肝癌

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            【中文期刊】 何卓  汪世平  等 《生物化学与生物物理进展》 2008年35卷8期 921-928页SCIISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 运用噬菌体展示技术构建日本血吸虫未成熟虫卵可溶性抗原(SIEA)单链抗体(scFv)表达文库,以天然分子候选疫苗SIEA26~28 ku为靶抗原筛选SIEA单链抗体库,获得特异性单链抗体.并将该scFv基因亚克隆至原核高效表达载体PET32...

            【关键词】 日本血吸虫未成熟虫卵可溶性抗原(SIEA)单链抗体(scFv)

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            【中文期刊】 蒋琳  冯静  等 《生物化学与生物物理进展》 2005年32卷9期 850-856页SCIISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 HER2/neu基因在肿瘤中的过度表达使其成为许多肿瘤的标志分子.为了增加过度表达HER2/neu的肿瘤细胞对肿瘤坏死因子(TNF)的敏感性和提高HER2/neu抗体的肿瘤杀伤效应,将抗HER2/neu单链抗体C6.5与人肿瘤坏死因子hTN...

            【关键词】 抗HER2/neu单链抗体人肿瘤坏死因子免疫毒素

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            【中文期刊】 刘志刚  林建波  等 《生物化学与生物物理进展》 2005年32卷6期 544-550页SCIISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 抗人纤维蛋白单链抗体-低分子质量尿激酶(Ⅱn-UK)融合蛋白,兼有单链抗体对纤维蛋白的亲和性和尿激酶的溶栓活性,有望开发成为新型导向溶栓药物.但基于通用连接肽(G4S)3的Ⅱn-linker-UK融合蛋白在CHO细胞中表达时出现明显的降解....

            【关键词】 融合蛋白连接肽降解

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            【中文期刊】 张志超  胡学军  等 《生物化学与生物物理进展》 2002年29卷4期 572-575页SCIISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 以健康人的外周血淋巴细胞为来源,以偶联BSA的乙型肝炎病毒PreS1肽体外免疫.分别从免疫和未经免疫的淋巴细胞提取RNA,扩增抗体基因,构建大容量天然单链抗体(scFv)噬菌体展示文库和体外免疫scFv抗体库.以PreS1肽进行3轮淘选后,...

            【关键词】 体外免疫单链抗体PreS1

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            【中文期刊】 张志强  林芸  等 《生物化学与生物物理进展》 2002年29卷4期 645-650页SCIISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 利用稀释法、凝胶过滤、脲浓度梯度凝胶过滤3种方法研究了抗肿瘤血管抗体功能片段VH/κ的体外复性.通过考察复性液中还原型谷胱甘肽/氧化型谷胱甘肽(GSH/GSSG)比例、精氨酸浓度、pH值、洗脱速度、变性液中蛋白质浓度、凝胶过滤脲梯度长度等因...

            【关键词】 层析柱复性单链抗体

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            【中文期刊】 刘晶  尹长城  等 《生物化学与生物物理进展》 2001年28卷5期 756-760页SCIISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 亲和力是影响改型单链抗体应用于临床的重要因素之一.利用巨型引物PCR定点诱变方法,设计并化学合成出两组含多个突变位点的简并引物,在第一轮PCR中使用简并引物分别扩增出含突变碱基的两条特异性的DNA片段,即巨型引物,将其经琼脂糖凝胶电泳分离纯...

            【关键词】 改型单链抗体定点诱变PCR

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            【中文期刊】 任军  季万胜  等 《生物化学与生物物理进展》 2000年27卷4期 390-394页SCIISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 克隆分泌CEA杂交瘤细胞重链可变区(VH)和轻链可变区(VL),以Linker连接VH及VL构建抗CEA单链抗体.同时以Spacer连接单链抗体和链亲和素,构建成功单链抗体和链亲和素融合基因,克隆该融合基因至原核表达载体,pET21a(+)...

            【关键词】 单链抗体融合蛋白基因表达

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            【中文期刊】 陈萍  邓健蓓  等 《生物化学与生物物理进展》 1999年26卷5期 502-504页SCIISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 基因工程技术构建的抗人TNF-α单链抗体克隆入表达载体pET15b-Etag中,在T7启动子的作用下,经0.1 mmol/L IPTG诱导,在大肠杆菌BL21(DE3)中获得高效表达,其表达量占菌体总蛋白的38%.表达产物大部分以包涵体形式...

            【关键词】 人肿瘤坏死因子-α单链抗体高效表达

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            【中文期刊】 高琪  韩月  等 《中国药科大学学报》 2020年51卷2期 206-212页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 探讨单链抗体JZC00和糖酵解抑制剂2-脱氧葡萄糖(2-deoxyglucose,2-DG)的联合用药对小鼠非小细胞肺癌细胞LLC、小鼠乳腺癌细胞4T1的抗肿瘤作用.利用大肠埃希菌表达并纯化单链抗体,用SDS-PAGE和Western bl...

            【关键词】 单链抗体2-脱氧葡萄糖糖酵解

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            【中文期刊】 付璐  张谦  等 《中国免疫学杂志》 2020年36卷1期 68-71,89页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:制备靶向β-淀粉样蛋白(Aβ)的单链抗体(scFv),探究其体外活性.方法:原核表达系统对scFv进行表达.ELISA、免疫组化法检测scFv与Aβ 的结合活性;Western blot、硫黄素-T法检测scFv对Aβ 寡聚体、纤维形...

            【关键词】 阿尔茨海默症β-淀粉样蛋白(Aβ)单链抗体(scFv)

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            【中文期刊】 陈炯  詹飞  等 《中国免疫学杂志》 2020年36卷10期 1224-1228页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:筛选特异性抗人载脂蛋白6单链抗体(anti-hLCN6 scFv),并进行表达纯化和活性鉴定.方法:采用RT-PCR技术,用抗体可变区简并引物,从hLCN6免疫小鼠的淋巴细胞中扩增全套VH和VL基因,装配成scFv基因后将其克隆到噬菌...

            【关键词】 噬菌体展示人载脂蛋白6单链抗体

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            【中文期刊】 李春  吴桐  等 《中国免疫学杂志》 2019年35卷9期 1100-1104页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:从全人源单链抗体文库中筛选并鉴定抗金黄色葡萄球菌 α-溶血素(α-HL)单链抗体.方法:IPTG低温诱导 α-HL融合蛋白表达并纯化鉴定;采用噬菌体展示技术从单链抗体文库中筛选抗 α-HL全人源单链抗体(scFv).将筛选并测序鉴定正...

            【关键词】 α-HL全人源单链抗体噬菌体展示

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            【中文期刊】 谈燚  秦中强  等 《中国免疫学杂志》 2019年35卷2期 202-206页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:利用酵母表面递呈技术,分泌表达抗PD-L1单链抗体(sc Fv),纯化后得到能特异性结合PD-L1抗原的小分子抗体片段(sc Fv).根据单链抗体基因序列,合成sc Fv抗体基因序列.选用sc Fv-mFc融合蛋白的方式,并采用p F...

            【关键词】 重组质粒PD-L1单链抗体

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            【中文期刊】 张冀原  陈羽  等 《微生物学杂志》 2019年39卷2期 50-55页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 以血管内皮生长因子单链抗体(pTA-anti-VEGF-scFv)为研究对象,考察不同培养基配方和培养条件对血管内皮生长因子单链抗体表达量的影响.经均匀设计试验,确定工程菌R22-4高效表达重组抗体的最佳培养基为以2×YT培养基为基础,添加...

            【关键词】 血管内皮生长因子单链抗体条件优化大肠埃希菌

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            【中文期刊】 刘志刚  俞炜源  等 《遗传学报》 2002年29卷1期 90-93页SCIMEDLINEISTICCSCDCABP

            【摘要】 以人源化鼠抗人纤维蛋白单链抗体的5株CDR3突变体为基础,利用致错PCR和DNA重排方法对其进行了突变和重排,然后克隆重组装的突变单链抗体至载体pHB-1HSCFV而构建了库容为105的抗体库,利用噬菌体表面呈现技术对构建的人源化抗体突变库...

            【关键词】 单链抗体致错PCRDNA重排

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            【中文期刊】 曾君祉  周志勇  等 《遗传学报》 2000年27卷11期 1006-1011页SCIMEDLINEISTICCSCDCABP

            【摘要】 用PCR方法以分泌抗甜菜坏死黄脉病毒(BNYVV)单克隆抗体的杂交瘤细胞的基因组为模板,扩增了编码BNYVV单抗的重链可变区(VH)基因。测序表明,该VH序列属于小鼠II(A)亚类,全长为360bp,编码120个氨基酸。将其和先前克隆的轻链...

            【关键词】 BNYVV杂交瘤单链抗体

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            【中文期刊】 纪洪帅  郭锦瑞  等 《中国免疫学杂志》 2018年34卷3期 354-361,366页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:构建基于抗B7-H4单链抗体(scFv)的重组毒素anti-B7-H4-scFv-PE38KDEL,检测毒素蛋白的抗肿瘤作用.方法:通过重叠延伸PCR(SOE-PCR)技术将anti-B7-H4-scFv基因和毒素PE38KDEL基因...

            【关键词】 B7-H4单链抗体绿脓杆菌外毒素PE38KDEL

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            【中文期刊】 杨光勇  刘茜明  等 《华中科技大学学报(医学版)》 2018年47卷2期 193-197页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 制备重组抗白细胞介素4受体(recombinant anti-interleukin-4 receptor,anti-IL-4R)单链抗体(single-chain variable fragment,scFv)与蜂毒肽(meliti...

            【关键词】 白细胞介素4受体单链抗体蜂毒肽

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            【中文期刊】 胡莉  王小红  《生物学杂志》 2018年35卷1期 26-31页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 为了提高黄曲霉毒素 B1(aflatoxin B1,AFB1)单链抗体(single chain Fv fragment, scFv)的表达量和生物活性,将从杂交瘤细胞株2C10中反转录后经基因拼接技术获得的scFv片段基因分别构建到E.c...

            【关键词】 AFB1单链抗体大肠杆菌

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            【中文期刊】 周冲  于峰  等 《生物学杂志》 2018年35卷4期 76-80页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 癌症是严重威胁人类生存的重大疾病.BiTE(bispecific T-cell engager)所代表的一类具有显著抗肿瘤效应的双特异抗体,能够靶向性激活自身T细胞杀伤肿瘤细胞.BiTE由两个单链可变片段(scFv)组成,通过柔性融合接头串...

            【关键词】 双特异性单链抗体BiTE免疫治疗

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            【中文期刊】 李世飞  祝孟海  等 《中国组织工程研究》 2018年22卷1期 1-6页ISTICPKUCA

            【摘要】 背景:拮抗骨硬化蛋白可影响Wnt/β-catenin信号通路,刺激成骨活动,增加骨合成代谢.目的:观察骨硬化蛋白单链抗体对小鼠骨髓间充质干细胞增殖、分化的影响.方法:全骨髓贴壁法分离得到C57BL/6小鼠骨髓间充质干细胞,成骨诱导14 d后...

            【关键词】 骨硬化蛋白单链抗体骨髓间充质干细胞增殖

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            【中文期刊】 王昊  杨一飞  等 《南方医科大学学报》 2017年37卷9期 1149-1155页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 构建抗MM单链抗体-鱼精蛋白融合蛋白表达载体,并验证其表达效率及功能.方法 通过PCR方法将鱼精蛋白截短片段序列与抗黑色素瘤细胞表面抗原单链抗体基因相连接;采用TaKaRa pMD 19-T载体试剂盒将PCR后获得的融合蛋白扩增产物进...

            【关键词】 恶性黑色素瘤单链抗体表达载体

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            【中文期刊】 刘倩  刘琼  等 《中国医学影像学杂志》 2017年25卷5期 321-324页ISTICPKUCSCD

            【摘要】 目的 测定131I标记的甲状腺未分化癌(ATC)人源单链抗体(scFv)的放射性纯度与比活度,并探讨其在荷瘤裸鼠模型的体内分布情况和放射免疫显像特点,以期为ATC的诊断及治疗提供一种新的方法.材料与方法接种ATC细胞构建荷人ATC裸鼠模型....

            【关键词】 甲状腺肿瘤碘放射性同位素

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            【中文期刊】 先德群  年四季  等 《中国免疫学杂志》 2017年33卷9期 1301-1305页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:对抗TSLP-scFv全人源单链抗体进行单点突变,以提高其亲和力.方法:本研究前期筛选了特异性好的抗TSLP-scFv,本研究利用Discovery Studio系统模拟TSLP和抗TSLP-scFv 三维结构,进行分子对接,对结合表...

            【关键词】 抗TSLP-scFv全人源单链抗体分子对接

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            【中文期刊】 刘秦  方勇涛  等 《中国老年学杂志》 2017年37卷13期 3173-3177页ISTICPKUCA

            【摘要】 目的 探讨以β淀粉样蛋白(Aβ)42为靶抗原筛选人源天然单链抗体(scFv)噬菌体抗体库中的特异性抗体对阿尔茨海默病(AD)模型鼠中淀粉样沉积的影响.方法 以Aβ42抗原包被免疫管,对人源天然scFv噬菌体抗体库进行筛选,经过3轮吸附-洗脱...

            【关键词】 阿尔茨海默病β淀粉样蛋白单链抗体

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            【中文期刊】 刘萌  孙杨  等 《生物学杂志》 2016年33卷6期 1-6页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 从人血清白蛋白HSA 免疫小鼠制备的杂交瘤单克隆抗体细胞中提取总RNA,通过反转录得到cDNA,经RT-PCR的方法扩增出单克隆抗体的重链可变区VH和轻链可变区VL的DNA编码序列,通过基因重组的方法将鼠源Fab段VH和VL与人源Fab段重...

            【关键词】 人源化嵌合抗体scFv可溶性表达

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            【中文期刊】 沈艳丽  姬晓南  等 《中国药科大学学报》 2016年1期 101-105页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 探讨抗人甲胎蛋白(AFP)单链抗体和阿霉素(DOX)单用或联用对人肝癌细胞 Huh7细胞增殖的抑制作用。采用MTT 法检测抗 AFP 单链抗体、阿霉素单用及联合作用对 Huh7细胞增殖的影响;采用 Annexin V /PI 荧光双染法检测...

            【关键词】 甲胎蛋白单链抗体阿霉素

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            【中文期刊】 张登梅  年四季  等 《中国免疫学杂志》 2016年1期 65-68页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:筛选特异性好、有体外中和特性的抗IL-13单链抗体,并进行可溶性表达和鉴定。方法:前期课题组构建了大库容量天然单链抗体文库,本研究采用噬菌体展示技术对天然抗体文库进行3轮富集,然后从3轮富集后的文库中采用ELISA进行筛选抗IL-13...

            【关键词】 IL-13全人源单链抗体噬菌体展示

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            【中文期刊】 孙蕊  朱琰  等 《中国免疫学杂志》 2015年4期 501-508页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:人工设计并表达美罗华(C2B8)单链可变区抗体与李斯特菌溶细胞素O(Listeriolysin O,LLO)显性抗原表位构成的重组融合蛋白(ScFv-pLLO),初步分析其抗淋巴瘤细胞活性。方法:查询数据库获得美罗华(C2B8)单抗V...

            【关键词】 CD20单链抗体B细胞淋巴瘤

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            【中文期刊】 刘纯宝  宋夷龄  等 《华中科技大学学报(医学版)》 2015年4期 390-394页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:从噬菌体重组抗体库中筛选获得靶向血管细胞黏附分子‐1(Vcam‐1)的单链抗体,纯化浓缩后进行亲和性鉴定,并与单克隆抗体效价进行比较。方法扩增Vcam‐1基因克隆质粒并转入真核细胞中表达获得Vcam‐1抗原蛋白,纯化后包被免疫管,通过...

            【关键词】 噬菌体展示单链抗体血管细胞黏附分子-1

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            【中文期刊】 谌晓燕  张银辉  等 《中华医院感染学杂志》 2015年14期 3121-3124页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:研究 Tn5细胞中单抗抗人重组质粒(B7‐2)基因的表达及其活性。方法基于具备信号肽单抗抗人B7‐2构建,构建系统 Bac‐to‐Bac 并含单抗抗人 B7‐2杆状重组病毒 AcBacmid 单抗 B7‐2,对 Tn5细胞采用不同感染...

            【关键词】 表达基因抗人 B7-2

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            【中文期刊】 叶刚  钟健  等 《中国老年学杂志》 2015年14期 3826-3828页ISTICPKUCA

            【摘要】 目的:模建特异性抗肝癌单链抗体HscFv 41-6和scFv DM的三维结构,比较两者结构的异同,为高亲和力的抗肝癌单链抗体的人源化设计提供结构信息。方法采用同源模建技术,在SGI图形工作站上,通过Accelrys公司InsightⅡ软件包...

            【关键词】 肝肿瘤抗体结构同源模建

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            【中文期刊】 叶刚  刘丽  等 《中国老年学杂志》 2015年16期 4467-4470页ISTICPKUCA

            【摘要】 目的:完成抗肝癌噬菌体单链抗体scFv DM的人源化设计,为进一步构建人源化抗肝癌噬菌体单链抗体库奠定基础。方法通过IgBlast搜索基因数据库获取鼠源抗体序列模板,从蛋白质晶体结构数据库获得结构模板;在 SGI图形工作站上,通过 Insi...

            【关键词】 同源模建人源化单链抗体

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            【中文期刊】 朱建光  袁青  等 《中国免疫学杂志》 2014年12期 1662-1665,1669页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:表达TSLP蛋白,从全人源单链抗体文库中筛选得到抗TSLP单链抗体。方法:扩增TSLP cDNA,将目的基因与表达载体pET101/D-TOPO连接,转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达并对表达产物进行纯化鉴定。以生物素化的TSLP...

            【关键词】 TSLP人源单链抗体筛选

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            【中文期刊】 宋月雯  袁向飞  等 《山东医药》 2020年60卷2期 1-5页ISTICCA

            【摘要】 目的 将跨膜型抗CD3单链抗体(antiCD3scfv)特异性修饰于肝癌细胞膜表面,观察其介导淋巴细胞体外特异性杀伤AFP阳性(AFP+)肝癌细胞的活性.方法 培养AFP+人肝癌细胞HepG2、Huh-7和AFP阴性(AFP-)正常人肝细胞...

            【关键词】 肝癌跨模型抗CD3单链抗体免疫治疗

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            【中文期刊】 李天鹤  任桂萍  等 《中国免疫学杂志》 2013年29卷3期 304-308,311页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:原核表达抗人IL-1β(hIL-1β)的scFv,并对纯化后抗体的特异性、亲和力以及中和活性进行检测,为研制治疗类风湿关节炎的小分子抗体药物奠定基础.方法:使用PCR方法从含有抗hIL-1β抗体基因的质粒中获得抗hIL-1β的单链抗体...

            【关键词】 hIL-1β单链抗体包涵体复性

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            【中文期刊】 袁青  黄黎  等 《中国免疫学杂志》 2013年29卷6期 644-648页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:表达IL-4和IL-13蛋白,从人源单链抗体文库中分别筛选抗IL-4和抗IL-13单链抗体.方法:采用RT-PCR从健康志愿者外周血单核细胞(PBMC) mRNA中扩增IL-4和IL-13 cDNA;构建硫氧还蛋白融合表达载体,转化大...

            【关键词】 IL-4IL-13人源单链抗体

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            【中文期刊】 周松峰  廖文军  等 《中国人兽共患病学报》 2012年28卷6期 597-601页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 为构建具有凝集性、免疫反应性的双功能融合蛋白.方法 本研究利用特异性引物从重组质粒pMD2E8scFv和pMD-G中以PCR方法扩增2E8基因(抗人红细胞H抗原单链抗体基因)和Kg基因(狂犬病毒G基因主要抗原表位区),采用重叠延伸(S...

            【关键词】 狂犬病毒G基因单链抗体

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            【中文期刊】 蔡凤  李铁军  等 《基因组学与应用生物学》 2012年5期 415-421页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 选用巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)系统表达特异性抗速灭威单链抗体(scFv)基因,以为速灭威特异性抗体的大量制备奠定基础.设计引物扩增阳性克隆 scFv 基因,亚克隆至表达载体 pPICZ琢 C,获得重组酵母表达质粒 pP...

            【关键词】 巴斯德毕赤酵母单链抗体表达

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