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【中文期刊】 梁文娟 崔聪聪  等 《中华流行病学杂志》 2018年39卷12期 1607-1610页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA

【摘要】 目的 探讨基于成簇规律间隔的短回文重复序列(CRISPR)4上游侧翼序列对大肠埃希菌和志贺菌鉴定和评价效果.方法 通过BLAST重复序列识别并获得全基因组测序大肠埃希菌和志贺菌的CRISPRs和CRISPR相关基因(CRISPR-assoc...

【关键词】 大肠埃希菌； 志贺菌； 成簇规律间隔的短回文重复序列；

【中文期刊】 曹媛 杨云  等 《植物学报》 2018年53卷1期 104-109页 ISTICPKUCSCDCA

【摘要】 T-DNA突变体是研究基因功能的重要资源.高效热不对称交错PCR (hiTAIL-PCR)是克隆突变体中T-DNA插入位点侧翼序列的常用方法.然而我们发现,利用hiTAIL-PCR克隆到的一些侧翼序列并不对应于宿主的染色体DNA序列,而是质...

【关键词】 hiTAIL-PCR； T-DNA突变体； 侧翼序列；

【中文期刊】 蒲远波 郭翠  等 《生物技术通报》 2016年32卷11期 72-79页 ISTICPKUCSCDCA

【摘要】 扩增基因的侧翼序列在分子生物学研究中具有重要作用。到目前为止，克隆基因侧翼序列的方法主要可以分为3类：反向 PCR、外源接头介导 PCR、半随机引物 PCR。对这些技术的原理以及近期的应用情况进行了较为系统的综述，旨在为研究者选择更可靠、更...

【关键词】 侧翼序列； 反向 PCR； 外源接头介导 PCR；

【中文期刊】 张晓 张锐  等 《生物工程学报》 2012年28卷1期 104-115页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA

【摘要】 双拷贝基因及其侧翼序列的克隆是分子生物学中的一个难点.将优化的反向PCR (Inverse PCR,iPCR)与TAIL-PCR相结合,有效地克隆双拷贝基因及其侧翼序列.先用Southern blotting方法确定一种能获得合适长度片段的...

【关键词】 反向PCR； TAIL-PCR； 细胞质雄性不育；

【中文期刊】 李书涛 郭佳玉  等 《现代生物医学进展》 2010年10卷16期 3001-3003页 ISTICCA

【摘要】 目的:研究牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合成酶(geranylgeranyl diphosphate synthase,GGPPs)基因启动子的活性;方法:从曼地亚红豆杉细胞中克隆ggpps基因5'-侧翼序列,并将该侧翼序列代替pBI121质粒上的...

【关键词】 紫杉醇； 牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合成酶； 5'-侧翼序列；

【中文期刊】 冯翠莲 万玥  等 《生物技术通报》 2021年37卷5期 248-258页 ISTICPKUCSCDCA

【摘要】 转基因作物外源T-DNA插入的侧翼序列是转基因事件检测的关键组分,也是转基因作物生物安全评价和监管所必需提供的重要信息.为了明确抗虫转基因甘蔗BCG-17的分子特征和建立其事件特异性检测方法,推进其生物安全性评价工作及未来的监管工作,以其T...

【关键词】 抗虫转基因甘蔗； T-DNA侧翼序列； 转化事件特异性检测；

【中文期刊】 王鹏飞 王颖芳  等 《生物医学工程学杂志》 2015年32卷2期 343-349页 MEDLINEISTICPKUCA

【摘要】 利用生物信息学方法探索志贺菌成簇的规律间隔的短回文重复序列(CRISPR)系统结构的特征.本文通过BLAST、序列比对、RNA二级结构预测等方法对志贺菌CRISPR进行研究.结果显示:志贺菌的4个群中均发现有CRISPR结构,其侧翼上、下游...

【关键词】 志贺菌； 成簇的规律间隔的短回文重复序列； 侧翼序列；

【中文期刊】 张露霞 邓伟平  《中国皮肤性病学杂志》 2014年28卷7期 721-723页 ISTICPKUCSCDCA

【摘要】 目的 检测一个中国X-性连锁鱼鳞病(XLI)家系类固醇硫酸酯酶(STS)基因及其侧翼序列突变情况.方法 收集家系患者临床资料,抽取该家系中患者、表型正常者及与该家系无关的50例健康人外周血,提取外周血DNA,PCR扩增外周血基因组DNA的S...

【关键词】 类固醇硫酸酯酶； 侧翼序列； X-性连锁鱼鳞病；

【中文期刊】 刘建 毛大庆  等 《应用生态学报》 2012年23卷1期 240-246页 MEDLINEISTICPKUCSCDCABP

【摘要】 抗生素在医疗、畜牧和水产养殖业的大量使用造成了环境中耐药细菌和抗性基因的日益增加,也加速了抗性基因在环境细菌间的传播扩散.本研究以环境样本直接提取的总DNA为模板,运用热不对称交错PCR (thermal asymmetric interl...

【关键词】 抗性基因； 实时荧光定量PCR； Tail-PCR；

【中文期刊】 杨键 曾丽娟  等 《中国生物工程杂志》 2010年30卷3期 56-60页 ISTICPKUCSCDCA

【摘要】 利用反向-巢式PCR(IN-PCR)从富集土壤宏基因组DNA中克隆到一种α-淀粉酶基因的全序列,其基因登录号为GU045523,测序分析显示与来自Bacillus sp.KR-8104耐酸淀粉酶不完整基因同源性为99%.将获得的α-淀粉酶成...

【关键词】 宏基因组； 反向-巢式PCR； 侧翼序列；

【中文期刊】 李付鹏 伍宝朵  等 《中国生物工程杂志》 2010年30卷12期 87-94页 ISTICPKUCSCDCA

【摘要】 基于PCR的染色体步移技术主要用于分离已知序列侧翼的未知序列,为分离基因、步移调控区域及填补基因组测序的空隙提供极大便利.基于PCR的染色体步移技术依照原理可分成依赖连接介导PCR法和不需要酶切连接PCR法.综述了近年来以PCR为基础的染色...

【关键词】 染色体步移； 聚合酶链式反应； 侧翼序列；

【中文期刊】 于洋 张海员  等 《国际遗传学杂志》 2014年37卷3期 119-123页 ISTICCA

【摘要】 染色体步移技术是一种重要的分子生物学研究技术,该技术现阶段主要分为结合基因组文库的染色体步移技术和基于PCR扩增的染色体步移技术.鉴于染色体步移技术可以克隆已知序列相邻的侧翼序列,所以主要应用于克隆已知序列的侧翼启动子和调控原件、鉴定T-D...

【关键词】 染色体步移技术； 反向PCR； 转座子；

【中文期刊】 潘玉雪 杨勇  等 《中华皮肤科杂志》 2019年52卷7期 450-454页 ISTICPKUCSCDCA

【摘要】 目的 检测1个色素失禁症家系NEMO基因的突变情况.方法 收集先证者临床资料,提取先证者及其父母和200例健康对照外周血DNA.采用多重PCR扩增的方法检测先证者及其父亲外周血DNA中是否存在NEMO基因4～10号外显子杂合性缺失;PCR扩...

【关键词】 色素失调症； DNA突变分析； 镶嵌现象；

【中文期刊】 王亚琴 张宇瑶  等 《中国中药杂志》 2019年44卷1期 77-81页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA

【摘要】 该研究以从感染了青枯病的广藿香植株中分离的青枯菌菌株PRS-84为供试菌株,利用电击转化法,对青枯菌进行Tn5转座子插入突变,在含卡那霉素的培养基上筛选抗性克隆.对抗性克隆进行卡那霉素抗性基因的PCR鉴定,并利用反向PCR技术获得转化子Tn...

【关键词】 广藿香； 青枯菌； Tn5转座子；

【中文期刊】 焦蓓蕾 韦红英  等 《临床儿科杂志》 2019年37卷2期 115-117页 ISTICPKUCSCDCA

【摘要】 目的 探讨凝血因子Ⅸ(FⅨ)基因突变致血友病乙的分子机制.方法 回顾分析1例确诊血友病乙并经家系基因检测患儿的临床资料.结果 先证者男,2岁4个月,反复皮肤瘀斑、鼻衄.查活化部分凝血活酶时间118.3 s,凝血酶原时间15 s,血小板287...

【关键词】 血友病乙； 凝血因子； 基因突变；

【中文期刊】 郭涛 李婉莎  等 《植物分类与资源学报》 2011年33卷6期 645-652页 SCIMEDLINEISTICCSCDBP

【摘要】 以哥伦比亚(Columbia)野生型拟南芥(Arabidopsis thaliana)为实验材料,用含有激活标记双元质粒pCB260的农杆菌浸花进行转化,构建拟南芥T-DNA插入突变体库.通过突变体的筛选和表型分析,获得了两株光形态突变体,...

【关键词】 拟南芥； 突变体； TAIL-PCR；

【中文期刊】 卢致琨 刘丽  等 《中华实用儿科临床杂志》 2018年33卷8期 615-617页 ISTICPKUCSCDCA

【摘要】 目的 对2例Citrin缺陷所致新生儿肝内胆汁淤积症(NICCD)患儿进行SLC25A13基因突变分析.方法 分析2例患儿的临床特点,经家长同意后留取患儿外周血2 mL,提取基因组DNA,进行SLC25A13基因18个外显子及侧翼序列的PC...

【关键词】 Citrin蛋白缺陷； 新生儿肝内胆汁淤积症； SLC25A13基因；

【中文期刊】 陈少威 吴程  等 《生物技术通报》 2018年34卷11期 136-143页 ISTICPKUCSCDCA

【摘要】 为了研究苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)N-酰基高丝氨酸内酯酶(N-acylhomoserine Lactonase,AiiA 蛋白)表达调控机制,确定aiiA的启动子区域.本研究克隆了aiiA的5'端侧...

【关键词】 苏云金芽胞杆菌； 群体感应； 启动子；

【中文期刊】 张晓峰 苏惠春  等 《中华皮肤科杂志》 2016年49卷7期 508-510页 ISTICPKUCSCDCA

【摘要】 目的：研究一个反常性痤疮家系患者γ分泌酶基因突变情况。方法收集1个反常性痤疮患者家系资料，该家系共4代30人，患者12例，其中在世患者9例。提取先证者及其有关亲属8例（患者5例、非患者3例）外周血DNA，采用PCR扩增NCSTN、PSEN1...

【关键词】 突变； 基因,PSENEN； 反常性痤疮；

【中文期刊】 多丽娜 汪慧君  等 《中华皮肤科杂志》 2016年3期 180-182页 ISTICPKUCSCDCA

【摘要】 目的：报告2例长岛型掌跖角化病，确定其致病基因突变。方法收集患者及其父母外周血和临床资料，提取基因组 DNA，PCR 扩增 SERPINB7基因8个外显子及其侧翼序列，对扩增产物进行 DNA 测序以查找基因突变位点，并以200例无关健康人 ...

【关键词】 皮肤角化病,掌跖； 皮肤表现； DNA 突变分析；

【中文期刊】 王鹏飞 王颖芳  等 《吉林大学学报（医学版）》 2015年41卷2期 261-268,后插3页 ISTICPKUCSCDCA

【摘要】 目的:检测志贺菌成簇的规律间隔短回文重复序列(CRISPR),并与GenBank全基因组中志贺菌重复序列和间隔序列对比,分析其结构特征及同源性.方法:利用PCR法扩增获得志贺菌CRISPR,采用生物信息学方法对重复序列及间隔序列进行同源性分...

【关键词】 志贺菌； 成簇的规律间隔短回文重复序列； 重复序列；

【中文期刊】 王慧 张保卫  等 《生物多样性》 2012年20卷1期 51-58页 ISTICPKUCSCDCABP

【摘要】 两栖类有尾目物种的微卫星分离中的筛选成功率常常较低.为探索微卫星结构对筛选效率的影响,本研究通过AFLP快速分离法(fast isolation by AFLP of sequences containing repeats,FIASCO)...

【关键词】 微卫星结构； 微卫星DNA家族； Pachyhynobius shangchengensis；

【中文期刊】 李名扬 林志淼  等 《中华皮肤科杂志》 2012年45卷9期 613-615页 ISTICPKUCSCDCA

【摘要】 目的 探讨1例结节病和肺结核的患者CARD15基因突变情况.方法 收集患者的临床资料,提取患者外周血DNA,PCR扩增CARD15基因所有编码区外显子及侧翼序列并测序,测序结果与正常序列比对,寻找致病性突变位点.结果 患者皮疹及组织病理表现...

【关键词】 结节病； 基因,CARD15； 突变；

【中文期刊】 王楷宬 陆承平  等 《微生物学报》 2012年52卷5期 573-580页 MEDLINEISTICPKUCSCDCABP

【摘要】 [目的]为了解猪链球菌各血清型荚膜多糖合成相关基因保守区的功能与基因进化关系,[方法]在分析已知的猪链球菌1、2、7、9型荚膜多糖合成相关基因簇序列,及其各orf与猪链球菌33个血清型基因组DNA杂交结果的基础上,提出猪链球菌荚膜多糖合成相...

【关键词】 猪链球菌； 荚膜多糖合成相关基因簇； 保守基因；

【中文期刊】 钱佳丽 臧东杰  等 《中华皮肤科杂志》 2011年44卷4期 232-234页 ISTICPKUCSCDCA

【摘要】 目的 探讨一个中国汉族人表皮松解性掌跖角化病(EPPK)家系的角蛋白基因KRT1、KRT9、KRT10突变情况.方法 收集1个EPPK家系的临床资料,提取外周血DNA,通过PCR扩增角蛋白KRT1、KRT9、KRT10基因编码区的全部外显子...

【关键词】 角化病,掌跖； 表皮松解； 角蛋白质类；

【中文期刊】 宋修鹏 武波  等 《中国生物工程杂志》 2011年31卷2期 50-55页 ISTICPKUCSCDCA

【摘要】 以甲基营养细菌Methylobacterium sp.MB200为出发菌株,首先利用质粒转座子(pTnModRKm')构建了目的菌株MB200的部分突变体库,获得能够在双抗性MMII板上生长的突变体共11552株,然后在双抗性MMI板上复筛...

【关键词】 甲基营养菌； 突变体库； pTnMod-RKm'；

【中文期刊】 刘茂静 于迎  等 《中华肾脏病杂志》 2011年27卷6期 395-399页 ISTICPKUCSCDCA

【摘要】 目的 研究一个经典型Banter综合征家系CLCNKB基因突变情况.方法 提取该家系各成员患者外周血淋巴细胞基因组DNA,应用PCR扩增CLCNKB基因全部外显子及侧翼序列,并直接测序检测突变.选取50例无亲缘关系的健康人作为对照.结果 在...

【关键词】 巴特综合征； 突变； CLCNKB基因；

【中文期刊】 林志淼 谭燕红  等 《中华皮肤科杂志》 2010年43卷10期 677-679页 ISTICPKUCSCDCA

【摘要】 目的 检测1例Kindler综合征患者皮损超微结构改变以及FERMT1基因突变.方法 收集患者临床资料,取患处皮肤进行透射电镜检查明确其超微结构的变化.提取患者及其相关亲属外周血DNA,采用PCR扩增FERMT1基因编码区的全部外显子及其侧...

【关键词】 Kindler综合征； FERMT1基因； DNA突变分析；

【中文期刊】 常大雨 周荣富  等 《南京医科大学学报（自然科学版）》 2009年29卷2期 152-155页 ISTICPKUCSCDCA

【摘要】 目的:检测1例凝血因子X(FX)缺陷患者的基因突变.方法:用活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)及FX促凝活性(FX∶C)等测定进行表型诊断;用PCR法对其F10基因8个外显子及其侧翼序列和5'端非翻译区(5'UTR)序列...

【关键词】 凝血因子X； 聚合酶链反应； 基因突变；

【中文期刊】 王淑娜 Khamphouth VONGXAY  等 《微生物学报》 2009年49卷12期 1576-1583页 MEDLINEISTICPKUCSCDCABP

【摘要】 [目的]初步探索副溶血弧菌海产品分离株tdj基因区域的结构特征.[方法]采用长距离PCR和基因步移技术进行tdh基因侧翼序列扩增,测序验证后拼接成疑似毒力基因片段,将所获序列与NCBI数据库进行比较,初步明确tdh基因侧翼序列的结构与功能....

【关键词】 副溶血弧菌； tdh基因； 类插入序列；

【中文期刊】 张媛 杨林花  等 《中华血液学杂志》 2008年29卷3期 179-182页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA

【摘要】 目的 探讨中国汉族3个无关血友病B家系先证者凝血因子Ⅸ(FⅨ)基因突变及分子发病机制,对家系女性成员进行携带者诊断.方法 家系先证者及成员采静脉血,先证者表型诊断确诊后,检测先证者及其家系成员6个STR位点的基因多态性,进行家系遗传连锁分析...

【关键词】 血友病B； 凝血因子Ⅸ； 短串联重复序列；

【中文期刊】 郭俊涛 周艺彪  等 《中华流行病学杂志》 2008年29卷11期 1119-1122页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA

【摘要】 目的 分析4个种群湖北钉螺中微卫星序列及其两侧序列的特点.方法 以(CA)8RY为引物对湖北钉螺基因组DNA进行微卫星锚定PCR(SSR-PCR)扩增,对全部159个扩增产物进行T克隆并测定其中82个片段的核苷酸序列.结果 SSR-PCR的...

【关键词】 湖北钉螺； 微卫星锚定聚合酶链反应； 两翼序列；

【中文期刊】 陈亚男 周鑫  等 《中华儿科杂志》 2007年45卷6期 413-416页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA

【摘要】 目的 建立检测Duchenne型肌营养不良症(Duchenne muscular dystrophy,DMD)致病基因dystrophin突变的快速、敏感的微小突变筛查系统.方法 选择经多重PCR检测未发现dystrophin基因大尺度缺失...

【关键词】 肌营养不良,杜氏； 色谱法,高效液相； 突变；

【中文期刊】 黄丽素 刘晓青  等 《实用儿科临床杂志》 2007年22卷20期 1530-1532页 ISTICPKUCSCDCA

【摘要】 目的 了解中国人肝豆状核变性(WD)ATP7B基因5'UTR及启动因子区域分子特征,探讨不同人种该区域基因多态与突变的分布.方法 采用聚合酶链反应-单链构象特异性(PCR-SSCP)和DNA序列分析技术,对110例WD患者和90例健康对照儿...

【关键词】 肝豆状核变性； ATP7B； 启动子；

【中文期刊】 焦卫云 吴竞生  等 《中华血液学杂志》 2007年28卷9期 598-601页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA

【摘要】 目的 对1例遗传性凝血因子ⅩⅢ(ⅩⅢ)缺陷症患者及其家系成员FⅩⅢA基因[F(13)A]进行分析,探讨其分子致病机制.方法 尿素溶解法定性检测FⅩⅢ活性,抽提外周血基因组DNA,PCR扩增FⅩⅢA基因的15个外显子及其侧翼序列,PCR产物纯...

【关键词】 因子ⅩⅢ缺陷,遗传性； 基因突变； 家系；

【中文期刊】 应艳琴 罗小平  等 《实用儿科临床杂志》 2007年22卷8期 569-572页 ISTICPKUCSCDCA

【摘要】 目的 对5例X-连锁肾上腺脑白质营养不良(X-ALD)患儿及其中2例的母亲进行ABCD1基因突变分析.方法 聚合酶链反应(PCR)扩增5例X-ALD患儿ABCD1基因的10个外显子及其侧翼序列,直接进行测序.将测序结果与正常ABCD1基因序...

【关键词】 X-连锁肾上腺脑白质营养不良； ABCD1基因； 基因突变；

【中文期刊】 吴俊杰 洪小珍  等 《中华检验医学杂志》 2006年29卷5期 460-462页 ISTICPKUCSCDCA

【摘要】 目的建立RHD基因的测序方法并对9例弱D表型作分子鉴定.方法用间接抗人球蛋白试验(IAT)筛选弱表达的D变异体,聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)方法扩增RHD基因特异的外显子及其侧翼序列,PCR产物直接序列分析测定核苷酸的变异...

【关键词】 Rh-Hr血型系统； RHD基因； 血型鉴定和交叉配血；

【中文期刊】 赵志宇 温海  等 《中华微生物学和免疫学杂志》 2006年26卷3期 199-202页 ISTICPKUCSCDCABP

【摘要】 目的筛选具启动活性的新生隐球菌荚膜相关基因CAP10编码区上游5'侧翼序列(启动子序列),为进一步研究其调控机制打下基础.方法利用氯霉素乙酰基转移酶(CAT)的编码基因为报告基因,构建了含不同长度的新生隐球菌荚膜相关基因CAP10编码区上游...

【关键词】 新生隐球菌； 荚膜； 基因；

【中文期刊】 李端 刘丽  等 《中华儿科杂志》 2006年44卷11期 865-868页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA

【摘要】 目的 研究中国人多种羧化酶缺陷症 (multiple carboxylase deficiency,MCD)患儿及其父母基因突变情况.方法 应用聚合酶链反应-直接测序的方法,对4例临床确诊MCD的中国患儿的生物素酶(BT)基因和全羧化酶合成...

【关键词】 多源性羧化酶缺乏； 碳氮连接酶类； 生物素酶；

【中文期刊】 陆惠玲 台运春  等 《法医学杂志》 2006年22卷3期 186-189页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA

【摘要】 目的观察中国汉族人群PowerPlexTM16体系STR基因座分型标准物外等位基因(OL等位基因)的序列组成,探讨其类型及命名.方法应用PowerPlexTM16体系和ABI377或3100遗传分析仪,对10071名中国汉族无关个体的血样D...

【关键词】 STR基因座； OL等位基因； PowerPlexTM16体系；