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【中文期刊】 蔡俊 屈纪富 《第三军医大学学报》 2016年38卷4期 356-360页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 观察分泌型白细胞蛋白酶抑制因子(secretory leukocyte protease inhibitor,SLPI)对真皮多能干细胞(dermal multipotent stem cells,DMSCs)的促增殖作用.方法 酶消...
【关键词】 分泌型白细胞蛋白酶抑制因子；重组表达载体；真皮多能干细胞；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 杨键 游志庆 等 《生物技术通报》 2013年9期 146-150页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 利用基因重组技术,以枯草杆菌表达载体pWB980为骨架,插入大肠杆菌的克隆载体pUC18中的抗性基因和复制子,构建穿梭质粒pY980coli.将海洋细菌蛋白酶基因hspa插入pY980coli载体P43启动子下游,导入枯草杆菌WB600中,...
【关键词】 穿梭载体；P43启动子；枯草芽孢杆菌表达系统；
- 概要：
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【中文期刊】 罗金 杨菁 等 《生殖与避孕》 2010年30卷8期 509-513页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建小鼠富含半胱氨酸分泌蛋白-1(Crisp-1)真核表达载体,并观察其在COS-7细胞中的表达.方法:从小鼠附睾组织中提取总RNA,RT-PCR扩增Crisp-1基因开放阅读框(ORF),将目的基因克隆至真核表达载体pcDNA3.1...
【关键词】 半胱氨酸分泌蛋白-1(Crisp-1)；真核表达载体；COS-7细胞；
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- 方法：
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【中文期刊】 王健生 张明鑫 等 《中华肝胆外科杂志》 2009年15卷6期 464-466页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 构建含有NT4和HA2-TAT的分泌型VP3真核表达载体,并观察其表达对人肝癌细胞HepG2和小鼠成纤维细胞NIH3T3的影响.方法 构建了含鸡贫血病毒VP3基因和NT4、HA2-TAT基因的分泌型真核表达载体--NT4-Apopti...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 孙强正 李振军 等 《中华流行病学杂志》 2009年30卷12期 1288-1291页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 在乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)食品级分泌性表达系统L.lactis MBP71/pSQZ和L.lactis MBP71/pSQ中克隆表达霍乱毒素B亚单位(CTB),实现CTB的分泌性表达.方法 采用PCR扩增霍乱...
- 概要：
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【中文期刊】 孙永丰 冯剑锷 等 《中华实验外科杂志》 2014年31卷8期 1687-1689页ISTICCA
【摘要】 目的 观察腺病毒介导S24F基因转染人脐静脉内皮细胞(HUVECs)对调节活化正常T细胞表达和分泌因子(RANTES)趋化作用的影响.方法 构建pAV-MCMV/S24F-GFP-3 FLAG(Ad-S24F)腺病毒载体,将不含目的基因的病...
【关键词】 S24F基因；调节活化正常T细胞表达和分泌因子；腺病毒载体；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 朱亮华 金蕊 等 《江苏医药》 2012年38卷11期 1247-1249页ISTICCA
【摘要】 目的 构建并鉴定含分泌型白细胞蛋白酶抑制蛋白(SLPI)基因的重组真核表达质粒.方法 以HeLa细胞的总RNA为模板,用RT-PCR方法扩增出SLPI基因cDNA,将产物克隆进真核载体pcDNA3.1(+)内,构建含SLPI基因的重组真核表...
【关键词】 分泌型白细胞蛋白酶抑制蛋白；真核表达载体；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 张用书 赵志虎 等 《生物技术通讯》 1999年10卷4期 305页ISTICCA
【摘要】 <篇首> 外源基因在原核细胞中的表达,是基因工程和分子生物学许多研究领域中应用最为广泛的技术,大肠杆菌已成为蛋白质表达的首选宿主和生产基因工程多肽药物的主要表达系统.发展通用的高表达、可溶性以及分泌性表达策略,是目前该领域研究中的重点发展方向....
- 概要：
- 方法：
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【学位论文】 作者：秦艳青导师：沈明浩 吉林农业大学 食品科学与工程 食品科学（硕士） 2013年
【摘要】 在乳酸乳球菌的表达研究中,我们发现在培养基上清中始终有一条稳定且表达量较大的蛋白条带.为了探究这些蛋白的本质,挖掘主要蛋白质的潜在功能,本研究利用蛋白质组学技术对该蛋白条带进行了鉴定,并根据结果对打分值最高的蛋白进行了基因克隆、序列分析以及...
- 概要：
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【学位论文】 作者：潘兴亮导师：贡成良 苏州大学 生物学 生物化学与分子生物学（硕士） 2009年
【摘要】 家蚕(Bombyx mori),又名桑蚕,属鳞翅目家蚕蛾科.其幼虫丝腺具有强大的合成和分泌蛋白质的能力,利用家蚕丝腺生物反应器安全、高效地生产药用蛋白有很好的实用前景.近几年以转基因家蚕表达外源蛋白的技术体系正被逐步建立.人胰岛样生长因子(...
- 概要：
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【学位论文】 作者：郗艳丽导师：马颖哲 吉林大学 生物学 生物化学与分子生物学（硕士） 2009年
【摘要】 pICln(p-protein,I-currents,Cl-chloride,n-nucleotide sensitive)是1992年发现的一种蛋白质,推测它与细胞体积的调节有关.目前认为,pICln与ClC-2、P-糖蛋白是阴离子通道的...
- 概要：
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【中文期刊】 黄晨燕 郑茹萍 等 《微生物学报》 2019年59卷8期 1612-1623页MEDLINEISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 [目的]构建一株具备外分泌蛋白功能的工程菌,解决杀虫毒素无法由胞内分泌至胞外,无法直接作用于虫体等问题,为松墨天牛防治提供新思路.[方法]本研究先测定从松墨天牛肠道及其生境中分离出的嗜虫耶尔森氏菌(CSLH88)的生长特性及抗性,进而对其进...
- 概要：
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【中文期刊】 石胜 钟华 等 《细胞与分子免疫学杂志》 2012年28卷6期 629-632页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:采用酵母多拷贝分泌表达载体pPIC9K表达重组嵌合抗人CD22四价基因工程抗体cRFB4FC和cRFB4CH3,并进行活性检测.方法:采用基因克隆技术获得两抗体的基因,然后将其克隆入表达载体pPIC9K中,构建重组质粒pPIC9K/c...
- 概要：
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【中文期刊】 孔蕴 郜海涛 等 《中国生物工程杂志》 2012年32卷5期 24-30页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:为了获得有催化活性的人乙酰半乳糖胺转移酶3(GALNT3),构建了GALNT3可溶性区域(GALNT3-sol)的真核分泌表达载体,在巴斯德毕赤酵母中表达并纯化GALNT3-sol蛋白,体外检测其转糖基活性.方法:以构建好的pET15...
- 概要：
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【中文期刊】 陈科 黄潇 等 《中国生物工程杂志》 2012年32卷2期 24-28页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:以菊欧氏杆菌(Erwinia chrysanthemi)基因组DNA为模板,通过PCR方法找到了该菌的β-1,4-内切葡聚糖酶celY基因及其调控元件并克隆至pUC19载体.为提高纤维素酶celY基因在原核细胞中的分泌表达量,比较了由...
- 概要：
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【中文期刊】 付小强 刘洪波 等 《中国热带医学》 2011年11卷9期 1048-1050页ISTICPKUCA
【摘要】 目的 在毕赤酵母(Pichia pastoris)表达系统中表达结核分枝杆菌ESAT-6基因.方法 以重组质粒pET23a-ESAT-6为模板,亚克隆目的片段ESAT-6至酵母菌分泌表达载体pPICZaA,重组质粒经线性化后电转化转染至毕赤...
- 概要：
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【中文期刊】 赵钰岚 徐珏 等 《生物工程学报》 2010年26卷5期 664-670页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 血管紧张素转化酶(ACE,EC3.4.15.1)在调节血压方面具有重要作用,研究证实,ACE-C结构域是体内使血管紧张素I(AngI)分解的主要活性位点.PCR扩增ACE-C结构域基因片段,克隆至分泌表达载体pPIC9K,转化毕赤酵母GS1...
- 概要：
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【中文期刊】 李洋 李晖 等 《中国生物工程杂志》 2010年30卷4期 54-59页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 将萝卜磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶(RsPHGPx)基因插入到分泌表达载体pPIC9K中,转化巴斯德毕赤酵母GS115细胞,筛选具有G418抗性的单拷贝转化子.经过优化表达条件,RsPHGPx在1%甲醇、pH6.0、28℃条件下诱导60h后得到...
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【中文期刊】 韩建军 薛德文 等 《中华肿瘤防治杂志》 2010年17卷23期 1912-1915页ISTICPKUCA
【摘要】 目的:观察白细胞介素-24(IL24)基因对肝癌细胞系Bel-7402生长的抑制作用,为肝癌的基因治疗提供理论基础.方法:将真核分泌表达载体pIRES-IL-24转染肝癌细胞系Bel-7402.RT-PCR检测IL-24基因的表达,蛋白质印...
- 概要：
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【中文期刊】 胡亚冬 姚冬生 《中国生物工程杂志》 2009年29卷12期 49-53页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 以pPIC9为模板,通过PCR扩增获得酿酒酵母的α-交配因子(α-factor),并克隆至酿酒酵母胞内表达载体pYES2/CT中,构建了一种新型酿酒酵母附加型分泌表达载体pYES2/CT/α-factor(pYCα).再将甘露聚糖酶基因(m...
- 概要：
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【中文期刊】 李朴 文阳安 等 《中国生物工程杂志》 2009年29卷1期 70-74页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 构建抗菌肽Bactenecin7分泌表达载体,鉴定表达产物及检测其生物活性.采用重叠延伸PCR方法拼接合成Bactenecin7基因及其相关调控元件,将目的基因克隆到穿梭载体pMG36e中,经鉴定后电击转化乳酸菌.通过RT-PCR,west...
【关键词】 抗菌肽；Bac2tenecin7；分泌表达；
- 概要：
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【中文期刊】 唐金宝 宋淑亮 等 《中华微生物学和免疫学杂志》 2007年27卷6期 532-535页ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 目的 将EGFP基因与葡萄球菌蛋白A(SPA)基因的ZZ结构域重组,尝试以融合标记的方式构建一种新型免疫亲和试剂.方法 利用基因工程技术将EGFP基因重组至pEZZ18质粒,构建原核分泌表达载体pEZZ-EGFP,通过竞争EILSA和荧光光...
- 概要：
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【中文期刊】 师长宏 徐志凯 等 《中华结核和呼吸杂志》 2005年28卷4期 254-257页MEDLINEISTICPKUCSCD
【摘要】 目的筛选获得分泌表达Ag85B与ESAT6融合蛋白的重组卡介苗(BCG)菌株.方法采用多聚合酶链反应(PCR)方法从结核分枝杆菌毒株H37Rv中扩增出热休克蛋白60(Hsp60)基因及其信号肽序列α-ss,将测序正确的hsp60和α-ss基...
- 概要：
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【中文期刊】 汤宇澄 孙文长 等 《上海第二医科大学学报》 2000年20卷5期 392-394页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 从小鼠肝脏中克隆出endostatin并在COS-7细胞中分泌表达，为其在肿瘤抗血管基因治疗中的应用打下基础。方法 用RT-PCR从鼠肝脏扩增出内皮细胞抑制素cDNA并克隆人测序载体PUC-T测序证实后，装入分泌表达载体pSEC-hy...
- 概要：
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【中文期刊】 戴永刚 尹胜菊 等 《中国输血杂志》 2017年30卷3期 276-278页ISTICCA
【摘要】 目的 人凝血因子Ⅸ(hFⅨ)在人类内源性凝血过程中起着非常重要的作用.hFⅨ表达量绝对或相对不足会导致B型血友病.本研究用毕赤酵母生产重组高活性突变体hFⅨ-R338A.方法 首先构建pPICZaA-hFⅨ-R338A酵母分泌表达载体,其次...
【关键词】 人凝血因子Ⅸ高活性突变体；毕赤酵母；蛋白表达；
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【中文期刊】 王玉 朱艳平 等 《中国生物制品学杂志》 2011年24卷9期 1064-1067页ISTICCSCDCABP
【摘要】 目的 修饰犬干扰素α1(Canine interferon alpha1,CaIFNα1)基因,提高其在毕赤酵母中的表达水平及抗病毒活性.方法 根据巴斯德毕赤酵母表达系统对密码子的偏爱性,将CaIFNα1基因改造后,克隆至分泌表达载体pP...
- 概要：
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【中文期刊】 王丽梅 师长宏 等 《现代生物医学进展》 2011年11卷18期 3405-3407,3430页ISTICCA
【摘要】 目的:构建能够分泌表达结核分枝杆菌热休克蛋白65(Hsp65)与人IL-2融合蛋白的重组耻垢分枝杆菌(recombinant Mycobacterium Smegmatis,rMs).方法:用EcoRV和Hind Ⅲ双酶切合Hsp65-IL...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 赵慧 郑文岭 等 《热带医学杂志》 2010年10卷6期 629-632,659页ISTICCA
【摘要】 目的 使狂犬病病毒糖蛋白在酿酒酵母中获得分泌表达,为制备口服狂犬病疫苗奠定基础.方法 克隆狂犬病病毒糖蛋白基因,与菊粉酶信号肽序列连接为融合基因InG,该融合基因克隆至pYes2载体Gal1启动子下游,构建成诱导分泌表达载体pYes2-In...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 李莹 孙志豪 等 《现代生物医学进展》 2010年10卷24期 4664-4668页ISTICCA
【摘要】 目的:在大肠杆菌中分泌表达重组纤维蛋白的C-末端序列,并检测其抗原性.方法:采用PCR技术扩增了减蛋综合症病毒(EDSV)纤维蛋白C-末端的编码基因,并将其克隆到组成型分泌表达载体pUC18ompAcat上构建pUC18ompA-EDS.将...
- 概要：
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【中文期刊】 张开俊 杨莉 《中国生物制品学杂志》 2009年22卷7期 667-670页ISTICCSCDCABP
【摘要】 目的 在大肠杆菌中表达Serratia marcescens非特异性核酸内切酶(SMNE),并进行纯化、活性检测及应用.方法 合成smne基因,应用PCR技术在基因的5'端引入6个组氨酸标签序列,将其插入分泌表达载体pET-20b(+)中,...
【关键词】 Serratia marcescens；非特异性核酸内切酶；原核表达；
- 概要：
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【中文期刊】 卢雪涛 岳乔红 等 《第四军医大学学报》 2008年29卷16期 1441-1443页ISTICCA
【摘要】 目的:克隆人羧肽酶A1(CPA1)全酶及其4条肽段基因,构建重组表达载体,并在COS-7细胞中分泌表达. 方法:以胰腺总RNA为模板,RT-PCR扩增CPA1全酶基因;再以全酶基因为模板,PCR扩增其4条肽段基因;扩增产物分别克隆于分泌表达...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 王跃华 张青云 《肿瘤研究与临床》 2005年17卷5期 305-308页ISTICCA
【摘要】 目的克隆凋亡抑制因子Survivin基因,利用甲醇酵母Pichia pastoris真核表达系统表达Survivin蛋白.方法利用Survivin特异引物,通过PCR方法扩增人Survivin基因后进行测序,将序列正确的Survivin基因...
【关键词】 Survivin；凋亡抑制；Pichia pastoris表达；
- 概要：
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【中文期刊】 吕彤 涂然 等 《生物工程学报》 2019年35卷7期 1317-1325页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 巴斯德毕赤酵母是当前应用最为方便和广泛的外源蛋白表达系统之一,为了进一步提高其表达外源蛋白的能力,文中建立了基于液滴微流控的毕赤酵母高通量筛选方法,并以木聚糖酶融合荧光蛋白为例,筛选获得木聚糖酶表达和分泌能力提高的突变株.通过PCR扩增得到...
- 概要：
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【中文期刊】 范文辉 王萌 等 《生物工程学报》 2019年35卷1期 49-58页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 为了研究H5亚型流感病毒HA蛋白中头部球状结构的免疫原性及其基因优化对蛋白表达的影响,本研究构建了重组真核表达载体pPICZαA-H5HA,并将其转化至毕赤酵母,经筛选获得重组菌株.SDS-PAGE和Western blotting结果分析...
- 概要：
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【中文期刊】 董聪 高庆华 等 《生物技术通报》 2019年35卷7期 114-120页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 旨在获得表达量高的FAD依赖的葡萄糖脱氢酶.通过FAD依赖的葡萄糖脱氢酶密码子优化,人工合成基因片段,构建重组表达载体pMD-GDH,转化毕赤酵母X33菌株后利用甲醇诱导培养实现分泌表达.结果显示,经试管水平筛选阳性转化子获得一株酶活高且稳...
【关键词】 FAD依赖的葡萄糖脱氢酶；密码子优化；重组毕赤酵母；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 王立群 梁盼红 等 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 2019年37卷1期 70-74页MEDLINEISTICPKUCSCD
【摘要】 目的 筛选并制备亚洲带绦虫45 kDa雌激素调节蛋白(TaEP45)的杂交瘤细胞株. 方法 设计带有酶切位点的特异性引物,以亚洲带绦虫成虫总RNA为模板,RT-PCR扩增TaEP45完整的开放阅读框(ORF),克隆至原核表达载体pET-30...
【关键词】 亚洲带绦虫；45 kDa雌激素调节蛋白；杂交瘤细胞株；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 张钰文 袁航 等 《生物技术通报》 2019年35卷9期 93-98页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 筛选和构建高效降解羽毛角蛋白的菌株,以提高角蛋白酶分泌表达量.从全国5个不同地方的猪、羊圈土壤中取样,在牛奶平板上进行初筛,以羽毛为唯一碳氮源对产角蛋白酶菌株进行复筛.通过形态学观察、16S rDNA序列分析,对菌株进行分类鉴定.为进一步提...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 张伟 刘秀霞 等 《生物工程学报》 2019年35卷3期 425-434页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 以来自于谷氨酸棒杆菌内源AH6启动子和5'UTR及其前38 bp结合合适的Shine-Dalgarno (SD)序列,构建双顺反子表达载体对木聚糖酶进行表达.为了能够实现分泌表达,选取了来自谷氨酸棒杆菌的两种分泌途径的信号肽,分别为Tat型...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 余果宇 张红芸 等 《动物学研究》 2010年31卷6期 565-569页SCIMEDLINEISTICCSCDBP
【摘要】 Bm-TFF2,一种从大蹼铃蟾皮肤分泌物中分离得到的两栖类三叶因子,具有比人三叶因子更强的生物学活性.该研究以Bm-TFF2的cDNA为模板,利用PCR方法扩增Bm-TFF2基因,然后插到含有AOXl启动了和α-因子信号肽序列的表达载体pP...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 刘丽 徐华敏 等 《神经科学通报（英文版）》 2010年26卷3期 225-231页SCIMEDLINEISTICCSCDBP
【摘要】 目的 构建携带GHS-R1a基因的重组腺病毒,为转基因做准备.方法 采用PCR法扩增GHS-R1a基因片段,随后亚克隆至腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV,形成重组质粒pAdTrack-CMV-GHS-R1a.线性化的pAdTrackC...
【关键词】 腺病毒载体；同源重组；生长激素促分泌素受体1a亚型；
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