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【学位论文】 作者：邓若磊 导师：肖凯 河北农业大学 作物学 作物栽培与耕作学（硕士） 2007年
【摘要】 提高作物品种的氮素利用效率对于改善人类的生存环境、实现农业的可持续发展具有重要作用。植物种属中部分铵转运蛋白在改善植物氮胁迫条件下的氮素吸收和利用效率具有重要作用。本项研究根据GenBank中已经公布的Nippenbare铵转运蛋白OsAM...
- 概要：
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- 结论：
- 概要：
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【中文期刊】 曹卿 杨杰 等 《分子植物育种》 2010年8卷1期 35-40页
【摘要】 本研究克隆了江苏南京地区灰飞虱(Laodelphax striatellus Fallén)体内共生菌Wolbachia的groEL基因全长序列.序列分析表明,其开放阅读框为1 659 bp,编码552个氨基酸残基,分子量为58.884 k...
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【中文期刊】 马嘉楠 李蕊 等 《微生物学杂志》 2023年43卷6期 35-41页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 菌根是真菌与植物之间形成的互惠互利的营养共生体,对生态环境有重大的意义.外生菌根真菌与植物互作机制以及真菌基因功能的深入研究都需要对菌根真菌进行遗传转化,本研究以外生菌根真菌模式生物双色蜡蘑(Laccaria bicolor)为研究对象,选...
- 概要：
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【中文期刊】 陈新君 黄静 等 《海南医学院学报》 2019年25卷2期 90-93页ISTICPKUCA
【摘要】 目的:采用克隆的番茄E8启动子和夏侧金盏花虾青素合成相关酶基因Adketo构建果实特异表达载体,为利用植物基因工程进行虾青素生产提供新途径.方法:采用RT-PCR的方法,从夏侧金盏花中克隆到虾青素合成相关酶基因Adketo,同时以番茄基因组...
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【中文期刊】 李小平 邓楠 等 《分子细胞生物学报》 2006年39卷1期 1-8页SCIMEDLINEISTICCSCDBP
【摘要】 植物类受体蛋白激酶(plant receptor-like kinases RLKs)以其特有的结构在植物的生长、发育和防御等多种生理生化过程中发挥着重要的作用.利用RNA干扰技术(RNA interference RNAi)来研究RLKs...
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【中文期刊】 刘长命 张显 等 《西北植物学报》 2018年38卷7期 1179-1186页ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 该研究以哥伦比亚生态型野生拟南芥为材料,将甜瓜CmSAMDC基因构建到植物双元表达载体pCAMBIA1304上,采用农杆菌介导法转入拟南芥,在含有50 mg/L潮霉素(Hyg) MS固体培养基上筛选转基因后代,并利用T3代转基因幼苗进行耐盐...
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【中文期刊】 周琼 胡姗姗 等 《广西植物》 2018年38卷12期 1614-1625页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 为了实现罗汉果生产中免除人工授粉和果实无籽化,该研究利用pBI121-Gus构建果实特异启动子2A11与生长素合成相关基因iaaM的嵌合基因(2A11-iaaM)过量表达载体,以罗汉果雌株叶盘为材料,采用农杆菌介导法建立罗汉果高效遗传转化体...
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【中文期刊】 李珅 王珂 等 《西北植物学报》 2018年38卷11期 1968-1974页ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 利用黄孢原毛平革菌木质素过氧化物酶基因(PcLIPH8),构建植物双元表达载体35S∷PcLIPH8,并遗传转化水稻野生型品种Kitaake,对转基因水稻进行分子鉴定、酶活及木质素含量测定、表型观察等分析.结果表明:(1)成功构建了植物双元...
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【中文期刊】 韦淑亚 张莹莹 等 《基因组学与应用生物学》 2013年5期 581-588页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 水稻钙依赖型蛋白激酶(CDPKs)是一个响应逆境胁迫并在植物发育过程中起重要作用的蛋白激酶。我们采用RT-PCR从水稻品种日本晴(Oryza sativa L. cv. Nipponbare)中克隆了OsCPK9基因靠近翻译起始位点下游的一...
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【中文期刊】 杨成运 段广才 等 《郑州大学学报(医学版)》 2011年46卷1期 57-59页ISTICPKUCA
【摘要】 目的:构建含有人幽门螺杆菌(H.pylori,Hp)ureB基因的植物表达载体.方法:采用高保真PCR技术从质粒pMED-ureB中扩增出ureB基因,构建质粒pUC18-ureB,再将pUC18-ureB酶切,将ureB基因与质粒pBI1...
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【中文期刊】 芦春斌 高忱 《生物技术通报》 2011年4期 143-146页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 HPV16型为主的多种HPV病毒可诱发机体发生宫颈癌等疾病,以重叠PCR法人工合成HPV16 E6、E7致癌基因的融合基因,以之为目的基因构建了无选择标记基因(Marker-Free)双元载体,期望转化番茄开发新型宫颈癌治疗性疫苗-转基因植...
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【中文期刊】 姚洪平 王广君 等 《生物技术通报》 2010年8期 214-217页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 用XholⅠ和SalⅠ分别双酶切植物表达载体pCAMBIA1300和含有目的基因的pMD19-T-BenA3,定向连接得到重组质粒pCAMBIA1300-BenA3,将其导入农杆菌AGL-1.经PCR鉴定后,得到可用于绿僵菌转化的农杆菌双元...
【关键词】 BenA3基因；pCAMBIA1300-BenA3；农杆菌；
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【中文期刊】 石凤敏 云锦凤 等 《生物技术通报》 2010年8期 125-128页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 以植物双元表达载体pCAMBIA2300为基础,设计分别带有酶切位点Xba I和Pst I的一对引物,从克隆载体pGM-T-MwLEA3中扩增到目的基因MwLEA3.用Xba I和Pst I双酶切该目的基因及表达载体pCAMBIA2300,...
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【中文期刊】 王庆菊 周泳 等 《西北植物学报》 2010年30卷7期 1309-1315页ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 通过构建pVB4215植物双元表达载体,采用农杆菌介导法转化烟草,研究VviDREB1在植物体中的异源表达特性.结果显示,实验获得了25个Hyg抗性株系,经过PCR、RT-PCR和GUS组织化学染色检测及Hyg基因的PCR复检等多点验证,证...
【关键词】 红豆越桔；VviDREB1基因；表达载体构建；
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【中文期刊】 高喜乐 吴国江 等 《广西植物》 2010年30卷2期 261-264页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 从拟南芥基因组中分别克隆AtCKX1基因和RD29B基因5′-侧翼1705 bp启动子区域序列,生物信息学表明,AtCKX1含有黄素腺嘌呤二核苷酸(FAD)和细胞分裂素的结合位点;RD29B启动子片段中存在ABA响应元件(ABA respo...
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【中文期刊】 梁雪莲 关彩蝶 等 《生物技术通报》 2009年10期 189-193页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 Taq DNA聚合酶是PCR反应中的重要试剂,它具有结构性稳定和耐高温的特性,有能在90℃以上合成DNA的能力,因此被广泛使用于DNA扩增技术当中,但是国内尚未报道有关Taq DNA聚合酶基因用于转基因的研究.若将此耐热基因转入某些经济作物...
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【中文期刊】 梁倩倩 魏玉杰 等 《西北植物学报》 2009年29卷8期 1520-1526页ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 的RNAi双元表达载体pARC,转化烟草获得转基因植株.
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【中文期刊】 《西北植物学报》 2009年29卷10期 1962-1966页ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 依据RNA干涉机制,以TMV复制酶基因为靶标基因,针对TMV 5个株系复制酶基因间高度同源序列设计引物,经RT-PCR反应获得靶序列,构建靶序列反向重复结构的RNA干涉双元载体.用根癌农杆菌介导将外源基因转化至烟草品种K326基因组中,培育...
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【中文期刊】 周明 杨世湖 等 《遗传》 2008年30卷3期 367-372页MEDLINEISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 将包含Pib基因启动区及下游完整编码区的9.9 kb DNA片段克隆到双元载体pPZP2Ha3(+),构建了35S驱动的正义表达载体pNAR701(20.3 kb);同时将Pib基因编码区6 986～9 392 bp之间的DNA片段,克隆到...
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【中文期刊】 XIONG Ai-sheng 庄静 等 《西北植物学报》 2008年28卷8期 1521-1532页ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 利用油菜UniGene数据库,以拟南芥转录因子保守序列为探针,通过电子克隆方法分离得到一个UniGene库Bna.17538,进一步序列拼接得到一个油菜AP2/ERF-B4亚族的转录因子BnaERFB4-1,长度为672bp,并进行了相关的...
【关键词】 转录因子；AP2/ERF-B4亚族；RT-PCR；
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【中文期刊】 律凤霞 郭兆奎 等 《植物研究》 2008年28卷3期 310-314页ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 以TMV复制酶基因作为RNAi的靶向序列,应用RT-PCR法获得目的DNA序列.依据RNAi机制,以酶切后连接的方法将目的DNA序列正向、反向锚定连接到pUCCRNAi载体质粒,构建含目的序列反向重复结构的RNA干涉中间载体;反向重复结构酶...
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【中文期刊】 万小荣 李玲 《植物生理学通讯》 2007年43卷2期 283-287页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 从拟南芥基因组中克隆RD29A基因5'-侧翼520bp启动子区域序列,生物信息学分析表明,该启动子片段中存在脱水胁迫响应元件(DRE)、ABA响应元件(ABRE)、TATA-box、CAAT-box等顺式作用元件.构建了干旱诱导型启动子At...
【关键词】 RD29A基因启动子；NCED基因；双元载体构建；
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【中文期刊】 郝岗平 边高鹏 等 《广西植物》 2007年27卷1期 132-136页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 采用高保真PCR方法从pGEM-VP1-T质粒扩出VP1基因,定向克隆到含DHA的融合中间载体pUC18-DHA,得到pUC18-VP1-DHA,经测序证实核酸序列正确后,再亚克隆到转化范围广,转化效率高,且含有双增强子的高效植物双元表达载...
【关键词】 口蹄疫病毒VP1基因；植物高效表达载体；
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【中文期刊】 胡钟东 乔玉山 等 《西北植物学报》 2007年27卷7期 1285-1290页ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 以砂梨'若光'的成熟果实为材料,根据脂氧合酶氨基酸保守区设计1对简并引物,采用RT-PCR克隆到1段长827 bp的序列,经Blast比对和DNAstar软件聚类分析,结果表明由该序列推导出的氨基酸序列含有脂氧合酶氨基酸保守结构域,与马铃薯...
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【中文期刊】 严飞 赵新宇 等 《生物工程学报》 2007年23卷3期 423-428页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 为了研究基因的特征、理化特性及其功能机制,通常需要构建多个真核表达裁体,涉及到多次的引物设计、酶切、连接和鉴定等繁琐的亚克隆过程.构建携带易于多种实验研究的多用或通用载体是基因工程载体的发展方向.为此,利用DIRES载体为骨架质粒,在A和B...
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【中文期刊】 叶兴国 秦华 《生物工程学报》 2007年23卷1期 138-144页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 高频率获得无选择标记转基因植株有利于转基因植物的环境释放和安全性生产,农杆菌介导的共转化法是获得无标记转基因植株的方法之一.含二段T-DNA载体的共转化法已被人们成功应用,而二段以上T-DNA载体的共转化法还未见报道.基于这一目的,通过几个...
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【中文期刊】 马欣荣 谈心 等 《应用与环境生物学报》 2006年12卷2期 151-154页ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 RNA干扰技术已广泛应用于沉默基因表达的研究.本文分析烟草花叶病毒(TMV)基因序列,选择设计编码小分子发卡结构RNA(hpRNA)的cDNA;并根据农杆菌双元载体质粒p2355多克隆位点区限制性酶切位点,两端分别加入XbaI和BamHI酶...
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【中文期刊】 俞嘉宁 原江锋 等 《西北植物学报》 2006年26卷11期 2250-2256页ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 将TaNHX2基因重组于质粒pBIN438的CaMV 35S启动子下游,构建含TaNHX2基因的植物双元表达载体pBIN438-TaNHX2.采用根癌农杆菌介导的真空渗透法转化拟南芥,得到T0代转基因拟南芥种子.经含Kan的平板筛选及PCR...
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【中文期刊】 赵咏梅 罗雯 等 《中国人兽共患病学报》 2006年22卷7期 613-616页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的运用植物转基因技术,探索构建表达抗汉滩病毒鼠源单抗3G1单链抗体基因的植物生物反应器的可能性及技术路线.方法将鼠源单抗3G1单链抗体基因连接在双元表达载体pBI121 CaMV35s启动子下游,构建了能在植物中高效表达的载体pBI121...
- 概要：
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【中文期刊】 王永录 王炜 等 《中国人兽共患病学报》 2006年22卷11期 1059-1061,1064页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 双元载体是目前转基因植物工程普遍应用的载体,本文将口蹄疫病毒P12A基因、3C基因串联,构建植物表达载体pBin-438P12A-3C.方法 为便于实验操作,本试验采用先将基因片段P12A、3C构建到一个中间质粒pcDNA3.1(+)...
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【中文期刊】 王强 喻富根 《西北植物学报》 2005年25卷7期 1377-1382页ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 为了探索利用植物分泌特性来表达重组蛋白的可行性,先构建了含钙网蛋白信号肽的植物双元载体pBIcal,再向该载体中插入霍乱毒素B亚单位编码基因,最后得到表达载体pBIcal-ctb.通过根癌农杆菌介导,该表达载体转化烟草,在卡那霉素抗性培养基...
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【中文期刊】 卜庆云 武亮 等 《遗传》 2005年27卷3期 417-422页MEDLINEISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 根据GenBank发表的四倍体马铃薯栽培种(Solanum.tuberosum)来源的马铃薯蛋白酶抑制剂Ⅱ基因序列,用PCR方法从二倍体马铃薯lVP101(Solanum.phurejia)cDNA文库和基因组DNA扩增得到马铃薯蛋白酶抑制...
【关键词】 二倍体马铃薯(Solanum.phurejia)；蛋白酶抑制剂Ⅱ；伤害诱导；
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- 方法：
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【中文期刊】 刘红莉 陈宏伟 等 《生物工程学报》 2004年20卷6期 827-831页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 利用PCR技术克隆人乳头瘤病毒HPV-16 L1蛋白编码基因,将其重组于pUCmT和pBI121中,构建含HPV-16L1基因的植物双元表达载体pBI-L1,L1基因由CaMV 35S启动子控制表达.采用叶盘共培育法经根瘤农杆菌介导转化烟草...
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【中文期刊】 刘红莉 雷霆 等 《西安交通大学学报（医学版）》 2004年25卷5期 425-429页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的构建大肠杆菌热不稳定肠毒素B亚单位(LT-B)基因的植物表达载体,并建立LT-B转基因烟草植株.方法用PCR从pMMB68扩增LT-B编码基因,将其克隆于pUCmT和pBI121载体,进而构建植物表达双元载体pBI-LTB,LT-B基因...
【关键词】 大肠杆菌热不稳定肠毒素B亚单位；转基因烟草；植物疫苗；
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- 方法：
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【中文期刊】 金松恒 翁晓燕 等 《遗传》 2004年26卷6期 881-886页MEDLINEISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 利用pGEM-T easy 、pBluescript KS+获得了RCA基因两端可以引入与双元表达载体pCAMBIA1301多克隆位点相匹配的单酶切位点,将该片段连接到pCAMBIA1301载体,构建了RCA基因的反义植物表达载体pCAMR...
【关键词】 水稻；Rubisco活化酶；反义；
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【中文期刊】 张艳华 王罡 等 《遗传》 2003年25卷5期 563-566页MEDLINEISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 本实验构建了含有CaMV35S启动子控制下的Pti5-VP16基因的植物双元表达载体pBI121UCH1.通过根癌农杆菌叶盘转化法,将Pti5-VP16基因导入烟草SRI中,经卡那霉素筛选,获得了抗性植株.经PCR和Southern印迹分析...
【关键词】 Pti5-VP16基因；表达载体；转化；
- 概要：
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【中文期刊】 彭志强 俞守义 等 《第一军医大学学报》 2002年22卷8期 736-738页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的构建含霍乱肠毒素B亚单位(CTB)基因的植物双元表达载体.方法采用高保真PCR方法调出CTB基因,定向克隆到中间载体pRTL2,经测序证实核酸序列正确后,再亚克隆到含植物双元表达载体pBI121上;采用电击法,将含CTB的植物表达载体转...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 赵林 王林会 等 《中国真菌学杂志》 2019年14卷3期 129-133页ISTICCSCD
【摘要】 目的 构建真菌通用的RNA干扰载体,以广泛用在多种真菌基因干扰的研究中.方法 利用现有的植物双元表达载体进行改造,将pBlueScriptⅡ的多克隆位点(MCS)酶切下来构建干扰载体;为使载体适于农杆菌转化,加入T-DNA边界重复序列;为便...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 孟凤丽 张改平 等 《生物技术通讯》 2017年28卷4期 465-470页ISTICCA
【摘要】 目的:结合水稻胚乳生物反应器的优点,将人乳头瘤病毒(HPV)31、33亚型的L1蛋白编码基因导入水稻,构建HPV31 L1、HPV33 L1植物表达载体,最终实现其在水稻胚乳表达系统中的表达.方法:利用生物信息学方法分析并优化合成HPV31...
【关键词】 人乳头瘤病毒L1基因；根癌农杆菌；水稻胚乳表达系统；
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