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【中文期刊】 娄海伟 林俊芳 等 《中国食品学报》 2021年21卷10期 15-22页
【摘要】 为获得草铵膦完全抑制蛹虫草生长的最小浓度和一种快速构建Bar基因双元载体的方法,本文首先采用浓度梯度法研究草铵膦对蛹虫草的抑制效果,其次采用双接头PCR(DJ-PCR)构建Bar基因表达盒,然后分别采用T4 DNA连接酶法和同源重组法把Ba...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 徐莉 赵舟宙 等 《生物工程学报》 2008年24卷2期 220-225页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 利用双启动子构建含人补体调节蛋白 DAF 和 MCP cDNA 的双顺反子重组表达载体 pcDNA3-DAFMCP-DP,以磷酸钙沉淀法转染 NIH3T3 细胞,用G418筛选获得 NIH3T3 pcDNA3-DAFMCP-DP 转化细胞....
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 徐莉 赵舟宙 等 《中国生物工程杂志》 2007年27卷9期 8-13页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 利用双启动子构建含人补体调节蛋白MCP和CD59 cDNA的双顺反子重组表达载体pcDNA3-MCPCD59-DP,以磷酸钙沉淀法转染NIH3T3细胞,用G418筛选获得NIH3T3pcDNA3-MCPCD59-DP转化细胞.PCR实验结果...
- 概要：
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【中文期刊】 李煦 王荣春 等 《山东大学学报（理学版）》 2007年42卷9期 1-6,29页
【摘要】 多基因植物表达载体用于植物遗传转化是培育具有多种优良品质作物的有效策略.双T-DNA系统是实现筛选完成后选择标记基因删除的一种简便可行的方式.为培育高度抗逆或去除标记基因的农作物,构建了多基因双T-DNA植物表达载体2T-bbgdD,其中含...
- 概要：
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- 结论：
【学位论文】 作者：郑海霞 导师：张振刚 扬州大学 临床医学 内科学（硕士） 2013年
【摘要】
目的:构建能够在体外真核细胞中过表达目标基因Brcc3的重组腺病毒真核表达载体，并进而使用HEK293细胞包装重组腺病毒，从而为后续转染小鼠心脏成纤维细胞（cFs）探讨细胞内Brcc3基因过表达对TGF-β信号通路各环节的影响做准备。
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【学位论文】 作者：李世彬 导师：马永平 重庆医科大学 重庆医科大学 生物学 生物化学与分子生物学（硕士） 2011年
【摘要】
轮状病毒是引起婴幼儿腹泻的首要病毒性病原体,全球每年超过一亿儿童感染该病毒并导致近百万例的死亡。Vp4是轮状病毒主要的抗原基因之一,其产物外衣壳蛋白在感染宿主细胞时起重要作用。因此,我们选择vp4作为研制相关疫苗的目标基因。
...
- 概要：
- 方法：
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【学位论文】 作者：李江 导师：马永平 重庆医科大学 重庆医科大学 生物学 生物化学与分子生物学（硕士） 2011年
【摘要】 肠道病毒71型(EV71)是导致手足口病的主要病原体之一,常引起多种与神经系统相关的严重疾病。Vp1是EV71病毒主要的抗原基因,其编码的外衣壳蛋白在感染宿主细胞时起重要作用。因此,我们选择vp1作为研制EV71疫苗的目标基因。LTB有很强...
- 概要：
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- 结论：
【学位论文】 作者：赵艳敏 导师：张东裔 湖南师范大学 生物学 生物化学与分子生物学（硕士） 2010年
【摘要】
第一部分两种蜘蛛多肽毒素酵母双杂交诱饵载体的构建及初步鉴定
酵母双杂交系统是一种直接在真核细胞内检测蛋白相互作用的方法，具有灵敏度高和特异性好的优点。自1989年由Fields等提出并初步建立以来，得到了不断的完善和改进，在细...
- 概要：
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【学位论文】 作者：张静 导师：杨艳燕 湖北大学 药学 微生物及生化药学（硕士） 2009年
【摘要】
纳豆激酶是一种具有溶解血栓功能的蛋白酶，属于丝氨酸蛋白酶类。最初是从日本传统发酵食品纳豆(natto)中提取得到的。它由枯草芽孢杆菌产生，有较强的纤溶活性。具文献报道，纳豆激酶具有安全性好、半衰期长、口服有效等优点，受到了广泛的关注。
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【学位论文】 作者：齐维 导师：杨慧兰 华南理工大学 华南理工大学 化学工程与技术 发酵工程（硕士） 2009年
【摘要】 单纯疱疹病毒（herpes simplex virus，HSV）是人类病毒性疾病的常见病原体之一，含有HSV-1和HSV-2两个血清型。HSV-1主要感染腰部以上、生殖器以外的皮肤、粘膜和神经系统，而HSV-2则主要造成腰部以下的皮肤疱疹，...
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【学位论文】 作者：沈艳霞 导师：张永学 华中科技大学 临床医学 影像医学与核医学（博士） 2008年
【摘要】 目的：将编码GGC肽（diglycylcysteine，双甘氨酰半胱氨酸）的基因序列与人生长抑素2a型受体（hSSTr2a）基因的膜外N端开放阅读框相连接，构建融合受体重组腺病毒载体Ad5-GGC-hSSTr2a-IRES-EGFP。通过体...
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【学位论文】 作者：赵举峰 导师：杨慧兰 华南理工大学 华南理工大学 化学工程与技术 发酵工程（硕士） 2008年
【摘要】 本研究以已成功构建的pVAX-LAT重组载体为模板,根据GenBank中LATORFs的核苷酸序列设计引物,并在引物的5'端分别引入Kpn I及Pst I酶切位点,特异性扩增LAT ORFs序列。TA克隆后转化大肠杆菌Top 10,抗性筛选...
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【学位论文】 作者：罗娟 导师：吴云锋 韩烈保 西北农林科技大学 西北农林科技大学 植物保护 植物病理学（硕士） 2008年
【摘要】 畜牧业是我国重要的经济产业，紫花苜蓿是畜牧业中重要的饲草，素称“牧草之王”。但近几年来病虫害问题越来越严重，已经成为制约紫花苜蓿生产的一个重要的因素。在我国北方地区，尤其以真菌性病害如褐斑病、霜霉病和锈病发生严重；虫害种类也比较多，其中主要...
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【学位论文】 作者：李煦 导师：杨爱芳 山东大学 生物学 细胞生物学（硕士） 2007年
【摘要】 20世纪80年代以来，以转基因技术为代表的植物基因工程技术的广泛应用为植物的遗传改良开拓了广阔的前景。传统的转基因植物绝大多数是通过单个目的基因的遗传转化而获得的。长期以来，培育具有多种优良品质，如高产、优质、高抗、多抗或具备其他生产上有用...
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【学位论文】 作者：李军 导师：窦忠英 西北农林科技大学 西北农林科技大学 兽医学 临床兽医学（硕士） 2007年
【摘要】 胚胎干细胞(Embryomc Stem Cells，ES细胞)起源于早期胚胎细胞，培养扩增时，可维持未分化状态并具有自我更新能力的原始细胞。理解ES细胞多能性和自我更新的转录调控系统是理解人类发育过程及实现这些细胞治疗潜能的基础。其中同源域...
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【学位论文】 作者：邓若磊 导师：肖凯 河北农业大学 作物学 作物栽培与耕作学（硕士） 2007年
【摘要】 提高作物品种的氮素利用效率对于改善人类的生存环境、实现农业的可持续发展具有重要作用。植物种属中部分铵转运蛋白在改善植物氮胁迫条件下的氮素吸收和利用效率具有重要作用。本项研究根据GenBank中已经公布的Nippenbare铵转运蛋白OsAM...
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【学位论文】 作者：何杨 导师：金礼吉 大连理工大学 生物学 生物化学与分子生物学（硕士） 2007年
【摘要】 本研究的目的是构建带有IGF-1基因和绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein，简称 GFP)基因的柞蚕核型多角体病毒双启动子转移载体。 首先，根据苜蓿银纹夜蛾和家蚕的核型多角体病毒 IE-1 基因上游序列...
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【学位论文】 作者：张美祥 导师：郭蔼光 范三红 西北农林科技大学 西北农林科技大学 生物学 生物化学与分子生物学（硕士） 2007年
【摘要】 抗病相关基因是植物分子生物学研究的热点领域之一。脂肪酸alpha双加氧酶(fatty acid alpha-Dioxygenase)是近年来植物中发现的一类重要的抗病相关基因，已在多个物种中相继发现并得以克隆。脂肪酸alpha双加氧酶参与脂...
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【学位论文】 作者：仕瑶慧 导师：杨慧兰 华南理工大学 华南理工大学 化学工程与技术 发酵工程（硕士） 2007年
【摘要】 本实验通过构建表达2.2kbLAT的真核表达载体pVAX-LAT，使其在SH-SY5Y神经细胞中瞬时表达，为后续在HSV-2低滴度情况下，模拟人体内神经节中LAT的大量表达，抗神经细胞凋亡的实验，提供了实验基础。 从疱疹病毒Ⅱ型基...
- 概要：
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【学位论文】 作者：许小勇 导师：程智慧 西北农林科技大学 西北农林科技大学 园艺学 蔬菜学（硕士） 2006年
【摘要】 以加工番茄育种材料B04的果实为材料，对PG基因片段进行了克隆，并构建了正义植物表达载体和反义植物表达载体。主要实验结果如下： (1)提取了B04加工番茄红熟果实总RNA，经过反转录PCR，扩增出一条697bp的目的片段。通过TA...
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【学位论文】 作者：雷智勇 导师：向成斌 中国科学技术大学 生物学 生物化学和分子生物学（硕士） 2006年
【摘要】 Invitrogen公司利用λ噬菌体点特性重组系统建立的GatewayTM重组克隆技术极大的方便了目的基因的高通量的克隆。目的基因首先穿梭到入门载体中,然后根据各种模式生物研究的需要重组到的各种目的载体中去。由于其高通量的高效克隆的特点,许...
- 概要：
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【学位论文】 作者：宋凯 导师：张涌 西北农林科技大学 西北农林科技大学 兽医学 临床兽医学（硕士） 2006年
【摘要】 CD9蛋白广泛分布于血小板、前B细胞、单核细胞等造血细胞中，CD9还分布于骨髓细胞、脑细胞和肌肉细胞中，另外CD9还普遍在不同组织的干细胞表面表达，在卵母细胞中也有CD9表达。CD9相对分子质量为24KD。分子中有4个疏水区，往返4次穿过细...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【学位论文】 作者：肖红卫 导师：张涌 西北农林科技大学 西北农林科技大学 生物学 发育生物学（硕士） 2006年
【摘要】 本研究在分别构建了表达人膜反应性溶解抑制物(CD59)基因的重组载体pEGFPN1-CD59、表达人膜辅蛋白(MCP)基因的重组载体pEGFPN1-MCP后，利用精子介导法生产转CD59和MCP双基因小鼠，并采用PCR检测其结果。利用PCR...
- 概要：
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- 结论：
【学位论文】 作者：郝炜 导师：王跃进 西北农林科技大学 西北农林科技大学 园艺学 果树学（硕士） 2005年
【摘要】 芪合成酶(STS)是催化植物体内芪类化合物合成的关键酶，乙醛脱氢酶(ALDH)是广泛存在于动物、植物和微生物体内的一类酶，参与体内多种代谢途径，目前它在植物抗病反应中的作用还有待进一步了解。本实验室研究人员通过mRNA差异显示技术(DD.....
- 概要：
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【学位论文】 作者：孙燕 导师：李文鑫 武汉大学 武汉大学 生物学 微生物学（博士） 2003年
【摘要】 为进一步在翻译水平研究ZNF268蛋白的表达,我们构建了ZNF268重组原核表达载体,纯化在大肠杆菌中表达的产物,制备了特异的ZNF268抗体paZNF268ab.以paZNF268ab抗体为依托,用Western印迹法检测出在4月龄人胚胎...
- 概要：
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【中文期刊】 黎燕 周克茹 等 《南京医科大学学报（自然科学版）》 2025年45卷3期 319-326页ISTICPKUCA
【摘要】 目的:利用反向遗传学技术拯救重组H1N1 pdm09病毒,评价其在MDCK细胞和鸡胚内的生长特性以及对BALB/c小鼠的致病性.方法:RT-PCR技术扩增A/Puerto Rico/8/1934(简称PR8)病毒基因片段,并克隆至pHW20...
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- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 邵帅 纪晓岚 等 《中国动物保健》 2025年27卷1期 240-241页
【摘要】 为构建脑心肌炎病毒VP2 2A基因真核表达载体.参考EMCV毒株基因组序列,设计VP2 2A基因特异性引物,PCR扩增VP2 2A基因目的片段,双酶切目的基因和pcDNA3.1-Flag质粒产生相同的黏性末端,使用T4 DNA连接酶连接相同...
- 概要：
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【中文期刊】 曹鑫艳 王钢 等 《动物医学进展》 2025年46卷6期 13-18页
【摘要】 旨在初步分析绵羊清道夫受体A(SRA)启动子活性调节机理,为进一步探究SRA转录调控机制奠定基础.使用同源重组的方法构建SRA启动子报告质粒,Xho Ⅰ酶切验证,进一步测序比对;将构建的SRA启动子报告质粒与海肾荧光素酶载体共转染至HEK2...
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- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 魏鼎 白心悦 等 《中华耳科学杂志》 2024年22卷5期 861-867页ISTICPKUCSCD
【摘要】 据世界卫生组织2021年报道,50％以上先天性听力损失是由遗传性因素变异引起的.临床上用于提高耳聋患者听力的几种主要方式(如佩戴助听器、植入人工耳蜗)都有一定局限性.近年来,重组腺相关病毒(recombination adeno-assoc...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 杨杰 李卫 等 《现代肿瘤医学》 2023年31卷5期 806-811页ISTICCA
【摘要】 目的:应用酵母双杂交筛选人胃癌耐药细胞中与SIVA-1基因相互作用的蛋白.方法:构建人胃癌耐药细胞的cDNA文库,运用酵母双杂交及体外免疫共沉淀实验方法筛选SIVA-1相关作用蛋白,探讨其对胃癌耐药细胞耐药性的影响机制.结果:成功构建人胃癌...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 高艳萍 任静 等 《中国牛业科学》 2023年49卷1期 25-29页
【摘要】 可卡因—苯丙胺调节转录肽(cocaine-and amphetamine regulated transcript peptides,CART)是一种内源性神经肽,广泛分布于中枢神经和外周神经系统.CART具有多种不同的生理功能,在牛繁殖机...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 郭跃荣 任静 等 《中国牛业科学》 2023年49卷3期 40-44页
【摘要】 [目的]构建以及鉴定可卡因—苯丙胺调节转录肽(cocaine-and amphetamine regula-ted transcript peptides,CART)基因启动子片段双荧光素酶报告载体,为后续筛选CART基因核心启动子奠定试验...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 杜建玲 安利佳 等 《生物化学与生物物理进展》 2007年34卷4期 425-430页SCIISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 采用以下方法探讨SelS在内皮细胞中的表达和作用:将SelS基因克隆到真核表达载体pLNCX2,RT-PCR、Xho I/Cla I双酶切以及DNA序列分析验证目的基因;利用脂质体转染技术将pLNCX2-SelS或pLNCX2转染至人脐静脉...
【关键词】 内皮功能障碍；Tanis/SelS；ECV304细胞；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 戴橄 汪世平 等 《生物化学与生物物理进展》 2007年34卷3期 283-291页SCIISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 采用双向凝胶电泳和质谱技术对日本血吸虫单性感染雄虫和双性感染雄虫蛋白质表达谱进行分析,并在mRNA水平进行验证;观察差异表达SJCHGC蛋白重组真核表达质粒pEGFP-C1/SJCHGC在COS-7细胞中的表达和亚细胞定位,并分析其表达产物...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 沈雳 陈少萍 等 《生物化学与生物物理进展》 2005年32卷11期 1061-1068页SCIISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 根据抗PTCA或支架后再狭窄的基因治疗需要多基因治疗的特点,用基因重组技术构建了hVEGFi65和嵌合水蛭肽(fused hirudin,FH)融合基因,并克隆到真核表达载体pcDNA3.0中,通过脂质体介导将pcDNA3.0/hVEGF1...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 陈其军 安瑞 等 《生物化学与生物物理进展》 2004年31卷10期 951-954页SCIISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 与Gateway技术兼容的农杆菌双元载体系统已开始应用于植物功能基因组的研究,但应用这些载体系统的一个瓶颈问题,是如何简单、经济和高效地将PCR产物或其他来源的目的DNA片段构建到入门载体上获得入门克隆.为此,将传统的TA克隆技术与Gate...
【关键词】 Gateway克隆技术；TA克隆技术；入门载体；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 孟宪敏 吴小兵 等 《生物化学与生物物理进展》 2002年29卷4期 597-603页SCIISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 为探讨双基因共表达对再狭窄的防治作用,分别构建了含反义凝血酶受体(ATR)或/和p21单、双基因及报告基因绿色荧光蛋白(GFP)的腺病毒伴随病毒(AAV)载体.上述载体经脂质体介导转染BHK-21细胞, G418筛选获得整合有外源基因的细胞...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 符浩东 张晨曦 等 《核农学报》 2022年36卷5期 885-894页
【摘要】 玉米赤霉烯酮(ZEN)是具有雌激素作用的次生代谢产物,可以被来源于Gliocladium roseum的内酯水解酶降解为无毒物质.为了实现玉米赤霉烯酮降解酶基因zlhy-6在枯草芽孢杆菌中的表达,获得不含抗生素抗性基因的食品级重组枯草芽孢杆...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 李雅静 宫强 《现代畜牧兽医》 2022年11期 19-23页
【摘要】 研究旨在构建铜绿假单胞菌oprH基因的DNA疫苗.试验根据GenBank中已发表的铜绿假单胞菌的oprH基因序列,设计合成了一对特异性引物,利用PCR技术由铜绿假单胞菌基因组DNA中扩增获得该目的基因,进行胶回收纯化并与T载体进行连接,经双...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 刘金宜 富炜琦 等 《中国药理学通报》 2019年35卷5期 733-739页ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 目的 构建ST8Sia1基因过表达载体,建立稳定过表达ST8Sia1的细胞株,检测ST8Sia1的表达及对细胞增殖的影响.方法 通过PCR反应扩增ST8Sia1基因片段,双酶切目的基因片段和pEGFP-C1载体以及pHBLV-CMV-MCS...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
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