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【中文期刊】 王准 陈玉娟 等 《科学技术与工程》 2019年19卷1期 71-77页
【摘要】 纳米抗体具有相对分子质量小、稳定性高、特异性强以及能够穿过血脑屏障等众多优势,而且其能够通过大肠杆菌、酵母等简单微生物大量表达.大肠杆菌周质表达纳米抗体是目前纳米抗体制备主要的方法之一,但是纳米抗体的表达水平还相对较低.以pET22 b和p...
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【中文期刊】 李振国 徐明波 等 《药物生物技术》 2011年18卷1期 73-76页ISTICCA
【摘要】 大肠杆菌表达系统是基因表达技术中发展最早和应用最广的表达系统,由于大肠杆菌周质空间具有其独特优势,重组蛋向在周质表达和提取技术得到国内外学者的关注.文章从重组蛋白在大肠杆菌周质表达的特点、提高周质蛋白表达的策略以及周质蛋白提取技术进行了论述...
- 概要:
- 方法:
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【中文期刊】 武玉露 夏玲珍 等 《生物加工过程》 2021年19卷2期 185-192页ISTICCABP
【摘要】 开发一种将肿瘤坏死因子α(TNFα)分泌到大肠杆菌周质空间的表达策略.将实验室自主研发的新型融合标签Ffu与TNFα融合后克隆制备成重组质粒pFfu-TNFα.对重组蛋白的表达条件进行优化,通过灰度扫描得重组目的蛋白占总蛋白表达量的76%左...
- 概要:
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- 结论:
【中文期刊】 何正祥 张部昌 等 《生物学杂志》 2005年22卷2期 15-17,20页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 在大肠杆菌周质中分泌表达rhGH既有利于消除其在临床应用上的抗原性又有利于提取纯化,在rhGH的发酵生产中越来越受到青睐.就rhGH在大肠杆菌中的分泌表达机制以及启动子、引导序列、宿主菌、培养基和培养条件对分泌表达效率的影响等方面进行了综述...
- 概要:
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- 结论:
【中文期刊】 何正祥 张部昌 等 《中国生物工程杂志》 2004年24卷10期 47-51页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 在5L发酵罐中将工程菌pET-ompA3-hGH/BL21(DE3)进行补料式发酵,诱导表达分泌型重组人生长激素.通过对发酵培养基成分、补料成分、补料体积、补料时机和滴加流速的选择,分泌表达rhGH的量可达到250mg/L,占周质蛋白的44...
- 概要:
- 方法:
- 结论:
【中文期刊】 罗旭东 丁莉 等 《湖北医药学院学报》 2019年38卷4期 402-408,封4页ISTICCA
【摘要】 富含二硫键毒素多肽广布于蝎、胡蜂、蜘蛛、海葵、蜈蚣、芋螺与蛇等有毒动物毒液中,具有抗菌、抗肿瘤、镇痛、抗血栓、抑制或激活离子通道等多种生物学活性[1-3].基于二级结构差异,这类多肽可分为四类:(1)α螺旋/β折叠,如BmKTX[4];(2...
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【中文期刊】 蒋玉亮 兰萍 等 《成都医学院学报》 2016年11卷4期 409-412页ISTICCA
【摘要】 目的 构建大肠杆菌周质分泌型表达载体并验证其表达效果.方法 以pUC18-lpp为基础载体,构建含有核糖体结合元件(RBS)、信号肽(OmpA)、多克隆位点(MCS)的分泌型表达载体pUC-OmpA;通过分子克隆获得含有密码子优化的人生长激...
- 概要:
- 方法:
- 结论:
【中文期刊】 何正祥 张部昌 等 《军事医学科学院院刊》 2005年29卷1期 55-59页ISTICCSCDCA
【摘要】 目的:构建分泌型重组人生长激素(recombinant human growth hormone,rhGH)工程菌,优化工程菌表达条件.方法:应用T7启动子与ompA3引导序列构建分泌型表达rhGH工程菌,采用多因素正交优选法初步筛选培养基...
- 概要:
- 方法:
- 结论:
【中文期刊】 丁国伟 叶正琴 等 《安徽农业科学》 2017年45卷27期 152-154,156页
【摘要】 [目的]利用大肠杆菌可溶性地表达鸡传染性法氏囊病毒(IBDV)VP2蛋白.[方法]根据IBDV vp2全长序列(GenBank登入号AY704912),设计一对缺失VP2蛋白N-端80个氨基酸残基的特异性引物,克隆IBDV HQ株的vp2基...
- 概要:
- 方法:
- 结论:
【中文期刊】 王寅竹 孙涛 等 《微生物学通报》 2022年49卷2期 794-806页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 重组蛋白在大肠杆菌中表达时,往往面临着形成包涵体的问题,而重组蛋白若是分泌至周质空间则基本解决了这一问题,周质空间的周质蛋白不仅能帮助重组蛋白正确折叠还有利于二硫键的生成.信号肽是一段由15-30个氨基酸组成,被融合在重组蛋白N端的短肽,按...
- 概要:
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- 结论:
【中文期刊】 李进 李青云 等 《基因组学与应用生物学》 2022年41卷9期 1903-1913页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 氨肽酶在食品加工、饲料生产、生物活性肽制备等多个领域被广泛应用,尤其是耐热氨肽酶的应用前景更加广阔.目前,有关铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)耐热氨肽酶基因的成功克隆和表达的研究较少,本研究将源自铜绿假单胞菌GF...
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【中文期刊】 童梅 程永庆 等 《中国生物工程杂志》 2020年40卷5期 48-56页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建一株表达TNF-α Fab'抗体的大肠杆菌工程菌,并设计一种高效实用的策略以促进大肠杆菌周质空间的可溶性Fab'抗体表达.方法:首先,通过更换不同表达载体,改变轻链和重链顺序,更换信号肽,共表达分子伴侣(Skp)、二硫键合成酶(D...
- 概要:
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【中文期刊】 厉书杰 叶贤龙 等 《药学学报》 2016年51卷5期 732-737页ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 成纤维细胞生长因子21 (FGF21)是近期发现的糖脂代谢调节因子,其安全、有效和不依赖胰岛素调节血糖的特点,使其有望成为治疗糖尿病的新型药物.为研究人FGF21 (h-FGF21)在大肠杆菌细胞周质表达,本实验在pET27b载体PelB ...
【关键词】 成纤维细胞生长因子-21;信号肽;周质空间表达;
- 概要:
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【中文期刊】 徐黎明 郭茉 等 《细胞与分子免疫学杂志》 2013年29卷4期 396-399页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 建立细菌周质内抗原抗体共表达系统.方法 将人白介素-1β(hIL-lβ)基因和抗人白介素1β单链抗体(antihIL-1β scFv)基因分别插入到细菌展示载体pBFD的pelB前导肽(游离型前导肽)和NlpA前导肽(锚定型前导肽)下...
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【中文期刊】 范丽君 吕立力 等 《药物生物技术》 2014年21卷3期 204-208页ISTICCA
【摘要】 构建阿达木单抗抗原结合片段(Fragment antigen binding,Fab)表达载体,使其在大肠杆菌内高效共分泌表达,周质空间中获得具有活性的目的蛋白.将带有信号肽的Fab片段重链与轻链克隆于带有双启动子的pETDuet-1载体内...
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【学位论文】 作者:陈莉 导师:饶平凡 刘树滔 福州大学 生物学 生物化学与分子生物学(硕士) 2004年
【摘要】 为了解决目前大黄鱼(Pseudosciaena crocea,pc)等名贵经济鱼类在养殖中存在的养殖周期长,饵料利用率低,养殖生产成本较高的问题,急需开发鱼类本身的基因产物以改良鱼类养殖饲料.鱼类生长激素(growth hormone,GH...
- 概要:
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【中文期刊】 李振国 徐明波 等 《生物学杂志》 2011年28卷6期 95-97页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 研究了精氨酸缓冲液在不同浓度、pH值及提取时间下的周质蛋白提取率,并以溶菌酶法、渗透压休克法作为对比.结果表明浓度0.4 mol/L,pH值8.0,提取时间为45 min时,周质目的蛋白达到0.89 mg/g湿菌,相比其他方法,周质蛋白提取...
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【中文期刊】 刘纯杰 张兆山 等 《世界华人消化杂志》 2000年8卷z1期 41页ISTICCA
【摘要】 目的将幽门螺杆菌尿素酶B亚单位基因和热休克蛋白A亚单位基因融合,并实现其在大肠杆菌中的表达,为构建该菌的基因工程二价苗打下基础.方法通过交叠延伸拼接PCR法将幽门螺杆菌ureB基因和hspA基因通过(Gly4Ser)3 linker连接起来...
- 概要:
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【学位论文】 作者:李进 导师:刘幽燕 杨小星 广西大学 化学工程与技术 化学工程(硕士) 2022年
【摘要】 氨肽酶(Aminopeptidases,EC3.4.11)能够去除蛋白质或多肽N-末端氨基酸,广泛应用于食品加工、饲料生产、活性肽制备等领域,尤其是耐热氨肽酶的应用前景更加广阔。课题组前期从铜绿假单胞菌(Pseudomonasaerugin...
- 概要:
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【学位论文】 作者:张晶晶 导师:王宗华 福建农林大学 生物学 生物学(硕士) 2017年
【摘要】 细胞极性,广义上是细胞内的不对称分布,是细胞实现发育和环境调节功能的基本特征之一。拟南芥作为模式植物,其单细胞的花粉管和多细胞表皮系统已经成为研究植物细胞极性的重要模式系统。早先有研究表明在拟南芥的子叶表皮细胞中,生长素可以激活植物细胞极性...
- 概要:
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- 结论:
【中文期刊】 霍世元 朱文华 等 《中国免疫学杂志》 2013年29卷10期 1085-1088,1092页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建、表达、纯化抗血管内皮生长因子(VEGF)的Fab片段(眼明,Vasculizumab),并检测其抗VEGF的活性.方法:首先对轻链(LC)及重链(HC)基因进行密码子优化并做了全基因合成,将补充了OmpA信号肽核苷酸序列的轻链及...
- 概要:
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【学位论文】 作者:杨程 导师:谢浩 武汉理工大学 化学工程与技术 应用化学(硕士) 2012年
【摘要】 本研究研利用一种枯草芽孢杆菌膜蛋白MrpF作为膜锚定分子,锚定一些亲水性蛋白到大肠杆菌细胞膜表面,本研究中选定了一种较为常用,稳定且活性易于检测的亲水性蛋白PhoA来锚定。首先利用计算机预测了MrpF的结构和疏水性。得出MrpF一种三次跨膜...
- 概要:
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【中文期刊】 张友鸿 杨克恭 等 《生命的化学》 2001年21卷6期 470-472页ISTIC
【摘要】 <篇首> 随着分子伴侣的发现和外源基因表达技术的发展,大肠杆菌间周质蛋白质的折叠成为研究热点.间周质(periplasm)是革兰氏阴性菌内膜与外膜之间的区域,对外界环境变化的适当能力很脆弱,例如pH、温度、渗透压[1].重组技术表达的重要蛋白质...
【关键词】 间周质;二硫键氧化还原酶;肽酰-脯氨酰顺反异构酶;
- 概要:
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【中文期刊】 李泽鸿 彭其胜 《中国兽药杂志》 2011年45卷3期 9-12页
【摘要】 构建了免疫毒素DAB389(G1y4Ser)2-aMSH的两种表达质粒,其一为胞内表达质粒pET28a/DAB389(Gly4Ser)2-aMSH,其二为胞周质表达质粒pET20b/DAB389(Gly4Ser)2-aMSH.实验结果显示,...
【关键词】 分泌机制;信号肽;DAB389(Gly4Ser)2-aMSH;
- 概要:
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【中文期刊】 郑海洲 刘晓志 等 《天津药学》 2009年21卷4期 40-42页
【摘要】 长期以来,大肠杆菌是表达外源蛋白的首选表达系统,重组蛋白分泌表达与胞内表达相比有很大优越性,在细胞周质腔不仅能促进重组蛋白二硫键的形成及正确折叠,还能促进分泌蛋白的N-端加工.本文综述了近年来在大肠杆菌中表达可溶性外源蛋白的进展,目的是为了...
- 概要:
- 方法:
- 结论:
【中文期刊】 刘渊 蒙国权 等 《农业生物技术学报》 2009年17卷3期 510-515页
【摘要】 根据已筛选到的手掌参(Gymnadnia conopsea)中赤霉酸诱导的富含半胱氨酸蛋白部分cDNA序列,设计带有EcoR I和Hind Ⅲ酶切位点的引物.对编码区全长(gcgasa)及信号肽缺失的片段(△gcgasa)进行扩增,获得大小...
【关键词】 手掌参;赤霉酸诱导的富含半胱氨酸蛋白;原核表达;
- 概要:
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【中文期刊】 梁峰 朱智芳 等 《商丘师范学院学报》 2008年24卷9期 96-99页
【摘要】 植物细胞中有许多重要的成束的微管结构,如周质微管、细胞质丝束、早前期带、纺锤体微管和成膜体微管等.生化研究已经证实微管相关蛋白MAP65家族的成员具有交联微管使之成束的能力.本文构建了GFP-融合 蛋白植物表达载体(pMAP65-6-GFP...
- 概要:
- 方法:
- 结论:
【中文期刊】 李倩倩 熊小路 等 《生物化学与生物物理进展》 2012年39卷3期 273-281页SCIISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 成团泛菌YS19是从水稻“越富”品种中分离的一种优势内生细菌,与宿主水稻互作时具有多种促生作用,其形成的共质体(symplasmata)结构与菌体抗逆及与宿主互作有重要意义.研究发现了一种在YS19共质体形成阶段高表达的差异蛋白,对其用肽指...
- 概要:
- 方法:
- 结论:
【中文期刊】 李晶泉 林衡 等 《生物技术通报》 2016年32卷8期 214-220页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 旨在研究类弹性蛋白[I]40(elastin-like polypeptide[I]40,ELP[I]40)在大肠杆菌周质空间的表达。构建表达载体 pIG6LH/ELP[I]40及 pIG6LH/ELP[I]40+Trx,分别将构建的表达载...
- 概要:
- 方法:
- 结论:
【中文期刊】 刘革力 冉丹霞 等 《中国微生态学杂志》 2009年21卷5期 415-416页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 研究双歧杆菌表达的CFA/I在细胞中的分布.方法 将培养8~10 h的重组双歧杆菌固定后制作电镜切片,镜检合格后用镍网捞取3~5个切片与金标抗体作用,镜检CFA/I在双歧杆菌中的表达分布.结果 自制的胶体金颗粒均匀,与抗体结合后能够示...
- 概要:
- 方法:
- 结论:
【中文期刊】 唐喆伟 韩红辉 等 《现代免疫学》 2010年30卷5期 375-378页ISTIC
【摘要】 从Tomlinson(I+J)噬菌体抗体库中筛选获得了特异性抗GST蛋白的单链抗体(scFv),并在E coli HB2151进行表达,经SDS-PAGE和Western blot分析表明,scFv可在细菌周质腔中进行可溶性表达,其分子量约...
- 概要:
- 方法:
- 结论:
【中文期刊】 李莹 孙志豪 等 《现代生物医学进展》 2010年10卷24期 4664-4668页ISTICCA
【摘要】 目的:在大肠杆菌中分泌表达重组纤维蛋白的C-末端序列,并检测其抗原性.方法:采用PCR技术扩增了减蛋综合症病毒(EDSV)纤维蛋白C-末端的编码基因,并将其克隆到组成型分泌表达载体pUC18ompAcat上构建pUC18ompA-EDS.将...
- 概要:
- 方法:
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【中文期刊】 李素芹 潘英 等 《药物生物技术》 2009年16卷4期 291-295页ISTICCA
【摘要】 HIV-Tat蛋白转导域(protein transduction domain,PTD)是一个公认的具有介导靶蛋白跨膜作用的肽段.为了表达出可溶的并具有生物学活性的PTD-NGF融合蛋白,作者首先根据人神经生长因子成熟肽(hNGFm)的基...
- 概要:
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【学位论文】 作者:罗玉娇 导师:舒衡平 中南大学 生物学 病原生物学(硕士) 2012年
【摘要】
研究背景:
虎纹捕鸟蛛是我国特有的大型有毒蜘蛛。HWTX-Ⅺ(虎纹捕鸟蛛毒素-Ⅺ)是从虎纹捕鸟蛛粗毒中提取的一种Kunitz型多肽毒素,具有很强的胰蛋白酶抑制作用,研究表明可用于治疗急性胰腺炎,但它同时具有阻断钾离子通道的作用...
- 概要:
- 方法:
- 结论:
【学位论文】 作者:王明娥 导师:张一折 郑州大学 生物学 生物工程(硕士) 2012年
【摘要】 来源于枯草芽孢杆菌I15的内切1-4-葡聚糖酶,当在大肠杆菌中表达时,可高效分泌表达于大肠杆菌周质中,最适条件下表达量可达7.1g/L。于是利用信息学软件分析了Eng酶的信号肽,属于Ⅱ类SecB依赖型,因此,SecB分子伴侣蛋白应该和Eng...
【关键词】 内切1-4-葡聚糖酶 ; 大肠杆菌周质 ;
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