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            【中文期刊】 王琪  闫见敏  等 《植物生理学报》 2024年60卷11期 1707-1716页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 核编码叶绿体蛋白通过叶绿体被膜上的TOC-TIC装置靶向导入叶绿体,对于叶绿体生物发生以及植物生长发育至关重要.Toc159家族蛋白是前体蛋白导入叶绿体这一过程中最重要的受体.以前期克隆到的番茄SlToc159-2基因为模版,选取SlToc...

            【关键词】 番茄叶绿体外膜转运蛋白Toc159

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            【中文期刊】 郭文博  路杨  等 《生物技术通报》 2023年39卷10期 58-67页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 真菌病毒Beauveria bassiana polymycovirus 4(BbPmV-4)的感染能够提高寄主球孢白僵菌的致病力,然而其在寄主中的复制、传播和与寄主互作机理尚不清楚.本研究构建了真菌病毒BbPmV-4 外壳蛋白(coat ...

            【关键词】 球孢白僵菌真菌病毒外壳蛋白

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            【中文期刊】 王光丽  范婵  等 《生物技术通报》 2022年38卷7期 269-277页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 原核表达、纯化霍乱弧菌HlyA蛋白,制备并鉴定其多克隆抗体.PCR扩增霍乱弧菌hlyA基因并克隆入pET28a、pET32a和pColdTF载体中构建重组表达载体;将重组载体pET28a-hlyA、pET32a-hlyA和pCold TF-...

            【关键词】 霍乱弧菌HlyA蛋白原核表达

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            【中文期刊】 覃雪晶  王雨涵  等 《生物技术通报》 2022年38卷8期 142-149页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 制备青杄(Picea wilsonii)PwHAP5基因的特异性多克隆抗体,为研究PwHAP5基因功能、分子机制奠定基础.经PCR扩增获得青杄花粉PwHAP5基因片段与载体pET-48b相连构建原核表达载体pET-48b-PwHAP5.经诱...

            【关键词】 PwHAP5基因原核表达蛋白纯化

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            【中文期刊】 单丽伟  唐如春  等 《生物工程学报》 2011年27卷1期 26-30页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 WP1 是小麦种子中最主要的阳离子过氧化物酶,该酶不仅参与种子的发育过程,而且影响面粉的加工品质.首先构建了WP1基因原核表达载体pET28a-WP1,并将其转化到T7 Expression大肠杆菌菌株中诱导表达.His-tag融合的WP1...

            【关键词】 小麦种子过氧化物酶WP1

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            【中文期刊】 黄晶晶  韩斌  等 《昆虫知识》 2010年47卷2期 293-298页ISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 用重组表达的棉铃虫Helicoverpa armigera(Hübner)中肠钙粘蛋白N端多肽片段制备兔多克隆抗体,并利用其对Bt抗性进行鉴定.通过RT-PCR方法对棉铃虫中肠钙粘蛋白N端多肽的基因片段Cad285进行PCR扩增,将其克隆到...

            【关键词】 棉铃虫钙粘蛋白原核表达

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            【中文期刊】 王增  代茹  等 《生物工程学报》 2009年25卷9期 1409-1416页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 本研究构建了带有His标签的拟南芥(Arabidopsis thaliana)WUSCHEL基因原核表达载体pET-31b(+)-WUS-Hiss(6),优化了大肠杆菌(EschPrichia coli)诱导表达体系,将亲和层析纯化后的WU...

            【关键词】 拟南芥WUSCHEL蛋白质

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            【中文期刊】 索青青  吴楠  等 《生物技术通报》 2022年38卷8期 135-141页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 咖啡酰辅酶A-O-甲基转移酶(caffeoyl coenzyme A-O-methyltransferase,CCoAOMT)在植物木质素生物合成过程中发挥重要作用.目前关于水稻咖啡酰辅酶A-O-甲基转移酶的研究主要集中在基因水平,对其在蛋...

            【关键词】 咖啡酰辅酶A-O-甲基转移酶原核表达克隆抗体

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            【中文期刊】 汪媛媛  李泳宁  等 《生物化学与生物物理进展》 2010年37卷3期 337-341页SCIISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 以1,4-丁二醇二缩水甘油醚(双环氧试剂)为偶联剂,合成桔霉素.蛋白质偶联抗原CTT-BSA,经过HPLC分析、紫外扫描和红外光谱鉴定表明,偶联物成功制备,CIT/BSA的偶联比为8.16.通过免疫BALB/C小鼠,获得抗桔霉素多克隆抗体,...

            【关键词】 1,4-丁二醇二缩水甘油醚桔霉素抗原

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            【中文期刊】 仇书兴  殷星  等 《生物技术通报》 2019年35卷12期 85-93页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 旨为以原核表达系统表达、纯化新型H7N9禽流感病毒(安徽株)NA蛋白胞外区片段并制备该蛋白的多克隆抗体.对新型H7N9禽流感病毒神经氨酸酶(Neuraminidase,NA)蛋白胞外区片段进行生物信息学分析,基于大肠杆菌密码子偏爱性进行密码...

            【关键词】 H7N9禽流感病毒生物信息学NA蛋白胞外区

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            【中文期刊】 闫爱霞  邹洋  等 《中国热带医学》 2019年19卷7期 634-637页ISTICPKUCA

            【摘要】 目的 原核表达弓形虫TgPRF蛋白,制备多克隆抗体并评价其作为内参抗体的可行性.方法 以刚地弓形虫RH株速殖子cDNA为模板,PCR扩增TgPRF编码基因,克隆至pGEX-4T-1载体,转化至大肠埃希氏菌(Escherichia coliB...

            【关键词】 刚地弓形虫弓形虫前纤维蛋白克隆抗体

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            【中文期刊】 李缜  邹洋  等 《中国热带医学》 2019年19卷5期 411-415,429页ISTICPKUCA

            【摘要】 目的 通过pET-41 Ek/LIC载体在大肠杆菌工程菌中重组表达恶性疟原虫自噬相关蛋白8(PfAtg8)基因的重组蛋白GST-PfAtg8-6× His,并用蛋白免疫法制备小鼠抗自噬相关蛋白8(PfAtg8)的多克隆抗体,并验证其效价.方...

            【关键词】 恶性疟原虫自噬相关蛋白8原核表达

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            【中文期刊】 郭莺  汪文华  等 《生物技术通报》 2018年34卷6期 79-83页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 本研究通过制备Lxx(Leifsonia xyli subsp.xyli)免疫磁珠,实现对甘蔗Lxx进行分离,用于病原菌与甘蔗互作的深入研究.以RSD PCR检测呈阳性的感病甘蔗为材料,分离培养Lxx抗原进行多克隆抗体制备,利用磁性Fe3O...

            【关键词】 甘蔗宿根矮化病致病菌Lxx克隆抗体

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            【中文期刊】 金永梅  陈莫军  等 《生物技术通报》 2018年34卷9期 224-229页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 利用生物信息学方法预测cry1C蛋白的抗原表位区,并命名为△cry1C.优化△cry1C的核苷酸序列并进行人工合成,构建重组表达载体pET28b(+)-△cry1C.在E.coli中诱导表达His6-△cry1C蛋白,纯化后免疫新西兰大白兔...

            【关键词】 鳞翅目害虫cry1C抗原表位

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            【中文期刊】 尼加提·迪里木拉提  赵洁  等 《生物技术通报》 2018年34卷7期 154-159页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 利用蛋白免疫法制备鼠抗棉铃虫类肌钙蛋白(Helicoverpa armigera Calponin,HaCal)的多克隆抗体并进行初步应用.通过原核表达棉铃虫类肌钙蛋白,镍柱纯化获得目的蛋白,经足垫加皮下注射免疫小鼠,4次免疫后用ELISA...

            【关键词】 棉铃虫类肌钙蛋白克隆抗体

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            【中文期刊】 金巧  甘志凯  等 《生物技术通报》 2018年34卷8期 175-180页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 该研究旨为克隆、表达和纯化出人源DLL4蛋白,并制备出相对应的多克隆抗体.采用搭桥PCR,构建带有tPA信号肽的DLL4基因,并克隆到pGZX表达载体上,经过酶切和测序鉴定后,瞬时转染到HEK293F细胞中,转染48 h后对发酵上清液进行镍...

            【关键词】 DLL4真核表达亲和纯化

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            【中文期刊】 王云龙  徐瑞芳  等 《生物技术通报》 2018年34卷8期 75-79页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 制备胱抑素C的单克隆抗体并建立可用于肾损伤早期诊断的化学发光检测方法.合成胱抑素C多肽制备单抗隆抗体,用竞争抑制法筛选优化配对抗体并建立化学发光胱抑素C检测方法.获得胱抑素C单抗细胞共39株,经筛选确定出可配对抗体,通过线性范围、最低检测限...

            【关键词】 胱抑素C抗体配对化学发光

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            【中文期刊】 童霄霞  杨远勤  等 《生物技术通报》 2017年33卷5期 176-182页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 旨在得到较高浓度和纯度的C19orf18蛋白,再将得到的目的蛋白用于制备其特异性的多克隆抗体.利用PCR技术扩增出C19orf18基因的胞内段和胞外段,中间用柔性肽连接,再将目的片段克隆到pET28a(+)与pET32a(+)载体上,通过诱...

            【关键词】 C19orf18蛋白原核表达抗原亲和纯化

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            【中文期刊】 刘雁霞  李少杰  等 《生物技术通报》 2017年33卷9期 216-222页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 构建pET-28a(+)-ERG-11重组质粒,表达6×His-ERG-11融合蛋白,制备ERG-11多克隆抗体.采用PCR技术扩增目的片段,插入pET-28a(+)原核表达载体,并转入E.coli BL21(DE3)感受态表达融合蛋白,融...

            【关键词】 粗超脉孢菌ERG-11基因克隆蛋白表达及纯化

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            【中文期刊】 周东  刘贞  等 《生物技术通报》 2017年33卷8期 88-94页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 克隆新疆辣椒LJ-10 CMV基因组片段,并进行序列分析,构建CMV CP基因的原核表达载体,并制备CP基因的多克隆抗体.利用RT-PCR技术,克隆新疆辣椒LJ-10 CMV的RNA1(3357 nt)、RNA2(3042 nt),RNA3...

            【关键词】 黄瓜花叶病毒序列分析外壳蛋白

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            【中文期刊】 靳亮  许翠萍  等 《生物技术通报》 2016年32卷11期 208-214页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 马尾松毛虫质型多角体病毒(Dendrolimus punctatus cytoplasmic polyhedrosis virus,DpCPV)基因组 S5片段编码一个由881个氨基酸组成、分子量为101 kD 的非结构蛋白(NSP1)。为...

            【关键词】 马尾松毛虫质型角体病毒NSP1抗体制备

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            【中文期刊】 闫琰  张茜  等 《吉林大学学报(医学版)》 2015年41卷4期 864-869,后插6页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:制备犬博卡病毒(MVC)的非结构基因NP1的兔多克隆抗体,并进行特异性鉴定.方法:以MVC的感染性克隆pI-MVC为模板,构建NP1基因的原核表达质粒pGEX-4T-3-NP1,转化大肠杆菌BL21后,在异巯基-1-硫代-β呋喃半乳糖...

            【关键词】 犬博卡病毒NP1基因克隆抗体

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            【中文期刊】 杨柳  汪小菀  等 《吉林大学学报(医学版)》 2015年41卷3期 656-661页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:构建pGEX-4T-1/ hZimp10重组质粒,并在大肠杆菌中表达,纯化出GST-hZimp10融合蛋白,用以制备抗hZimp10抗体.方法:采用PCR技术以pcCDNA3.1-Flag-hZimp10为模板,扩增出hZimp10蛋...

            【关键词】 hZimp10谷胱甘肽硫转移酶融合蛋白克隆抗体

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            【中文期刊】 薛一  孙静  等 《南京医科大学学报(自然科学版)》 2012年32卷10期 1376-1380页ISTICPKUCA

            【摘要】 目的:构建S100A16原核表达载体,制备S100A16蛋白多克隆抗体并初步鉴定.方法:RT-PCR扩增得到小鼠肝脏组织的S100A16基因,将此片段克隆到带有His标签的原核表达载体pET-28a多克隆位点,并转化大肠杆菌BL21(DE3...

            【关键词】 S1000A16原核表达克隆抗体

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            【中文期刊】 迟象阳  于长明  等 《生物工程学报》 2012年28卷6期 651-660页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 单克隆抗体是现代生命科学研究的重要工具,为许多领域的发展作出了不可估量的贡献.随着PCR技术和单克隆抗体技术的发展和成熟,单个B细胞抗体制备技术迅速兴起.该技术能够对单个的抗原特异性B细胞进行抗体基因的体外克隆和表达,保证了轻重链可变区的天...

            【关键词】 克隆抗体单个B细胞免疫球蛋白基因

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            【中文期刊】 鞠文  宋秀玲  等 《吉林大学学报(医学版)》 2012年38卷5期 821-826页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:制备高效价高纯度兔抗单增李斯特菌(LM)多克隆抗体,并初步探讨其在乳胶凝集试验(LAT)中的应用.方法:复苏并扩大培养LM标准菌株,制备灭活疫苗免疫家兔,采用ELISA法测定耳缘静脉血抗体效价.4次免疫后,颈动脉采血分离血清,采用辛酸...

            【关键词】 单增李斯特菌克隆抗体乳胶凝集试验

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            【中文期刊】 杜军利  张传溪  等 《生物工程学报》 2012年28卷1期 76-85页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 为了建立一种基于免疫反应检测茶尺蠖核型多角体病毒的方法,以纯化后的茶尺蠖核型多角体病毒作为抗原,免疫BALB/c小鼠,将小鼠脾脏细胞与小鼠骨髓瘤细胞Sp2/0融合,经间接ELISA筛选及克隆得到了一株稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为...

            【关键词】 茶尺蠖核型角体病毒角体蛋白克隆抗体

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            【中文期刊】 陈超群  吴移谋  等 《微生物学通报》 2011年38卷12期 1863-1868页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 分析沙眼衣原体CT058蛋白在感染细胞中的定位.克隆表达CT058蛋白;纯化的CT058融合蛋白免疫小鼠制备多克隆抗体;间接免疫荧光法对CT058蛋白在沙眼衣原体感染细胞中的定位进行分析;Western blot检测CT058蛋白在原体和网...

            【关键词】 沙眼衣原体CT058亚细胞定位

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            【中文期刊】 林霖  李国超  等 《生物工程学报》 2011年27卷8期 1183-1190页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 为了探讨O-GlcNAc修饰的生物学作用和相关疾病的发病机理,需制备高效、专一的O-GlcNAcase (OGA)抗体.通过对人源OGA蛋白进行序列分析发现,氨基端1~350 aa片段(sOGA)抗原性和亲水性较强,将该片段构建至原核表达载...

            【关键词】 O-GlcNAcase表达生物活性

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            【中文期刊】 杨南扬  缪璇  等 《吉林大学学报(医学版)》 2011年37卷6期 1010-1014页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:构建pGEX-4T- 1/SUMO3重组表达质粒,并在大肠杆菌中表达和纯化出类泛素化修饰蛋白SUMO3/GST融合蛋白.方法:采用PCR技术利用pcDNA3.1-SUMO3质粒为模板,扩增出SUMO3全长编码序列(312 bp),并将...

            【关键词】 类泛素化蛋白3GST融合蛋白蛋白纯化

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            【中文期刊】 李坚  刘强  等 《微生物学通报》 2010年37卷10期 1447-1450页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 棉铃虫核型多角体病毒(Helicoverpa armigera nucleopolyhedrovirus,HearNPV)orf86是一个功能未知的基因.从HearNPV基因组中通过PCR得到orf86基因编码序列,将其构建于原核表达载体p...

            【关键词】 棉铃虫核型角体病毒(HearNPV)orf86基因原核表达

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            【中文期刊】 李慧  张巍  等 《生物工程学报》 2010年26卷4期 495-502页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 为了开发以D1蛋白酶作为靶标的新型除草剂,需要对先导化合物的生物活性进行检测和筛选.从菠菜中提取总RNA,逆转录合成cDNA,采用PCR扩增了CtpA的基因,连接至表达载体pET-28a中,构建了重组表达质粒,并在大肠杆菌BL21(DE3)...

            【关键词】 D1蛋白酶表达纯化

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            【中文期刊】 冯从经  吕文静  《昆虫知识》 2010年47卷2期 414-418页ISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 以亚洲玉米螟Ostrinia furnacalis Guenée 5龄幼虫的中肠和体壁组织为材料,采用Epon 812常规包埋方法,以作者实验室制备的酚氧化酶原多克隆抗体为一抗、胶体金标记的羊抗鼠IgG为二抗,采用醋酸双氧铀-柠檬酸铅双染色...

            【关键词】 亚洲玉米螟酚氧化酶原胶体金

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            【中文期刊】 王博  李莉云  等 《生物工程学报》 2010年26卷6期 796-801页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 类受体激酶在植物发育、自交不亲和、雄性不育、抗逆和抗病等生命过程中起着重要的调控作用.为了对水稻类受体激酶的功能及生物学特性进行深入研究,本实验克隆表达了水稻中5个类受体激酶抗原表位片段,以纯化的蛋白质为抗原免疫新西兰兔,获得了特异性较高的...

            【关键词】 水稻类受体激酶蛋白质纯化

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            【中文期刊】 郑惠玲  祝珍珍  等 《生物工程学报》 2010年26卷12期 1704-1709页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 ΔfosB是fosB基因的自然截短型,稳定存在于许多组织中,在脂肪细胞和成骨细胞的形成和分化中起到重要作用.ΔFosB蛋白可能与钙在骨和乳腺中的代谢有关,并且调控钙从骨向乳腺转移的信号通路.将奶山羊的ΔfosB基因亚克隆到pET32a载体得...

            【关键词】 山羊ΔFosB原核表达

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            【中文期刊】 杨波  余沛然  等 《微生物学通报》 2009年32卷9期 1443-1448页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 ns2是黑胸大蠊浓核病毒的一个非结构基因,所编码的蛋白质大小为30 kD,是一个功能未知的基因.为了对该基因进行深入的功能研究,从感染了黑胸大蠊浓核病毒的蟑螂的后肠组织中通过RT-PCR得到ns2基因编码序列,将其构建于原核表达载体pET-...

            【关键词】 黑胸大蠊浓核病毒NS2蛋白表达

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            【中文期刊】 李芬  田树娟  等 《中国生物化学与分子生物学报》 2009年25卷10期 919-925页MEDLINEISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 人Elp3(human elongator protein 3,hElp3)具有组蛋白乙酰转移酶活性,是与延伸中的RNA聚合酶Ⅱ结合的elongator复合物的催化亚基,可参与组蛋白的乙酰化修饰与基因的转录延伸.Elp3及其复合物功能异常与...

            【关键词】 hElp3原核表达克隆抗体

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            【中文期刊】 李芬  田树娟  等 《生物工程学报》 2009年25卷8期 1261-1266页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 酵母Elp3(Yeast elongation protein 3,yElp3)是组蛋白乙酰转移酶复合物Elongator的催化亚基,通过组蛋白乙酰化参与基因转录延伸.近来证实胞质中也存在的Elp3还参与胞外分泌,tRNA修饰等重要生物学过...

            【关键词】 Elp3原核表达克隆抗体

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            【中文期刊】 陈华  王玢  等 《南京医科大学学报(自然科学版)》 2009年29卷12期 1703-1705,1799页ISTICPKUCA

            【摘要】 目的:根据人抑制素α、βA、βB 3个亚基特点,选择各哑基特定的抗原表位进行融合表达,并制备相应的多克隆抗体.方法:根据各亚基抗原表位氨基酸序列,合成其基因序列,并选用大肠杆菌偏爱密码子,插入pGEX-4T-2中作融合表达,纯化表达产物,免...

            【关键词】 抑制素抗原表位pGEX-4T-2

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            【中文期刊】 郭林  王晓杜  等 《生物工程学报》 2009年25卷5期 672-678页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 从H3N2亚型猪流感病毒感染的鸡胚尿囊液中提取病毒基因组RNA,采用RT-PCR方法克隆M1全长基因,将M1基因亚克隆至pET-28a(+)表达载体中,构建重组表达质粒pET-28a-M1,将该重组质粒转化大肠杆菌BL21并经IPTG诱导表...

            【关键词】 猪流感病毒M1基因克隆

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