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            【中文期刊】 刘传苗  李红俊  等 《中国实验血液学杂志》 2019年27卷2期 606-612页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:建立表达绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)和小鼠白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor,LIF)的细胞系,并尝试使用其作为饲养层培养小鼠胚胎干细胞(ESC).方法:...

            【关键词】 白血病抑制因子绿色荧光蛋白STO细胞

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            【中文期刊】 段彪  邵华  等 《动物学研究》 2007年28卷4期 417-422页SCIMEDLINEISTICCSCDBP

            【摘要】 生殖系嵌合体的获得是实现ES细胞介导的转基因途径的决定步骤,而嵌合体的制作及生殖系嵌合体的获得则是判定ES细胞系是否具有配子分化能力的有效方法.利用一株表达绿色荧光蛋白的杂种ES细胞系制备出嵌合体小鼠,共获得9只表达绿色荧光蛋白的嵌合体小鼠...

            【关键词】 EGFP转基因小鼠嵌合体杂种ES细胞

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            【中文期刊】 曹鸿国  刘俊平  等 《动物学研究》 2005年26卷2期 209-213页SCIMEDLINEISTICCSCDBP

            【摘要】 取8周后的雌性昆明小鼠进行超排,取卵母细胞用作核受体,收集卵母细胞周围的卵丘细胞作核供体,进行体细胞核移植.核移植重构胚经SrCl2激活处理6 h后,与改良的M16培养液和小鼠输卵管上皮细胞共培养; 将发育到早期囊胚阶段的重构胚转移至小鼠胎...

            【关键词】 心肌细胞输卵管上皮细胞改良培养液

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            【中文期刊】 招霞  马芸  等 《动物学报》 2004年50卷5期 784-790页SCIMEDLINEISTICCSCDBP

            【摘要】 为研究嵌合体动物中供体胚胎干细胞(ES)在宿主胚胎发育中的走向和定位,同时探讨绿色荧光蛋白(GFP)基因作为报告基因在转基因动物制作中的应用价值,本研究将pEGFP-N1基因导入小鼠ES-D3细胞系,得到稳定表达GFP的胚胎干细胞亚系ES-...

            【关键词】 GFP转基因小鼠嵌合体

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            【中文期刊】 孟国良  汤富酬  等 《遗传学报》 2003年30卷10期 933-942页SCIMEDLINEISTICCSCDCABP

            【摘要】 以70%的大鼠心脏细胞条件培养基(RH-CM)为培养液,以小鼠胚胎成纤维细胞(PMEF)为饲养层,采用添加1%鸡血清的消化液和"连续离散法"作为小鼠ES细胞建系的改进方法,比较了5个品系小鼠ES细胞系建立的特点.与常规方法相比,3个近交系小...

            【关键词】 小鼠品系ES细胞条件培养基

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            【中文期刊】 Chousheng Liu  白昌明  等 《生物工程学报》 2008年24卷7期 1268-1273页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 以小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)为饲养层,研究了用Knockout血清替代品(Knockout serum replacement,KSR)代替胚胎干细胞(Embryonic stem cells,ES cell)培养液中的胎牛血清(FBS)...

            【关键词】 绵羊类ES细胞小鼠ES细胞条件培养基knockout血清替代品

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            【中文期刊】 杨荣荣  周荣艳  等 《遗传》 2008年30卷6期 765-770页MEDLINEISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 为探讨印迹基因H19的甲基化状态与ES小鼠胚胎发育之间的关系,以遗传背景相同的正常成年对照小鼠、22只成年ES小鼠和8只新生死亡的ES小鼠以及不同传代次数的ES细胞为实验材料,利用甲基化敏感性限制性内切酶-PCR技术分别检测了其印迹基因H1...

            【关键词】 ES细胞ES小鼠DNA甲基化

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            【中文期刊】 孟国良  汤富酬  等 《生物工程学报》 2002年18卷6期 740-743页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 <篇首>小鼠胚胎干细胞(ES细胞)是从小鼠囊胚内细胞团(ICM)分离出来的、在体外培养过程中可维持未分化状态、正常二倍体核型及无限增殖能力,具有多能性或全能性的细胞系[1-3]。

            【关键词】 129/ter小鼠,C57BL/6J小鼠,大鼠心脏细胞条件培 养(RH-CM),胚胎干细胞(ES细胞),二倍体核型,未分化状态

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            【中文期刊】 周欣  王太一  等 《中国实验动物学报》 2002年10卷1期 5-9页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的研究不同培养条件分离和克隆小鼠ES细胞集落的效率。方法以PMEF饲养层、NIH3T3细胞饲养层或培养液中加入LIF为培养条件,分离和克隆昆明小鼠ES细胞集落,比较其效率。结果 饲养层的培养条件明显优于培养液中加入LIF的培养条件;有饲养...

            【关键词】 昆明小鼠ES细胞集落形成

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            【中文期刊】 秦茂林  蔡文琴  等 《第三军医大学学报》 2001年23卷9期 1071-1073页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的提高昆明小鼠胚胎干细胞(ES细胞)建株的成功率.方法收集小鼠3.5 d的囊胚培养,用小鼠胚胎成纤维细胞作为饲养层,形成的ES细胞样集落,经两次亚克隆分离培养ES细胞;进行相差显微镜观察、碱性磷酸酶染色和体内外分化能力鉴定.结果获得两个稳...

            【关键词】 小鼠胚胎干细胞ES细胞

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            【中文期刊】 余飞  钱丽萍  等 《实验动物与比较医学》 2016年36卷2期 87-92页ISTICCA

            【摘要】 目的 制备微小RNA簇miR-302s条件性基因打靶小鼠.方法 构建miR-302s打靶载体,通过电穿孔的方法转染胚胎干细胞(ES细胞),用正负筛选法筛选阳性ES细胞并进行PCR鉴定和Southern分析.利用显微注射技术将正确同源重组的E...

            【关键词】 miR-302s条件性基因打靶小鼠胚胎千细胞

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            【中文期刊】 姚玉琛  朱少华  等 《发育医学电子杂志》 2018年6卷3期 160-165页

            【摘要】 目的 建立强力霉素(doxmycin,Dox)诱导型Cas9基因编辑小鼠胚胎干细胞系,以满足不同条件下基因编辑的实验需求.方法 根据四环素(tetracycline,Tet)-on诱导表达调控系统的原理,分别构建含有调控元件反义Tet转录激...

            【关键词】 CRISPR/Cas9四环素诱导条件性敲除

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            【中文期刊】 刘述先  《国际医学寄生虫病杂志》 2009年36卷5期 279-285页ISTICCA

            【摘要】 该文以血吸虫生活史不同发育阶段(尾蚴、虫卵、成虫)诱导的免疫应答以及血吸虫病临床各期(急性期和慢性期)的免疫应答为主,综述近年来血吸虫病免疫应答的研究进展.在血吸虫病免疫应答的调节方面内容较多,限于篇幅,该文主要从细胞因子的调节作用,参与免...

            【关键词】 血吸虫病Th1和Th2型免疫应答细胞因子

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            【中文期刊】 王惟  于洋  等 《实验动物与比较医学》 2008年28卷6期 404-405,415页ISTICCA

            【摘要】 目的 介绍两种制备嵌合体小鼠实验中ES细胞的处理方法.方法 一种为差速贴壁分离法即消化后的ES细胞接种在明胶包被的平皿中,利用饲养层细胞与ES细胞贴壁速度的不同来分离ES细胞;另一种方法为冰水浴自然沉淀分离法,即消化后的ES细胞移入15ml...

            【关键词】 嵌合体小鼠ES细胞

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            【中文期刊】 樊玉梅  段相林  等 《生物学通报》 2008年43卷2期 1-4页ISTICCA

            【摘要】 人类对于自身基因功能的研究是生物学领域非常重要的一项内容.随着人类基因组计划的完成和人类基因信息的不断完善,基因功能的研究已成为近年来国际上的热点.基因敲除小鼠技术的建立和发展使得科学家们能够从分子、细胞及动物整体水平研究特定基因在生物发育...

            【关键词】 基因靶向ES细胞同源重组

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            【中文期刊】 杨桦  孙霞  等 《细胞生物学杂志》 2004年26卷3期 285-289页MEDLINEISTICCSCDCA

            【摘要】 从129S1小鼠早期胚胎的内细胞团分离、培养类胚胎样细胞,经反复传代,成功地建立了129S1 小、鼠胚胎干细胞系,命名为NM-2细胞系.形态学鉴定具有胚胎干细胞的典型形态特征,正常核型率为80%;呈碱性磷酸酶阳性、表达胚胎干细胞特异性转录因...

            【关键词】 129S1小鼠ES细胞生殖腺嵌合

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            【中文期刊】 黄冰  陈系古  等 《细胞生物学杂志》 2001年23卷1期 28-32页MEDLINEISTICCSCDCA

            【摘要】 目的:建立BALB/c小鼠胚胎干细胞系,并用于制作嵌合体小鼠.方法:从BALB/c小鼠囊胚内分离培养内细胞团块.建系后,进行C57BL/6J小鼠受体囊胚腔注射,制作嵌合体小鼠.结果:建立了我国第一株BALB/c小鼠胚胎于细胞系.该细胞系具有...

            【关键词】 BALB/c小鼠ES细胞嵌合体小鼠分离培养

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            【中文期刊】 曾文滔  张爱华  等 《安徽农业科学》 2013年27期 11053-11055页

            【摘要】 [目的]提高ES细胞囊胚注射的移植出生率.[方法]对照组采用正常囊胚ES细胞注射,试验组注射后的囊胚经酸性台氏液消化透明带后直接移植,研究ES细胞囊胚注射后脱透明带移植对小鼠产仔率和嵌合率的影响.[结果]对照组产仔率为15.96%,嵌合率为...

            【关键词】 胚胎干细胞小鼠囊胚

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            【中文期刊】 白昌明  王新庄  等 《畜牧兽医学报》 2009年40卷9期 1327-1332页

            【摘要】 本研究以无血清培养基为基础培养液,旨在探求小鼠ES细胞条件培养液(ESCCM)和2种不同饲养层对绵羊类ES细胞分离、克隆效率的影响.绵羊内细胞团从胚胎中分离得到后,分别以小鼠胎儿成纤维细胞(MEF)和绵羊胎儿成纤维细胞(SEF)为饲养层进行...

            【关键词】 绵羊类ES细胞小鼠ES细胞条件培养基自我更新

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            【中文期刊】 高巍  刘福强  等 《辽宁医学院学报》 2008年29卷1期 1-3页CA

            【摘要】 目的 从昆明种小鼠的早期胚胎中获取并培养胚胎干细胞.方法 收集小鼠3.5 d的囊胚培养,用小鼠胚胎成纤维细胞作为饲养层,形成的ES细胞样集落,72 h后分离隆起生长的内细胞团并继续培养,观察集落的生长状态,并通过碱性磷酸酶染色进行鉴定.结果...

            【关键词】 小鼠胚胎干细胞ES细胞

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            【中文期刊】 杨玉艾  孙永科  等 《畜牧兽医学报》 2006年37卷11期 1093-1098页

            【摘要】 利用PCR技术克隆了人类α-actin基因的启动子(约450bp),尝试用去掉启动子的pEGFP-N1作为框架结构,成功构建了真核表达载体pEGFP-N1-α-actin-P.应用Lipofectamine 2000将所构建的pEGFP-N...

            【关键词】 人类α-actin启动子真核表达载体小鼠ES细胞

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            【中文期刊】 谢安  汪泱  等 《江西医学检验》 2006年24卷1期 1-2,6页CA

            【摘要】 目的从BALB/C小鼠的早期胚胎中分离和培养胚胎干细胞(ES细胞),并对其生物学特性进行初步鉴定.方法收集BALB/C小鼠3.5d胚龄的囊胚,分离内细胞团(ICM)细胞进行培养,以小鼠原代胚胎成纤维细胞(PMEF)作为饲养层,细胞扩增传代,...

            【关键词】 BALB/C小鼠ES细胞分离培养

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            【中文期刊】 杨恕玲  董雅娟  等 《莱阳农学院学报》 2005年22卷4期 241-246页

            【摘要】 本试验采用两种方法制备小鼠胎儿成纤维细胞饲养层(mouse embryonic fibroblast, MEF),两种方法的差别在于用丝裂霉素-C(mitomycine-C,MMC)处理后,一种是用PBS-洗净MMC后直接使用;另一种是丝裂...

            【关键词】 小鼠MEFES细胞

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            【中文期刊】 曹鸿国  张涌  《畜牧兽医学报》 2005年36卷6期 559-563页

            【摘要】 取成年小鼠唇部皮肤进行培养, 分离成纤维细胞并血清饥饿培养1周, 用作核供体.对成年小鼠进行超排, 取卵母细胞用作核受体,核移植重构胚经SrCl2激活处理6 h后, 同mM16培养液和小鼠输卵管上皮细胞共培养, 把发育到早期囊胚的重构胚转移...

            【关键词】 小鼠皮肤成纤维细胞

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            【中文期刊】 时伟红  安志兴  等 《动物医学进展》 2002年23卷4期 97-99页

            【摘要】 收集鼠卵母细胞和精子,采用体外受精技术,获得早期胚胎.体外培养胚胎至囊胚,分离内细胞团,获得ICR小鼠的ES细胞.结果不但获得了来自体外受精囊胚的ICR小鼠ES细胞,而且表明用体外受精方法获得的小鼠早期胚胎的数量明显大于常规方法,且比较稳定...

            【关键词】 体外受精ES细胞小鼠

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            【中文期刊】 刘岩  赵沛妍  等 《中华肺部疾病杂志(电子版)》 2024年17卷6期 901-906页ISTIC

            【摘要】 目的分析肿瘤坏死因子受体超家族4(tumor necrosis factor receptor superfamily member 4)(OX40)抗体激动剂(ES102)对小细胞肺癌(non-small cell lung cancer...

            【关键词】 非小细胞肺癌人源化小鼠肿瘤坏死因子受体超家族4

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            【中文期刊】 陈静静  邢桂春  等 《中国生物工程杂志》 2015年35卷4期 74-79页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 建立FBXL15基因条件型敲除小鼠模型,为研究该基因所发挥的重要生理功能提供材料和思路.采用KO first策略,构建打靶载体,将1stloxP插入1~2号内含子,在3~4号内含子之间插入FRT-SA-IRES-lacZ-loxP-neo-...

            【关键词】 FBXL15基因敲除小鼠模型胚胎干细胞

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            【中文期刊】 曹鸿国  殷慧群  等 《中国生物工程杂志》 2009年29卷5期 23-27页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 试验尝试构建小鼠Nanog基因慢病毒表达载体,培养表达外源Nanog基因的小鼠ES细胞.结果显示通过RT-PCR扩增出918bp的小鼠Nanog基因,测序正确的小鼠Nanog基因通过慢病毒介导在小鼠ES细胞表达后,表达外源Nanog基因的小...

            【关键词】 小鼠ES细胞Nanog基因

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            【中文期刊】 童英  邹冀中  等 《北京大学学报(自然科学版)》 2000年36卷4期 472-476页

            【摘要】 报道一种新的建立C57BL/6J小鼠ES细胞系的方法.采用大鼠心肌条件培养基,在不使用饲养层细胞和白血病抑制因子(LIF)的情况下,从C57BL/6J品系小鼠中建成1个ES细胞系即MESPU41,成系率为1.0%. MESPU41细胞为XX...

            【关键词】 ES细胞C57BL/6J小鼠品系大鼠心肌条件培养基

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            【会议论文】陈良 第九届北京实验动物科学国际论坛 2019年

            【摘要】 小鼠癌症模型在癌症研究中起着不可替代的作用.然而,高效制备转基因小鼠模型的手续繁琐,本报告简要介绍了基于ES细胞的功能筛选的制备转基因小鼠的方法.敲除高度重复序列大片段DNA是一个艰难的任务,我将介绍利用CRISPR/CAS9系统敲除2M的...

            【关键词】 肺癌转基因小鼠模型ES细胞

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            【学位论文】 作者:金佳丽 导师:王平   华东师范大学   生物学 生物化学与分子生物学(博士) 2017年

            【摘要】 胚胎干细胞(Embryonic Stem Cells,ES细胞)是一类来源于囊胚内细胞团(ICM)的多能干细胞,这类细胞具有自我更新能力和多向分化的潜能.基于这些特性,其在基础科研和临床应用方面都存在着极为重要的应用价值.Oct4,Sox2...

            【关键词】 小鼠ES细胞核心转录因子

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            【学位论文】 作者:鹿群 导师:陈子江   山东大学   临床医学 妇产科学(博士) 2005年

            【摘要】 人胚胎干细胞因在再生医学和人胚胎早期发育研究等方面潜在的应用价值而成为近年来生命科学的研究热点,但是人胚胎干细胞研究面临着严重的伦理学问题和资源匮乏的限制。本课题围绕卵母细胞激活和胚胎干细胞分离、培养这两大主题,共进行四部分实验研究,期.....

            【关键词】 小鼠卵母细胞

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            【学位论文】 作者:王小燕 导师:蔡继业   暨南大学   化学 分析化学(硕士) 2003年

            【摘要】 运用原子力显微镜(AFM)和扫描电子显微镜(SEM)这两种技术对BALB/c小鼠胚胎干细胞的细胞膜表面进行了观测,同时运用透射电子显微镜(TEM),通过制作超薄切片对BALB/c小鼠胚胎干细胞的内部结构进行观测,得到BALB/c小鼠胚胎干细...

            【关键词】 原子力显微镜(AFM)小鼠胚胎干细胞(ES细胞)

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            【学位论文】 作者:杨新玲 导师:翁建英   蒋雨平   王莉   新疆医科大学   临床医学 神经病理学(硕士) 2003年

            【摘要】 帕金森病(Parkinson\''s disease PD)是一种隐匿起病,缓慢进展的中枢神经系统锥体外系变性病.病理学特征性改变是中脑的多巴胺(Dopamine,DA)能神经元明显减少或丧失,残留的神经元内出现路易小体(Lewy body...

            【关键词】 帕金森病PQ

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            【学位论文】 作者:厉建中 导师:傅继梁   第二军医大学   基础医学 遗传学(博士) 2002年

            【摘要】 我们首先以人锌指蛋白基因ZNF191的cDNA为探针,筛选小鼠λ噬菌体基因组文库,意外地首次获得了一个与ZF-12基因相关的无内含子的假基因序列,以ZF12p(ZF-12 pseudogene)命名在GenBank登录(AY040222)....

            【关键词】 ZNF191ZF-12

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            【学位论文】 作者:郑敬民 导师:傅继梁   第二军医大学   其他 (博士) 2001年

            【摘要】 从构建工具小鼠的目标出发,该项研究设计并合在敢Flp重组酶识别位点变异体F3RT和Cre重组酶识别位点变异体lox66、lox71寡核苷酸序列;利用这些序列构建了便于外源基因克降插入的通用型交换质粒pF-Neo-F3和通用型整合质粒pEGF...

            【关键词】 基因打靶转基因小鼠

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            【学位论文】 作者:周欣 导师:王太一   中国医科大学   基础医学 遗传学(博士) 2001年

            【摘要】 该文进行了分离615小鼠ES细胞集落及诱导ES细胞定向分化为神经细胞的实验研究.结论:1.以PMEF或NIH3T3细胞为饲养小鼠E3囊胚,适时离散ICM,是比较高效的分离小鼠ES细胞集落的方法.2.以PMEF细胞为饲养层培养615小鼠的E3...

            【关键词】 615小鼠.ES细胞.ATRA.诱导分化.神经细胞.db-cAMP.多巴胺能神经元

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            【学位论文】 作者:韩嵘 导师:尚克刚   北京大学   生物学 细胞生物学(博士) 2000年

            【摘要】 该文报道研究人员从129/ter小鼠中建立了9个ES细胞系,并从中筛选出两个具有高效种系嵌合能力的ES细胞系,MESPU21和MESP22.该文报道了研究人员对ES细胞群体中未分化 细胞的特异标记.oct-4是一个在大鼠胚胎所有全能性细胞和...

            【关键词】 胚胎干细胞(ES细胞)小鼠

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            【学位论文】 作者:周常文 导师:傅继梁   第二军医大学   基础医学 遗传学(博士) 1999年

            【摘要】 Alzheimer病(AD)是一种进行性的精神衰退的疾病.AD有二个明显的病理特征,即老年斑和神经原纤维的缠结(FNTs),迄今,对NFTs的成因尚未阐明.研究发现,NFTs是由配对的螺旋纤丝(PHF)组成,而PHF的主要成分是异常过度磷酸...

            【关键词】 Alzheimer病p35<′Nck5a>基因

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            【学位论文】 作者:童英 导师:尚克刚   北京大学   生物学 细胞生物学(博士) 1997年

            【关键词】 小鼠ES细胞

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