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【中文期刊】 罗刚 李淑琴 等 《生物化学与生物物理进展》 2004年31卷2期 154-158页SCIISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 通过体外重组的方法,将asd基因插入重组表达质粒,使抗生素抗性失活,并与弗氏志贺氏菌FWL01构成宿主-载体平衡致死系统.通过蛋白质印迹结果表明,在没有抗生素条件选择的情况下,可稳定表达肠毒素大肠杆菌定居因子抗原CS6.重组菌通过口服和鼻饲...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 杨亚东 丁轲 等 《中国免疫学杂志》 2017年33卷10期 1520-1525页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:为构建减毒鼠伤寒沙门菌分泌性蛋白K1缺失株平衡致死系统,并将其开发为能够稳定携带外源基因的活疫苗载体.方法:利用重组自杀性质粒(pREΔasd)介导的等位基因交换技术,以减毒鼠伤寒沙门菌株SL1344ΔsseK1为亲本株,运用二步法筛...
【关键词】 鼠伤寒沙门菌；自杀性质粒；宿主-载体平衡致死系统；
- 概要：
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【中文期刊】 张春杰 陈松彪 等 《中国免疫学杂志》 2016年2期 210-213页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的：为研究用于能够稳定携带外源基因的口服活疫苗载体。方法：本研究以减毒鼠伤寒沙门菌SL1344ΔsipB为研究对象，利用自杀性质粒pREΔasd介导的细菌同源重组技术，构建SL1344ΔsipBΔasd宿主-载体平衡致死系统，并进一步研究...
- 概要：
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【中文期刊】 尚珂 张俊峰 等 《中国免疫学杂志》 2015年3期 358-363页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的：开发应用于猪的稳定携带异源基因的口服活疫苗载体。方法：本研究在减毒猪霍乱沙门菌ΔcrpΔcyaC78-1的基础上，运用自杀性质粒pREasd介导的细菌同源重组技术，构建缺失株ΔcrpΔcyaΔasdC78-1，再将携带asd基因的互补...
- 概要：
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- 结论：
【中文期刊】 陈松彪 李静 等 《中国免疫学杂志》 2014年8期 1083-1087,1092页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的：为了研制更加安全的鸡白痢沙门菌弱毒株，并将其开发为疫苗活载体。方法：本研究构建了鸡白痢沙门菌C79-13ΔcrpΔasd缺失株。双基因缺失株的构建是以含有重组自杀性质粒pREΔasd的大肠杆菌χ7213为供体菌，C79-13Δcrp为...
【关键词】 鸡白痢沙门菌C79-13；asd+平衡致死系统；重组自杀性质粒；
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【中文期刊】 梁爱心 冯细钢 等 《生物工程学报》 2008年24卷6期 995-998页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 将生长抑素(SS)与乙肝表面抗原(S)融合基因插入平衡致死系统原核表达质粒pYA3493中,转化至缺失asd基因的减毒猪霍乱沙门氏菌C500,经酶切、测序筛选得到非抗性的目的克隆,命名为pYA-SS.应用SDS-PAGE和Westernbl...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 袁盛凌 王芃 等 《微生物学通报》 2006年33卷2期 10-15页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 质粒pMM085是含有猪毒素源性大肠杆菌(ETEC)的黏附素K88与无毒肠毒素LTA-B+基因的重组质粒,含氯霉素抗性基因,由此构建的菌苗株带有抗药性.利用平衡致死系统改建此疫苗株,即将质粒上的氯霉素抗性基因cat替换成asd基因,并把新构...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 徐引弟 郭爱珍 等 《生物工程学报》 2006年22卷3期 366-372页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 猪霍乱沙门氏菌C500株是用化学方法致弱、用于预防仔猪副伤寒的弱毒疫苗株,虽具有较好的免疫原性,但仍有一定的残余毒力.为了研制更加安全并保持C500株良好免疫原性的弱毒株,及将C500开发为适于粘膜免疫的疫苗活载体,本文构建了猪霍乱沙门氏菌...
【关键词】 猪霍乱沙门氏菌C500株；△crp△asd缺失株；重组自杀性质粒；
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【中文期刊】 黄维 钟辉 等 《微生物学报》 2004年44卷1期 62-66页MEDLINEISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 大肠杆菌K-12 DY330菌株的染色体上整合有一种新型的同源重组系统--缺陷型λ原噬菌体同源重组系统.以DY330为出发菌,通过同源重组构建大肠杆菌thyA-株DY330-TI,其基因组特点是:thyA基因除保留N端的1～49氨基酸残基相...
【关键词】 thyA；染色体-质粒平衡致死系统；同源重组；
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【中文期刊】 张明亮 孙长江 等 《中国畜牧兽医》 2019年46卷11期 3341-3349页
【摘要】 本研究旨在构建基于减毒鼠伤寒沙门菌的平衡致死系统.将打靶基因片段Cat基因重组入鼠伤寒沙门菌LH430株asd基因位置,之后将温敏型质粒pCP20转入菌体中用以消除Cat基因片段,通过PCR技术两步法筛选出缺失株Δasd LH430;将as...
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【中文期刊】 宁元元 毛旭虎 等 《免疫学杂志》 2007年23卷2期 187-190页ISTICCSCDCA
【摘要】 目的 利用平衡致死系统构建表达O157:H7 EspA 的减毒鼠伤寒沙门氏菌.方法 构建表达EspA的重组质粒,再将其转入终宿主菌减毒鼠伤寒沙门氏菌x4550 株中构建成口服活疫苗株,用IPTG进行诱导表达,经聚丙烯酰胺凝胶电泳、Weste...
- 概要：
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【中文期刊】 李勣 李淑琴 等 《生物技术通讯》 2003年14卷3期 175-177页ISTICCA
【摘要】 以鼠伤寒沙门氏菌标准株基因组DNA作为模板,用PCR的方法扩增鼠伤寒沙门氏菌的asd基因并克隆入质粒pUC19,并对其进行测序,序列与文献报道一致.同时将质粒pYA248上的链球菌asd基因进行了置换,观察了分别含有链球菌asd基因与鼠伤寒...
- 概要：
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【中文期刊】 黄维 钟辉 等 《生物技术通讯》 2002年13卷5期 378-382页ISTICCA
【摘要】 以营养选择标志代替抗生素抗性标志为主要特征的染色体-质粒平衡致死系统的建立为基因工程产品的生产和基因治疗提供了更为安全,有效的操作平台.通过质粒载体基本元件与宿主菌之间的优化,构建出用于不同目的的外源基因的平衡致死系统.它对构建单价或多价减...
- 概要：
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【中文期刊】 毛旭虎 邹全明 等 《免疫学杂志》 2001年17卷6期 413-416页ISTICCSCDCA
【摘要】 目的采用平衡致死系统构建表达幽门螺杆菌尿素酶B亚单位的减毒沙门氏菌工程菌株.方法 PCR扩增幽门螺杆菌尿素酶B亚单位,与pYA3149(asd+)载体质粒重组,转化减毒的伤寒沙门氏菌突变株,SDS-PAGE,用western-blot分析其...
- 概要：
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【中文期刊】 王小舟 杨样 等 《中国预防兽医学报》 2015年37卷8期 595-599页
【摘要】 为研发以禽伤寒沙门氏菌(SG) SG9R弱毒疫苗株为载体表达外源基因的活菌疫苗,本研究利用Red同源重组系统对SG9R株基因组中编码天冬氨酸β-半醛脱氢酶的asd基因进行敲除,构建SG9R△asd缺失突变株.该突变株在缺乏外源DAP培养条件...
- 概要：
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【中文期刊】 耿士忠 陈晓娟 等 《畜牧兽医学报》 2015年46卷12期 2243-2250页
【摘要】 敲除鸡伤寒沙门菌(SG)减毒疫苗株97A asd基因,构建宿主载体平衡致死系统并表达新城疫病毒(NDV)F蛋白,构建二价活菌苗.PCR扩增两段位于asd基因外侧的序列作为等位基因,以氯霉素抗性(CmR)基因替代asd基因,构建自杀质粒pGM...
【关键词】 鸡伤寒沙门菌；asd基因；宿主载体平衡致死系统；
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【中文期刊】 吉玉辉 孙怀昌 等 《中国兽医科学》 2008年38卷11期 919-924页
【摘要】 将大肠杆菌DH5α在含胸腺嘧啶核苷和三甲氧苄二氨嘧啶的琼脂平板上培养,获得了遗传稳定的ThyA-大肠杆菌DH5α21株.用PCR扩增野生菌和ThyA-大肠杆菌的thyA基因,将测定的序列与野生型thyA基因相比,6号突变株的thyA基因第9...
【关键词】 ThyA-大肠杆菌；染色体-质粒平衡致死系统；构建；
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【中文期刊】 杨健美 张小荣 等 《动物医学进展》 2005年26卷7期 45-48,68页
【摘要】 利用平衡致死系统成功地将构建表达致PWD和ED大肠杆菌保护性抗原基因的重组菌BL21(pFSFaeG)中所含氨苄抗性基因敲除,并转化沙门氏菌宿主菌X4550.经过质粒酶切分析和表达产物的SDS-PAGE证实,氨苄抗性基因已经成功敲除,并且目...
- 概要：
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【中文期刊】 武军元 许程剑 等 《动物医学进展》 2005年26卷11期 105-107页
【摘要】 以染色体-质粒平衡致死系统为特征的减毒鼠伤寒沙门氏菌是一种有效的基因递呈载体,突变菌体通过入侵到宿主的派伊尔氏结,进而被抗原递呈细胞如树突状细胞和巨噬细胞吞噬,最终将突变菌体携带的外原基因导入真核细胞并在其中表达,从而诱导机体产生针对外原基...
- 概要：
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- 结论：
【中文期刊】 欧倩 陈昭斌 等 《四川大学学报（医学版）》 2023年54卷6期 1159-1166页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 构建表达宫颈癌抗原的单增和绵羊李斯特菌平衡致死系统,并研究其基本生物学特性,为宫颈癌免疫治疗提供参考数据.方法 将实验室已有的HPV16型E6E7融合蛋白抗原基因盒通过无缝克隆的方式连接到含有营养基因dal的回补质粒pCWgfp-LM...
- 概要：
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【中文期刊】 黄维 曹诚 等 《生物工程学报》 2003年19卷5期 521-526页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 克隆了大肠杆菌和霍乱弧菌胸腺嘧啶合成酶基因thyA,并以pcDNA3质粒为基础,分别用两种来源的thyA基因替代其氨苄抗性基因Amp,构建了不含抗性基因,且可在thyA营养缺陷型大肠杆菌中基于染色体-质粒平衡致死系统稳定传代的真核表达载体....
【关键词】 基因疫苗；染色体-质粒平衡致死系统；thyA；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 金铎 原志伟 等 《中国预防兽医学报》 2018年40卷1期 5-8页
【摘要】 为研制更加安全的大肠杆菌疫苗株,并将其开发为新型活疫苗载体,本研究采用电转化将氯霉素抗性基因片段转化至益生菌EP株.采用同源重组技术使氯霉素抗性基因的PCR产物通过其两侧asd基因序列与益生菌EP基因组中的asd基因发生同源重组.通过氯霉素...
- 概要：
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【中文期刊】 周丽丽 姚碧涛 等 《免疫学杂志》 2007年23卷5期 486-490页ISTICCSCDCA
【摘要】 目的 构建携带布鲁氏菌BLS-L7/L12融合基因的重组减毒沙门菌并进行免疫原性分析,为口服布鲁氏菌DNA疫苗研究奠定基础.方法将BLS-7/L12融合基因克隆到真核表达载体asd+-pVAX1,依次将重组质粒转化减毒沙门菌X3730、X4...
【关键词】 布鲁氏菌；BLS-L7/L12 DNA疫苗；伤寒沙门菌；
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【中文期刊】 郭习勤 焦新安 等 《免疫学杂志》 2007年23卷2期 176-179页ISTICCSCDCA
【摘要】 目的 构建携带鼠疫耶尔森菌F1-V融合基因的重组减毒沙门菌苗,口服免疫Balb/c小鼠检测其免疫原性,为口服鼠疫活载体DNA疫苗研究打下基础.方法 将F1-V融合基因克隆到真核表达载体asd-pVAX1,进一步依次将重组质粒转化减毒沙门菌X...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 应天翼 韩照中 等 《军事医学科学院院刊》 2003年27卷1期 5-9页ISTICCSCDCA
【摘要】 目的:构建表达肠毒素性大肠杆菌菌毛抗原基因CS6和霍乱毒素B亚基(CTB)基因的细菌性腹泻基因工程多价疫苗.方法:以基因工程减毒的人伤寒沙门菌为抗原载体,利用基于asd基因功能互补的宿主染色体-质粒平衡致死表达系统,实现了在没有抗生素选择压...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 张俊峰 张春杰 等 《中国预防兽医学报》 2015年37卷5期 366-370页
【摘要】 为研制能够稳定携带外源基因的猪霍乱沙门菌口服活疫苗载体,本研究在减毒猪霍乱沙门菌△cyaC78-1基础上,利用自杀性质粒介导的等位交换技术,构建了△cya△asdC78-1宿主-载体平衡致死系统,并对其生物学特性进行了鉴定.PCR及测序结果...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 徐引弟 王治方 等 《中国畜牧兽医》 2010年37卷7期 70-73页
【摘要】 为研制仔猪副伤寒-猪水肿病新型二联疫苗,从pMDSLT-II中扩增去信号肽后的SLT-ⅡvB基因,将2拷贝SLT-ⅡvB与pYA3493连接.阳性质粒pYA2B电转化C500crp-/asd-缺失株,进行SDS-PAGE电泳和Western...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 王恒樑 冯尔玲 等 《中国科学C辑》 2001年31卷5期 445-452页
【摘要】 通过DNA体内外同源重组,用霍乱毒素B亚单位基因(ctxB)完全取代了福氏志贺氏2aT32株染色体上的asd基因,获得了稳定表达CtxB的DAP依赖株FWL01.随后,用T32株的asd基因标记志贺氏宋内S7株的Ⅰ相大质粒,并将其诱动至FW...
【关键词】 痢疾杆菌ctxB基因；平衡致死系统；菌苗；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【学位论文】 作者：李敬业导师：张友明 湖南师范大学 生物学 生物学·微生物（硕士） 2010年
【摘要】 近年，有关细菌靶向治疗肿瘤的研究取得了巨大进展，但大量的研究工作主要集中在利用活菌本身或其产物使肿瘤局部破坏或引发机体免疫反应来达到控制、治疗肿瘤的目的，因其缺乏特异性和针对性，且毒副作用大，难以推广应用和临床研究。非致病性大肠杆菌Niss...
【关键词】 大肠杆菌Nissle1917 ； 染色体 ；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【学位论文】 作者：刘东升导师：周南进 南昌大学医学院 南昌大学 生物学 生物化学与分子生物学（硕士） 2007年
【摘要】 背景与目的：幽门螺杆菌(Helicobactcr pylori，Hp)的高感染率及其严重的危害性，使Hp疫苗成为当今研究的热点之一。随着疫苗研究的深入，应用混合抗原成分制备Hp疫苗将是未来Hp疫苗研究的趋势。细胞内感染性细菌减毒后作为DNA...
【关键词】 幽门螺杆菌 ； BabA2/UreI融合基因 ；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【会议论文】宁元元 第三次全国免疫诊断暨疫苗学术研讨会 2007年
【摘要】 目的:利用平衡致死系统构建表达O157:H7 EspA的减毒鼠伤寒沙门氏菌。 方法:构建表达espA的重组质粒,,再将其转入终宿主菌减毒鼠伤寒沙门氏菌X4550株中构建成口服活疫苗株,用IPTG进行诱导表达,经聚丙烯酰胺凝胶电泳、...
【关键词】 肠出血性大肠杆菌O157:H7 ； 减毒鼠伤寒沙门氏菌 ； 平衡致死系统 ；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【学位论文】 作者：刘陶陶导师：张兆山 中国人民解放军军事医学科学院 解放军军事医学科学院 生物学 分子遗传学（硕士） 2002年
【摘要】 该研究利用重组DNA技术,将ETEC优势定居因子抗原CFAⅡ的主要抗原成分CS3和融合肠毒素基因克隆至以天冬氨酸-β-半醛脱氢酶基因（asd）为标记的质粒载体上,与敲除了asd基因的减毒痢疾杆菌构成了营养缺陷的平衡致死系统.在无抗性选择条件...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【学位论文】 作者：黄维导师：曹诚 钟辉 中国人民解放军军事医学科学院 解放军军事医学科学院 生物学 分子遗传学（硕士） 2002年
【摘要】 该研究使用一种新型同源重组系统---缺陷型λ原噬菌体同源重组系统构建了大肠杆菌thyA<'->株.以此缺陷型菌株为宿主菌,利用同一基因自身互补和异种基因功能互补的方式分别构建了以大肠杆菌thyA和霍乱弧菌thyA为选择标志的大肠杆菌染色体-...
【关键词】 染色体-质粒平衡致死系统 ； thyA ；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【学位论文】 作者：张波导师：陈冠军 山东大学 生物学 微生物学（硕士） 2001年
【摘要】 现代免疫理论认为预防微生物引起的胃肠道传染病的一个重要的生理基础是黏膜免疫系统.分泌型IgA是粘膜免疫应答最重要的因子,sIgA能中和毒素,并能有效的防止微生物在粘膜表面的定居和对宿主细胞的侵袭.非肠道途径使用的疫苗不能有效地激发黏膜sIg...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 周凯钰太 潘俊慧 等 《中国动物检疫》 2024年41卷2期 47-57页
【摘要】 活载体疫苗是以细菌或病毒作为载体表达外源抗原和治疗因子的载体系统,具有安全性高、毒力返祖风险低、成本低,可诱导免疫机体产生高水平的体液免疫、细胞免疫或黏膜免疫等优点,是目前最具发展潜力的基因工程疫苗之一,在动物疫病防控领域应用较多.病毒载体...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 于斌 罗语思 等 《中国人兽共患病学报》 2014年7期 663-668页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的：利用载体-宿主平衡致死系统，将1株香港分离的野生型沙门氏菌（S129）构建为减毒核酸疫苗载体。方法以细菌生化反应和血清学方法鉴定S129为鼠伤寒沙门氏菌；以λ-RED同源重组方法靶向敲除S129株的 asdA基因，并以卡那霉素抗性基因...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 应天翼 韩照中 等 《生物工程学报》 2001年17卷1期 29-33页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 构建了携带asd、霍乱毒素B亚基(CTB)基因的表达质粒pYX201,与福氏2a痢疾菌T32的△asd突变株FaD构成宿主-质粒平衡致死系统,用于在没有抗生素选择压力的情况下,稳定表达CTB抗原基因.以此为基础,构建了单独表达肠毒索性大肠杆...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 李彦锋 靳凤烁 等 《免疫学杂志》 2001年17卷5期 344-348页ISTICCSCDCA
【摘要】 目的构建表达鼠精子cyritestin蛋白的可口服减毒沙门氏菌活疫苗株.方法将编码成熟cyritestin蛋白cDNA序列的酶切片段插入含pUC复制子的表达载体pYA3339中,构建重组质粒pMCY,将该重组质粒转入鼠沙门氏伤寒杆菌疫苗株X...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 郑继平 郭桂英 等 《中国兽医学报》 2008年28卷11期 1273-1276页
【摘要】 从猪链球菌2型(SS2)四川分离株分离溶菌酶释放因子基因mrp,将其克隆至T载体上,再将asd基因插入到重组质粒的抗生素抗性基因中,电击转入asd缺陷型沙门菌X4072中表达,形成依赖asd基因的质粒-宿主平衡致死系统.经酶切、PCR及蛋白...
【关键词】 猪链球菌2型；溶菌酶释放因子MRP；沙门菌；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 徐引弟 郭爱珍 等 《中国兽医学报》 2007年27卷4期 493-496,502页
【摘要】 猪霍乱沙门氏茵C500株是用化学方法致弱用于预防仔猪副伤寒病的弱毒疫苗株,毒力弱且免疫原性良好.为将猪霍乱沙门氏茵开发为适于粘膜免疫的疫苗活载体并保持原有免疫原性,构建了以C500为亲本茵,用负向选择的重组自杀性质粒介导接舍转移的方法构建了...
【关键词】 猪霍乱沙门氏茵C500株；asd(-)缺失株；绿荧光蛋白表达；
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