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            【中文期刊】 刘翠华  邓林林  等 《中国比较医学杂志》 2023年33卷5期 8-14页ISTICPKUCA

            【摘要】 目的 构建 LGALS3BP(lectin,galactoside-binding,soluble,3 binding protein,LGALS3BP)基因 3'非编码区(3'-untranslated region,3'UTR)的野生型...

            【关键词】 LGALS3BP3’UTR报告基因载体构建

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            【中文期刊】 傅建新  王玮  等 《中国实验血液学杂志》 2000年8卷4期 261-265页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 逆转录病毒载体被广泛用作对造血细胞进行基因转移的工具,转导方法的改进有赖于应用可快速分析并被高效选择的基因标志.为此,我们克隆了增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因,并构建可表达EGFP的逆转录病毒载体LGSN,通过脂质体转染和交互感染方法建...

            【关键词】 绿色荧光蛋白逆转录病毒载体基因表达

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            【中文期刊】 徐海荣  任雪迪  等 《现代肿瘤医学》 2018年26卷3期 325-328页ISTICCA

            【摘要】 目的:构建4ARE强化的红、绿双荧光蛋白报告基因载体.方法:人工合成3对ARE序列,经退火和磷酸化后插入pARE-TK-GFP载体,构建成p4ARE-TK-GFP载体.以质粒pDsRed2-N1为模板,PCR扩增红色荧光蛋白及其启动子序列与...

            【关键词】 抗氧化反应元件(ARE)双荧光蛋白报告基因

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            【中文期刊】 张照研  王宇光  等 《生物技术通讯》 2018年29卷5期 647-652页ISTICCA

            【摘要】 目的:克隆细胞色素P450 7A1 (CYP7A1)基因启动子,构建以CYP7A1基因启动子为启动序列的双萤光素酶报告基因系统并分析其活性,为研究CYP7A1基因转录调控提供有效筛选工具.方法:采用PCR方法克隆CYP7A1基因启动子序列,...

            【关键词】 细胞色素P450 7A1(CYP7A1)报告基因载体构建

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            【中文期刊】 李莎  汪雯雯  等 《医学分子生物学杂志》 2014年11卷1期 17-21页ISTICCA

            【摘要】 目的 克隆人IGF1R基因启动子序列,构建IGF1R基因启动子荧光素酶报告基因载体.方法 运用PCR方法从HeLa细胞基因组DNA中获得目的 基因;双酶切后连接到荧光素酶报告基因载体上,构建IGF1R基因启动子报告基因载体;将重组质粒转染至...

            【关键词】 IGF1R启动子荧光素酶报告基因

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            【中文期刊】 边素艳  盖鲁粤  等 《组织工程与重建外科杂志》 2009年5卷2期 75-78页ISTICCA

            【摘要】 目的 构建含萤火虫荧光素酶报告基因的逆转录病毒载体,为进一步研究生物发光活体动物体内光学成像奠定基础.方法 利用重组DNA技术,将荧光素酶报告基因载体pGL3-Basic双酶切得到的目的 基因fluc+亚克隆至逆转录病毒载体pLXSN中,重...

            【关键词】 荧光素酶报告基因载体pGL3-Basic重组逆转录病毒载体pLXSN构建

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            【中文期刊】 许丽艳  李恩民  等 《癌变·畸变·突变》 2004年16卷1期 5-8页ISTICCA

            【摘要】 背景与目的:构建NGAL基因5'侧翼区转录调控元件萤火虫荧光素酶报告基因表达载体.材料与方法:以PCR法从SHEEC食管癌细胞基因组DNA中扩增NGAL基因5'侧翼转录调控区不同长度片段G0-G6(-1431~+84).PCR产物经pGEM...

            【关键词】 NGAL基因基因表达调控荧光素酶

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            【中文期刊】 盛毅  纪亚忠  等 《中国男科学杂志》 2000年14卷1期 5-8页ISTICCSCDCA

            【摘要】 为确定人顶体蛋白酶原基因特异的基因表达调控和蛋白分选的序列,从血白细胞中抽提人基因组,聚合酶链式反应(PCR)扩增该基因5'侧翼序列和第1外显子.将扩增获得的1 3 Kb片段克隆到pGEM-T中,经酶切鉴定和DNA序列测定确定为人顶体蛋白酶...

            【关键词】 人顶体蛋白酶原基因报告基因载体构建

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            【中文期刊】 Salman Naseer  Shahid Khan  等 《高师理科学刊》 2016年36卷11期 41-44页

            【摘要】 为克隆C3基因启动子序列,构建C3基因启动子荧光素酶报告基因载体,运用PCR的方法从血液中提取到的基因组DNA中获得目的基因,双酶切后连接到荧光素酶报告基因载体上,构建C3基因启动子报告基因载体.构建的pGL3-Basic-C3-promo...

            【关键词】 C3启动子荧光素酶报告基因

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            【中文期刊】 林雨虹  林怡婷  等 《现代免疫学》 2018年38卷1期 19-24页ISTIC

            【摘要】 为构建人B7H4基因启动子荧光素酶报告基因载体,以人外周血单个核细胞基因组DNA为模板,PCR扩增3条不同长度人B7H4启动子序列,并插入PGL3-Basic荧光素酶报告基因载体中;待测序验证后,将3个重组质粒及pRL-TK内参质粒分别共转...

            【关键词】 B7H4启动子荧光素酶报告基因

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            【中文期刊】 屈亚琦  罗年安  等 《现代生物医学进展》 2015年15卷20期 3801-3804页ISTICCA

            【摘要】 目的:构建不同长度包含目的片段的PDGFC 3'UTR双荧光素酶报告基因载体,为进一步研究PDGF-C mRNA的上游miRNA调节做准备.方法:培养人乳腺癌细胞系MDA-MB-231细胞,提取腺癌细胞系MDA-MB-231细胞的基因组DN...

            【关键词】 载体构建PDGFC双荧光素酶报告基因

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            【中文期刊】 颜冬菁  盖文丽  等 《现代生物医学进展》 2011年11卷6期 1005-1008页ISTICCA

            【摘要】 目的:对Daintain/AIF-1(大炎肽/同种异体移植炎症因子-1)基因启动子进行克隆并构建荧光素酶报告基因载体,为进一步研究Daintain/AIF-1的转录调控作用提供了质粒资源.方法:提取单核巨噬细胞系RAW264.7基因组DNA...

            【关键词】 Daintain/AIF-1基因启动子荧光素酶报告基因载体构建

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            【学位论文】 作者:魏欢 导师:沈清武   西北农林科技大学   畜牧学 动物遗传育种与繁殖(硕士) 2014年

            【摘要】 MicroRNAs(miRNAs)是一类进化上非常保守的非编码小分子RNA,能直接通过降解靶基因mRNA或者抑制蛋白质的翻译,从而对基因的表达进行调控.已经有大量数据证实miRNAs在肌肉发育和癌症发生等多个过程中发挥着重要的作用.根据动物...

            【关键词】 miR-151-3pATP2a2

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            【学位论文】 作者:秦勇 导师:蔡金华   重庆医科大学   重庆医科大学   临床医学 影像医学与核医学(硕士) 2011年

            【摘要】 背景与目的:
               干细胞治疗以及以干细胞为载体的基因治疗是目前医学领域的研究热点之一[1-7],如何对这些细胞的生物学行为进行实时、有效的活体示踪是干细胞治疗用于临床的必要前提,MRI因其具有较高的时间和空间分辨率而成为细胞活体示...

            【关键词】 磁共振报告基因

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            【学位论文】 作者:汪晓艳 导师:冯涛   重庆医科大学   重庆医科大学   生物学 生物化学与分子生物学(硕士) 2011年

            【摘要】 造血是人体最重要的生理过程之一,造血过程必须被精确的控制以满足人体正常的生理需求,它涉及造血干细胞的自我更新、定向分化成各链系祖细胞并继续分化发育成多种具有不同形态和功能的成熟血细胞。红系分化是其中重要的分支。
               MicroRN...

            【关键词】 表达载体构建红系分化

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            【学位论文】 作者:王莉 导师:张涌   西北农林科技大学   西北农林科技大学   生物学 发育生物学(硕士) 2008年

            【摘要】 为了构建一个高效的经改造后的人胰岛素基因乳腺特异性表达载体,从而为利用动物乳腺生产人成熟胰岛素打下基础,我们利用Long PCR技术克隆了长为5151 bp的山羊β酪蛋白基因5P'调控区,并且在克隆出改造后的人胰岛素基因的基础上,以奶牛β酪...

            【关键词】 人胰岛素基因改造

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            【学位论文】 作者:贺宽军 导师:张涌   西北农林科技大学   西北农林科技大学   兽医学 临床兽医学(硕士) 2006年

            【摘要】 为了探讨将纤连蛋白结合蛋白A(FnBP—A)用于金黄色葡萄球菌引起的奶牛乳房炎的基因治疗和作为抗金黄色葡萄球菌引起的奶牛乳房炎的药物和诊断试剂进行开发,在克隆出纤连蛋白结合蛋白A基因(fnbA)的基础上,构建了真核表达载体pEBF和原核表达...

            【关键词】 金黄色葡萄球菌报告基因

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            【学位论文】 作者:何小宁 导师:张涌   西北农林科技大学   西北农林科技大学   生物学 发育生物学(硕士) 2006年

            【摘要】 人溶菌酶(humanlysozyme,hLYZ)参与机体的防御机制,有抗感染、抗肿瘤和免疫调节的作用,因此在医学、食品工业等领域得到十分广泛的应用。天然hLYZ一般是从人乳、中性粒细胞或尿液中少量提取,但由于来源极其困难,提取方法复杂,且安...

            【关键词】 人溶菌酶基因乳腺特异性表达载体

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            【学位论文】 作者:郑艳玲 导师:张涌   西北农林科技大学   西北农林科技大学   兽医学 临床兽医学(硕士) 2006年

            【摘要】 为了构建一个高效的人胰岛素基因乳腺特异性表达载体,从而为利用动物乳腺生产人胰岛素打下基础,我们利用LongPCR技术克隆了长为6.7kb的山羊β酪蛋白基因5'调控区,并且在克隆出人胰岛素基因的基础上,以奶牛β酪蛋白调控区为指导元件,以绿色荧...

            【关键词】 胰岛素基因乳腺特异性表达载体

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            【学位论文】 作者:魏秀丽 导师:李建粤   上海师范大学   基础医学 遗传学(硕士) 2006年

            【摘要】 花色是观赏植物的重要性状,改变花色以及创造新奇花色一直是花卉育种的主要目标之一。随着分子生物学的飞速发展,不断成熟的基因工程技术为花卉改良开辟了一条全新的途径,并已成为花卉育种的新趋势。迄今为止,人们往往利用花色素苷合成过程中编码关键性酶的...

            【关键词】 表达载体构建调节基因Lc

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            【学位论文】 作者:宋红卫 导师:张涌   西北农林科技大学   西北农林科技大学   兽医学 临床兽医(硕士) 2005年

            【摘要】 β-乳球蛋白(BLG)是反刍动物最主要的乳清蛋白,在人和啮齿动物乳中都不存在。基质结合区是真核基因组的DNA序列中能特异地和核基质紧密结合的区域,它广泛地存在于从酵母到人的所有真核生物基因组中。本试验以山羊β-乳球蛋白基因(BLG)5′.....

            【关键词】 人乳铁蛋白基因山羊乳腺上皮细胞

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            【中文期刊】 李静璇  刘峰  等 《中国免疫学杂志》 2024年40卷4期 811-817页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:构建一种高滴度SARS-CoV-2假病毒(PsV)体系,用于中和抗体体外评价与病毒进入抑制剂的筛选.方法:共转染慢病毒载体质粒psPAX2、pCDH-Luc与SARS-CoV-2 Spike(S)蛋白表达质粒,收获的假病毒上清感染AC...

            【关键词】 SARS-CoV-2假病毒S蛋白

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            【中文期刊】 林伟  朱晶晶  等 《中国肿瘤生物治疗杂志》 2024年31卷7期 655-661页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:设计和构建表达PD-1 shRNA的靶向CD19 CAR-T细胞并验证其体外肿瘤细胞杀伤能力.方法:设计并构建表达PD-1 shRNA的CD19 CAR分子基因,将其包装成逆转录病毒载体,通过qPCR法检测病毒载体拷贝数.将慢病毒转导...

            【关键词】 CD19PD-1嵌合抗原受体

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            【中文期刊】 杨翠平  何园  等 《中国药理学与毒理学杂志》 2022年36卷4期 274-281页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 构建由转化生长因子β(TGF-β)诱导的含有Smad响应元件(Smad RE)和红色荧光蛋白mCherry或荧光素酶报告基因序列的慢病毒报告载体,为筛选TGF-β/Smad信号转导通路抑制剂提供有效工具.方法 合成UAS-Smad R...

            【关键词】 转化生长因子βSmad慢病毒报告基因

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            【中文期刊】 高艳萍  任静  等 《中国牛业科学》 2023年49卷1期 25-29页

            【摘要】 可卡因—苯丙胺调节转录肽(cocaine-and amphetamine regulated transcript peptides,CART)是一种内源性神经肽,广泛分布于中枢神经和外周神经系统.CART具有多种不同的生理功能,在牛繁殖机...

            【关键词】 CART双荧光素酶报告基因启动子

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            【中文期刊】 马婷婷  于海伟  等 《齐齐哈尔大学学报(自然科学版)》 2023年39卷5期 86-90页

            【摘要】 从大豆基因组DNA中,通过PCR扩增获得GmGolS2-2启动子序列(GmGolS2-2P),长1740bp.预测分析结果显示,GmGolS2-2P中共含5种逆境相关顺式作用元件,包括2个水杨酸响应元件、1个茉莉酸甲酯响应元件、6个厌氧诱导...

            【关键词】 大豆肌醇半乳糖苷合成酶启动子

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            【中文期刊】 郭跃荣  任静  等 《中国牛业科学》 2023年49卷3期 40-44页

            【摘要】 [目的]构建以及鉴定可卡因—苯丙胺调节转录肽(cocaine-and amphetamine regula-ted transcript peptides,CART)基因启动子片段双荧光素酶报告载体,为后续筛选CART基因核心启动子奠定试验...

            【关键词】 CART启动子双荧光素酶报告基因

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            【中文期刊】 崔军  付汉江  等 《生物化学与生物物理进展》 2007年34卷4期 389-394页SCIISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 microRNA(miRNA)是一类长度为22 nt左右的单链非编码小RNA分子,通过与靶mRNA分子结合而沉默其表达.目前,虽然在多种生物中发现了大量的miRNA,但对它们的功能还知之甚少.为了深入研究miRNA的功能,构建了一个包括17...

            【关键词】 miRNA表达库功能筛选

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            【中文期刊】 孙强  韩骅  《生物化学与生物物理进展》 2004年31卷4期 328-333页SCIISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 蛋白质分子向细胞外分泌的过程有赖于信号肽的介导.基因陷阱是功能性基因克隆的一种有效方法,经典的基因陷阱以geo作为报告基因,对所克隆的基因类型没有选择性.将绿脓杆菌外毒素、2A序列、IL-2受体穿膜区以及新霉素磷酸转移酶的基因依次融合构建新...

            【关键词】 基因陷阱信号肽peo

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            【中文期刊】 汪维  吴军峰  等 《生物化学与生物物理进展》 2002年29卷1期 83-86页SCIISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 以自我失活型逆转录病毒载体pSIR为基础,构建了含有增强型绿色荧光蛋白报告基因的载体pSIR-EGFP和含有870bp p16启动子载体pSIR-EGFP-870.将两种病毒载体转染至包装细胞包装成病毒颗粒.病毒感染2BS靶细胞,病毒5′L...

            【关键词】 自我失活逆转录病毒衰老

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            【中文期刊】 孟宪敏  吴小兵  等 《生物化学与生物物理进展》 2002年29卷4期 597-603页SCIISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 为探讨双基因共表达对再狭窄的防治作用,分别构建了含反义凝血酶受体(ATR)或/和p21单、双基因及报告基因绿色荧光蛋白(GFP)的腺病毒伴随病毒(AAV)载体.上述载体经脂质体介导转染BHK-21细胞, G418筛选获得整合有外源基因的细胞...

            【关键词】 反义凝血酶受体基因p21基因腺病毒伴随病毒载体

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            【中文期刊】 王琳  张印则  等 《检验医学与临床》 2022年19卷22期 3058-3061页ISTICCA

            【摘要】 目的 探讨Rh血型系统RHD基因表达相关微小RNA(miRNA),及其在干预RHD基因表达中的作用.方法 利用生物信息学软件TargetScan、PicTar和miRWalk预测靶向作用于RHD基因的miRNA,综合3个数据库的结果选取靶标...

            【关键词】 RHD基因双荧光素酶报告基因载体微小RNA

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            【中文期刊】 张野  陈静  等 《山东医药》 2022年62卷15期 6-11页ISTICCA

            【摘要】 目的 构建一种逆转录病毒载体介导的SynNotch门控系统.方法 对逆转录病毒载体进行设计改造,在其两端插入绝缘子序列(insulator),并基于Gal4/UAS基因表达调控系统进行SynNotch门控系统的构建.首先采用逆转录病毒载体分...

            【关键词】 逆转录病毒载体SynNotch受体嵌合抗原受体T细胞

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            【中文期刊】 林彦霞  白睿  等 《解放军医学杂志》 2019年44卷2期 98-106页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 构建低氧诱导型的血管内皮生长因子(VEGF)真核表达载体,建立体外递送方法并对其效能进行鉴定.方法 应用基因重组技术,在真核表达载体pGL4.73[hRluc/SV40](pSV)启动子上游插入促红细胞生成素(EPO)增强子,构建低氧...

            【关键词】 VEGF165基因真核表达DNA重组技术

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            【中文期刊】 李钊全  粟正英  等 《中国药理学通报》 2019年35卷7期 1025-1030页ISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 目的 构建含RAC1启动子萤光素酶报告基因CNE1-RAC1-Luc2稳转细胞模型,探讨其在转录水平筛选靶向调控RAC1抗肿瘤活性的大黄酸衍生物中的应用.方法 利用RAC1启动子序列,设计合成萤光素酶报告基因-慢病毒重组载体,感染鼻咽癌CN...

            【关键词】 RAC1萤光素酶报告基因鼻咽癌CNE1细胞

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            【中文期刊】 刘姗  刘美丽  等 《解放军医学杂志》 2019年44卷7期 585-592页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 构建人E1A激活基因阻遏子基因(hCREG)不同截短片段的启动子增强型绿色荧光蛋白(pEGFP1)报告基因载体,比较各启动子转录活性,从而确定hCREG核心启动子区.方法 通过查询美国国立生物技术信息中心(NCBI)数据库hCREG序...

            【关键词】 E1A激活基因阻遏子转录启动子报告基因质粒

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            【中文期刊】 孟凡波  张蕊  等 《西安交通大学学报(医学版)》 2019年40卷1期 17-22页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 用分子克隆和双荧光素酶报告基因的方法研究miR-497对精神分裂症易感基因EFNB2的靶向调控作用,为miR-497在精神分裂症中的分子功能研究奠定基础.方法 运用生物信息学在线软件预测,发现与精神分裂症相关的miR-497可能直接调...

            【关键词】 精神分裂症miR-497EFNB2

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            【中文期刊】 毕红东  李宝群  等 《中国老年学杂志》 2019年39卷17期 4301-4304页ISTICPKUCA

            【摘要】 目的 构建含有类固醇激素受体(VDR)起始密码子区突变序列的双荧光素酶报告基因系统.方法 以人肝组织总RNA为模板应用RT-PCR方法扩增出VDR cDNA基因序列全长并克隆于T载体后酶切再与空载体pcDNA3.1(-)B-myc/his连...

            【关键词】 维生素D受体起始密码子区基因突变

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            【中文期刊】 姜威  任晴  等 《中风与神经疾病杂志》 2021年38卷4期 292-295页ISTICCA

            【摘要】 目的 克隆Kif1a启动子区基因全长序列,构建并鉴定Kif1a启动子全长序列荧光素酶报告基因载体pGL3-Kif1a.方法 以含Kif1a启动子基因全长序列的基因片段(2565 bp)的重组pGEM-T easy载体为模板,用含有酶切位点的...

            【关键词】 kif1a荧光素酶报告基因载体kif1a

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            【中文期刊】 逄越  袁晓东  等 《遗传学报》 2004年31卷2期 151-158页SCIMEDLINEISTICCSCDCABP

            【摘要】 采用5′RACE方法确定鸡卵清蛋白基因转录起始点的位置,通过序列分析得出转录起始点为G,从而确定出核心启动子及上游调控区的位置.应用PCR技术分别扩增两段卵清蛋白基因上游调控序列的两个片段,长度分别为1.5kb和2.9 kb.经PCR测序和...

            【关键词】 转录起始点鸡卵清蛋白基因启动子

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