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【中文期刊】 王淑娟 班付国 等 《畜牧兽医学报》 2021年52卷1期 177-184页
【摘要】 旨在建立特异、敏感的实时荧光定量PCR(FQ-PCR)方法,用于非洲猪瘟病毒(ASFV)和猪瘟病毒(CSFV)野毒株的快速鉴别检测.针对ASFV的P72基因和CSFV野毒株的5'UTR非编码区序列的保守区域分别设计1对特异性引物和1条探针,...
【关键词】 非洲猪瘟病毒;猪瘟病毒野毒株;二重TaqMan MGB FQ-PCR;
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【中文期刊】 胡继明 杨培培 等 《畜牧兽医学报》 2012年43卷6期 943-949页
【摘要】 本研究旨在建立猪瘟病毒野毒株和兔化弱毒疫苗株RT-PCR-RFLP鉴别检测方法.根据Shimen株设计1对特异性引物,建立猪瘟病毒RT-PCR-RFLP检测方法;对20份疑似猪瘟临床样品进行检测,并对检出的山东8株流行野毒株和2株疫苗株PC...
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【中文期刊】 王向鹏 孙元 等 《中国预防兽医学报》 2010年32卷6期 441-445页
【摘要】 为建立快速、简便检测猪瘟病毒(CSFV)野毒的胶体金免疫层析方法(GICA),本研究采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,标记纯化的抗CSFV E2蛋白的单克隆抗体(MAb)6E10作为捕捉抗体.将纯化的抗CSFV E2蛋白的MAb HQ06...
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【中文期刊】 王伟 符芳 等 《中国预防兽医学报》 2010年32卷11期 854-857页
【摘要】 为建立猪瘟病毒(CSFV)兔化弱毒疫苗(C株)与野毒株的快速鉴别检测方法,本研究根据GenBank登录的CSFV C株与野毒株的E2基因序列差异,设计2对特异性引物,建立了同时检测C株与野毒株的双重SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR...
【关键词】 SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR;猪瘟病毒野毒株;C株;
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【中文期刊】 张兴娟 孙元 等 《中国预防兽医学报》 2009年31卷11期 864-868页
【摘要】 本研究旨在建立一种可视化检测猪瘟病毒(CSFV)野毒株的反转录.环介导等温扩增方法(RT-LAMP).根据CSFV的NS5B基因序列设计一套RT-LAMP引物,以样品的cDNA为模板,利用Bsf DNA聚合酶,在62℃恒温条件下进行扩增,扩...
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【中文期刊】 郑从义 童攒 等 《武汉大学学报(理学版)》 2002年48卷6期 720-724页
【摘要】 经过筛选和连续传代,建立了稳定的猪瘟病毒野强毒株(CSFV22)感染猪肾传代细胞系(PK-15)的持续感染细胞模型,获得CSFV22-PK15病毒持续感染的传代细胞株.用免疫荧光技术、RT-PCR技术、透射电镜、流式细胞仪研究了CSFV22...
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【中文期刊】 郭瑞 韩小改 等 《中国兽医杂志》 2024年60卷12期 52-57页
【摘要】 为建立一种可鉴别非洲猪瘟病毒(ASFV)野毒株与ASFV-G-ΔI177L(I177L基因缺失株)疫苗株的实时荧光定量PCR检测方法,本试验针对非洲猪瘟病毒B646L与I177L两种基因保守性高的区域,分别设计了引物和探针,通过引物、探针最...
【关键词】 非洲猪瘟病毒(ASFV);B646L基因;I177L基因;
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【中文期刊】 夏应菊 李琰 等 《畜牧兽医学报》 2024年55卷10期 4590-4596页
【摘要】 旨在探索猪瘟病毒中和抗体与E2蛋白抗体的关系,本研究对289份猪血清进行中和抗体效价和E2抗体测定,比较分析二者的相关性;同时从中选取15份血清,测定血清对不同猪瘟病毒流行野毒株的中和效价.结果表明,从整体上说E2抗体水平与中和效价呈正相关...
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【中文期刊】 彭伍平 夏照和 等 《病毒学报》 2007年23卷5期 389-393页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 猪瘟病毒强毒株和兔化弱毒疫苗株E2糖蛋白分别含有5个和6个潜在的糖基化位点,其中986N是兔化弱毒疫苗株所特有的.为了分析二者糖基化位点差异及其影响,将去掉信号肽和跨膜区的猪瘟病毒石门强毒株(Shimen)和兔化弱毒疫苗株(HCLV)E2基...
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【中文期刊】 韩雪清 刘湘涛 等 《微生物学报》 2003年43卷5期 560-568页ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 密码子的偏嗜性是影响基因异源表达的重要参数之一,优化密码子序列能够提高外源基因的表达水平.野生型猪瘟病毒E2基因在毕赤酵母中的表达量较低,为了提高E2基因在毕赤酵母中的表达水平,利用PCR基础上的定点突变技术将E2基因上的毕赤酵母低利用密码...
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【中文期刊】 王琴 李博 等 《微生物学报》 2001年41卷3期 320-328页ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 为了比较猪瘟病毒(HCV)野毒株、疫苗株及标准株之间E2基因抗原区域的差异,采用RT-PCR扩增了HCV石门株、兔化弱毒疫苗株、野毒03及07株的囊膜糖蛋白E2(gp55)全基因的cDNA片段,分别克隆于pGEM-T载体中并对其进行了核苷酸...
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【中文期刊】 王琴 王在时 等 《微生物学报》 2000年40卷6期 614-621页ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 用RT-PCR扩增了12个不同时期分离的HCV毒株E2基因主要抗原区域的cDNA片段并对其进行了序列测定.应用DNAstar序列分析软件对所测的12个HCV毒株与国内外已知的6个毒株Alfort株、Ald株、Brescia株、Gpe株、C株...
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【中文期刊】 乌那尔汗·吉斯汗 任衍倍 等 《中国动物传染病学报》 2019年27卷1期 85-89页
【摘要】 本研究基于猪伪狂犬病毒(Porcine pseudorabies virus,PRV) gE基因,建立了一种PCR结合核酸斑点杂交检测方法来鉴别野毒株和疫苗株,并利用这一方法对山东省部分地区的猪临床病料中PRV进行了检测.结果 显示,建立的...
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【中文期刊】 郭立军 《吉林畜牧兽医》 2019年40卷6期 20,22页
【摘要】 猪瘟是由猪瘟病毒引起的一种高度接触性传染病,需要了解其流行特点、临床症状、采取切实可行的防控措施.1 猪瘟病症概述猪瘟在我国存在已经有七十余年的病毒,如今已经被列为四大A类动物疫病之一.猪瘟病毒又被称为"烂肠瘟",这种病毒存在两类毒株,一种...
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【中文期刊】 兰德松 魏澍 等 《中国预防兽医学报》 2018年40卷12期 1137-1141,1156页
【摘要】 为建立伪狂犬病病毒(PRV)野毒株与gE基因缺失疫苗株的鉴别诊断和准确定量的微滴数字PCR(ddPCR)方法,本研究以PRV gD和gE基因为靶基因,设计并合成了2套特异性引物和TaqMan探针,建立了分别针对PRV gD和gE基因的ddP...
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【中文期刊】 孔德梦 关冬梅 等 《畜牧兽医科技信息》 2016年4期 21-22页
【摘要】 为了进行猪流行性腹泻病毒的快速诊断,本研究根据GenBank中登录PEDV E基因设计一对引物,建立了RT-PCR方法,敏感性结果显示,可以检测到8.50×104个拷贝.特异性试验采用该方法对猪伪狂犬病病毒,猪圆环病毒2型,猪瘟病毒,猪繁殖...
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【中文期刊】 刘琪 冯晓声 等 《广东畜牧兽医科技》 2015年40卷2期 36-38页
【摘要】 根据GenBank中猪流行性腹泻病毒(PEDV)的基因序列分别设计两对引物,在完成最佳条件筛选、特异性、敏感性试验的基础上,建立一种快速区分PEDV疫苗毒株与野毒株的巢式PCR检测方法.建立的PCR快速检测方法能分别对PEDV疫苗毒株和野毒...
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【中文期刊】 张志 樊雅婷 等 《中国动物检疫》 2015年32卷5期 73-77页
【摘要】 为建立能鉴别猪伪狂犬病病毒(PRV)野毒株和疫苗株的实用方法,本文以疫苗株缺失的3.5kb片段为靶基因,设计了2对PCR引物,建立了能够特异性检测PRV野毒株的套式PCR方法.与常规PCR相比,该方法检测极限可达10个病毒拷贝/μL,是常规...
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【中文期刊】 李长龙 陈建飞 等 《中国兽医杂志》 2014年50卷6期 6-8页
【摘要】 开放阅读框3 (Open reading frame 3,ORF3)是猪流行性腹泻病毒(PEDV)基因组中的惟一辅助基因.前期研究表明,PEDV疫苗株的ORF3在245~293位缺失49个核苷酸.在ORF3缺失区域两端设计合成引物建立反转录...
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【中文期刊】 张改平 何文博 等 《郑州大学学报(理学版)》 2014年46卷3期 85-90页
【摘要】 为了鉴别猪瘟病毒(CSFV)野毒感染和疫苗接种,系统比较分析CSFV标准强毒株、疫苗株、不同基因亚型的野毒株的全基因组序列差异,设计一套分别针对猪瘟强毒与弱毒NS5B基因的环介导等温扩增(LAMP)引物,建立特异性的猪瘟强毒株与疫苗株的LA...
- 概要:
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【中文期刊】 余波 周思旋 等 《河南农业科学》 2014年6期 128-131,144页
【摘要】 根据GenBank中猪伪狂犬病毒(PRV )gE基因序列设计特异性的引物,PCR扩增获得PRV gE基因片段,构建重组质粒pMD18 T gE ,作为阳性标准品。对SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR反应条件进行优化,建立猪PRV S...
- 概要:
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【中文期刊】 杨若松 寇晓晶 等 《畜牧兽医科技信息》 2013年12期 22页
【摘要】 猪瘟是一种急性、热性、高度接触性传染病,由于本病死亡率高,对养猪业的危害极大,是现今严重危害养猪业的主要传染病之一.本研究根据GenBank收录的CSFV猪瘟野毒株全基因序列JL1(EU497410)为参照,建立猪瘟病毒PCR监测方法,该方...
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【中文期刊】 杨小燕 刘建奎 等 《动物医学进展》 2013年34卷8期 46-50页
【摘要】 应用RT-PCR技术对福建省某一猪场采集的疑似猪瘟样品进行猪瘟病毒E2基因扩增,并对其核苷酸序列进行分析.结果表明,猪瘟野毒与标准参考毒株及国内分离株的同源性为81%~98.1%;遗传进化树分析表明流行野毒与中国C株存在很大差异;预测的抗原...
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【中文期刊】 张艳英 高桂生 等 《中国畜牧兽医》 2013年40卷3期 205-209页
【摘要】 本研究旨在比较3种检测猪瘟病毒方法的优缺点.应用反转录一复合套式聚合酶链式反应(RT-nPCR)、荧光抗体法、胶体金免疫层析试纸条3种方法,分别对30份疑似猪瘟病料中的猪瘟病毒进行检测.试验结果显示,RT-nPCR方法检出阳性样品数为11份...
【关键词】 猪瘟;荧光抗体法;反转录—复合套式聚合酶链式反应;
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【中文期刊】 葛宝伟 张志 等 《中国兽医杂志》 2012年48卷12期 6-10页
【摘要】 为了解近年来辽宁地区猪瘟流行毒株的遗传变异情况,本试验利用RT-PCR方法对2006年~2011年辽宁地区发病猪群中猪瘟病毒感染情况进行了检测并获得了20株猪瘟病毒E2基因部分编码序列的扩增片段,测序后得到276 bp的E2基因编码序列;并...
- 概要:
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【中文期刊】 张文利 孙丰廷 等 《中国预防兽医学报》 2012年34卷11期 898-902页
【摘要】 为建立一种能够快速鉴别检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) GDr180疫苗株与GD野毒株的双重荧光定量RT-PCR方法,本研究在PPRSV的Nsp2基因和Orf7基因区域分别设计不同荧光标记的MGB探针及特异性引物.这两种MGB探针能...
- 概要:
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【中文期刊】 董浩 李菲 等 《中国畜牧兽医》 2011年38卷9期 187-189页
【摘要】 为有效鉴别猪瘟病毒强毒株(Shimen)与弱毒疫苗株(HCLV),根据GenBank上已发表的猪瘟病毒囊膜糖蛋白E2基因高度保守区设计一对特异性引物,在其跨越区内部有Shimen株独有的限制性内切酶BglⅡ酶切位点,采取酶切RT-PCR产物...
【关键词】 猪瘟病毒;强毒株和疫苗株;反转录—聚合酶链式反应;
- 概要:
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【中文期刊】 何玲 裴仉福 《中国畜牧兽医》 2011年38卷1期 198-201页
【摘要】 根据猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)变异野毒JXA1的基因变异序列和疫苗株JXA1-R的基因遗传标志设计合成了2对特异性引物,结合快...
- 概要:
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【中文期刊】 万莉 颜其贵 《猪业科学》 2010年27卷3期 20-25页
【摘要】 基于猪瘟病毒基因组中富含T的插入序列建立起的简捷一步法RT-PCR技术,用于同步检测与鉴别野毒株和疫苗株.依据猪瘟病毒兔化弱毒疫苗株3'NTR独立存在富含丁的插入序列,设计特异性的扩增引物,使用简捷一步法RT-PCR或巢式PCR之后用琼脂糖...
- 概要:
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【中文期刊】 刘志杰 任慧英 等 《畜牧兽医学报》 2008年39卷11期 1621-1624页
【摘要】 利用PCR技术从带有伪狂犬病毒( PRV) gE 基因的重组质粒pMD18-T-gE中扩增回收约304 bp大小的片段,并制备出地高辛标记的gE基因核酸探针.特异性检测结果表明,该探针能与重组质粒DNA发生特异性杂交,而与对照的PRV Ba...
- 概要:
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- 结论:
【中文期刊】 夏照和 彭伍平 等 《中国兽医科学》 2008年38卷9期 757-761页
【摘要】 采用环磷酰胺免疫抑制法制备特异性识别猪瘟病毒(CSFV)野毒株的单克隆抗体,用纯化的杆状病毒表达的重组HCLV-E2蛋白作为耐受原,Shimen-E2蛋白作为免疫原,免疫BALB/c小鼠,取其脾淋巴细胞与SP2/O骨髓瘤细胞融合,获得了1株...
- 概要:
- 方法:
- 结论:
【中文期刊】 张莉 丁伯良 等 《动物医学进展》 2008年29卷11期 5-8页
【摘要】 根据编码猪伪狂犬病病毒gE基因保守序列,设计合成一对引物,通过优化PCR反应条件,成功地从猪伪狂犬病病毒感染的细胞中扩增出预期的178 bp片段,而猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪细小病毒、猪瘟病毒、猪流感病毒和猪伪狂犬病病毒gE基因缺失株均未扩...
- 概要:
- 方法:
- 结论:
【中文期刊】 邓雨修 宋延华 等 《广东畜牧兽医科技》 2008年2期 29-32页
【摘要】 运用RT-PCR技术对3株广东省近期流行的猪瘟野毒的E2基因进行了扩增,并进行核苷酸序列分析,同时与国内外参考毒株的抗原序列进行了比对分析,绘制系统发育进化树.结果表明,3株流行毒株E2基因间核苷酸序列的相似性为81.9%~90.9%,所推...
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【中文期刊】 赵建军 成丹 等 《中国兽医科学》 2007年37卷5期 406-412页
【摘要】 根据GenBank中的猪瘟病毒强毒和弱毒株基因组序列设计了1对针对猪瘟病毒的通用引物和2条分别针对猪瘟病毒强毒和猪瘟兔化弱毒疫苗株的特异性TaqMan水解探针,建立了一种能区分猪瘟病毒强毒和兔化弱毒疫苗株的复合实时荧光定量RT-PCR检测方...
【关键词】 猪瘟病毒;猪瘟兔化弱毒疫苗;复合实时荧光定量RT-PCR;
- 概要:
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【中文期刊】 王琴 宁宜宝 等 《中国兽医学报》 2007年27卷2期 145-149页
【摘要】 采用9株临床表现强、中、低致病特点的猪瘟野毒分离株第3代细胞毒作为种毒,按3mL/头剂量分别注射猪瘟抗原及抗体阴性猪,再用上一代传代猪发病后的血毒作为下一代接毒用种毒接种试验猪1头或2头,或上一代传代猪发病后,同圈放入1头或2头试验猪进行同...
- 概要:
- 方法:
- 结论:
【中文期刊】 陆芹章 何颖 等 《中国预防兽医学报》 2005年27卷6期 512-516页
【摘要】 本实验以来自广西梧州、博自和北海地区的3株猪瘟野毒和中国标准石门株病毒、疫苗毒为材料,研究其在宿主体内和体外PK-15细胞中增殖的基本特性和差异.结果显示,广西的一部分毒株很可能在毒力和生长特性上已经发生了一些变异.本实验用免疫酶实验检测P...
- 概要:
- 方法:
- 结论:
【中文期刊】 车勇良 俞伏松 等 《动物医学进展》 2005年26卷11期 81-83页
【摘要】 根据伪狂犬病病毒(PRV)的gE基因序列,设计并合成了一对引物,以闽A株DNA为模板,建立了检测PRV的PCR方法.该方法能从猪细小病毒闽A株和FB株中扩增出一条长度为1 808 bp的片段,对Bartha株、gE-株检测为阴性;而以猪圆环...
- 概要:
- 方法:
- 结论:
【中文期刊】 王琴 宁宜宝 等 《中国农业科学》 2004年37卷3期 446-452页
【摘要】 采用RT-PCR技术扩增了HCV 1 0个野毒株、4批不同厂家生产的兔化弱毒疫苗株和1个标准SM株Erns基因的cDNA片段并对其进行了序列测定.应用DNA st a r序列分析软件对所测的1 5个HCV毒株与国内外6个参考毒株A1fort...
- 概要:
- 方法:
- 结论:
【中文期刊】 于立权 李鹏 等 《中国预防兽医学报》 2003年25卷4期 271-273页
【摘要】 本研究参考公开发表的Alfort株基因组全序列,用计算机软件Dnastar的PrimerSelect程序设计了两对SCFV E2基因高变区的特异性引物,对黑龙江东部地区分离的5株猪瘟野毒(HL、JN、MSND、MSPD和MSHT株)进行RT...
- 概要:
- 方法:
- 结论:
【中文期刊】 张永国 张彦明 等 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 2003年31卷5期 128-132页
【摘要】 利用RT-PCR和PCR技术扩增出近期猪瘟流行野毒株的E2基因,将其克隆到载体上测定核苷酸序列,根据Alfort株和Brescia株、C-株确定起始氨基酸三联体的正确位置后推导出其氨基酸序列,结果表明近期流行的猪瘟毒株与疫苗毒株和强毒株之间...
- 概要:
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