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【中文期刊】 付苏 郭树忠 等 《中国美容医学》 2009年18卷7期 960-963页ISTICCA
【摘要】 目的:构建含人OX40-IgG1融合基因的真核表达载体pDC315-0X40Ig,表达具有生物学活性的OX40Ig融合蛋白,为诱导异体复合组织移植免疫耐受的基因治疗作准备.方法:全基因合成目的基因OX40Ig,即人0X40胞外段序列及人Ig...
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【中文期刊】 张立华 银平章 等 《实用诊断与治疗杂志》 2004年18卷2期 104-106页ISTIC
【摘要】 目的:鉴定人表皮生长因子的真核表达载体.方法:重组体进行限制性酶切及PCR可见目的片段.结果:pCDDA3.1-hEGF真核表达载体已成功构建.结论:已成功构建hEGF真核表达载体,为进一步研究hEGF的功能奠定了基础.
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【中文期刊】 史楠 赵立平 等 《黑龙江畜牧兽医（科技版）》 2009年12期 1-3页
【摘要】 在幔病毒复制过程中cyclinT1(CycT1)是重要的辅助因子.为了揭示慢病毒的复制机理,试验使用RT-PCR方法扩增马和驴的cyclinT1基因,并进行克隆和序列分析,然后用DNASTAR(MegAlign)软件将测得的序列和国外发表的...
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【中文期刊】 李谷 马力 等 《全科医学临床与教育》 2008年6卷5期 380-382,封2,封3页
【摘要】 目的 构建重组基因表达栽体PcDNA-sTRAIL并观察其对C6胶质瘤细胞的抑制作用.方法 通过PCR扩增和定向克隆技术构建重组真核表达栽体PcDNA-sTRAIL.以阳离子脂质体介导转染C6胶质瘤细胞并用流式细胞仪观测时细胞增殖的影响.结...
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【中文期刊】 赵悦 肖华卫 等 《中华肿瘤防治杂志》 2013年20卷11期 806-810页ISTICPKUCA
【摘要】 目的:构建AIF截短后只保留羧基端促凋亡结构域的真核表达载体,了解其是否有促凋亡活性作用及其机制.方法:通过PCR方法构建出AIF截短体AIF△1-480的真核表达载体.采用脂质体将该载体瞬时转染人乳腺癌细胞系MCF-7细胞,采用流式细胞技...
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【中文期刊】 张巧 段丽菊 等 《卫生研究》 2010年39卷4期 403-406页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 了解Rap2b基因对NIH3T3细胞集落形成及细胞伤口愈合能力的影响,为探讨该基因在人肺癌发生中的作用提供实验依据.方法 以人肺CDNA为模板克隆出Rap2b基因片段,构建pcDNA3.1-Rap2b真核表达载体,稳定转染NIH3T3...
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【中文期刊】 张红绪 张怡 等 《中国药房》 2009年20卷22期 1707-1709页ISTICPKUCA
【摘要】 目的:构建Exendin-4基因真核表达裁体,并在巴斯德毕赤酵母GS115中进行表达,为大量获得Exendin-4奠定基础.方法:采用重叠聚合酶链反应法扩增出Exendin-4的完整序列,将其亚克隆到表达载体pPIC9K上,得到重组质粒pP...
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【中文期刊】 戴灿 卢光琇 《现代生物医学进展》 2010年10卷9期 1639-1641页ISTICCA
【摘要】 目的:构建pAAV-NF-YA真核表达栽体并转染子宫颈癌HeLa细胞,检测NF-YA的表达水平.方法:抽提人类胚胎干细胞和胚胎成纤维细胞的总RNA,RT-PCR获得NF-YA基因的cDNA,克隆至pAAV-MCS载体中,经限制性酶切和测序鉴...
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【中文期刊】 张家墅 甄海宁 等 《第四军医大学学报》 2009年30卷16期 1457-1460页ISTICCA
【摘要】 目的:克隆细胞凋亡抑制蛋白基因survivin(SVV)的编码序列,构建含SVV基因的真核细胞表达载体并观察其在人胶质瘤细胞系SHG44中的表达.方法:利用逆转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase...
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【中文期刊】 凌婧 马珍妮 等 《中国实验血液学杂志》 2013年21卷1期 126-129页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 本研究旨在构建人血管性血友病因子裂解蛋白酶(ADAMTS13)的pEGFP-N1真核表达载体,为进一步研究ADAMTS13在细胞内合成及其分泌提供有力工具.通过PCR方法获取目的基因片段,并在目的基因两端加上限制性酶切位点.限制性内切酶酶切...
【关键词】 ADAMTS13；pEGFP-N1栽体；载体构建；
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【中文期刊】 隋少飞 陈松林 《生物技术通报》 2004年3期 1-4页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 巴氏毕赤酵母表达系统具有真核生物表达的特点.本文综述了巴氏毕赤酵母菌及其表达载体的特点以及外源基因在该系统中表达存在的一些问题.
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【中文期刊】 张明珠 王丹 等 《同济大学学报（医学版）》 2011年32卷4期 1-4页ISTIC
【摘要】 目的 构建针对同源域蛋白TGIF(5′-TG-3′interacting factor)可诱导表达shRNA的慢病毒载体,鉴定其在大肠癌细胞系DLD1中对TGIF的基因沉默效率,进一步研究其对TGF-β信号通路下游基因的影响.方法 设计并合...
【关键词】 可诱导慢病毒shRNA栽体；TGIF；TGF-β信号通路；
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【中文期刊】 孔凡铭 张新伟 等 《天津医科大学学报》 2011年17卷2期 151-153,157页ISTIC
【摘要】 目的:构建iASPP真核表达载体,稳定转染小鼠成纤维细胞(NIH3T3)并检测其表达,观察其对NIH3T3细胞增殖的影响.方法:设计引物以源克隆PCMV-iASPP为模板PCR扩增其中的CDS区,亚克隆入FLAG-pcDNA3.0,将该重组...
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【中文期刊】 刘丹丹 孟秀香 等 《大连医科大学学报》 2008年30卷2期 108-111页ISTICCA
【摘要】 [目的]克隆转录抑制因子Bmi-1基因并构建其正、反义真核表达载体,为研究其功能及其作用机制奠定基础.[方法]根据Bmi-1基因已知序列,设计合成一对引物,上下游引物分别加入XhoI和ClaI的酶切位点,用反转录PCR(RT-PCR)方法从...
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【中文期刊】 赵晨曦 南景东 等 《黑龙江大学工程学报》 2015年3期 62-67,83页
【摘要】 甜菜M 14品系是在栽培甜菜染色体基础上附加了野生白花甜菜第9号染色体的单体附加系，具有抗逆、无融合生殖等优异特性。在前期工作中，通过 RACE技术获得了甜菜 M14品系硫氧还蛋白过氧化物酶（Thioredoxin peroxidase ，...
【关键词】 甜菜M 14品系；硫氧还蛋白过氧化物酶；大肠杆菌；
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【中文期刊】 李业伟 孙程龙 等 《安徽农业科学》 2011年39卷24期 14899-14901,14974页
【摘要】 [目的]构建表达犬瘟热Onderstepoort株H蛋白的重组伪狂犬病毒,并研究其生物学特性.[方法]通过RT-PCR方法获得Onderstepoort株H基因,插入pcDNA3.1(+)建立好完整的真核细胞表达盒并将此表达盒亚克隆到转移栽...
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【中文期刊】 高宏博 崔红玉 等 《中国预防兽医学报》 2010年32卷5期 329-333页
【摘要】 为构建表达禽流感病毒(AIV)血凝素(HA)基因的重组疱疹病毒(HVT),本研究将AIV A/Goose/Guangdong/3/96(H5N1)的HA基因克隆于真核表达质粒中,构建了转移栽体pUAB-gpt-HA.通过同源重组及霉酚酸筛选...
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【中文期刊】 运晨霞 王坤 《广西中医学院学报》 2010年13卷3期 1-3页
【摘要】 [目的]构建人maff基因表达载体并在人肝癌细胞系HepG2细胞中表达.[方法]PCR(聚合酶链式反应)扩增人maff基因,并将其和克隆质粒连接,转染到大肠杆菌中扩增,酶切鉴定,然后将目的基因和表达载体连接,转染到人肝癌细胞系HepG2细胞...
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【中文期刊】 吴琼 张永亮 等 《中国兽医学报》 2008年28卷3期 276-280页
【摘要】 合成含靶向生长抑素(Somatostatin,SS)前体基因的siRNA转录模板的发夹结构,插入pSilencer TM2.1-U6载体构建重组质粒2.1-S.提取小鼠下丘脑组织总RNA,PCR扩增获得SS前体基因eDNA,构建真核表达载体...
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【中文期刊】 徐树兰 童铁钢 等 《中国预防兽医学报》 2008年30卷6期 440-444页
【摘要】 通过RT-PCR获得赤羽病毒(AKAV)OBE-1株的G1基因,克隆至pMD18-T载体.经测序鉴定正确后,将该片段作为目的基因亚克隆至Bac-to-Bac杆状病毒表达系统中的pFastBacHTA转移栽体质粒中,利用Tn7转座子与穿梭载体...
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【中文期刊】 吴发兴 陈杰 等 《中国兽医科技》 2002年32卷8期 3-5页
【摘要】 根据已发表的伪狂犬病病毒(PRV)Rice株的gE基因序列设计了1对引物，用PCR法特异性地扩增出了PRVMin-A株的gE基因，并克隆到pUC19中，再与杆状病毒转座质粒pFastBacl连接得到pFastBac-gE，pFastBac-...
【关键词】 伪狂犬病病毒；gE基因；质粒pFastBacl；
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【中文期刊】 尹强兵 王晓捷 等 《现代生物医学进展》 2011年11卷9期 1643-1646页ISTICCA
【摘要】 目的:建立真核细胞表达的GFP-Hsp90α FA7A基因重组慢病毒栽体三质粒包装细胞系统,并检测其对细胞增殖性的影响,为进一步研究HSP90分子伴侣功能奠定基础.方法:制备完整的重组慢病毒载体三质粒系统:转移质粒(Hsp90αE47A/p...
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【中文期刊】 秦伟伟 葛银林 等 《现代生物医学进展》 2009年9卷1期 9-12,24页ISTICCA
【摘要】 目的:构建转基因小鼠模型的载体并检测在人肝癌HepG2中的表达效果.方法:将n-3多不饱和脂肪酸脱氢酶基因fat-1插入到真核表达载体(pcDNA3.1(+)myc-HisA)中,构建重组表达载体pcDNA3.1(+)myc-His A-f...
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