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【中文期刊】 何志惠 刘思汝 等 《中国热带医学》 2020年20卷5期 473-476页ISTICPKUCA
【摘要】 目的 构建小鼠细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4Fc融合基因(CTLA4-Fc)的真核表达质粒,并检测其在293T细胞中的表达,为后续在小鼠体内研究CTLA4-Fc抗肿瘤作用机制奠定基础.方法 Gene Runner软件设计并合成互为搭桥、互为模...
【关键词】 细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4；Fc融合蛋白；真核表达质粒；
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- 方法：
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【中文期刊】 黄用豪 和永壮 等 《中国热带医学》 2017年17卷4期 340-343页ISTICPKUCA
【摘要】 目的 构建小鼠成纤维细胞生长因子受体1/巨噬细胞炎性蛋白3a-Fc融合基因(FGFR1/MIP3a-Fc)的真核表达质粒,并在293T细胞中的表达.方法 设计合成FGFR1/MIP3a融合基因引物,用PCR方法扩增获得FGFR1/MIP3a...
【关键词】 成纤维细胞生长因子受体1；巨噬细胞炎性蛋白3a；Fc融合蛋白；
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- 方法：
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【中文期刊】 王佳雯 高云鹏 等 《生物技术通报》 2017年33卷6期 149-154页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 转录组测序发现Tβ10在鹿茸中高表达,为了研究Tβ10与鹿茸生长发育间的关系,构建Tβ10真核表达载体.使用Trizol法提取梅花鹿鹿茸总RNA,PCR技术特异性扩增梅花鹿Tβ10基因,利用酶切位点将目的片段插入真核表达载体VR1012构建...
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【中文期刊】 李烨 吴晶晶 等 《中国生物化学与分子生物学报》 2010年26卷4期 369-373页MEDLINEISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 本研究采用RT-PCR法从293T细胞中克隆得到PA28γ cDNA全长序列,并将该片段亚克隆到pMD-18T载体中,利用定点突变获得核定位序列缺失突变的PA28γ突变体,分剐将野生型(WT)和突变型(MT)PA28γ基因克隆到真核表达载体...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 吴扬 李玉琴 等 《吉林大学学报（医学版）》 2009年35卷5期 898-901页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建人纤溶酶真核表达载体以用于抗栓、溶栓的研究.方法:人胎肝组织经PCR技术扩增人纤溶酶基因,定向克隆至真核表达质粒pC-DNA-3后测序.经测序鉴定正确后构建人纤溶酶真核表达重组质粒,利用PCR和酶切方法鉴定重组真核表达质粒的正确性...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 时阳 谭岩 等 《吉林大学学报(医学版)》 2004年30卷2期 206-208页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建小鼠白细胞介素18(mIL-18)的重组真核表达质粒,制备有效的免疫佐剂.方法:通过RT-PCR分别从BALB/c小鼠和Swiss小鼠肝组织总RNA中扩增mIL-18,并将其连接于载体pcDNA3中,再用双酶切及测序方法鉴定重组质...
- 概要：
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- 结论：
【中文期刊】 张盼盼 李纾 等 《上海口腔医学》 2010年19卷6期 635-640页MEDLINEISTICCSCDCA
【摘要】 目的:构建并鉴定含有plap-1基因和已知FLAG序列的真核细胞表达载体pBABE-hygro-PLAP-1.方法:采用PCR扩增PLAP-1的目的片段,然后连接到已知FLAG序列的载体p3×FLAG-CMV-10上:再次通过PCR扩增出P...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 赵征 刘洪臣 等 《上海口腔医学》 2010年19卷3期 262-269页MEDLINEISTICCSCDCA
【摘要】 目的:探讨金属蛋白酶解离素28(ADAM28)基因对人牙髓干细胞(HDPSCs)增殖、分化、凋亡特性的影响和可能的作用机制.方法:体外分离培养、鉴定人牙髓干细胞(HDPSCs),应用基因重组构建ADAM28真核表达质粒并转染HDPSCs,应...
【关键词】 金属蛋白酶解离素28；人牙髓干细胞；增殖；
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【中文期刊】 李书祥 韩睿 等 《生物化学与生物物理进展》 2011年38卷8期 751-758页SCIISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 通过截短玉米黑粉菌CYP51(P450-14DM,UmCYP51)基因(去除编码跨膜区部分)和选取不同的表达载体,构建了9种重组表达质粒,在大肠杆菌中进行UmCYP51基因的表达,发现只有BL21(DE3)/PET32-Um-35重组表达工...
- 概要：
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【中文期刊】 张晋平 罗文萍 等 《生物化学与生物物理进展》 2010年37卷3期 288-296页SCIISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 为了观察肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)基因对体外培养的小鼠蜕膜基质细胞增殖及凋亡的作用,探讨TRAIL对小鼠子宫蜕膜化进程的影响,构建TRAIL过表达及干扰质粒,转染小鼠基质细胞后诱导蜕膜化发生.转染72 h后,应用半定量RT-...
【关键词】 肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)；子宫基质细胞；蜕膜化；
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【中文期刊】 刘进兰 杨雪 等 《生物技术通报》 2019年35卷2期 109-115页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 利用毕赤酵母菌株表达家蝇抗菌肽domesticin基因并检测其抑菌活性.克隆家蝇domesticin基因与pPIC9k质粒相连,构建重组表达载体pPIC9K-domesticin,将其电击转化入毕赤酵母KM71中.甲醇诱导后利用Tricin...
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【中文期刊】 王梅林 牛精铃 等 《生物技术通报》 2019年35卷10期 174-179页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 旨在构建带Flag标签的人RhoB基因真核表达载体并检测其表达.提取人胚肾细胞HEK-293T总RNA并反转录获得cDNA;设计引物并利用PCR技术扩增RhoB基因的ORF序列;将所扩增序列插入到带Flag标签的pCMV5真核表达载体,插入...
- 概要：
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【中文期刊】 赵佳福 许厚强 等 《生物技术通报》 2018年34卷11期 152-159页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 克隆获得BLM基因全长CDS区,研究其在细胞中的表达情况.从人前列腺癌PC3细胞中提取总RNA,反转录成cDNA,采用分段克隆的方法获得BLM全长CDS区,将其定向插入到原核表达载体pET-32a和真核表达载体pEGFP-N3,构建pET-...
- 概要：
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【中文期刊】 翟晓鑫 高花 等 《生物技术通报》 2018年34卷12期 132-139页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 为构建荷包猪SLA-2-HB01真核细胞表达载体,观察其在PK15细胞中的表达情况.首先参考SLA-2-HB01基因编码区序列设计了引物对,以SLA-2-HB01-pMD 18-T为模板PCR扩增获得SLA-2-HB01编码区基因片段,经T...
- 概要：
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【中文期刊】 郭欣欣 王刚 等 《生物技术通报》 2017年33卷5期 170-175页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 构建含人白介素10受体 α(IL-10RA)基因的真核表达质粒pENTER-IL-10RA-His,并在HEK293中进行真核表达,并用免疫共沉淀检测JAK1与IL10RA在细胞内的相互作用.在HeLa细胞中提取人总RNA,通过RT-PCR...
【关键词】 白介素10受体α(IL-10RA)；真核表达；免疫共沉淀；
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【中文期刊】 徐岚 肖斌 等 《生物技术通报》 2016年32卷5期 75-81页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 旨在构建人C-Src蛋白酪氨酸激酶（Csk）基因真核表达系统。从HeLa细胞中提取总的RNA，通过RT-PCR获得Csk基因全长cDNA序列，并将其克隆至真核表达载体pENTER中，构建重组质粒pENTER-Csk-his。重组质粒转染29...
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【中文期刊】 王海涛 金波 等 《生物技术通报》 2016年32卷5期 82-90页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 旨在构建新疆南部4个地方品种（品系）绵羊，即平原型和田羊（HP）、山区型和田羊（HS）、卡拉库尔羊（KL）和多浪羊（DL）的肌生成抑制素（myostatin，MSTN）基因与增强型绿色荧光蛋白（EGFP）的融合表达质粒并在真核细胞中表达。从...
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【中文期刊】 贺晓丽 刘萍 等 《植物生理学报》 2015年12期 2163-2168页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 miRNA作为真核生物的一类调控因子,在植物胁迫应答中发挥着重要的作用,成熟的miRNAs能降解或者阻遏靶mRNA的翻译。为从不同角度揭示miR398的生物学功能,我们从番茄中克隆到MIR398基因并构建了该基因的过表达载体pBI121-M...
- 概要：
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【中文期刊】 董乐 戴聪杰 等 《植物生理学报》 2014年12期 1880-1888页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 为研究蓖麻质膜水通道蛋白PIP1.3的转运功能,采用RT-PCR技术扩增基因PIP1.3的全长编码区cDNA序列(861 bp),将该序列亚克隆至真核表达载体pcDNA3.1/Myc-His A,酶切、测序分析表明,重组质粒pcDNA3.1...
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【中文期刊】 刘彤 李丹妮 等 《吉林大学学报（医学版）》 2014年40卷1期 27-30页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建不同活性的人p21活化激酶1(hPAK1)自我抑制域(AID)谷胱甘肽(GST)标签真核表达载体并鉴定其融合蛋白表达,以探讨PAK1 AID的功能及肿瘤治疗的靶向意义.方法:以pcDNA3.1 HisC-PAK1全长质粒为模板,利...
【关键词】 p21活化激酶1；自我抑制域；失活型(L107F)；
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【中文期刊】 王宇 陈葳 等 《吉林大学学报（医学版）》 2014年3期 504-507页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的：构建 UCA1 a（CUDR）基因真核表达载体 pcDNA-UCA1 a（CUDR），观察其在膀胱癌 UM-UC-2细胞中的表达，为研究 UCA1 a（CUDR）基因与膀胱癌的关系提供实验依据。方法：以膀胱癌 BLZ-211细胞的5′...
【关键词】 UCA1a(CUDR)基因；真核表达载体；转染；
- 概要：
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【中文期刊】 赵金匣 王志平 等 《吉林大学学报（医学版）》 2014年6期 1149-1154页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的：构建人 B细胞易位基因2（BTG2）真核表达载体，并在 H eLa细胞中表达携带 FLAG标签的BTG2蛋白，为阐明BTG2基因的功能提供实验工具。方法：利用 PCR法获得全长 BTG2片段，将扩增得到的片段插入真核细胞表达载体 pc...
- 概要：
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【中文期刊】 仲苓芝 李文雪 等 《吉林大学学报（医学版）》 2014年40卷1期 10-14页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建人线粒体超氧化物歧化酶2 (SOD2)的真核细胞表达载体,探讨其在人脐静脉内皮细胞(HUVEC)中的表达效果.方法:以HUVEC mRNA为原始模板,应用RT-PCR技术,扩增编码线粒体SOD2全长的cDNA片段.利用分子生物学技...
【关键词】 线粒体超氧化物歧化酶；pcDNA3.0；人脐静脉内皮细胞；
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【中文期刊】 许会静 杜彤华 等 《吉林大学学报（医学版）》 2014年3期 465-470页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的：构建成纤维细胞生长因子受体3（FGFR3）真核表达载体 MSCV／puro-fgfr3-WT和 MSCV／puro-fgfr3-DN，并检测 FGFR3蛋白在人白血病细胞系 K562中的表达。方法：通过 PCR 法获得 FGFR3全长...
【关键词】 受体,成纤维细胞生长因子,3 型；真核表达载体；K562 细胞系；
- 概要：
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【中文期刊】 张鹏 王艳丽 等 《吉林大学学报（医学版）》 2013年39卷4期 837-840页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:克隆家兔胆固醇酯转移蛋白(CETP)基因,构建其真核表达载体,研究CETP基因的结构与功能,为进一步研究CETP在动脉粥样硬化(As)中的作用机制提供参考.方法:采用TRIzol提取家兔肝组织总RNA,采用RT-PCR方法将RNA逆转...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 董肖婷 张斌 等 《吉林大学学报（医学版）》 2013年39卷2期 282-285,后插2页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建抑癌基因PTEN真核表达载体pEGFP-PTEN,并观察其在人舌鳞癌scc-4细胞系中的表达,为舌鳞癌的基因治疗提供理论依据.方法:提取人HeLa细胞总RNA,采用RT-PCR法获取PTEN全基因,克隆至pMD18-T载体,经Ec...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 刘彤 李洋 等 《吉林大学学报（医学版）》 2013年39卷3期 437-440页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建人p21活化激酶6(PAK6)的各个截短区域原核表达质粒,并诱导和鉴定其融合蛋白的表达,为探讨PAK6基因的生物学功能提供依据.方法:以真核表达质粒pcDNA3.1-GFP-PAK6为模板,PCR扩增出PAK6基因的各个截短片段....
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 王妍 黄志立 等 《吉林大学学报（医学版）》 2013年39卷2期 204-208页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建干扰素β1a(IFN-β1a)的CHO表达体系,探讨人IFN-β1a在真核细胞中的表达效果.方法:采用全基因合成法获取重组人IFN-β1a基因,并通过点突变将IFN-β1a的17位半胱氨酸进行修饰,合成的基因经PCR扩增,连接入p...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 宋丽华 齐力 等 《吉林大学学报（医学版）》 2013年39卷4期 759-762,后插4页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建携带Hath1基因的真核表达载体并转染神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y),观察其在SH-SY5Y细胞中的表达.方法:从人全血中提取DNA,克隆Hath1基因,同时扩增绿色荧光蛋白(GFP) gfp基因；利用引物GFP-R和Hath...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 迟莹 卞倩 等 《南京医科大学学报（自然科学版）》 2012年32卷1期 40-44页ISTICPKUCA
【摘要】 目的:构建甲型H3N2流感病毒非结构蛋白-1( nonstructal-1,NS1)真核表达载体并表达其编码蛋白；探讨NS1对细胞增殖的影响.方法:从江苏省甲型H3N2流感病毒毒株提取病毒RNA,采用RT-PCR技术扩增NS1全长基因,将其...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 张红艳 王春玉 等 《吉林大学学报（医学版）》 2012年38卷2期 202-206页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建pcDNA3.lmyc-HisA-Smad2/3/4真核表达质粒,证实融合蛋白在细胞内表达.方法:以pcDNA3.1-Smad2/3和pGEX2T-Smad4质粒为模板,设计特异性引物,PCR扩增Smad2/3/4全长编码基因,亚...
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- 方法：
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【中文期刊】 张伟红 张西臣 等 《吉林大学学报（医学版）》 2012年38卷3期 537-542,封3页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:探究DHRS7基因过表达和DHRS7特异性短发夹RNA (shRNA)重组质粒对人乳腺癌细胞MCF-7细胞周期的影响及DHRS7与乳腺癌浸润癌的关系,阐明DHRS7在乳腺癌发生、发展中的作用.方法:利用RT-PCR技术将DHRS7基因...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 王博蔚 高尚 等 《吉林大学学报（医学版）》 2012年38卷2期 270-275,后插3页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建人血管内皮生长因子165(hVEGF165)的真核表达质粒pIRES2-EGFP-hVEGF165,通过脂质体法将其转入人胎盘源间充质干细胞(HPMSCs)中,鉴定hVEGF165的表达活性及携带目的基因的HPMSCs的多向分化潜...
【关键词】 人血管内皮生长因子165；人胎盘源间充质干细胞；脂质体；
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 范翠英 冯利兴 等 《生物工程学报》 2012年28卷2期 233-242页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 蛋白酶体是真核细胞中的一类多亚基蛋白酶复合物,它在胞内蛋白质降解的泛素-蛋白酶体通路中起关键作用.重组表达蛋白酶体的活性亚基可以用于在体外筛选、寻找具有蛋白酶体抑制剂作用的化合物.将人蛋白酶体催化亚基( PSMBl)cDNA的编码区(全长7...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 吴晓莉 张婷 等 《中草药》 2012年43卷1期 143-147页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 从大蒜鳞茎中克隆蒜氨酸酶基因,构建蒜氨酸酶真核表达载体,并在毕赤酵母系统中表达,进一步探讨重组蒜氨酸酶的生物学活性.方法 利用RT-PCR方法克隆大蒜鳞茎蒜氨酸酶基因,通过pPIczaC载体构建pPIczaC-蒜氨酸酶真核表达质粒,电...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 于亚平 傅赞 等 《南京医科大学学报（自然科学版）》 2012年32卷7期 913-917页ISTICPKUCA
【摘要】 目的:体外实验观察乳酸脱氢酶-A (lactate dehydrogenase-A,LDHA)短发夹RNA对胆管癌细胞系Hucct1 LDHA表达的抑制效果,筛选出针对LDHA基因有效的干扰靶点,并检测LDHA表达下调后,细胞增殖活力的改变...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 禹亚彬 杭化莲 等 《南京医科大学学报（自然科学版）》 2012年32卷10期 1356-1360页ISTICPKUCA
【摘要】 目的:构建pcDNA3.1/HNF4α重组质粒,转染人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,HUMSCs),并检测其在HUMSCs中的表达.方法:采用基因重组技术构建载体p...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 毕建军 杨慧兰 等 《微生物学通报》 2012年39卷9期 1299-1305页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 [目的]研究人单纯疱疹病毒2型(Herpes simple virus type 2,HSV-2) 2.2 kb潜伏相关转录体(Latency associated transcript,LAT)对体外培养Hela细胞生长特性的影响.[方法...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 辛婧 张日华 等 《南京医科大学学报（自然科学版）》 2011年31卷3期 324-327页ISTICPKUCA
【摘要】 目的:构建S100A16基因RNA干扰(RNAi)的真核表达质粒,转染3T3-L1小鼠前体脂肪细胞,初步鉴定其干扰效果.方法:以小鼠S100A16基因为靶基因,以PLKO.1-sP6-GFP质粒为载体,根据GenBank数据库提供的S100...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 张文帅 卞倩 等 《现代预防医学》 2011年38卷16期 3303-3305,3308页ISTICPKUCA
【摘要】 [目的]构建甲型流感病毒H1N1亚型NS1蛋白真核表达载体,并在293T细胞中表达.[方法]采用RT-PCR技术,从甲型流感病毒H1N1毒株提取的病毒总RNA中,扩增NS1全长基因,将其克隆至pMD18-T Vector中构建pMD18-T...
【关键词】 甲型流感病毒H1N1；NS1；真核表达；
- 概要：
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