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【中文期刊】 徐君 张园海 等 《江苏大学学报(医学版)》 2011年21卷3期 224-228页ISTICCA
【摘要】 目的:构建乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)基本核心启动子(base core promoter,BCP)区A1762T/G1764A双突变株的复制质粒.方法:以1.5拷贝HBV野生型全基因组序列质粒(pHBV1.5...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 周亚芹 张洪梅 等 《现代医学》 2009年37卷5期 321-324页ISTIC
【摘要】 目的 采用环状定点诱变技术将重组真核表达质粒pcDNA3.1-hTSHR中hTSHR cDNA序列上发生突变的单碱基诱变回正常的序列.方法 设计1对含预期突变的完全互补的诱变引物,以环状质粒为模板进行PCR扩增,得到带缺口的突变质粒,酶消化...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 邵晓婷 戴玉璇 等 《重庆医学》 2024年53卷8期 1121-1125,1131页MEDLINEISTICCA
【摘要】 目的 构建波形蛋白(vimentin)糖基化突变质粒并研究其对大鼠肾上腺嗜铬细胞(PC12细胞)分化的影响.方法 构建波形蛋白糖基化突变质粒,进行凝胶电泳并测序鉴定;采用空载质粒pcDNA3.1b(对照组)、波形蛋白质粒(Vim组)、波形蛋...
- 概要：
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【中文期刊】 王琴 林春霖 等 《吉林大学学报（医学版）》 2021年47卷3期 551-558页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:预测人肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)基因上的泛素化位点,并构建泛素化位点突变质粒,探讨突变质粒对人结直肠癌HCT116和SW480细胞中核因子κB(NF-κB)和激活蛋白1(AP-1)相对荧光素酶活性的影响.方法:采用UbP...
【关键词】 肿瘤坏死因子受体相关因子6；突变质粒构建；泛素化；
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- 结论：
【中文期刊】 何叶 潘林鑫 等 《安徽医科大学学报》 2019年54卷10期 1526-1531页ISTICPKUCA
【摘要】 目的 构建脊椎骨骺发育不良蛋白(Sedlin)的缺失突变和点突变体质粒,检测其在细胞内的表达、定位及其与RB1蛋白的共定位情况,为后续研究蛋白质相互作用提供依据.方法 以Sedlin全长cDNA序列为模板,扩增目的基因序列,连接至表达载体,...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 赖扬帆 王鹏 等 《口腔疾病防治》 2021年29卷12期 801-808页ISTIC
【摘要】 目的 构建hit基因缺陷型变异链球菌株并验证其细胞周期调控的功能.方法 从变异链球菌株ATCC25175中提取基因组DNA,采用PCR扩增技术,将hit基因上下游片段克隆到pFW5质粒(壮观霉素抗性)上以构建重组质粒;利用该菌株天然遗传转化...
- 概要：
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【中文期刊】 卢岩岩 姚楠 等 《中国组织工程研究》 2018年22卷24期 3831-3836页ISTICPKUCA
【摘要】 背景:自噬可以通过抑制凋亡来缓解膝骨关节炎,miR-140是否可以调节自噬关键基因丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶-失调51样激酶1(uncoordinated 51 like kinase-1,ULK1)基因未见报道.目的:探索miRNA-140对...
- 概要：
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【中文期刊】 苏敬阳 王蓉蓉 等 《中国医科大学学报》 2018年47卷2期 97-101页ISTICPKUCABP
【摘要】 目的 制备钙调蛋白(CaM)突变体CaME141G的融合蛋白质粒,并进行蛋白表达、提取纯化和活性鉴定.方法 利用定点突变技术将野生型CaM的第141个氨基酸E(GAG)突变为G(GGG),再将突变体质粒转化大肠杆菌BL21感受态细胞,大量培...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 朱亮亮 韩卢 等 《安徽医科大学学报》 2016年51卷11期 1595-1599页ISTICPKUCA
【摘要】 目的：根据活化蛋白激酶C受体1( RACK1)的蛋白结构，构建其缺失突变体的真核表达质粒，研究RACK1缺失突变体在真核细胞内的表达及定位改变。方法根据RACK1蛋白的结构域特点，以 pcDNA3．1-RACK1-FLAG 为模板，构建真核...
- 概要：
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【中文期刊】 马旸 韩陈陈 等 《安徽医科大学学报》 2016年51卷10期 1547-1551页ISTICPKUCA
【摘要】 GRK2-S670A突变体导入pIRES-EGFP真核表达载体,为寻找GRK2磷酸化GPCR的位点提供研究基础.利用PCR定点突变试剂盒,获得pGEM-T-GRK2-S670A,用Sal Ⅰ/Apa Ⅰ分别对pGEM-T-GRK2-S670...
【关键词】 pIRES-EGFP-GRK2-S670A突变质粒；重组质粒；细胞转染；
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【中文期刊】 牛卫卫 白华 等 《中国抗生素杂志》 2013年38卷12期 942-946页ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 目的 构建过表达SOS阻遏蛋白编码基因lexA的大肠埃希菌菌株,研究SOS应答对恩诺沙星抗药性突变的影响,并建立SOS应答抑制剂筛选平台.方法 构建lexA重组表达质粒pET-22b(+)-lexA,转化大肠埃希菌BL21(DE3)构建重组...
- 概要：
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【中文期刊】 李立 石小云 等 《中国组织工程研究》 2013年2期 315-319页ISTICPKUCA
【摘要】 背景:细胞周期末期促进复合物调节亚基Cdh1的活性受到磷酸化调节,磷酸化的Cdh1不能与细胞周期末期促进复合物结合,从而抑制细胞周期末期促进复合物的活性.目的:构建突变型Cdh1基因真核表达质粒及鉴定.方法:采用RT-PCR方法,从大鼠海马...
【关键词】 组织构建；组织构建细胞学实验；细胞周期末期促进复合物；
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【中文期刊】 顾卉 佟宇鑫 等 《中国医科大学学报》 2011年40卷11期 961-963,978页ISTICPKUCABP
【摘要】 目的 构建GST-LMO1融合蛋白表达载体,并在原核细胞大肠埃希菌(E.coli)中诱导表达.方法 以人胎脑文库为模板,用PCR方法法扩增出LMO1基因全长及各个截短突变体,通过BamH Ⅰ和EcoR Ⅰ酶切位点分别将其定向插入pGEX-5...
- 概要：
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【中文期刊】 王桂玲 陈薇 等 《中国医科大学学报》 2011年40卷6期 484-486页ISTICPKUCABP
【摘要】 目的 构建GST-C/EBPa融合蛋白表达载体,并在大肠埃希茵(E.coli)中诱导表达.方法 以质粒pcDNA3.1-C/EBPa为模板,用PCR法扩增C/EBPα全长及各个截短片段,通过EcoRI和XhoI酶切位点将C/EBPα全长及各...
【关键词】 CCAAT增强子结合蛋白α；截短突变体；质粒；
- 概要：
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【中文期刊】 王峰 黄鹏 等 《浙江大学学报（医学版）》 2011年40卷2期 156-162页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:制备和纯化重组人NAMPT和NAMPT(H247A)蛋白,并对其体外酶活性进行检测.方法:以pcDNA3.1-hnampt为模板,通过PCR扩增获得两端分别为BamH I和Nde I酶切位点的hnampt片断,将该片断与pET-11a...
【关键词】 磁共振波谱学；大肠杆菌；磷酸转移酶类/遗传学；
- 概要：
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【中文期刊】 黄鹏 孙红颖 等 《浙江大学学报（医学版）》 2011年40卷3期 297-303页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:优化稀有密码子提高重组肠毒素O的表达量.方法:将带His标签的肠毒素O成熟肽克隆至pET28a质粒上,采用PCR方法对15个稀有密码子进行突变,将突变后的重组质粒转化入大肠杆菌BL21(DE3),并进行蛋白表达及活性鉴定.结果:通过稀...
【关键词】 葡萄球菌,金黄色/免疫学；肠毒素类/免疫学；密码子；
- 概要：
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【中文期刊】 陈刚 糜祖煌 等 《中华医院感染学杂志》 2011年21卷21期 4426-4430页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 了解1株多药耐药肺炎克雷伯菌的遗传学背景.方法 采用聚合酶链反应(PCR)的方法分析1株多药耐药肺炎克雷伯菌可能存在的65种耐药相关基因:包括β-内酰胺类、氨基糖苷类、喹诺酮类耐药相关基因及可移动的遗传元件(整合子、转座子、接合性质粒...
【关键词】 多药耐药肺炎克雷伯菌；耐药相关基因；整合子；
- 概要：
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【中文期刊】 涂婉 赵虎 《复旦学报(医学版)》 2010年37卷2期 189-193页ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 目的 研究质粒传播和ampD基因突变两种机制对阴沟肠杆菌AmpC β-内酰胺酶由诱导型转变为组成型的影响作用和比率.方法 收集医院感染患者标本,将诱导型阴沟肠杆菌和其转变后的组成型阴沟肠杆菌分为一组.对每组细菌的质粒ampC基因和染色质am...
【关键词】 AmpC β-内酰胺酶；组成型；质粒传播；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 曹莹 王卫国 等 《南方医科大学学报》 2009年29卷4期 652-655页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 对人端粒酶RNA进行多位点的突变并构建该突变体的酵母三杂交诱饵质粒,且进行毒性检测.方法 根据人端粒酶RNA(hTR)序列及突,变位点设计引物,运用重叠延伸PCR法埘hTR基因的第41位、第80位及第102位碱基进行T→A突变,将突变...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 童忠春 倪龙兴 等 《华西口腔医学杂志》 2009年27卷4期 386-389页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 敲除变异链球菌中的luxS基因,构建luxS突变株,测试变异链球菌失去luxS基因后形成牙菌斑生物膜的能力.方法 把luxS基因敲除重组质粒转入变异链球菌UA159中,得到转化菌,在含有卡拉霉素的培养基中进行筛选,得到变异链球菌lux...
【关键词】 pMD-19TUKD质粒；变异链球菌UA159；luxS突变株；
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 戴大鹏 周晓阳 等 《中华老年心脑血管病杂志》 2009年11卷3期 194-197页ISTICPKUCA
【摘要】 目的 构建肌细胞增强因子2A(MEF2A)/绿色荧光蛋白(GFP)融合表达载体,检测其在Hela和293T细胞中的表达,探讨MEF2A第11号外显子CAG三联核苷酸重复序列的改变与其细胞学定位功能的相关性.方法 用PCR法扩增野生型MEF2...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 佟宇鑫 李丹妮 等 《中国医科大学学报》 2009年38卷10期 721-723,729页ISTICPKUCABP
【摘要】 目的 构建GST/HIF-1α融合蛋白表达载体,并在大肠埃希菌(E.coli)中诱导表达.方法 以质粒pcDNA3.1-HIF-1α为模板,用PCR法扩增HIF-1α全长及各个截短片段,通过BamHI和Not I酶切位点将HIF-1α全长及...
- 概要：
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【中文期刊】 李劲 宋波 等 《第三军医大学学报》 2008年30卷11期 1021-1024页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 研究TCR在顺铂导致的细胞内DNA损伤和突变过程中的分子机制,并为进一步研究转录偶联修复与突变发生的分子机制提供重要分子生物学依据.方法 首先将SupF突变报告基因克隆到带有双向真核启动子的含有Tet调控元件TRE的表达载体pBI-L...
【关键词】 Tet-on控制系统；质粒；转录；
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 白晋丽 瞿宇晋 等 《解放军医学杂志》 2008年33卷5期 527-530页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 构建Y154H、R157I、Y206C、G247R、D282G、G346R、S349A、A389G、R400K 9个PAH基因突变型重组质粒,为下一步研究这些PAH突变体在哺乳动物细胞中表达蛋白功能奠定基础.方法 [1]选择错义突变位...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 乔凤 陈泽良 等 《中国生物工程杂志》 2007年27卷12期 1-5页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 突变株的构建是细菌基因功能研究的前提.构建了一个可用于布鲁氏菌突变株构建的自杀质粒.在pUC19质粒的多克隆位点插入卡那霉素抗性基因,在该基因两侧添加多个酶切位点,构建成为pUC19K.利用该质粒,构建了布鲁氏菌外膜蛋白Omp25基因的突变...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 孙静慧 张慧 等 《第二军医大学学报》 2005年26卷8期 892-895页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建人La蛋白(human La protein,hLa)突变体表达质粒,并在大肠杆菌中表达野生型La蛋白及各突变体.方法:利用定点突变技术,对野生型人La蛋白的原核表达质粒pET28b-hLa进行定向缺失突变,将得到的3个突变体Mu...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 吴倩倩 张清华 等 《第一军医大学学报》 2005年25卷8期 1016-1019页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的了解大肠癌细胞株(SW480,LoVo,HT29)线粒体DNA的突变,克隆突变的大肠癌线粒体DNA(mtDNA)基因,构建pcDNA3.I(+)-mtDNA真核表达重组体,并导入NIH3T3细胞,以探讨线粒体基因突变与肿瘤发生的关系.方...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 刘春 周集体 等 《微生物学通报》 2003年30卷1期 1-4页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 假单胞菌XN-1对有机污染物硝基苯具有降解性,并且对氨苄青霉素具有抗性.检测和提取了假单胞菌XN-1细胞内的质粒,得到了一个约22kb大小的质粒pXN-1.质粒消除实验证实这个质粒与硝基苯降解性有关,而与抗生素抗性无关.XN-1和其自发突变...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 陈孙孝 温海 等 《第二军医大学学报》 2001年22卷11期 1009-1011页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建白念珠菌钙调蛋白基因(CMD1)单点突变重组质粒,为进一步探讨CMD1突变对真菌生长周期及致病性的影响奠定基础.方法:采用PCR定点突变法,将CMD1 编码 C端3个苯丙氨酸(F89、F92和F141)的碱基分别定点突变成编码丙氨...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 卢洋 黎怀星 等 《第二军医大学学报》 1999年20卷8期 509-512页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建一个用于比较研究哺乳动物细胞内表达基因和沉默基因的不同突变机制的质粒载体.方法和结果:设计并构建一种具两个lacⅠ突变靶基因的突变研究载体:pMCLacⅠ/Neo质粒.在该质粒中,一个lacⅠ靶基因受CMV启动子的驱动而使其在人和...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 李素云 刘慧晴 等 《解剖学杂志》 2019年42卷5期 453-457页ISTICCA
【摘要】 目的 :构建STGC3基因单碱基位点突变载体并观察CNE2细胞中STGC3蛋白表达情况,为探讨STGC3基因发挥抑瘤作用的功能性位点提供前期基础.方法 :针对STGC3基因糖基化、蛋白激酶C磷酸化、酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化3个(656C、725C...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 李振玲 王帝 等 《解剖学杂志》 2019年42卷3期 249-252页ISTICCA
【摘要】 目的:构建细胞分裂周期蛋白(Cdc42)的结构域突变质粒,即鸟嘌呤核苷酸交换因子(GEF)结构域突变质粒.方法:根据NCBI中小鼠Cdc42全长cDNA序列找到结构域GEF,将GEF的氨基酸突变成丙氨酸,根据突变后的序列设计引物,PCR扩增...
【关键词】 细胞分裂周期蛋白；鸟嘌呤核苷酸交换因子；结构域；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 姚运红 袁炜 等 《黑龙江医学》 2020年44卷4期 472-474页
【摘要】 目的 构建并鉴定野生型PIRES2-EGFP-eIF4E3(eIF4E3)、突变体PIRES2-EGFP-eIF4E3 C69a(eIF4E3C69a)、突变体PIRES2-EGFP-eIF4E3 w86a(eIF4E3 w86a)真核过表...
【关键词】 真核翻译起始因子4E；野生型；突变体；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 罗家明 朱红 等 《山东医药》 2018年58卷34期 22-25页ISTICCA
【摘要】 目的 为研究基质金属蛋白酶2(MMP2)基因的功能,构建MMP2基因野生型与G1207A突变型质粒.方法 采用聚合酶链式反应(PCR)及定点突变技术扩增MMP2野生型基因、携带突变位点G1207A的MMP2基因,分别克隆入pUC57质粒中,...
【关键词】 基质金属蛋白酶2基因；基因突变；质粒构建；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 李育萌 《微生物学免疫学进展》 2017年45卷3期 71-74页ISTICCA
【摘要】 衣原体(chlamydia)是人类重要的致病菌之一,不同衣原体感染会引起多种人类疾病.因此,衣原体研究正逐步受到广泛的关注.依据近年来国内外衣原体的研究进展,概述了荧光下等位基因交换突变(fluorescence-reported alle...
【关键词】 衣原体；荧光下等位基因交换突变；空斑试验；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 魏军 时慧森 等 《军事医学》 2017年41卷12期 947-951页ISTICCSCDCA
【摘要】 目的 探讨3-磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1(PDK1)发生多聚泛素化修饰的机制.方法 免疫共沉淀(CO-IP)和免疫印迹(WB)分析PDK1的多聚泛素化修饰,MEF细胞内印证泛素连接酶Smad泛素化修饰调节因子1 (Smurf1)增强PDK1多...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 羊嬉春 王芃 等 《军事医学》 2017年41卷12期 962-967页ISTICCSCDCA
【摘要】 目的 在包含腺病毒全基因组40 kb的大质粒上快速实现单碱基突变.方法 通过重叠PCR方法扩增出含有突变位点的打靶DNA,将腺病毒大质粒和打靶DNA共同转化入Red高重组率大肠杆菌中,通过菌落PCR联合酶切鉴定的方法,筛选到携带突变位点大质...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 陆凡倩 陈晓红 等 《中国耳鼻咽喉头颈外科》 2016年23卷5期 250-252页ISTICCSCD
【摘要】 目的：构建中国大陆甲状腺髓样癌RET基因常见突变位点的质粒并验证其表达。方法分析中国大陆甲状腺髓样癌家系RET基因，进行RET基因外显子高通量“二代”测序分析。体外构建RET基因相应位点突变并研究在NIH3T3细胞中的表达水平。结果通过对野...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 原素梅 徐超 等 《微生物学免疫学进展》 2016年44卷3期 19-22页ISTICCA
【摘要】 目的：构建pcDNA3.1-EV71-2A的突变质粒(EV71-2Amut),并对其功能进行检测,为进一步研究肠道病毒71型(Enterovirus type 71,EV71)2A蛋白酶的活性位点及其生物学功能奠定实验基础。方法利用聚合酶链...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 王帝 李振玲 等 《科学技术与工程》 2019年19卷26期 118-123页
【摘要】 为构建c-Jun氨基末端激酶3(c-Jun N-terminal kinase3,JNK3)的pVP16-eGFP-Myc-JNK3活化环(activation-loop,A-loop)结构域突变型重组质粒,通过A-loop突变型JNK3的...
【关键词】 c-Jun氨基末端激酶3；活化环；真核表达质粒；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
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