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            【中文期刊】 王卓文  刘艳丽  《中国科技论文在线精品论文》 2024年17卷1期 79-90页

            【摘要】 目的:研究获得N端/C端融合组蛋白H3K4M小肽的EML3 融合蛋白的方法.方法:将组蛋白H3(aa 1~15)小肽编码区融合进表达EML3 Agenet结构域重组质粒中,得到N端/C端融合表达H3K4M的质粒,转化至大肠杆菌BL21(DE...

            【关键词】 微生物药物学组蛋白H3K4M小肽EML3 Agenet结构域

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            【中文期刊】 王明燚  朱燕  《诊断学理论与实践》 2021年20卷6期 557-561页ISTIC

            【摘要】 目的:分别构建人透明带蛋白(zona pellucida,ZP)基因ZP1、ZP2、ZP3、ZP4与荧光蛋白基因的融合蛋白表达载体,并在中国仓鼠卵巢(Chinese hamster ovary,CHO)细胞和卵母细胞中表达这些荧光标记的重组...

            【关键词】 透明带基因荧光标记融合蛋白表达质粒

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            【中文期刊】 耿洁  刘涛  等 《天津医药》 2020年48卷8期 711-714页MEDLINEISTICCA

            【摘要】 目的 构建含可诱导共刺激分子(ICOS)融合蛋白(ICOSIg)基因的真核表达载体,探讨其能否在大鼠脂肪间充质干细胞(ADSCs)中表达.方法 克隆编码大鼠ICOS的胞外片段,将其与编码人免疫球蛋白IgG Fc段的基因融合,构建ICOSIg...

            【关键词】 间充质基质细胞受体,Fc基因融合

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            【中文期刊】 孙海涛  杨化强  等 《南方医科大学学报》 2012年32卷2期 185-188页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 构建含人Tau多表位肽段基因的原核表达载体,在大肠杆菌中诱导表达并纯化目的蛋白,检测Tau多表位DNA疫苗免疫小鼠后特异性抗体产生情况.方法 以质粒pVAX1-Tau为模板,用PCR扩增人Tau多表位肽段基因,插入表达载体pGEX-4...

            【关键词】 Tau质粒原核表达

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            【中文期刊】 刘中禄  陶翠兰  等 《中国比较医学杂志》 2012年22卷7期 13-16页ISTICPKUCA

            【摘要】 目的 构建表达重组胸腺素α1(Tα1)的pMAL- C2x - Tα1/TBI工程菌.方法 将人工合成的Tα1序列进行PCR扩增,将扩增的片段和pMAL- C2x质粒载体分别经BamHI和EcoR I双酶切后,用T4 DNA快速连接酶连接构...

            【关键词】 重组胸腺素α1基因克隆质粒pMAL-C2x

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            【中文期刊】 张卓娜  陶妍  《生物技术通报》 2012年9期 166-172页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 以斑点叉尾鮰(Ictalurus punctatus)NK-lysin-type1的成熟肽为研究目标,首先通过RT-PCR和巢式PCR从斑点叉尾鲴的鳃中克隆到编码NK-lysin成熟肽的基因,该基因编码由92个氨基酸残基组成的成熟肽;6个高...

            【关键词】 斑点叉尾鮰抗菌肽NK-lysin cDNA克隆

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            【中文期刊】 陈文昭  黄路  等 《重庆医科大学学报》 2010年35卷5期 645-648页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:构建尤文肉瘤EWS-FLI1基因原核表达质粒.方法:从人尤文肉瘤A673细胞中提取总RNA,以RT-PCR法扩增EWS-FLI1基因序列,目的基因两侧引入Sac Ⅰ和HindⅢ酶切位点,克隆至pMD18-T载体中,转化大肠杆菌JM10...

            【关键词】 EWS-FLI1融合基因尤文肉瘤原核表达质粒

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            【中文期刊】 王孝会  王桂玲  《中国医科大学学报》 2010年39卷12期 987-988,994页ISTICPKUCABP

            【摘要】 目的 构建GST/RIPX融合蛋白基因表达载体,并在大肠埃希菌(E.coli)中诱导表达.方法 以质粒pcDNA3.1.RIPX为模板,通过BamH1和Xho1酶切位点将RIPX定向插入pGEX-4T-2中,构建原核表达质粒pGEX-4T-...

            【关键词】 质粒原核表达融合蛋白

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            【中文期刊】 陈静  孙红颖  等 《浙江大学学报(医学版)》 2008年37卷2期 126-133页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:在毕赤酵母中高效分泌表达人血清白蛋白与PTH(1-34)融合蛋白.方法:利用PCR技术获得HSA和PTH(1-34)基因,以柔性连接肽相连插入到表达载体pPIC9,重组质粒线性化后,用化学法转化毕赤酵母GS115,经组氨酸缺陷型培养板...

            【关键词】 毕赤酵母甲状旁腺激素肽(1-34)血清白蛋白

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            【中文期刊】 梅明珠  严亚贤  等 《微生物学通报》 2007年34卷3期 475-478页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 以大肠杆菌O157 DNA为模板扩增VT2-B亚单位,纯化后经EcoRⅠ和Xho Ⅰ酶切,连入表达载体pGEX4T-2,构建重组表达质粒pGEX4T-2-VT2-B.转化到大肠杆菌BL21中,经IPTG诱导,实现了VT2-B-GST融合蛋白...

            【关键词】 大肠杆菌O157Vero毒素重组质粒

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            【中文期刊】 钮利喜  石亚伟  等 《中国抗生素杂志》 2004年29卷1期 11-14页ISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 将菌株 SS-ori的 N-氨甲酰- D-氨基酸酰胺水解酶基因( Dcase)插入到 pMAL- c2X载体中,构建表达产物为麦芽糖结合蛋白( MBP)与 Dcase融合的重组子.该重组子在 E.coli BL21中的表达产物为融合蛋白 M...

            【关键词】 pMAL- c2X质粒N-氨甲酰- D-氨基酸酰胺水解酶麦芽糖结合蛋白

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            【中文期刊】 陈全  朱道银  等 《中国人兽共患病杂志》 2004年20卷2期 105-108页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的构建能表达结核分枝杆菌早期分泌蛋白CFP10-ESAT6融合蛋白的重组卡介苗(recombinant BCG,rBCG).方法以pQE30-CFP10-ESAT6质粒为模板,通过PCR扩增633bp lhp-esat6基因,将该基因定向...

            【关键词】 结核分枝杆菌CFP10-ESAT6融合蛋白穿梭表达质粒

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            【中文期刊】 胡金川  饶贤才  等 《解放军医学杂志》 2004年29卷2期 113-115页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的构建人肽抗生素hPAB-β重组质粒,并在大肠杆菌中进行表达,为大量制备hPAB-β奠定基础.方法通过PCR将hPAB-β融合蛋白的CNBr裂解位点改为羟胺裂解,将修改的目标片段克隆到pFAST-HTa质粒中,挑取阳性重组子,酶切出目标片...

            【关键词】 抗生素类,肽hPAB-β融合表达

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            【中文期刊】 苏晨  史祥  等 《军事医学》 2018年42卷1期 34-37页ISTICCSCDCA

            【摘要】 目的 构建YTH结构域m6A结合蛋白2(YTHDF2)重组表达载体,获得具有结合m6A修饰RNA活性的YTHDF2重组蛋白.方法 以 mRNA 为模板采用 RT-PCR 方法扩增 YTHDF2基因编码区序列,构建 pET-28a-YTHDF...

            【关键词】 质粒重组融合蛋白质类RNA

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            【中文期刊】 朱晓霞  张露萍  等 《成都医学院学报》 2018年13卷1期 27-31页ISTICCA

            【摘要】 目的 构建pET-CTR-PS重组原核表达质粒,原核表达Cholix Toxin的毒性部位和P物质的融合蛋白,为探讨该融合蛋白对肿瘤细胞的靶向杀伤作用奠定基础.方法 用PCR方法扩增Cholix Toxin的催化活性部分CTR,扩增后连入T...

            【关键词】 原核表达融合蛋白大肠杆菌

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            【中文期刊】 朱翔  路文明  等 《实用肝脏病杂志》 2015年1期 20-23页ISTICCA

            【摘要】 目的:构建截短序列和全序列HBcAg基因和HBc-HBsAg融合基因原核表达质粒,研究目的蛋白在大肠杆菌中的表达及其免疫原性。方法利用HBV全基因(adr亚型)质粒pUCmT-HBV分别扩增HBsAg截短基因、HBcAg截短基因和HBcAg...

            【关键词】 乙型肝炎病毒HBsAgHBcAg

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            【中文期刊】 高星杰  何津岩  等 《天津医药》 2014年7期 625-629页MEDLINEISTICCA

            【摘要】 目的:针对人SND1基因2个蛋白翻译起始密码子AUG构建真核表达质粒pCMV-N-Flag-SND1-No1/2,并分析2个AUG在SND1应激颗粒形成中的作用。方法以SND1全长转录本为模板,PCR法扩增含BamHⅠ和EcoRⅠ酶切位点的...

            【关键词】 重组融合蛋白质类应激质粒

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            【中文期刊】 王桂玲  王孝会  等 《解剖科学进展》 2011年17卷4期 375-377页ISTICCA

            【摘要】 目的 构建GST/RUNX3融合蛋白表达载体,并在大肠埃希菌(E.coli)中诱导表达.方法 利用Kpn1和Xho1位点酶切pcDNA3.1-RUNX3质粒,将获得的1300bp RUNX3编码序列插入到pGEX-4T-2中,构建pGEX-...

            【关键词】 pGEX-4T-2-RUNX3质粒原核表达融合蛋白

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            【中文期刊】 刘宁  石英  等 《胃肠病学和肝病学杂志》 2011年20卷1期 41-43页ISTICCA

            【摘要】 目的 构建TAT-HBx-EGFP质粒,转化大肠埃希菌BL21,进行蛋白的表达、鉴定及纯化.方法 PCR扩增目的 基因HBx,进行EcolR1单酶切,与经EcolR1单酶切的TAT-EGFP质粒进行连接,转化大肠埃希菌BL21,利用IPTG...

            【关键词】 TAT-HBx-EGFP质粒构建融合蛋白

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            【中文期刊】 朱梦瑜  高星杰  等 《天津医药》 2011年39卷11期 990-992页MEDLINEISTICCA

            【摘要】 目的:将人类G3BP(Ras-GTPase activating protein SH3 domain binding protein)蛋白Domain (1~5)基因片段分别定向连入pEGFP-C2质粒,使G3BP蛋白各功能片段与绿色荧光...

            【关键词】 绿色荧光蛋白质类质粒基因表达

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            【中文期刊】 席少静  何军  等 《中国现代医学杂志》 2011年21卷19期 2210-2214页ISTIC

            【摘要】 目的 构建与增强型绿色荧光蛋白(GFP)融合的重组真核表达载体,并转染大鼠血管平滑肌细胞(A7r5),观察其在A7r5中的表达.方法 采用Trizol法快速提取A7r5的总RNA,经RT-PCR获得线粒体融合蛋白2(mfn2)的cDNA...

            【关键词】 线粒体融合蛋白2pEGFP-N1重组真核表达质粒

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            【中文期刊】 王桂玲  王孝会  等 《解剖科学进展》 2011年17卷3期 284-286页ISTICCA

            【摘要】 目的 构建GST/RUNX3融合蛋白表达载体,并在大肠埃希菌(E.coil)中诱导表达.方法 以质粒pcDNA3.1-RUNX3为模板,通过Kpn1和Xho1酶切位点将RUNX3定向插入pGEX-4T-2中,构建原核表达质粒pGEX-4T-...

            【关键词】 质粒原核表达融合蛋白

            浏览:183 被引:0 下载:4
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            【中文期刊】 钱宝鑫  高星杰  等 《天津医药》 2011年39卷10期 881-883页MEDLINEISTICCA

            【摘要】 研究人类Tudor-SN蛋白TSN结构域4个亚片段的功能,构建重组质粒pEGFP-C2-Tudor-SN-TSN (I-Ⅳ).方法:以重组质粒pSG5-Tudor-SN-flag为模板,聚合酶链反应(PCR)扩增出目的基因,将双酶切后带有粘...

            【关键词】 DNA结合蛋白质类质粒基因表达

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            【中文期刊】 张尤历  曹亮  等 《山东医药》 2011年51卷40期 73-76页ISTICCA

            【摘要】 目的 构建大鼠髓样细胞表达激发受体-1(TREM-1)/人lgG融合蛋白的真核表达载体,并在家蚕Bm细胞中实现稳定表达.方法 克隆大鼠TREM-1胞外段与人1gGFe段,片段连接后PCR扩增,再与病毒穿梭载体BAC1连接,基因克降,构建重组...

            【关键词】 髓样细胞表达激发受体-1重组质粒杆状病毒

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            【中文期刊】 席少静  何军  等 《中国实验诊断学》 2010年14卷11期 1689-1692页ISTIC

            【摘要】 目的 利用基因工程技术克隆线粒体融合蛋白2(mitofusin-2,mfn2)基因并构建一种无细胞毒性、不激活原癌基因的真核表达的pEGFPmfn2质粒载体.方法 采用高效Trizol试剂快速提取大鼠血管平滑肌细胞株A7r5总RNA,经RT...

            【关键词】 基因克隆线粒体融合蛋白2基因真核表达质粒载体

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            【中文期刊】 彭明丽  韩春光  等 《军事医学科学院院刊》 2010年34卷1期 8-11页ISTICCSCDCA

            【摘要】 目的 获得人孤儿G蛋白偶联受体(oGPCR)与G蛋白α亚基(Gi1α)的融合基因及其表达蛋白.方法 采用RT-PCR法,从人HepG2细胞扩增oGPCR成员GPR45,GPR85,GPR174和Gi1α的完整表达序列,运用重叠延伸PCR法扩...

            【关键词】 孤儿G蛋白偶联受体G蛋白α亚基融合蛋白

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            【中文期刊】 王义军  吴文韬  等 《激光生物学报》 2010年19卷1期 10-13,24页ISTICCA

            【摘要】 人的SLP-2基因是一个新的肿瘤相关基因,它在多个癌组织里高表达,如食管鳞状细胞癌组织和肺癌组织.其中在乳腺癌组织的高表达和病人的存活率负相关,这说明该基因很可能在乳腺癌的发生中发挥重要作用.为了研究SLP-2基因在肿瘤里的功能,将人类SL...

            【关键词】 SLP-2重组质粒融合蛋白表达

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            【中文期刊】 张尧  何百成  等 《检验医学与临床》 2009年6卷16期 1313-1314,1316页ISTICCA

            【摘要】 基因987 bp和P35基因762 bp,合成hPLAP-1 C末端信号肽序列117 bp,并将GPI信号肽序列与P40基因成功拼接,成功构建了真核表达载体pBudCE4.1/IL-12A/IL-12B-GPI(命名为pBIG),经酶切及测...

            【关键词】 白细胞介素12糖基磷脂酰肌醇类蛋白分选信号

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            【中文期刊】 左凤琼  李婉宜  等 《西部医学》 2009年21卷6期 888-891页ISTIC

            【摘要】 目的 构建人乳头瘤病毒16L1-E5的原核表达质粒,并进行表达融合蛋白,为下一步探讨该蛋白是否能作为疫苗的研究作准备.方法 以本室已构建好的阳性质粒pET32(+)/HPV16 E5为模板,PCR获得E5基因,经SalⅠ和NotⅠ双酶切插入...

            【关键词】 人乳头瘤病毒16原核表达质粒融合蛋白

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            【中文期刊】 杨富强  陈光明  等 《中国现代医学杂志》 2008年18卷7期 838-842,846页ISTIC

            【摘要】 目的 评价IL-2/IFN-y融合蛋白基因质粒(pFP)增强HBVDNA疫苗(pS2.S)免疫原性的佐剂作用.方法 构建IL-2/IFN-y融合蛋白和H.BV包膜中蛋白(PreS2+S)编码基因的重组真核表达质粒,根据pFP编码的目的基因序...

            【关键词】 DNA疫苗乙型肝炎病毒(HBV)白细胞介素-2(IL-2)/γ-干扰素(IFN-γ)融合蛋白表达质粒(pFP)

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            【中文期刊】 杨富强  陈光明  等 《热带医学杂志》 2008年8卷5期 408-411,435页ISTICCA

            【摘要】 目的 评价融合蛋白基因质粒(pFP)联合在体电脉冲(EP)介导的HBV DNA疫苗(pS2.S)免疫HBV转基因(Tg)小鼠的治疗效果.方法 HBV Tg小鼠随机分成3组,每组5只,分别为pS2.S+pFP、pS2.S+PcDNA3.1免疫...

            【关键词】 DNA疫苗乙型肝炎病毒白细胞介素-2/γ-干扰素融合蛋白基因表达质粒

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            【中文期刊】 顾涛  罗福康  等 《重庆医学》 2006年35卷4期 335-338页MEDLINEISTICCA

            【摘要】 目的克隆人趋化因子MIP-3 alpha基因,表达并初步纯化MIP-3 alpha融合蛋白.方法从人扁桃体中提取总RNA,再进行RT-PCR,扩增MIP-3 alpha成熟蛋白基因,并在5'和3'端分别添加NcoI和EcoRI酶切位点,通过...

            【关键词】 MIP-3 alpha融合表达pET32a(+)质粒

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            【中文期刊】 杨登科  靳风烁  等 《免疫学杂志》 2006年22卷3期 350-351页ISTICCSCDCA

            【摘要】 <篇首> 卡介苗(BCG)膀胱灌注是治疗表浅型膀胱肿瘤及预防其复发最有效的方法之一,BCG联合IL-2治疗膀胱肿瘤具有更好的临床疗效[1].无论是BCG还是IL-2在临床治疗膀胱癌均存在着剂量大、疗程长、毒副作用大等缺点.Ag85B是BCG在体...

            【关键词】 Ag85BIL-2质粒

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            【中文期刊】 谢云青  郑天荣  等 《福建医科大学学报》 2006年40卷2期 111-113页ISTIC

            【摘要】 目的构建原核表达质粒pPROEXTMHTb-GM-CSF/IL-15并在大肠杆菌DH5α中表达,以期获得具有GM-CSF/IL-15双重活性的融合蛋白.方法利用分子生物工程技术,构建重组原核表达载体pPROEXTMHTb-GM-15,并转化...

            【关键词】 GM-CSF白细胞介素15重组融合蛋白质类

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            【中文期刊】 杨振泉  刘巧泉  等 《生物技术通讯》 2004年15卷2期 128-130页ISTICCA

            【摘要】 利用转基因植物作为生物反应器可以表达重组蛋白、生产外源蛋白质,也可以成为动物疫苗的廉价生产系统.以编码新城疫病毒融合蛋白(NDV-F)的基因为外源基因,以玉米泛素蛋白(Ubi)启动子为启动子,以潮霉素磷酸转移酶(HPT)基因作为选择标记基因...

            【关键词】 新城疫病毒融合蛋白基因转基因水稻

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            【中文期刊】 陈义忠  章涛  等 《福建医科大学学报》 2003年37卷2期 133-136页ISTIC

            【摘要】 目的克隆弓形虫ZS株表面抗原P22编码基因,构建原核重组表达质粒pThioHisA,B,C/P22,并在大肠杆菌(Top10)中进行表达及纯化融合蛋白.方法PCR扩增及限制性内切酶Pst Ⅰ和Bgl Ⅱ双酶切496 bp的弓形虫表面抗原P2...

            【关键词】 弓形虫,鼠克隆,分子基因表达

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            【中文期刊】 朱元祺  姜岩  等 《青岛大学医学院学报》 2003年39卷4期 421-423页ISTICCA

            【摘要】 ①目的构建HIV-1 SF2株env基因C1与C3区嵌合片段的克隆并在大肠杆菌中表达.②方法用DNAstar软件辅助设计引物,以含有HIV-1 SF2株前病毒基因组的9B1R6质粒为模板,PCR法分别扩增出env基因C1和C3段;两个片段经...

            【关键词】 HIV-1env基因基因表达

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            【中文期刊】 张富春  钱东  等 《生物技术》 2002年12卷4期 11-13页ISTICCA

            【摘要】 鼠透明带3(mZP3)作为精子的初级受体,是鼠透明带中的一种主要糖蛋白,抗鼠透明带3抗体能够阻断精卵的结合,达到不育的效果,因此mZP3是免疫避孕研究的重要候选抗原.从小鼠卵巢中提取总RNA,分离mRNA,反转录获得cDNA,将cDNA连接...

            【关键词】 mZP3cDNA质粒GST-mZP3

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            【中文期刊】 李雷  王宏伟  等 《广东微量元素科学》 2002年9卷8期 23-27页ISTICCA

            【摘要】 为获得人MBL蛋白,并对其功能进行初步研究,用DNA重组法构建了组氨酸标签融合原核表达质粒pET28(b)-MBL.将重组质粒转入大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG在37℃条件下诱导培养,利用SDS-PAGE、Western-blot检...

            【关键词】 人MBL质粒构建大肠杆菌表达

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            【中文期刊】 王弘  郑文岭  等 《广东医学》 2002年23卷12期 1239-1240页ISTICCA

            【摘要】 目的构建以绿色荧光蛋白(GFP)为报告基因的酿酒酵母表达载体.方法利用通用载体质粒融合系统(UPS),首先将GFP片断连入donor载体,随后在Cre酶作用下与acceptor载体融合,获得了带有GFP片断的酿酒酵母(saccharomyc...

            【关键词】 绿色荧光蛋白酵母表达载体通用载体质粒融合系统

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