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            【中文期刊】 何志惠  刘思汝  等 《中国热带医学》 2020年20卷5期 473-476页ISTICPKUCA

            【摘要】 目的 构建小鼠细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4Fc融合基因(CTLA4-Fc)的真核表达质粒,并检测其在293T细胞中的表达,为后续在小鼠体内研究CTLA4-Fc抗肿瘤作用机制奠定基础.方法 Gene Runner软件设计并合成互为搭桥、互为模...

            【关键词】 细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4Fc融合蛋白真核表达质粒

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            【中文期刊】 黄用豪  和永壮  等 《中国热带医学》 2017年17卷4期 340-343页ISTICPKUCA

            【摘要】 目的 构建小鼠成纤维细胞生长因子受体1/巨噬细胞炎性蛋白3a-Fc融合基因(FGFR1/MIP3a-Fc)的真核表达质粒,并在293T细胞中的表达.方法 设计合成FGFR1/MIP3a融合基因引物,用PCR方法扩增获得FGFR1/MIP3a...

            【关键词】 成纤维细胞生长因子受体1巨噬细胞炎性蛋白3aFc融合蛋白

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            【中文期刊】 刘彤  李洋  等 《吉林大学学报(医学版)》 2013年39卷3期 437-440页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:构建人p21活化激酶6(PAK6)的各个截短区域原核表达质粒,并诱导和鉴定其融合蛋白的表达,为探讨PAK6基因的生物学功能提供依据.方法:以真核表达质粒pcDNA3.1-GFP-PAK6为模板,PCR扩增出PAK6基因的各个截短片段....

            【关键词】 P21活化激酶截短区域原核表达质粒

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            【中文期刊】 王晓东  林镯  等 《中华传染病杂志》 2009年27卷6期 326-329页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 构建大鼠肝细胞生长因子(rHGF)与大鼠肝再生增强因子(rALR)融合基因的真核表达质粒并进行鉴定,为新的肝纤维化治疗方法奠定实验基础.方法 分别以重组质粒pUC18-rHGF和pUC18-rALR为模板,进行PCR扩增,获得rHGF...

            【关键词】 肝细胞生长因子肝再生基因融合

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            【中文期刊】 张红宇  李晓恒  等 《中国热带医学》 2009年9卷5期 787-789,840页ISTICPKUCA

            【摘要】 目的 构建分泌表达融合蛋白CFP10-ESAT6的重组卡介苗.方法 采用基因拼接(Gene SOEing)法,体外扩增结核杆菌CFP10-ESAT6融合基因,插入大肠杆菌-分枝杆菌穿梭表达质粒pBCG3000,构建重组穿梭表达质粒pBCG3...

            【关键词】 融合蛋白CFP10ESAT6

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            【中文期刊】 卿玉玲  赵嘉将  等 《中华肝脏病杂志》 2004年12卷4期 201-204页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的研究乙型肝炎表面抗原(HBsAg)和粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)的融合表达质粒免疫乙型肝炎病毒(HBV)转基因小鼠及其病毒清除作用.方法将小鼠随机分为8组,分别注射以下质粒:A组pcDNA3.1-S 100μg;B组:pc...

            【关键词】 肝炎病毒,乙型粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子DNA疫苗

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            【中文期刊】 卿玉玲  凌宁  等 《中华肝脏病杂志》 2003年11卷8期 474-476页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的观察乙型肝炎表面抗原(HBsAg)与粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)融合表达质粒诱导特异性免疫应答的效果. 方法以HBsAg与GM-CSF融合表达质粒DNA免疫BALB/C小鼠,用酶链免疫吸附方法检测质粒诱导BALB/C小鼠产...

            【关键词】 肝炎病毒,乙型DNA疫苗融合表达质粒

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            【中文期刊】 梁增伟  兰英华  等 《中华肝脏病杂志》 2002年10卷4期 248-252页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的探讨HBsAg与结核杆菌热休克蛋白70(Mt.HSP70)融合表达质粒在真核细胞中的表达.方法用真核表达质粒pCI-neo作为载体构建HBsAg及其与Mt HSP70的融合表达质粒(pCI-S,pCI-S-HSP70);用脂质体介导的转...

            【关键词】 乙型肝炎表面抗原热休克蛋白70,结核杆菌融合质粒

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            【中文期刊】 张青苗  王雯雯  等 《新乡医学院学报》 2016年33卷12期 1028-1030,1035页ISTICCA

            【摘要】 目的 研究分枝杆菌热休克蛋白65(HSP65)重组质粒的构建与原核表达.方法 HSP65的开放阅读框经聚合酶链反应(PCR)扩增后,经Nco Ⅰ与Not Ⅰ内切酶依次酶切,连接至酶切后的原核表达载体PET-28a中,然后将重组质粒转入大肠杆...

            【关键词】 热休克蛋白重组质粒融合蛋白

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            【中文期刊】 袁凤媚  郭欣泳  等 《药物生物技术》 2014年21卷4期 321-324页ISTICCA

            【摘要】 瞬时基因表达(TGE)是一种省去筛选高表达细胞株步骤,快速获得重组蛋白质的技术.昆虫细胞作为一种广泛使用的蛋白表达系统,在国内外关于它的瞬时基因表达的研究比较少.这篇文章进行了以昆虫SF9细胞在悬浮培养条件下进行瞬时表达eGFP和肿瘤坏死因...

            【关键词】 SF9昆虫细胞瞬时基因表达质粒DNA

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            【中文期刊】 席少静  何军  等 《中国现代医学杂志》 2011年21卷19期 2210-2214页ISTIC

            【摘要】 目的 构建与增强型绿色荧光蛋白(GFP)融合的重组真核表达载体,并转染大鼠血管平滑肌细胞(A7r5),观察其在A7r5中的表达.方法 采用Trizol法快速提取A7r5的总RNA,经RT-PCR获得线粒体融合蛋白2(mfn2)的cDNA...

            【关键词】 线粒体融合蛋白2pEGFP-N1重组真核表达质粒

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            【中文期刊】 罗金  杨菁  等 《中华实验外科杂志》 2011年28卷7期 1169-1171页ISTICCA

            【摘要】 目的 构建小鼠附睾富含半胱氨酸分泌蛋白-1(Crisp-1)基因的原核表达载体并在大肠杆菌中的表达.方法 从小鼠附睾组织中提取总RNA,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增实验所需的Crisp-1基因片段,将目的 基因克隆至原核表达载体...

            【关键词】 半胱氨酸分泌蛋白-1原核表达质粒

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            【中文期刊】 杜琴  蔡嘉镜  等 《国际医药卫生导报》 2017年23卷13期 1998-2001,2025页

            【摘要】 目的 构建PML-RAR o[融合基因相关重组表达质粒,在大肠埃希菌中表达可溶性蛋白并进行纯化.方法 利用聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)以PML-RAR α全长质粒为模板分别扩增出长度均为1 20...

            【关键词】 PML-RARα融合基因重组质粒蛋白表达

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            【学位论文】 作者:崔智慧 导师:洪斌   李元   石莲英   中国协和医科大学   药学 微生物与生化药学(博士) 2009年

            【摘要】 力达霉素(lidamycin,LDM),原名C-1027,是一种新型的烯二炔类抗肿瘤抗生素,由球孢链霉菌C-1027(Streptomyces globisporus C-1027)产生.其抗肿瘤活性比临床常用的阿霉素强10,000倍,已经...

            【关键词】 融合蛋白表达发色团

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            【中文期刊】 林美璇  周小满  等 《生物技术通报》 2020年36卷1期 81-87页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 旨在研究大肠杆菌产磷脂酰肌醇特异性磷脂酶C(PI-PLC)的发酵表达和分离纯化,探究PI-PLC酶切GPI锚定蛋白的效果.依据NCBI数据库中蜡样芽孢杆菌的PI-PLC的基因序列,按照大肠杆菌的密码子偏好性进行密码子优化,合成相应基因序列并...

            【关键词】 磷脂酰肌醇特异性磷脂酶C蜡样芽孢杆菌密码子优化

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            【中文期刊】 王阿香  李铁鹏  等 《中国肿瘤生物治疗杂志》 2019年26卷4期 389-395页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:探讨anti-PD-1 (scFv) /IL-15/IL-15Rα-sushi (简称PD-S15) 融合蛋白体外特异性结合PD-1的能力及其对NK/T细胞增殖能力的影响.方法:化学合成人anti-PD-1 (scFv) 基因和人IL...

            【关键词】 程序性死亡受体1白细胞介素-15/白细胞介素-15受体PD-S15融合蛋白

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            【中文期刊】 周玉真  刘思静  等 《四川大学学报(医学版)》 2019年50卷4期 506-511页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 评价结核分枝杆菌基因Rv2660c、Rv2460c、Rv3875和Rv3804c的细胞表位融合蛋白的免疫原性,为研制新型多阶段结核疫苗提供可靠的靶抗原.方法 将Rv2660c、Rv2460c、Rv3875和Rv3804c基因中的细胞表...

            【关键词】 结核分枝杆菌多阶段Rv2660c

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            【中文期刊】 徐玉梅  曹士德  等 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 2019年37卷3期 364-367页MEDLINEISTICPKUCSCD

            【摘要】 PCR扩增日本血吸虫28 000谷胱甘肽-S-转移酶(Sj28GST)的主要抗原表位与霍乱毒素B亚基(CTB)的融合基因,CTB-Sj28GST经SalⅠ和SphⅠ双酶切后定向克隆至转移质粒pFastBac,构建重组转移质粒pFastBac...

            【关键词】 日本血吸虫谷胱甘肽-S-转移酶霍乱毒素B亚基

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            【中文期刊】 钟李婷  陈秀珍  等 《生物技术通报》 2019年35卷12期 10-15页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 对广藿香的法尼基焦磷酸酶(PatFPPS)进行重组蛋白的原核表达,并筛选与之互相作用的蛋白.利用PCR扩增PatFPPS编码区并连接到pGEX-6P-1表达载体,测序验证后将质粒转化BL21(DE3)表达菌株,并用IPTG诱导表达蛋白,最终...

            【关键词】 广藿香蛋白表达广藿香醇

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            【中文期刊】 刘进兰  杨雪  等 《生物技术通报》 2019年35卷2期 109-115页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 利用毕赤酵母菌株表达家蝇抗菌肽domesticin基因并检测其抑菌活性.克隆家蝇domesticin基因与pPIC9k质粒相连,构建重组表达载体pPIC9K-domesticin,将其电击转化入毕赤酵母KM71中.甲醇诱导后利用Tricin...

            【关键词】 家蝇抗菌肽毕赤酵母

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            【中文期刊】 朴君  许春玲  等 《昆虫学报》 2019年62卷7期 823-829页ISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 [目的]前期发现水稻条纹病毒(rice stripe virus,RSV)可与介体灰飞虱Laodelphax striatellus 体内的HiPV病毒(Himetobi P virus,HiPV)互作.本研究旨在制备HiPV外壳蛋白VP1...

            【关键词】 灰飞虱HiPV病毒VP1基因

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            【中文期刊】 马润亭  郭树奇  等 《微生物学通报》 2019年46卷2期 252-260页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 [背景]绿针假单胞菌(Pseudomonas chlororaphis) GP72是一株可生产吩嗪类抗生素吩嗪-1-羧酸(PCA)和2-羟基吩嗪(2-OH-PHZ)的生防根际促生菌.基因组比对发现GP72菌中存在aurI/aurR 双元调控...

            【关键词】 绿针假单胞菌GP72aurI/aurR双元调控系统吩嗪类化合物

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            【中文期刊】 赵东岳  王德民  等 《微生物学报》 2019年59卷2期 386-394页ISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 [目的]Rv3194c基因编码的是结核分枝杆菌的PDZ信号蛋白,本研究探讨该蛋白的亚细胞定位,为其细胞结合蛋白的筛选奠定基础.[方法]从H37Rv基因组中扩增出编码只含有PDZ结构域的tRv3194c (Rv3194c 1-234 aa)的...

            【关键词】 结核分枝杆菌Rv3194c蛋白线粒体

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            【中文期刊】 马占兵  党洁  等 《中国生物工程杂志》 2019年39卷5期 88-95页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:构建能够用于稳定动态监测细胞自噬流变化和过表达基因的红色荧光蛋白-绿色荧光蛋白-鼠源LC3融合慢病毒多功能表达载体(PCDH-Duo-mRFP-eGFPph-LC3rat,PCDH-Duo),并构建小鼠腹腔巨噬细胞Raw264.7稳转...

            【关键词】 自噬流载体构建慢病毒

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            【中文期刊】 刘赫  叶伟  等 《细胞与分子免疫学杂志》 2019年35卷2期 97-102页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 构建带有亲和素标签的汉滩病毒(HTNV)核衣壳蛋白(NP)表达质粒,转染HEK293T细胞并表达后,鉴定与其相互作用的宿主蛋白.方法 合成亲和素标签基因(SF)与HTNV NP基因,先后克隆入哺乳动物真核表达载体pCAGGS,构建带有...

            【关键词】 汉滩病毒核衣壳蛋白亲和纯化

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            【中文期刊】 汪珍  王大涛  等 《兽类学报》 2019年39卷2期 182-190页MEDLINEISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 半乳糖凝集素-1(Galectin-1)是最先被报道的哺乳动物半乳糖凝集素,存在于多种组织和细胞内,参与细胞的粘附、增殖、凋亡和炎症反应等多种生理病理过程,并且与免疫系统的调节和肿瘤的发生发展密切相关.鹿茸是哺乳动物中罕见的能够周期性的脱落...

            【关键词】 梅花鹿鹿茸半乳糖凝集素-1

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            【中文期刊】 余果宇  向阳  等 《动物学研究》 2011年32卷4期 379-385页SCIMEDLINEISTICCSCDBP

            【摘要】 大蹼铃蟾三叶因子Bm-TFF2具有较人TFF2更强的促细胞迁移和抗凋亡活性.该研究利用RT-PCR方法扩增得到野生型Bm-TFF2的基因,然后分别构建N端、C端和分子中两个精氨酸突变的突变体,最后连接表达载体产生pET32a(+)/Bm-T...

            【关键词】 Bm-TFF2突变体表达

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            【中文期刊】 彭静  王琼  等 《生物工程学报》 2018年34卷4期 569-577页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 本研究旨在人绒毛膜促性腺激素 (hCG) 的结合多肽的基础上应用嫁接抗体技术制备抗hCG单域抗体,简化单域抗体制备过程,提高多肽生化稳定性.利用单域抗体通用骨架 (cAbBCII10),以 hCG 结合多肽取代互补决定区CDR1或CDR3,...

            【关键词】 hCG单域抗体嫁接抗体

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            【中文期刊】 周湧超  徐志刚  等 《细胞与分子免疫学杂志》 2018年34卷5期 462-468页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 制备肠道病毒71型(EV71)衣壳蛋白VP1特异性小鼠单克隆抗体(mAb)并检测其特异性.方法 合成编码EV71-VP1的基因并克隆入原核表达质粒pET21a;采用重组表达的VP1免疫BALB/c小鼠,将小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤SP2/...

            【关键词】 肠道病毒71型(EV71)衣壳蛋白VP1单克隆抗体(mAb)

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            【中文期刊】 张玲  王男  等 《中国生物工程杂志》 2018年38卷12期 21-31页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 为了促进亮氨酸脱氢酶在Bacillus subtilis中高效表达,采取在质粒pMA5自带的启动子PHpaⅡ之后分别添加诱导型和组成型启动子,考察双启动子对酶表达的影响.选取2种诱导型启动子(Pgrac、Pgl-M1)和4种组成型启动子(P...

            【关键词】 亮氨酸脱氢酶枯草芽孢杆菌启动子

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            【中文期刊】 林煊  陈鹤丹  等 《细胞与分子免疫学杂志》 2018年34卷10期 896-901页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 体外转录获得小鼠黏蛋白1(MUC1) mRNA并在NIH/3T3细胞中表达.方法 通过反转录PCR从小鼠4T1细胞中扩增MUC1基因,然后插入真核表达载体pcDNA3.1(+)中构建重组表达载体pcDNA3.1(+)-MUC1.双酶切...

            【关键词】 黏蛋白1 (MUC1)体外转录蛋白表达

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            【中文期刊】 谢自新  姜洁  等 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 2018年36卷3期 266-271页MEDLINEISTICPKUCSCD

            【摘要】 目的 构建弓形虫复合抗原ROP2-SAG1免疫优势表位(RSepitope)与人乳头瘤病毒16型晚期结构蛋白L1 (HPV16L1)的融合体(RSepitope-HPV16L1),验证其在真核细胞中的表达. 方法 优化RSepitope基因...

            【关键词】 弓形虫优势表位人乳头瘤病毒16型晚期结构蛋白

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            【中文期刊】 邓瑞雪  蒙学莲  等 《微生物学报》 2018年58卷8期 1475-1482页ISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 [目的]研究小反刍兽疫病毒囊膜糖蛋白(血凝素蛋白和融合蛋白)在病毒囊膜和宿主细胞膜融合过程中所发挥的作用.[方法]制备构建成功的小反刍兽疫病毒囊膜糖蛋白和病毒受体SLAM、Nectin4 的真核表达质粒pCMV-HA-H、pCAGGS-Fl...

            【关键词】 血凝素蛋白融合蛋白受体

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            【中文期刊】 尹中波  霍云龙  等 《中华肿瘤防治杂志》 2018年25卷14期 985-989页ISTICPKUCA

            【摘要】 目的 染色质重塑因子SNF5在肝细胞肝癌中的生物学功能仍有待深入研究,本研究检测SNF5在HepG2和Hep3B肝癌细胞系中的表达及亚细胞定位,并构建Flag-SNF5真核表达质粒.方法 提取HepG2和Hep3B两种肝癌细胞系的总蛋白,蛋...

            【关键词】 肝细胞癌重组质粒蛋白质印迹法

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            【中文期刊】 唐健雪  肖永乐  等 《中国生物工程杂志》 2018年38卷6期 9-16页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:在毕赤酵母SMD1168中表达融合抗茵肽,并检测其体外抑菌活性.方法:本实验从实验室先前构建的重组质粒pVAX1-RHKJT中克隆出已构建好的融合抗茵肽RHKJT基因片段,将RHKJT基因片段插入至pGAPZaA真核表达质粒中,通过P...

            【关键词】 融合抗菌肽基因表达毕赤酵母

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            【中文期刊】 钟传青  王静  等 《微生物学通报》 2018年45卷4期 780-787页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 [背景]积磷小月菌(Microlunatus phosphovorus)是重要的聚磷微生物,在好氧条件下积累聚磷酸盐并在厌氧条件分解聚磷酸盐,这个过程可能受到精细的基因调控.[目的]利用凝胶迁移实验(EMSA)分析调控蛋白Mlp21700结...

            【关键词】 积磷小月菌多聚磷酸盐调控蛋白

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            【中文期刊】 顾源  寻子琦  等 《生物技术通报》 2018年34卷10期 172-181页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 挖掘新颖的类膨胀素基因,丰富类膨胀素基因资源,探究其功能,加深我们对类膨胀素及其作用机制的认识,促进其工业应用.通过RT-PCR的方法从嗜热真菌Talaromyces leycettanus JCM12802中克隆得到了一个1 196 bp...

            【关键词】 类膨胀素Talaromyces leycettanus JCM12802基因克隆

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            【中文期刊】 邵婕  潘娇  等 《生物工程学报》 2018年34卷10期 1668-1678页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 为建立一种简便、快速且能大量获得富含二硫键的蜘蛛多肽毒素JZTX-26 (35 aa)和JZTX-51 (27 aa)的有效方法,利用PCR的方法克隆成熟肽编码基因并插入至大肠杆菌Escherichia coli表达载体pMAL-p2x中与...

            【关键词】 蜘蛛毒素原核表达融合蛋白

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            【中文期刊】 翟晓鑫  高花  等 《生物技术通报》 2018年34卷12期 132-139页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 为构建荷包猪SLA-2-HB01真核细胞表达载体,观察其在PK15细胞中的表达情况.首先参考SLA-2-HB01基因编码区序列设计了引物对,以SLA-2-HB01-pMD 18-T为模板PCR扩增获得SLA-2-HB01编码区基因片段,经T...

            【关键词】 荷包猪PK15细胞SLA-2

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            【中文期刊】 纪晓奇  李青连  等 《微生物学通报》 2018年45卷9期 2006-2013页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 [背景]L-异亮氨酸(L-isoleucine,L-Ile)和L-别异亮氨酸(L-allo-isoleucine,L-allo-Ile)是自然界中广泛存在的一对同分异构体.抗感染抗生素Desotamides结构中含L-别异亮氨酸结构单元,其...

            【关键词】 氨基转移酶异构酶融合蛋白

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