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【中文期刊】 郭中敏 徐康 等 《生物化学与生物物理进展》 2004年31卷9期 784-790页SCIISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 Cre/lox P系统由Cre位点特异重组酶和可被Cre特异性识别的lox P位点构成,该系统广泛用于条件性基因敲除和表达,以研究基因功能.为了表达和纯化一种细胞可透过性Cre重组酶(即His6-NLS-Cre-MTS);经IPTG诱导,在...
【关键词】 Cre/lox P系统,细胞可透过性Cre重组酶,表达,纯化,生物活性检测,细胞和非细胞的重组系统；Cre/lox P system；cell-permeable Cre recombinase；
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【中文期刊】 张怡 周庆峰 等 《生物技术通报》 2011年6期 155-159页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 为了制备GST-Exendin-4融合蛋白,以本实验室构建好的pET22b-Exendin-4为模板,通过PCR扩增出Exendin-4基因,酶切克隆入pGEX-4T-1,构建重组表达质粒pGEX-4T-1-Exendin-4.经DNA测序...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 蔡华伟 万琳 等 《生物医学工程学杂志》 2007年24卷3期 620-625页MEDLINEISTICPKUCA
【摘要】 细胞色素C在电子传递、缺氧应激和细胞凋亡的过程中起重要作用.通过人源细胞色素C和酵母细胞色素C亚铁血红素裂解酶共表达,从大肠杆菌中获得了可溶性的重组人源细胞色素C蛋白.细菌经过超声破碎后,获得的上清经350 g/L硫酸铵沉淀去除杂蛋白,再经...
- 概要：
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【中文期刊】 邓虎平 庄然 等 《细胞与分子免疫学杂志》 2007年23卷4期 356-358,362页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:表达和纯化CD112 胞膜外区重组蛋白, 制备针对CD112胞膜外区的单克隆抗体(mAb), 并且研究CD112的分布.方法:采用基因重组技术在真核系统表达CD112-Fc融合蛋白, 亲和层析法进行蛋白纯化;纯化的CD112-Fc融合...
【关键词】 CD112(Nectin2、PRR2)；蛋白表达和纯化；mAb；
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【中文期刊】 杨小昂 钱晓萍 等 《中国免疫学杂志》 2006年22卷1期 29-32页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:对HCA518蛋白进行表达和纯化,并制备HCA518蛋白的单克隆抗体.方法:采用基因重组技术在原核系统表达HCA518蛋白,金属镍螯合的Ni-NAT亲和层析柱进行蛋白纯化;杂交瘤技术建立分泌HCA518单克隆抗体的杂交瘤细胞株;ELI...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 徐万祥 何亚萍 等 《生物工程学报》 2004年20卷1期 49-53页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 作为开发新型实用性人绒毛膜促性腺激素(hCG)疫苗的一种尝试, 我们已构建若干组合靶抗原三个线性B- 细胞表位和外源强T- 细胞表位的基因工程hCG嵌合肽.为了检测用这些嵌合肽免疫的动物血清中是否能产生抗各表位的三种抗体,本研究选用能在大肠...
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【中文期刊】 蓝兴国 杨佳 等 《生物技术通讯》 2010年21卷2期 210-212页ISTICCA
【摘要】 目的:分离羽衣甘蓝S13-b位点受体激酶(SRK13-b)基因并进行序列及结构域分析,构建SRK13-b结构域的原核表达载体并进行重组蛋白质的原核表达和纯化.方法:提取羽衣甘蓝S13-bS13-b自交不亲和系花期柱头的RNA,用RTPCR法...
【关键词】 羽衣甘蓝；自交不亲和；S13-b位点受体激酶；
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【中文期刊】 田利源 胡亚欧 等 《生物技术通讯》 2010年21卷3期 328-331页ISTICCA
【摘要】 目的:在原核细胞中表达小鼠β-防御素30(DEFB30),并对表达产物进行鉴定和纯化.方法:用RT-PCR方法扩增小鼠Defb30的cDNA序列,将2个拷贝的cDNA序列串联连入原核表达载体pET28(a),构建重组表达载体pET28(a)...
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【中文期刊】 魏旭冉 杨军 等 《医学分子生物学杂志》 2010年7卷2期 93-98页ISTICCA
【摘要】 目的 确定人血红素加氧酶-1(human heme oxygenase-1,hHO-1)在大肠埃希菌中的表达条件与纯化方法,利用纯化的蛋白制备具有中和活性的hHO-1多克隆抗体.方法 将hHO-1原核表达质粒pMW172/hHO-1转入大肠...
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【中文期刊】 冯智慧 焦淑贤 等 《医学分子生物学杂志》 2008年5卷4期 296-298页ISTICCA
【摘要】 目的 构建人第10号染色体上磷酸酶和张力蛋白同源缺失的基因(phosphatase and tensin homolo-gy deleted on chromosome ten.PTEN)原核表达质粒,使其在原核细胞中高效表达并进行纯化.方...
【关键词】 磷酸酶和张力蛋白同源缺失的基因；原核表达；融合蛋白；
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【中文期刊】 王俊芳 王星 等 《新疆医科大学学报》 2007年30卷4期 346-348页ISTICCA
【摘要】 目的:筛选和优化泡球蚴Em18重组蛋白在大肠杆菌中表达和纯化的方法,为进一步筛选Em18抗原表位奠定基础.方法:原核表达pET41a-Em18重组质粒,经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导、表达,获得rEm18-GST蛋白,采用不...
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【中文期刊】 朱艳冰 杨丰 《厦门大学学报（自然科学版）》 2005年44卷5期 697-700页
【摘要】 从对虾白斑综合症病毒基因组的预测开放阅读框中选取3个编码类锌指蛋白的基因wsv063、wsv069和wsv477,将它们克隆到pET-GST表达载体,以E.coli BL21(DE3)为宿主菌,成功表达了GST融合的目的蛋白.表达的GST-...
【关键词】 对虾白斑综合症病毒；wsv063、wsv069和wsv477基因；类锌指蛋白；
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【中文期刊】 金巧 甘志凯 等 《生物技术通报》 2018年34卷8期 175-180页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 该研究旨为克隆、表达和纯化出人源DLL4蛋白,并制备出相对应的多克隆抗体.采用搭桥PCR,构建带有tPA信号肽的DLL4基因,并克隆到pGZX表达载体上,经过酶切和测序鉴定后,瞬时转染到HEK293F细胞中,转染48 h后对发酵上清液进行镍...
- 概要：
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【中文期刊】 闫清华 杨理 等 《昆虫学报》 2010年53卷11期 1207-1212页ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 为表达和纯化黄粉甲Tenebrio molitor抗冻蛋白,采用RT-PCR方法扩增得到黄粉甲抗冻蛋白基因afp84acDNA,将其连接到pMAL-p2X质粒上,构建分泌型融合表达载体pMAL-p2X-afp84a,并在大肠杆菌Escher...
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【中文期刊】 刘肖飞 梁卫红 《中国生物工程杂志》 2010年30卷1期 56-61页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 OsRacD是水稻小GTP结合蛋白Rho家族成员,其功能之一是作为"分子开关",通过控制花粉管的延伸生长,参与光敏核不育水稻光周期的育性转换.在序列同源性比对和蛋白保守结构域分析的基础上,采用重叠延伸PCR方法在水稻OsRacD基因的第一个...
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【中文期刊】 徐安健 蒋单懿 等 《中国生物工程杂志》 2010年30卷7期 7-11页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:表达和纯化人组氨酸磷酸酶PHP14蛋白,并寻找与其存在体外相互作用的蛋白.方法:PCR扩增PHP14的全长cDNA,并将其克隆至pGEX4T原核表达载体,构建重组表达质粒.用重组表达质粒转化大肠杆菌BL21菌株,经IPTG诱导后,使用...
- 概要：
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【中文期刊】 郭芬 李实骞 等 《中国生物工程杂志》 2009年29卷12期 18-23页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:表达和纯化两种小鼠RHOX5蛋白的截短型突变体,确定完整的RHOX5蛋白及其两种截短型突变体与MDFIC蛋白结合的能力.方法:生物信息学分析小鼠同源异型框蛋白RHOX5的cDNA序列,分别对RHOX5的两种截短型片段RHOX5 N和R...
- 概要：
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【中文期刊】 曹旭 林东海 《药物生物技术》 2010年17卷2期 95-99页ISTICCA
【摘要】 大鼠Lipocalin13(rLcn13)是最近发现的一个大鼠附睾特异分泌的lipocalin家族蛋白,与男性生殖密切相关.该工作分析了rLcn13的染色体定位和基因特征,用同源模建方法获得了rLcn13蛋白的三级结构,并构建了rLcn13...
【关键词】 Lipocalin13蛋白；原核表达和纯化；配体结合特性；
- 概要：
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【中文期刊】 孙晶莹 李研 等 《陕西医学杂志》 2023年52卷1期 3-6,22页ISTICCA
【摘要】 目的:制备链霉亲和素(SA)连接的人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(hGM-CSF)融合蛋白(SA-hGM-CSF),并对其生物学活性进行鉴定.方法:在NCBI数据库中查找SA和hGM-CSF序列,将序列合成后连接入Pet28表达载体中,构建S...
【关键词】 人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子；链霉亲和素；融合蛋白；
- 概要：
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【中文期刊】 丁睿 谢会芳 等 《武汉轻工大学学报》 2022年41卷1期 16-24页
【摘要】 从海洋微生物中挖掘酶基因资源是获取新型工业酶的重要途径.从海洋微生物基因组资源库中发掘到一个来源于海洋微生物Cellulophaga algicola DSM 14237的木聚糖酶基因(Xyn14237).通过氨基酸序列比对和三维结构模拟分...
- 概要：
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【中文期刊】 邵继平 符健 《中国免疫学杂志》 2019年35卷5期 579-583页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建HIV-1ⅢB标准株、中国大陆地区主要流行株CRF-BC和海南省流行株CRF-AE野生型和突变型gp41表达载体,获得gp41重组蛋白.方法:利用基因定点突变的方法,将HIV-1ⅢB、CRF-BC和CRF-AE流行株野生型gp41...
- 概要：
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【中文期刊】 石松 薛殿婷 等 《贵州医科大学学报》 2021年46卷10期 1145-1150页ISTIC
【摘要】 目的 探讨人丝裂原激活蛋白激酶3(MAPK3)基因原核表达载体的构建及鉴定.方法 取对数生长期正常人肝细胞系HL-7702细胞,采用TRIzol法抽提细胞总RNA,以此为模板用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)反转录扩增MAPK3基因的蛋...
【关键词】 丝裂原激活蛋白激酶类；丝裂原激活蛋白激酶3；基因克隆；
- 概要：
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【中文期刊】 崔克乐 李静 等 《安徽医科大学学报》 2018年53卷1期 40-45页ISTICPKUCA
【摘要】 目的 构建结核分枝杆菌外排泵蛋白MmpL6(Rv1557)表达载体,在大肠杆菌E. coli中诱导MmpL6蛋白高表达并进行纯化.方法 以结核分枝杆菌H37Rv菌株基因组DNA为模板,采用聚合酶链反应扩增目的基因片段,构建pET21b-Mm...
- 概要：
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【中文期刊】 刘日强 刘天华 等 《中国癌症杂志》 2016年26卷7期 581-588页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 背景与目的：p90核糖体S6蛋白激酶4基因(ribosomal S6 kinase 4 gene，RSK4)作为抑癌基因，能够抑制细胞增殖、迁移并诱导细胞的凋亡，但与其配合发挥相应功能的相互作用蛋白尚不明确。该研究利用Flag标签纯化技术和...
- 概要：
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【中文期刊】 蔡炯 郑堃 等 《中国医学科学院学报》 2013年35卷3期 281-285页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 通过基因重组表达制备一种氨基端带有HEHEHE序列,羧基端带有GGGC序列的ZHER2∶V2亲和体,为无创的人类表皮生长因子受体2 (HER2)显像创造条件.方法 采用基因设计软件,将HER2亲和体编码基因的密码子进行优化,使之适合于...
【关键词】 人类表皮生长因子受体2；亲和体；表达；
- 概要：
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【中文期刊】 安瑞 魏少华 等 《西北植物学报》 2009年29卷12期 2378-2384页ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 将拟南芥Antiquitin基因重组到原核表达载体pMAL-c4x和pET41中,在T7 Express菌株中诱导表达,经Amylose和Ni-NTA亲和层析柱纯化获得重组蛋白.SDS-PAGE结果表明:MBP和His-tag融合的拟南芥A...
【关键词】 拟南芥；Antiquitin；重组表达；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 黄敏 徐辉 等 《应用与环境生物学报》 2009年15卷3期 371-375页ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 将大肠杆菌植酸酶appA摹因重组于表达载体pET32a中,导人大肠杆菌Origami(DE3)构建工程菌Origami(DE3)-pET32aappA.对表达的appA重组植酸酶经Ni柱亲和纯化、SDS-PAGE分析表明,纯化后条带单一,酶...
- 概要：
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【中文期刊】 许松梅 郑立恒 等 《四川大学学报（医学版）》 2007年38卷3期 370-373页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 研究CTLA-4/Ig融合蛋白在CHO真核表达系统中的表达,并纯化所表达的CTLA-4/Ig融合蛋白,为其功能研究和临床应用奠定基础.方法 将线性化的pMM-CTLA-4-IgG4/WG和pMMGR转染CHO/DG44细胞,对阳性克隆...
【关键词】 CTLA-4/Ig融合蛋白；pMMGR；转染；
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 李环 陈悦 等 《生物工程学报》 2007年23卷3期 487-492页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 报道重组N-乙酰鸟氨酸脱乙酰基酶(NAOase)的研究进展.重组NAOase由大肠杆菌argE基因编码,在重组菌BL21(DE3)-pET22b-argE中的表达量为32.5%,大多以无活性的包涵体存在.低温诱导可增大有活性的可溶表达部分的...
【关键词】 重组N-乙酰鸟氨酸脱乙酰基酶；表达定位；亲和纯化；
- 概要：
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【中文期刊】 彭瀚 张昕 等 《中国医学科学院学报》 2007年29卷6期 772-776页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 在大肠杆菌中表达HZF1融合蛋白,制备抗HZF1抗体.方法构建包含编码HZF1非锌指区DNA的重组表达质粒pET30a-HZF1,转化大肠杆菌并用异丙基-a-D-硫代半乳糖苷诱导表达相应的融合蛋白,采用镍柱纯化.以纯化蛋白作为免疫抗原...
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- 方法：
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【中文期刊】 徐海滨 张晓霞 等 《卫生研究》 2007年36卷1期 45-48页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 以Cry1Ie基因表达蛋白为模式蛋白,建立外源基因表达蛋白的技术平台.方法 利用大肠杆菌系统高效表达Cry1Ie蛋白,并采用SDS-PAGE技术分离纯化,通过生物学活性和免疫反应性2项指标检测了大肠杆菌表达蛋白与转基因玉米中蛋白的等同...
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【中文期刊】 郑文云 马兴元 等 《生物工程学报》 2006年22卷2期 285-292页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 从人乳腺癌细胞系B-Cap-37中克隆出Survivin的cDNA,并对其中编码34位Thr的密码子定点突变为Ala的密码子后,经一系列基因操作方法将天然HIV-TAT转导肽的突变体基因HIV-TATm引入Survivin(T34A)基因的...
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【中文期刊】 Liu Xian-jun 刘方欣 等 《中国临床康复》 2005年9卷7期 162-164页ISTICPKUCA
【摘要】 背景:瘦素是脂肪组织产生的一种激素,具有广泛的生理作用,也是近年能量代谢研究的热点之一,所用瘦素主要是大肠杆菌的表达产物,后者以不溶解的包含体形式存在,需要通过烦琐的复性过程才能获得具有生物学活性的人瘦素.目的:为获得天然溶解形式的人瘦素,...
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【中文期刊】 孙嗣梅 王利春 等 《中国生物工程杂志》 2005年25卷4期 47-51页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 用PCR方法从克隆质粒pUC19-RTA中扩增出蓖麻毒素A(RTA)链基因,序列分析正确后,亚克隆到原核表达质粒pET-His中,构建重组表达质粒pET-HisRTA,再转化到E.coli BL21(DE3)plysS中获得表达工程菌株BL...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 赖燕来 孙朝晖 等 《中国生物化学与分子生物学报》 2004年20卷5期 578-582页MEDLINEISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 核受体相关因子1(nuclear receptor-related factor 1,Nurr1)是主要表达于中脑黑质及腹侧被盖区多巴胺能神经元的一种转录因子,属于核受体超家族成员,其功能性配体尚未被确认.研究表明,Nurr1对中脑多巴胺神...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 雷旭宇 杨青 等 《中国生物工程杂志》 2004年24卷9期 44-48页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 将编码大连蛇岛蝮蛇类凝血酶(Gloshedobin)的基因克隆于表达载体pET-32a(+)中,以融合蛋白形式在大肠杆菌中获得表达.在25℃下经1mmol/L IPTG诱导6h,SDS-PAGE和蛋白质印迹分析表明,部分融合蛋白以可溶形式存...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 房青 张明程 等 《细胞与分子免疫学杂志》 2004年20卷1期 91-94页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:以原核表达的人硒蛋白P片段(HSelP)制备其兔多克隆抗体并进行鉴定.方法:在E.coli中诱导表达HSelP片段, 经DEAE fast flow和Ni-NTA-Agarose柱层析纯化后, 以其为免疫原制备兔抗HSelP抗体, 并...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 吴斌文 段招军 等 《生物工程学报》 2004年20卷3期 461-464页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 用高表达菌株BL-21codon plus compentent cells表达重组人角质化细胞生长因子(hKGF-2)蛋白并初步纯化和检测其活性.通过RT-PCR从流产胎儿肺组织中钓取hKGF-2cDNA,将其克隆入pBV220载体质粒....
【关键词】 人角质化细胞生长因子-2；克隆和表达；纯化；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 杨静 诸欣平 等 《中国人兽共患病杂志》 2003年19卷3期 25-27,40页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的为进一步研究和应用旋毛虫Ts87基因,本文原核表达了PET-28a(+)/Ts87重组质粒,并纯化鉴定了该蛋白.方法将Ts87基因片段克隆入原核表达载体PET-28a(+),形成重组质粒PET-28a(+)/Ts87,转化后经IPTG诱...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 张添元 罗进贤 等 《生物工程学报》 2002年18卷5期 593-596页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 纤溶酶原K1-3功能区是近年发现的血管生成抑制因子,具有抑制肿瘤生长和转移的活性.以人血管生成抑制素cDNA为模板用PCR技术扩增了K1-3功能区的基因,DNA序列分析后克隆至质粒pPIC9K上获得重组质粒pPIC9K13,转化毕节酵母GS...
- 概要：
- 方法：
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