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【中文期刊】 张欢 方瑞 等 《生物技术通报》 2012年5期 93-98页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 采用RT-PCR方法从BALB/c胚鼠成纤维细胞克隆FAPα基因,将其连接至表达栽体pTd-FL-N,转化Stbl3感受态.筛选重组质粒,经酶切、PCR检测及测序鉴定,证实表达质粒构建正确.将表达载体转染HEK293细胞,经G418筛选单克...
【关键词】 FAPα；pTd-FL-N表达栽体；G418筛选；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 尹建洪 罗立新 等 《生物技术通报》 2012年5期 105-109页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 根据南极假丝酵母脂肪酶B (CALB)的基因序列将CALB基因进行TA克隆、酶切鉴定及测序后,亚克隆至大肠杆菌-乳酸乳球菌穿梭表达栽体pMG36e-Nisl中,构建重组表达栽体pMG36e-Nisl-CALB.设计特异性引物P3和P4,对重...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 赵虹 杨子超 等 《浙江大学学报（医学版）》 2011年40卷6期 622-629页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:针对小鼠烟酰胺单核苷酸腺苷酰转移酶1( NMNAT1)基因构建质粒并进行慢病毒包装,同时检测其表达水平和干扰效率,为进一步探讨该基因的功能提供研究工具和实验基础.方法:根据NMNAT1基因信息,用慢病毒载体pLenti6构建三种重组质...
- 概要：
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【中文期刊】 张益谋 邱海霞 等 《生物技术通报》 2010年12期 201-205页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 旨在克隆SPA基因并将该基因的IgG结合区亚克隆至毕赤酵母表达栽体中.以金黄色葡萄球菌CowanI菌株基因组为模板,对葡萄球菌A蛋白(SPA)基因全长序列进行PCR扩增,再将PCR产物克隆入pMD18-T质粒,将DNA测序所得的结果用Bla...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 柴晓杰 靳非 等 《生物技术通报》 2009年1期 80-82页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 应用聚合酶链式反应技术(PCR)扩增了轮状病毒VP7基因,并将其克隆到pMD18-Tvectr载体上,对重组子进行PCR检测和限制性内切酶分析,并测定了DNA全序列.结果表明,克隆片段全长为981 bp.将轮状病毒VP7基因定向的克隆到植物...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 杜洪伟 陈芬 等 《生物技术通报》 2008年4期 99-103页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 用PCR方法从拟南芥和荠菜中分别克隆了DREB1A基因.序列分析发现从拟南芥中克隆的AtDREB1A基因与已发表的AtDREB1A基因序列(DQ372533)的同源性为99.69%.首次从荠茱中克隆的CbDREB1A基因序列(EF15674...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 刘林林 孙宝胜 等 《中国肿瘤临床》 2008年35卷8期 459-462页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建带有小鼠分泌型内皮抑素(ssEndostatin)的原核表达载体pNZ44-ssEndostatin并在双歧杆菌中表达Endostatin蛋白.方法:利用引物设计软件oligo 6.0设计引物,从pcDNA3.1-Egr1-ssE...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 隋少飞 陈松林 《生物技术通报》 2004年3期 1-4页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 巴氏毕赤酵母表达系统具有真核生物表达的特点.本文综述了巴氏毕赤酵母菌及其表达载体的特点以及外源基因在该系统中表达存在的一些问题.
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 王华 周鹏 等 《西北植物学报》 2002年22卷2期 250-256页ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 几丁质酶(Chitinase,Chi.)、β-1,3-葡聚糖酶(β-1,3-Glucanase,Glu.)和萝卜抗真菌蛋白(Rs-AFP2)是植物体内正常的表达产物,它们对防御植物的真菌病害具有重要的作用.基于它们在功能上具有协同作用,本研...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 李天洙 张学武 《时珍国医国药》 2007年18卷12期 2994-2995页PKUCSCDCA
【摘要】 目的 探讨Troglitazone对小鼠Ⅱ型葡萄糖载体(mGLUT2)和Ⅰ型葡萄糖载体(mGuJT1)mRNA表达的影响.方法 采用分子克隆技术,将过氧化物酶体增殖物受体γ(PPART)和维甲酸类受体χ(RXRα)及mGLUT2和mGLUT...
【关键词】 Troglitazone；小鼠Ⅰ型葡萄糖栽体；Ⅱ型葡萄糖载体；
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【中文期刊】 汪勇 《生物学通报》 2015年50卷7期 39-41页ISTICCA
【摘要】 利用学校微生物和分子生物学实验室的相关仪器设备,开设“转基因技术体验和实践”校本选修课,带领高二学生构建原核表达载体pEASY-Blunt E1-EGFP,并在E.coli BL21 (DE3)中高效表达,建立相关课程的初步方案.利用有限的...
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【中文期刊】 石蓓 宋付凯 等 《遵义医学院学报》 2010年33卷4期 330-332页ISTIC
【摘要】 目的 构建携带人受体活性修饰蛋白-1(RAMP1)基因的腺病毒表达载体,为进一步深入研究RAMP1的功能奠定基础.方法 通过基因工程技术将RAMP1基因克隆到穿梭质粒pShuttle-GFP-CMV中;I-Ceu I+I-Sce I双酶切穿...
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【中文期刊】 周雪莉 王园 等 《生命科学研究》 2009年13卷5期 418-421页ISTICCA
【摘要】 MuMADS1是从香蕉果实cDNA文库中筛选分离到的一个MADS-box基因.通过生物信息学分析表明,该基因编码的蛋白可能作为转录因子定位于细胞核中,而且芯片分析表明:该基因在果实成熟早期表达上调,是乙烯的上游调控因子,可能与花的发育、果实...
【关键词】 香蕉；MuMADS1表达栽体；基因枪转化；
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- 方法：
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【中文期刊】 付苏 郭树忠 等 《中国美容医学》 2009年18卷7期 960-963页ISTICCA
【摘要】 目的:构建含人OX40-IgG1融合基因的真核表达载体pDC315-0X40Ig,表达具有生物学活性的OX40Ig融合蛋白,为诱导异体复合组织移植免疫耐受的基因治疗作准备.方法:全基因合成目的基因OX40Ig,即人0X40胞外段序列及人Ig...
- 概要：
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【中文期刊】 刘丹丹 孟秀香 等 《大连医科大学学报》 2008年30卷2期 108-111页ISTICCA
【摘要】 [目的]克隆转录抑制因子Bmi-1基因并构建其正、反义真核表达载体,为研究其功能及其作用机制奠定基础.[方法]根据Bmi-1基因已知序列,设计合成一对引物,上下游引物分别加入XhoI和ClaI的酶切位点,用反转录PCR(RT-PCR)方法从...
- 概要：
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【中文期刊】 艾国平 谭虎 等 《现代生物医学进展》 2008年8卷3期 404-407页ISTICCA
【摘要】 为了促进肠上皮细胞增殖、加速肠上皮机械屏障修复和防止肠源性感染的发生,利用分子克隆技术首先获得含胰高血糖素样肽-2(GLP-2)编码序列的高血糖素原cDNA片段,通过PCR重叠延伸技术成功拼接GLP2的信号肤及成熟肽,同时将成熟肽N-末端第...
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【中文期刊】 姜习新 张鹏辉 等 《第四军医大学学报》 2008年29卷9期 777-781页ISTICCA
【摘要】 目的:体外研究siRNA-EGFP-hTERT/U6-PTZU6+1表达载体在肿瘤细胞中的靶向性.方法:常规培养稳定表达绿色荧光蛋白的肝癌SMMC-7721细胞株(EGFP-7721)和稳定表达绿色荧光蛋白的人正常成纤维细胞株HELF(EG...
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【中文期刊】 张立华 银平章 等 《实用诊断与治疗杂志》 2004年18卷2期 104-106页ISTIC
【摘要】 目的:鉴定人表皮生长因子的真核表达载体.方法:重组体进行限制性酶切及PCR可见目的片段.结果:pCDDA3.1-hEGF真核表达载体已成功构建.结论:已成功构建hEGF真核表达载体,为进一步研究hEGF的功能奠定了基础.
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【中文期刊】 李慧伦 魏艳丽 等 《湖北农业科学》 2011年50卷13期 2775-2779页
【摘要】 从玉米自交系9801基因组DNA中克隆了玉米19 kD醇溶蛋白基因(ze19)启动子,将其连接到pMD18-T载体上.测序结果表明该序列与已报道序列同源性为94%,包含TATAbox、CAATbox启动子基本元件以及GCN4、skn-1、p...
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【中文期刊】 朱伟伟 陈远良 等 《中国农学通报》 2011年27卷16期 146-150页
【摘要】 为了获得黄瓜中ClpP基因的cDNA全序列,研究其与黄瓜芽黄突变现象的关系,采用TRNzol法提取芽黄突变的黄瓜叶片总RNA,并以其为模板反转录合成cDNA第一链.根据NCBI预测的黄瓜ClpP基因序列设计并合成1对特异引物,通过PCR扩增...
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【中文期刊】 运晨霞 王坤 《广西中医学院学报》 2010年13卷3期 1-3页
【摘要】 [目的]构建人maff基因表达载体并在人肝癌细胞系HepG2细胞中表达.[方法]PCR(聚合酶链式反应)扩增人maff基因,并将其和克隆质粒连接,转染到大肠杆菌中扩增,酶切鉴定,然后将目的基因和表达载体连接,转染到人肝癌细胞系HepG2细胞...
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【中文期刊】 王琼 吴志蕾 等 《云南畜牧兽医》 2010年1期 4-5页
【摘要】 根据B病毒E2490株(基因序列AF533768)人工合成猴B病毒gB基因,通过Xbal和EeoRI特异性酶切,将其亚克隆于昆虫杆状病毒表达栽体pFastBacHTA,经PCR、酶切及测序鉴定,表明构建了猴B病毒gB基因杆状病毒表达重组质粒...
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【中文期刊】 代长云 黄海军 等 《现代农业科技》 2010年4期 332-333页
【摘要】 介绍了动物乳腺生物反应器的概念,综述了动物乳腺生物反应器及其载体的发展现状,以为动物乳腺生物反应器进一步研究提供借鉴.
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【中文期刊】 史楠 赵立平 等 《黑龙江畜牧兽医（科技版）》 2009年12期 1-3页
【摘要】 在幔病毒复制过程中cyclinT1(CycT1)是重要的辅助因子.为了揭示慢病毒的复制机理,试验使用RT-PCR方法扩增马和驴的cyclinT1基因,并进行克隆和序列分析,然后用DNASTAR(MegAlign)软件将测得的序列和国外发表的...
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【中文期刊】 范晶 黄明远 《湖北农业科学》 2009年48卷10期 2337-2340页
【摘要】 根据NCBI中水稻OsRop4基因序列设计引物,通过RT-PCR获得了水稻的OsRop4基因的3个转录本,其中1个转录本序列与GenBank中该基因的序列相同,含1个648bp的开放阅读框,编码215个氨基酸,另外两个转录本分别在编码序列内...
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【中文期刊】 林志娟 刘艳菲 等 《潍坊医学院学报》 2008年30卷3期 202-204页
【摘要】 目的 构建小鼠OX40胞外段基因的原核表达载体并进行诱导表达.方法 PCR扩增OX40胞外段基因并将其插入原核表达质粒pET32a(+),重组pET32a-OX40经测序鉴定后转入表达菌株B121(DE3)进行融合蛋白的小量诱导表达.结果 ...
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【中文期刊】 张春叶 沈红 等 《中国农学通报》 2008年24卷7期 11-16页
【摘要】 [研究目的]对猪传染性胃肠炎病毒S基因A抗原位点进行克隆和原核表达栽体的构建.[方法]参考GenBank上公布的TGEV S基因A抗原位点序列,应用Primer6.0设计一对含酶切位点的引物,用于RT-PCR扩增A抗原位点目的片段,将扩增产...
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【中文期刊】 吴琼 张永亮 等 《中国兽医学报》 2008年28卷3期 276-280页
【摘要】 合成含靶向生长抑素(Somatostatin,SS)前体基因的siRNA转录模板的发夹结构,插入pSilencer TM2.1-U6载体构建重组质粒2.1-S.提取小鼠下丘脑组织总RNA,PCR扩增获得SS前体基因eDNA,构建真核表达载体...
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【中文期刊】 李长福 张守鸿 等 《贵州农业科学》 2008年36卷3期 10-11页
【摘要】 采用RT-PCR技术扩增出天麻抗真茵蛋白(Gastrodia antifungal protein,GAFP)的cDNA序列,通过pGM-T载体转入大肠杆菌JM109克隆,在培养基上筛选重组质粒酶切鉴定,阳性克隆经限制性内切酶Xbal和Sa...
- 概要：
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【中文期刊】 张素芝 潘丽 等 《中国兽医科学》 2008年38卷7期 549-554页
【摘要】 为了研究饲草玉米可饲口蹄疫疫苗,将O型口蹄疫病毒的VP1和2A基因序列按照玉米的偏爱性密码子优化后,再与P1的其他基因及3C基因连接.同时,通过使用高效的Ubiquitin启动子以及在P1的起始密码子处添加Kozak序列和在3C基因3'末端...
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【中文期刊】 李谷 马力 等 《全科医学临床与教育》 2008年6卷5期 380-382,封2,封3页
【摘要】 目的 构建重组基因表达栽体PcDNA-sTRAIL并观察其对C6胶质瘤细胞的抑制作用.方法 通过PCR扩增和定向克隆技术构建重组真核表达栽体PcDNA-sTRAIL.以阳离子脂质体介导转染C6胶质瘤细胞并用流式细胞仪观测时细胞增殖的影响.结...
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【中文期刊】 张春兰 何秀霞 等 《长春理工大学学报（自然科学版）》 2007年30卷4期 84-86页
【摘要】 为构建一个能够表达出乙/戊型肝炎二价疫苗抗原的大肠杆茵高效重组原核表达栽体,采用PCR方法扩增出HBV的S基因,及HEV的ORF2编码区的羧基末端中的414-606an的基因片段,经过T栽体连接、茵落PCR、双酶切、测序鉴定后,将这两部分重...
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- 方法：
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【中文期刊】 韩亚杰 祝建波 等 《内蒙古农业科技》 2006年2期 16-19页
【摘要】 植物病毒载体是一类新型的外源基因表达载体,与利用转基因植物表达外源基因相比,植物病毒载体具有表达水平高、速度快、宿主广等优点.文章主要介绍了病毒载体的发展过程,以及病毒栽体的构建策略,如"全病毒"和"重组病毒"载体策略.
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【中文期刊】 刘发央 侯路珍 等 《草原与草坪》 2005年3期 66-68,71页
【摘要】 通过提取水稻叶片基因组DNA,设计PCR扩增特异引物,克隆单子叶特异表达启动子Actin1基因,与T载体连接,转化E.coliDH5a,得到重组子,经酶切和序列分析鉴定,该片段分子大小为1238bp,通过序列对比分析发现与已发表的Actin...
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【中文期刊】 施惠娟 范立强 等 《生物化学与生物物理学报》 1999年31卷1期 16-18页SCISCIEMEDLINEISTICCSCDBP
【摘要】 用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR),以人胎肝组织总RNA为模板,扩增了人铜锌超氧化物歧化酶(hCu,Zn-SOD)的cDNA,并进行序列分析,将该hCu,Zn-SODcDNA重组到T7启动子控制下的分泌型表达载体pET-22b(+)中,...
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【中文期刊】 赵悦 肖华卫 等 《中华肿瘤防治杂志》 2013年20卷11期 806-810页ISTICPKUCA
【摘要】 目的:构建AIF截短后只保留羧基端促凋亡结构域的真核表达载体,了解其是否有促凋亡活性作用及其机制.方法:通过PCR方法构建出AIF截短体AIF△1-480的真核表达载体.采用脂质体将该载体瞬时转染人乳腺癌细胞系MCF-7细胞,采用流式细胞技...
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【中文期刊】 张巧 段丽菊 等 《卫生研究》 2010年39卷4期 403-406页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 了解Rap2b基因对NIH3T3细胞集落形成及细胞伤口愈合能力的影响,为探讨该基因在人肺癌发生中的作用提供实验依据.方法 以人肺CDNA为模板克隆出Rap2b基因片段,构建pcDNA3.1-Rap2b真核表达载体,稳定转染NIH3T3...
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【中文期刊】 张红绪 张怡 等 《中国药房》 2009年20卷22期 1707-1709页ISTICPKUCA
【摘要】 目的:构建Exendin-4基因真核表达裁体,并在巴斯德毕赤酵母GS115中进行表达,为大量获得Exendin-4奠定基础.方法:采用重叠聚合酶链反应法扩增出Exendin-4的完整序列,将其亚克隆到表达载体pPIC9K上,得到重组质粒pP...
- 概要：
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【中文期刊】 戴灿 卢光琇 《现代生物医学进展》 2010年10卷9期 1639-1641页ISTICCA
【摘要】 目的:构建pAAV-NF-YA真核表达栽体并转染子宫颈癌HeLa细胞,检测NF-YA的表达水平.方法:抽提人类胚胎干细胞和胚胎成纤维细胞的总RNA,RT-PCR获得NF-YA基因的cDNA,克隆至pAAV-MCS载体中,经限制性酶切和测序鉴...
- 概要：
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【中文期刊】 张家墅 甄海宁 等 《第四军医大学学报》 2009年30卷16期 1457-1460页ISTICCA
【摘要】 目的:克隆细胞凋亡抑制蛋白基因survivin(SVV)的编码序列,构建含SVV基因的真核细胞表达载体并观察其在人胶质瘤细胞系SHG44中的表达.方法:利用逆转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase...
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