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            【中文期刊】 严伟  聂尧  等 《微生物学报》 2013年53卷2期 145-153页ISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 [目的]从长野芽胞杆菌(Bacillus naganoensis)JNB-1中克隆出普鲁兰酶基因并在大肠杆菌系统中表达,通过优化诱导条件和使用化学添加剂提高了胞外酶活.[方法]采用PCR方法,从B.naganoensis基因组中扩增出普鲁兰...

            【关键词】 普鲁兰酶基因克隆和表达诱导条件

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            【中文期刊】 李赛男  李慷  等 《微生物学通报》 2012年39卷3期 300-308页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 [目的]假单胞菌株M18中负责抗真菌剂藤黄绿菌素(Plt)合成的结构基因包括pltLABCDEFG、pltM.为了鉴定Plt合成限速酶的基因,分别将9个结构基因过表达.[方法]以M18菌株染色体DNA为模板,PCR扩增这9个Plt合成基因的...

            【关键词】 假单胞菌株藤黄绿菌素限速酶

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            【中文期刊】 徐灵龙  石星明  等 《微生物学报》 2009年49卷1期 128-134页ISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 [目的]原核表达系统是目前最为广泛使用的一种外源蛋白表达系统.在利用原核表达系统表达目的蛋白的过程中,可溶性外源蛋白的产量是决定成本和效率的决定性因素.[方法]本项研究中利用本实验室构建的7种不同的重组质粒(p-1、p-2、p-3、p-4、...

            【关键词】 蛋白表达培养基自动诱导

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            【中文期刊】 张姝  王敏  等 《中国生物工程杂志》 2009年29卷10期 44-49页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 对已构建好的表达HrpNEcc蛋白的工程菌BL21(DE3)/pET30a(+)hrpN Ecc的摇瓶发酵条件及乳糖诱导进行优化,通过在7L发酵罐中放大发酵实验,以期提高蛋白产量并降低生产成本.在摇瓶中优化的发酵及诱导条件是:5%的接种量,...

            【关键词】 HrpNEcc蛋白重组大肠杆菌发酵及诱导条件优化

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            【中文期刊】 杨隆兵  国果  等 《中国生物工程杂志》 2019年39卷4期 24-31页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:优化AMPs17重组蛋白的原核表达条件, 分析重组蛋白的抗真菌活性.方法:比较不同的诱导温度(25℃、28℃、30℃、32℃、34℃) 、异丙基硫代-β-D半乳糖苷(IPTG) 诱导浓度(0. 025mmol/L、0. 05mmol/...

            【关键词】 家蝇家蝇抗菌肽-17原核表达

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            【中文期刊】 赵加玲  武舒佳  等 《生物工程学报》 2019年35卷9期 1771-1786页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 Rv2742是本课题组前期基于蛋白质基因组学策略从结核分枝杆菌Mycobacterium tuberculosis H37Rv中发现、鉴定的遗漏注释基因.文中旨在建立结核分枝杆菌H37Rv漏注释蛋白Rv2742的可溶性诱导表达、纯化体系,为...

            【关键词】 结核分枝杆菌新基因原核表达

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            【中文期刊】 王越  李江华  等 《中国生物工程杂志》 2019年39卷3期 56-64页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 α-酮戊二酸(α-ketoglutaric acid,α-KG)是谷氨酸脱氨基的酮酸产物,作为一种重要的有机酸广泛用于食品、医药、精细化工等领域.为提高L-氨基酸脱氨酶全细胞催化法合成α-KG的效率及产量,首先通过优化全细胞催化剂制备条件及...

            【关键词】 L-氨基酸脱氨酶条件优化定点饱和突变

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            【中文期刊】 陈子晗  周海胜  等 《中国生物工程杂志》 2019年39卷10期 58-66页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 首先构建了5株表达NADH依赖型谷氨酸脱氢酶的大肠杆菌基因工程菌,获得来源于Amphibacillus xylanus的谷氨酸脱氢酶AxyGDH.其最适温度为60℃、最适pH为8.0,该条件下比酶活达到(903.1±24.6) U/mg,酶...

            【关键词】 谷氨酸脱氢酶异源表达比酶活

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            【中文期刊】 梅建凤  赵文渊  等 《微生物学通报》 2019年46卷3期 541-547页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 [背景]血红素加氧酶-1 (HO-1)具有抗氧化应激、抗凋亡和抗纤维化等多种生理效应,有望成为一种新型药物应用于临床疾病的治疗.[目的]构建表达HO-1的基因重组大肠杆菌(Escherichia coli),并优化其表达培养条件,实现HO-...

            【关键词】 血红素加氧酶原核表达大肠杆菌

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            【中文期刊】 苗书魁  汪萍  等 《中国微生态学杂志》 2019年31卷1期 30-34页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 探讨小反刍兽疫病毒(Peste des Petits Ruminants Virus,PPRV)N蛋白原核表达、条件优化及反应活性.方法 参照GenBank中PPRV (Nigeria/75/1)N基因序列,人工合成该基因,构建重组表...

            【关键词】 小反刍兽疫病毒N蛋白原核表达

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            【中文期刊】 付航  黄涵签  等 《中草药》 2018年49卷13期 3127-3133页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 建立防风Saposhnikovia divaricate再生体系.方法 研究不同外植体、温度、培养基、光照条件对诱导防风愈伤组织的影响,采用响应面试验设计,优化愈伤组织诱导及增殖的激素配比.结果 以防风的叶片为外植体,诱导愈伤组织最适...

            【关键词】 防风组织培养愈伤组织

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            【中文期刊】 王玲  李琰  等 《生物技术通报》 2018年34卷8期 80-86页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 为了利用葡萄愈伤组织建立快速稳定的葡萄细胞悬浮体系,以无核白和黑比诺葡萄无菌幼苗的茎段、叶片以及叶柄为外植体,通过基本培养基、不同植物生长调节剂配比及其浓度、PVP等优化疏松型愈伤组织的诱导方法并建立稳定的细胞悬浮培养体系.结果表明,以无核...

            【关键词】 葡萄苗疏松型愈伤组织细胞悬浮培养

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            【中文期刊】 高洁  李益民  等 《生物工程学报》 2018年34卷7期 1178-1188页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 随着大型褐藻生产燃料乙醇以及褐藻寡糖重大药用价值的发现,褐藻胶裂解酶成为国内外多个领域的研究重点.文中对解藻酸弧菌上与褐藻胶降解相关的5个基因分别进行克隆表达,通过SDS-PAGE和酶活性定量测定,发现该基因簇中的4个基因有降解褐藻胶活性....

            【关键词】 褐藻胶裂解酶解藻酸弧菌克隆表达

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            【中文期刊】 刘强  王腾飞  等 《生物技术通报》 2017年33卷3期 106-115页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 运用枯草芽孢杆菌中的麦芽糖诱导型启动子调控元件,构建得到麦芽糖诱导海藻糖合成酶的安全表达系统,使其制备的海藻糖能够广泛应用于食品医疗行业.以来源于恶臭假单胞杆菌KT2440(Pseudomonas putida KT2440)的海藻糖合成酶...

            【关键词】 枯草芽孢杆菌海藻糖合成酶麦芽糖启动子

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            【中文期刊】 邹明月  席磊  等 《细胞与分子免疫学杂志》 2017年33卷11期 1456-1461页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 优化条件建立人急性单核白血病细胞THP-1炎症细胞模型,评价其对磷酸二酯酶抑制剂类抗炎剂咯利普兰的响应.方法 THP-1细胞经佛波酯(PMA)诱导分化、脂多糖(LPS)刺激,ELISA检测细胞上清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介...

            【关键词】 THP-1细胞佛波酯(PMA)脂多糖(LPS)

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            【中文期刊】 饶德明  张良程  等 《生物技术通报》 2017年33卷1期 148-156页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 5-氨基乙酰丙酸(5-amino levulinic acid,ALA)是生物体内天然存在的一种非蛋白质氨基酸,在农业和医药等领域应用广泛。为了在谷氨酸棒状杆菌中建立 ALA 碳四合成途径并优化其发酵体系,首先在谷氨酸棒状杆菌中过表达沼泽红...

            【关键词】 5-氨基乙酰丙酸谷氨酸棒状杆菌5-氨基乙酰丙酸合成酶

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            【中文期刊】 公冶祥旭  朱惠君  等 《植物科学学报》 2017年35卷3期 427-434页ISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 以除虫菊(Pyrethrum cinerariifolium Trey.)无菌苗为外植体,研究除虫菊发状根的诱导、培养条件优化,并对发状根中的除虫菊素进行检测和生物活性测定.结果显示,乙酰丁香酮能促进除虫菊下胚轴和子叶发状根的诱导,当乙酰丁...

            【关键词】 除虫菊发根农杆菌发状根

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            【中文期刊】 施慧  穆晓清  等 《微生物学报》 2017年57卷7期 1112-1125页ISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 [目的]烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)在细胞基因表达、氧化还原反应、能量代谢以及调控细胞生命周期中具有重要的作用,其细胞内含量是能量效率的关键因素.强化辅因子合成策略,获得高产NAD+菌株,对于NAD+依赖型氧化还原反应的速率和调节相关生...

            【关键词】 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸大肠杆菌pncB

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            【中文期刊】 吴优  周卫  等 《微生物学报》 2017年57卷12期 1778-1787页ISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 [目的]克隆Arthrobacter ureafaciens CZ31丙氨酸脱氢酶的编码基因(alanine dehydrogenase),转化至Escherichia coli Rosetta (DE3)中构建可溶性表达alanine d...

            【关键词】 Arthrobacter ureafaciens CZ31丙氨酸脱氢酶克隆表达

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            【中文期刊】 车路阳  郭志兰  等 《生物工程学报》 2017年33卷5期 849-862页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 RANKL/RANK/OPG轴在骨代谢过程中起到中心调节作用,也是近年来骨相关疾病治疗研究的热点之一.RANKL蛋白在RANKL/RANK/OPG轴信号传递过程中起到关键作用,在骨代谢相关实验研究中用途广泛.但是,使用大肠杆菌Escheri...

            【关键词】 RANKL大肠杆菌蛋白表达

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            【中文期刊】 姚晓坤  伦永志  等 《中国微生态学杂志》 2017年29卷4期 373-376页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 为进一步研究痢疾志贺菌侵袭素IpaC蛋白的侵袭活性,必须先获得IpaC重组融合蛋白.方法 将IpaC基因亚克隆至表达载体pET-24α(+)中,转化至E.coli BL21 (DE3)表达宿主菌中,采用IPTG优化诱导表达,然后纯化复...

            【关键词】 侵袭素IpaC原核表达

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            【中文期刊】 刘微  姚杨  等 《吉林大学学报(医学版)》 2016年42卷4期 642-647页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:设计合成小泛素修饰物-成纤维细胞生长因子受体4(SUMO-FGFR4)基因,构建 pET22b-SUMO-FGFR4表达载体,并对其表达条件进行优化。方法:采用 Overlap PCR 方法制备 SUMO-FGFR4融合基因,并连接到...

            【关键词】 小泛素相关修饰物成纤维细胞生长因子受体 4重组融合蛋白类

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            【中文期刊】 朱玲玲  梅兰菊  等 《植物科学学报》 2012年30卷3期 322-326页ISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 为建立川芎(Ligusticum chuanxiong Hort.)高频再生体系,优化了诱导和分化培养基及培养条件.以叶柄为外植体,以MS为基本培养基,KT2.0 mg/L+ IAA0.5mg/L的激素组合对不定芽分化最有利.在此基础上,针...

            【关键词】 川芎叶柄继代培养

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            【中文期刊】 石胜  钟华  等 《细胞与分子免疫学杂志》 2012年28卷6期 629-632页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:采用酵母多拷贝分泌表达载体pPIC9K表达重组嵌合抗人CD22四价基因工程抗体cRFB4FC和cRFB4CH3,并进行活性检测.方法:采用基因克隆技术获得两抗体的基因,然后将其克隆入表达载体pPIC9K中,构建重组质粒pPIC9K/c...

            【关键词】 CD22人CD22抗体B细胞淋巴瘤

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            【中文期刊】 杨晶  李天航  等 《中国中药杂志》 2012年37卷12期 1738-1742页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:发状根生产的次生代谢产物含量比植物自身合成的含量高几倍甚至几十倍,利用人参发状根可以生产大量人参皂苷,并有效的抑制癌细胞的增值.方法:通过正交试验设计筛选人参发状根诱导的条件,通过发状根生物积累量和皂苷含量的测定确定培养条件,然后利用...

            【关键词】 人参发状根Ri质粒人参皂苷

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            【中文期刊】 李林轩  韦坤华  等 《中药材》 2012年35卷4期 514-517页MEDLINEISTICPKUCA

            【摘要】 目的:建立和优化山豆根组织培养快速繁殖技术,为保护山豆根的野生资源,发展人工资源和探讨育种新途径奠定基础.方法:采用正交设计对影响山豆根组织培养的激素进行优化研究.结果:培养基MS+ 6-BA( 1.5mg/L)+ NAA(0.2 mg/L...

            【关键词】 山豆根组织培养繁殖系数

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            【中文期刊】 刘春光  权春善  等 《中国生物工程杂志》 2012年32卷4期 1-6页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:克隆表达金黄色葡萄球菌agr系统的受体蛋白AgrC,构建人工超分子体系.方法:构建基因工程菌E.coli TOP10-pBAD-AgrC,对诱导条件进行优化,对蛋白的提取方法进行分析优化.表达产物使用Western blot鉴定,Hi...

            【关键词】 金黄色葡萄球菌人工超分子体系囊泡

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            【中文期刊】 智晓燕  汪小锋  等 《中国生物工程杂志》 2012年32卷2期 82-89页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:构建高效表达白地霉脂肪酶的毕赤酵母重组菌株,并对筛选得到的菌株进行摇瓶发酵条件优化和分批补料高密度发酵工艺研究.方法:将诱导型表达载体pPIC9K-gcl电转化至毕赤酵母GS115.通过橄榄油-罗丹明B平板和摇瓶发酵筛选高脂肪酶活力的...

            【关键词】 巴斯德毕赤酵母白地霉脂肪酶基因拷贝数

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            【中文期刊】 蔡媛媛  李雪燕  等 《细胞与分子免疫学杂志》 2012年28卷6期 596-600页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:构建肿瘤坏死因子相关凋亡配体胞外功能区的原核表达质粒,优化诱导蛋白表达的相关条件,检测切胶纯化所得蛋白的抗原结合活性,以及亲和层析纯化蛋白的促凋亡功能.方法:扩增Trail胞外功能区第114 - 281个氨基酸基因序列,插入融合表达载...

            【关键词】 pET-28α-Trail114-281优化条件目的蛋白

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            【中文期刊】 赵爽  郑妍研  等 《中药材》 2012年35卷2期 176-179页MEDLINEISTICPKUCA

            【摘要】 目的:建立金铁锁毛状根诱导体系.方法:用发根农杆菌A4和C58CI菌株分别诱导金铁锁外植体获得毛状根,并对毛状根诱导过程中的多个因素进行优化.结果:金铁锁毛状根诱导的最佳条件为选择幼嫩茎段和幼嫩叶片作为外植体,在培养基1/2MS+ AS 1...

            【关键词】 金铁锁毛状根培养条件

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            【中文期刊】 谢琦  林军  等 《现代预防医学》 2012年39卷11期 2799-2802页ISTICPKUCA

            【摘要】 目的 构建重组多价人精子表位肽原核表达质粒,优化其在大肠杆菌中的表达条件.方法 用化学合成法合成多价人精子表位肽基因.该基因经PCR扩增,BamHI和XhoI双酶切后,克隆至GST融合表达载体PGEX-4T-1获得重组质粒.将该重组质粒转化...

            【关键词】 重组多价人精子表位肽GST融合蛋白大肠杆菌

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            【中文期刊】 解鹏  王欲晓  等 《细胞与分子免疫学杂志》 2012年28卷7期 718-721页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:优化β-淀粉样蛋白单链抗体(scFv)的诱导表达和纯化条件.方法:在固定诱导表达时间和诱导表达温度的条件下,采用不同终浓度的IPTG进行诱导表达,通过SDS-PAGE分析全菌液总蛋白中目的蛋白F3 scFv的表达水平,确定所需诱导剂I...

            【关键词】 β-淀粉样蛋白单链抗体表达纯化

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            【中文期刊】 李观强  张志珍  等 《中国热带医学》 2012年12卷1期 1-5页ISTICPKUCA

            【摘要】 目的 优化高表达禽流感病毒NS1蛋白的实验方法.方法 将基因工程菌接种LB培养基,设定IPTG终浓度为0.3mmol/L,诱导温度为37℃,诱导表达6.0h,SDS-PAGE分析融合蛋白表达情况,确定最佳诱导时间.以0.1mmol/L为...

            【关键词】 禽流感H5N1NS1融合蛋白

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            【中文期刊】 陈光  吴铭  等 《吉林大学学报(医学版)》 2011年37卷4期 656-660页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:构建含有胶原蛋白基因的原核表达载体pET32a-CP6,并转入大肠杆菌BL21 (DE3)中进行高效表达,为获得大量可溶的胶原蛋白肽提供可靠依据.方法:将重组表达载体pET32a-CP6转化到大肠杆菌BL21中,以IPTG为诱导剂,对...

            【关键词】 重组胶原蛋白肽重组蛋白纯化大肠杆菌

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            【中文期刊】 戴易兴  王洪新  等 《中国微生态学杂志》 2011年23卷6期 481-484页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 以1株酶产量高、耐热性好的重组大肠埃希菌BL21为材料发酵生产β-葡聚糖酶.方法 选用麸皮、豆粕等农副产品配制复合碳源、氮源,优化半合成发酵培养基,并通过正常试验确定最佳培养条件.结果 研究得到摇瓶水平产β-葡聚糖酶的最佳培养基(g/...

            【关键词】 基因工程菌β-葡聚糖酶培养基

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            【中文期刊】 王鹏  赵颖  等 《生物工程学报》 2011年27卷11期 1655-1666页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 为了获得活性良好的重组人β-分泌酶(β-secreatase,BACE1),用于研究其与抑制剂的作用模式,构建了携带p-分泌酶proBACE1和BACE1编码序列的重组表达质粒pPIC9K-MetBACE22和pPIC9K-MetBACE4...

            【关键词】 β-分泌酶糖基化毕赤酵母

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            【中文期刊】 张小娟  张荣光  等 《中国公共卫生》 2011年27卷9期 1134-1136页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 探讨幽门螺杆菌尿素酶B(UreB)在食品级乳酸乳球菌NZ3900菌株中的优化表达条件.方法 利用基因重组技术构建乳酸乳球菌NZ3900( pNZ81 10/ureB);采用L25(56)正交表设计,选定诱导剂浓度、诱导时机、诱导时间3...

            【关键词】 幽门螺杆菌乳酸菌乳酸链球菌肽翻译融合表达系统(NICE)

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            【中文期刊】 李江姣  朱武洋  等 《中国生物工程杂志》 2011年31卷2期 62-68页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:通过优化表达条件,提高辛德毕斯病毒E2包膜蛋白胞外区的可溶性表达量.方法:构建含E2基因胞外区的重组表达质粒pGEX.6p-1-E2,筛选合适宿主茵和诱导温度,并构建5种分子伴侣共表达系统(即pG-KJE8、pGro7、pKJE7、p...

            【关键词】 辛德毕斯病毒E2包膜蛋白分子伴侣

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            【中文期刊】 金城  《微生物学通报》 2011年38卷12期 1869页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 提高抗生素在产生菌中的表达效价,从而降低生产成本,是实现抗生素生产应用的重要基础.星形孢菌素是一种非特异性的蛋白激酶抑制剂,能够诱导多种类型的细胞凋亡,但目前星形孢菌素生产菌株的表达效价均较低,达不到生产要求,使其应用受到限制[1-4].

            【关键词】 海洋放线菌星形孢菌素发酵

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            【中文期刊】 罗正伟  张来  等 《中药材》 2011年34卷12期 1818-1823页MEDLINEISTICPKUCA

            【摘要】 目的:探索竹节参离体培养与植株再生技术及优化培养条件.方法:以竹节参的胚、茎、叶作为外植体,应用正交的方法,筛选出竹节参最佳的愈伤组织诱导和分化培养基.结果:竹节参不同外植体的最优消毒方法分别为,种子消毒采用75%酒精浸泡60 s,0.1%...

            【关键词】 竹节参离体培养植株再生

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