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【中文期刊】 窦速林 刘卫贞 等 《微生物学杂志》 2018年38卷5期 27-33页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 探究质粒拷贝数以及目标蛋白S1表达量与发酵时间的关系,从而确定放大生产pLA-PEDV-S1/Lactobacillus casei的最佳发酵时间.通过发酵重组干酪乳杆菌,绘制重组干酪乳杆菌的生长曲线,确定其生长的最佳时期.将pLA-PED...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 史悦 于慧敏 等 《中国生物工程杂志》 2005年25卷8期 70-75页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 成功构建了腈水合酶(nitrile hydratase,NHase)高表达的重组大肠杆菌E.coli BL21(DE3)/pETNHM(Kanr),研究了重组质粒pETNHM在重组菌株中的质粒稳定性.结果表明,pETNHM具有较好的结构稳定...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 钟春英 孙明 《湖北农业科学》 2015年8期 2001-2006页
【摘要】 根据苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis)YBT-1520的全基因组测序结果,在内生质粒pBMB67和染色体上分别选取单拷贝片段,利用实时荧光定量PCR法测得质粒pBMB67的拷贝数为21.此外,在内生质粒pBMB6...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 王剑 夏杰 等 《化学与生物工程》 2009年26卷5期 46-49页
【摘要】 研究了培养基组分对hCG核酸疫苗质粒拷贝数的影响.结果表明,复合培养基比合成培养基更利于hCG核酸疫苗质粒DNA的生产.通过均匀设计实验确定,当培养基中含有胰蛋白胨10 g·L-1、酵母浸出粉8 g·L-1、NaCl 10 g·L-1、甘油...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 张乐 王润杨 等 《湖北工业大学学报》 2025年40卷1期 70-75页
【摘要】 为通过优化质粒pUC57的复制起始位点,提高其在宿主菌中的拷贝数,利用随机突变PCR技术对质粒pUC57的复制起始位点进行了定向突变,发现突变后的质粒pUC57-Mu-Ori-kana(Mu代表突变)显示更高的拷贝数.采用分子克隆技术中的同...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 陈伟京 洪梅 等 《中华医学杂志(英文版)》 2002年115卷12期 1785-1789页SCIMEDLINEISTICCSCDCABP
【摘要】 目的确定在一个质粒载体上串联目的操纵子以提高目的蛋白表达量的可行性,阐明宿主细胞对胞内质粒DNA总量调控的可能机制.方法亚克隆构建了两组操纵子正向串联的表达质粒:CWll系列分别含1-4个正向操纵子,质粒大小以2.25 kb的增加量从5.4...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 李媛 任长虹 等 《中国生物工程杂志》 2011年31卷6期 93-98页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 聚合酶链式反应(PCR)作为常规分子克隆技术已在分子生物学的各个领域得到广泛应用.然而,多重PCR技术应用于质粒拷贝数检测的研究尚未见报道.为深入探索多重PCR在质粒拷贝数测定中的应用,首先利用构建的多重PCR引物设计及评估体系分别针对细菌...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 周涛 《生物技术通讯》 1999年10卷1期 51-57页ISTICCA
【摘要】 在研究生物工程重组蛋白产量的过程中,质粒的拷贝数是一个需要重点考虑的参数,对它进行精确定量至关重要.本文概述了几种主要的测定方法的原理和特点.
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 陈孟璋 何星垚 等 《广东药科大学学报》 2023年39卷5期 87-92页ISTICCA
【摘要】 目的 比较不同的定量方法和总DNA制备方法对实时定量PCR(real-time quantitative PCR,qPCR)测定治疗性HBV DNA疫苗工程菌的质粒拷贝数(plasmid copy number,PCN)的影响,为建立快速简...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 付立霞 高雯 等 《淡水渔业》 2018年48卷4期 63-70页
【摘要】 为测定(鮰)爱德华氏菌(Edwardsiella ictaluri)隐蔽质粒的拷贝数, 并探究不同基因组制备方式及定量策略对质粒拷贝数测定的影响, 分别采用试剂盒和水煮法制备(鮰)爱德华氏菌基因组, 通过绝对定量和相对定量PCR测定两种不同...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 易俊波 买制刚 等 《中国生物制品学杂志》 2008年21卷12期 1062-1065页ISTICCSCDCABP
【摘要】 目的 构建多拷贝脑钠肽(BNP)基因重组表达质粒,并探讨BNP基因的拷贝数与其表达水平的相关性.方法 通过人工合成和PCR技术扩增BNP基因,将其克隆至载体pCW111中,构建表达质粒pBNP11,并通过亚克隆构建含有不同数量表达盒的正向串...
- 概要：
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- 结论：
【中文期刊】 陈军 张高川 等 《生物技术》 2001年11卷1期 6-8页ISTICCA
【摘要】 为了研究ColE2质粒的复制及其调控机理,构建了一种新的质粒克隆载体pBluescript22+,并且测定了它在宿主中的稳定性和拷贝数.结果表明,在宿主菌繁殖40代前,它在宿主菌中的拷贝数达到最高,之后便很快下降,虽然在宿主菌繁殖到180代...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 石磊 傅佑丽 《稀土》 2006年27卷4期 91-95页
【摘要】 稀土应用的日益增长将会对生物的遗传产生深远的影响.生物的遗传离不开DNA的复制,由于染色体DNA非常巨大和复杂,难以直接研究稀土离子对其复制的影响.本研究以细菌染色体之外的遗传因子--质粒为对象,研究La3+对质粒DNA复制拷贝数的影响.结...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 石磊 傅佑丽 《曲阜师范大学学报(自然科学版)》 2003年29卷4期 95-97页
【摘要】 稀土应用的日益增长将会对生物的遗传产生深远的影响.生物的遗传离不开DNA的复制,由于染色体DNA非常巨大和复杂,难以直接研究稀土离子对其复制的影响.以细菌染色体之外的遗传因子--质粒为对象,研究La3+ 对质粒DNA复制速度的影响.结果表明...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 王魁 殷吉祥 等 《中国生物制品学杂志》 2024年37卷10期 1263-1267,1274页ISTICCSCDCABP
【摘要】 目的 建立重组E.coli宿主中质粒DNA(pDNA)拷贝数的qPCR检测方法,并进行验证,以期为mRNA疫苗研发提供可靠的检测方法.方法 根据E.coli Top10基因组DNA序列设计用于qPCR扩增的引物及探针,并优化引物浓度.提取重...
- 概要：
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【中文期刊】 王丽燕 王煜 等 《中国生物工程杂志》 2016年36卷12期 42-48页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 腈水合酶由α亚基和β亚基组成,活化元件对其功能表达至关重要,研究腈水合酶基因簇中各元件的表达比例对酶重组表达的影响具有重要意义.以来源于Klebsiella oxytoca KCTC 1686的腈水合酶(NHaseK)为研究对象,构建了多种...
- 概要：
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- 结论：
【中文期刊】 林垚 洪珊 等 《中国生物制品学杂志》 2019年32卷1期 76-79页ISTICCSCDCABP
【摘要】 目的 建立登革病毒Ⅰ型(dengue virus-Ⅰ,DENV-Ⅰ)拷贝数标准质粒及其检测体系.方法 将DENV-Ⅰ的前膜蛋白基因克隆至pMD19-T载体,建立DENV-Ⅰ标准质粒,采用实时荧光定量PCR法进行扩增,获得Ct值与病毒拷贝数的...
- 概要：
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【学位论文】 作者：江礼捷 导师：王志强 刘岳龙 扬州大学 兽医学 兽医博士（博士） 2022年
【摘要】 替加环素是首个用于临床抗感染的甘酰胺四环素药物，其抗菌谱广，对多重耐药细菌中也表现出较好的体内外抗菌活性，因而被认为是治疗耐药菌感染的最后一道防线。近年来，抗生素的大量及不合适使用导致耐药病原菌急剧增加，严重影响了公共卫生安全。tet(X)...
- 概要：
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【学位论文】 作者：高玉晓 导师：张成岗 安徽医科大学 生物学 生物化学与分子生物学（硕士） 2013年
【摘要】 聚合酶链式反应(PCR)技术是一项基因检测技术,具有简便易行、灵敏度高等优点,已广泛用于核酸扩增及基因表达调控研究。其中,基因组DNA是传统PCR技术常用的扩增模板,制备方法通常有两种:利用常规生物化学试剂破碎细胞,从细胞提取核酸以获得基因...
- 概要：
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【学位论文】 作者：程林 导师：张翼 武汉大学 生物学 生物化学与分子生物学（硕士） 2003年
【摘要】 革兰氏阳性菌Leifsonia xyli subsp.Cynodotis(Lxc)的天然质粒pCXC100中的一个800bp片段对质粒的稳定性起着关键性作用.研究表明该DNA片段也能提高不同质粒在E.coli中的稳定性,证明了该DNA片段是...
- 概要：
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【中文期刊】 姜雅文 张苍萍 等 《食品科学》 2025年46卷15期 128-135页
【摘要】 在大肠杆菌BL21(DE3)中构建磷酸化-去磷酸化将D-葡萄糖转化为D-阿洛酮糖的途径.通过CRISPR/Cas9基因编辑系统敲除竞争途径的相关基因,探究不同来源阿洛酮糖-6-磷酸磷酸酶(allulose-6-phosphate phosp...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 袁璐 陈楠 等 《微生物学杂志》 2023年43卷3期 30-38页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 通过比较四种品系小鼠对炭疽芽胞杆菌(Bacillus anthracis)(简称炭疽杆菌)弱毒株芽胞的敏感性,确定炭疽杆菌弱毒株芽胞攻毒合适的动物模型.采用炭疽杆菌弱毒株A16Q1(pXO1-、pXO2+)和A16PI2(pXO1+、pXO...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 章晓波 徐洵 等 《生物化学与生物物理进展》 2000年27卷3期 277-280页SCIISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 将对虾白斑杆状病毒的一段特异性DNA设计成分子信标探针,用于该病毒的PCR检测.温度与荧光强度之间的关系表明,所设计探针的发夹既可以形成也可以打开,符合PCR对分子信标探针的要求.结果表明,在PCR同时加入分子信标探针不影响PCR扩增,分子...
- 概要：
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【中文期刊】 车勇良 陈秋勇 等 《动物医学进展》 2022年43卷8期 46-49页
【摘要】 根据多黏菌素耐药基因mcr-1的保守序列,设计合成一对重组酶介导扩增方法(RAA)特异性引物和一条FAM标记的荧光探针,优化扩增条件,建立了检测多黏菌素耐药基因mcr-1的RAA方法,验证其特异性和敏感性,并应用于临床检测.结果显示,建立的...
- 概要：
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【中文期刊】 王亚新 刘春羽 等 《动物医学进展》 2022年43卷11期 6-11页
【摘要】 为检测牛传染性鼻气管炎病毒,通过设计针对gB基因的特异性引物扩增gB基因,构建阳性重组质粒.经过优化建立了牛传染性鼻气管炎病毒的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法.结果显示,建立的实时荧光定量PCR检测方法在阳性标准质粒拷贝数在5...
【关键词】 牛传染性鼻气管炎；SYBR GreenⅠ荧光定量PCR；gB基因；
- 概要：
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【中文期刊】 赵松 李婷 等 《中国血吸虫病防治杂志》 2018年30卷3期 273-277,306页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 建立一种可用于日本血吸虫特异性基因片段检测的重组酶介导的核酸等温扩增方法(RAA).方法 以日本血吸虫SjG28基因片段作为靶序列,根据RAA反应原理设计合成引物,建立并优化RAA反应体系.应用此方法与聚合酶链式反应(PCR)同时扩增...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 罗依凡 胡贵鹏 等 《生物工程学报》 2025年41卷5期 1942-1958页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 没食子酸是一种具有抗氧化等多种药用价值的天然植物酚类化合物,目前主要的生产方法是通过提取植物中单宁进行化学或酶水解方式制备,存在成本高和污染大的问题.基于微生物细胞工厂的绿色合成为没食子酸生产提供了有效替代途径,然而目前的产量仍难以达到工业...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 黄洁 崇钰 等 《菌物学报》 2025年44卷6期 153-161页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 小麦矮腥黑穗病是由小麦矮腥黑粉菌Tilletia controversa(TCK)侵染引发的麦类腥黑穗病中危害最大、最难防治的一种系统侵染性病害,也是一种重要的国际检疫性小麦病害.对其精准、快速的检测有助于病害检验检疫和防止病害随口岸货物运...
【关键词】 小麦矮腥黑粉菌；重组酶聚合酶扩增技术；侧流层析试纸条；
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 但晓雅 董英 等 《生物技术通报》 2012年8期 125-129页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 利用改良逆转录环介导等温扩增( RT-LAMP)技术建立一种快速、灵敏的检测方法用于H9亚型禽流感病毒检测.根据H9亚型禽流感病毒血凝素(HA)基因保守区序列中的8个区段设计6条特异性引物,在恒温条件下进行核酸扩增反应,并以琼脂糖凝胶电泳和...
【关键词】 H9亚型禽流感病毒；逆转录环介导等温扩增；快速检测；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 孙朝晖 王蜀燕 等 《解放军医学杂志》 2007年32卷11期 1179-1183页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 制备病毒性肝炎联合诊断cDNA芯片,并进行系列优化及临床应用性研究.方法 对于基因组较小的HBV、HDV病毒,采用Primer Premier 5.0软件针对其保守区域设计特异引物,普通PCR技术制备探针;利用限制性显示PCR(RD-...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 林懿 陈祖欢 等 《第二军医大学学报》 2002年23卷8期 828-829页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:高密度、高质粒拷贝数培养大肠杆菌生产重组DNA疫苗pcD-flaB.方法:应用FUS-5L自控发酵罐,采用补料分批培养技术,控制补料的补加使溶氧控制在30%～60%,pH控制在7左右,培养中后期采用42℃培养以提高质粒拷贝数.结果:重...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 石东乔 陈正华 《遗传》 2001年23卷1期 73-76页MEDLINEISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 <篇首>反义RNA 最初发现于细菌中，它们是一些较短的、散布的转录产物［1］，本身缺乏编码能力，但可以通过碱基配对的方式与靶RNA的特定互补区域结合，从而阻抑基因的正常表达，因此，反义RNA是高度特异性的基因表达抑制因子。1 自然界中存在的反义...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 戴陈伟 童琳 等 《食品安全质量检测学报》 2019年10卷23期 8037-8041页
【摘要】 目的 建立实时荧光定量PCR法快速检测志贺氏菌.方法 提取志贺氏菌基因组为模板扩增virA基因片段,将目的片段连接至pMD19-T载体得到重组质粒,转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,验证所得到的重组质粒,以紫外分光光度计测量重组质粒吸光度值A...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 王柏林 周怡 等 《中国畜牧兽医》 2019年46卷4期 1135-1142页
【摘要】 为定量分析贵州省临床用猪伪狂犬病(pseudorabies,PR)活疫苗中病毒含量,根据GenBank中公布的伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)gB基因序列(登录号:M17321.1)设计1对特异性引物,建立实时荧...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 李国华 高锦伟 等 《食品安全质量检测学报》 2019年10卷7期 2054-2058页
【摘要】 目的:建立一种肉制品中猪源性成分的相对定量检测方法.方法:针对猪的ER-beta基因的mRNA序列设计了特异性引物与探针序列,并对引物和探针的特异性进行了验证.构建重组质粒,利用质粒拷贝数的1og值和Ct值构建标准曲线.通过标准曲线计算各个...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 赵春光 谢希贤 等 《生物技术通讯》 2009年20卷4期 534-537页ISTICCA
【摘要】 目的:研究变温控制对大肠杆菌TRTH L-色氨酸补料分批发酵过程中生物量、色氨酸产量、比生长速率及质粒稳定性的影响.方法:利用5L自控发酵罐对L-色氨酸补料分批发酵过程进行温度控制,对不同温度下相关参数进行分析比较,确定优化的温度控制方案....
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 殷玉和 高冷 等 《中国生物制品学杂志》 2008年21卷2期 150-152页ISTICCSCDCABP
【摘要】 目的 优化重组质粒D-GPEi工程菌发酵工艺条件.方法 控制相关发酵参数,观察溶解氧浓度、比生长速率和培养时间对工程菌生长和质粒浓度的影响.结果 发酵培养对数生长期溶解氧浓度控制在30%～50%.补料前比生长速率为0.5～0.7/h,6 h...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 饶桂荣 黄英 等 《中国生物制品学杂志》 2007年20卷2期 110-113页ISTICCSCDCABP
【摘要】 目的 研究双质粒HBV DNA疫苗工程菌的中试发酵工艺.方法 首先通过计算质粒拷贝数,检测工程菌DH5α/pS2.S和DH5α/pFP在传代过程中的遗传稳定性,通过摇瓶培养确定培养基组成,再在30 L发酵罐内,通过改变培养基成分、培养时间、...
【关键词】 治疗性HBV DNA疫苗；工程菌；发酵；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 肖凤君 张庆林 等 《生物技术通讯》 2006年17卷5期 755-756页ISTICCA
【摘要】 目的:pUDKH是由本实验室构建的携带人肝细胞生长因子(HGF)基因的真核表达质粒,具有治疗肢体动脉闭塞病的应用潜能.为了生产制备重组质粒pUDKH,须建立菌种库并对其进行质量检定.方法:将质粒pUDKH转化大肠杆菌DH5α,经筛选后制备成...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 刘志伟 张晨 等 《生物技术》 2004年14卷2期 11-13页ISTICCA
【摘要】 为了实现转基因鱼腥藻培养生产TNF的目的,研究了转基因鱼腥藻的稳定性.影印法证实转TNF-α基因鱼腥藻7120能保持质粒分配稳定性.比较无选择压力下连续传代的转基因鱼腥藻7120在不同培养基中的生长和外源基因表达,证实没有发生质粒部分缺失,...
【关键词】 转基因鱼腥藻7120；质粒；稳定性；
- 概要：
- 方法：
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