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            【中文期刊】 张波  李晨  等 《中国食品学报》 2014年14卷9期 7-13页

            【摘要】 根据碱裂解提取大肠杆菌质粒的原理与程序,借鉴Anderson和O' Sullivan的乳酸菌质粒提取方法,使酶解破壁和碱破膜变性相结合,通过优化乳酸菌质粒提取中酶浓度、酶解时间、质粒沉淀条件,提出1种高效提取乳酸菌质粒的方法.在此基础上,分...

            【关键词】 乳酸菌质粒提取简单快速

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            【中文期刊】 喻春函  宋辉  等 《生物工程学报》 2023年39卷11期 4708-4717页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 质粒是基因合成与测序领域中使用最为频繁的基因运载工具,然而传统的质粒DNA提取方法面临提取通量低、生产成本高等问题,无法满足日益增长的需求.本研究基于质粒提取原理,开发了双磁珠法(double-magnetic-bead method,DM...

            【关键词】 质粒提取双磁珠法高通量提取

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            【中文期刊】 符德佳  曾宪军  等 《广东畜牧兽医科技》 2023年48卷6期 22-27页

            【摘要】 肺炎克雷伯氏菌是一种全球广泛存在的条件致病菌,除了是常见的人医院获得性感染病原体外,近年来越来越多的发现表明其能够引起动物侵袭性感染,且该菌携带多种耐药基因.由于一个肺炎克雷伯氏菌细胞可以同时携带多个质粒,具有从环境中的捕获耐药性质粒、并在...

            【关键词】 肺炎克雷伯氏菌耐药基因质粒

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            【中文期刊】 黄南  程熠  等 《华中科技大学学报(医学版)》 2008年37卷6期 816-818页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 通过改进溶液Ⅱ配方,消除质粒DNA提取中的不可逆变性条带,提高质粒DNA提取的质量与得率.方法 取氨苄LB液体培养液中培养好的DH5α(pCDNA3),以NaOH系列梯度浓度/甘氨酸-NaOH缓冲液体系配制溶液Ⅱ,依据文献提供的方法 ...

            【关键词】 质粒DNA提取碱裂解法溶液Ⅱ

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            【中文期刊】 刘晶晶  束长龙  等 《生物技术通报》 2008年6期 120-123页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 改进了苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)内生质粒提取技术,提取了Bt库斯塔克亚种、以色利亚种和一株对鳞翅目害虫有活性的野生菌株的质粒,利用琼脂糖凝胶电泳分析了质粒图谱,进一步检测了质粒的浓度与纯度.实验结果...

            【关键词】 苏云金芽胞杆菌内生质粒提取

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            【中文期刊】 张林琳  李磊  等 《西安交通大学学报(医学版)》 2007年28卷1期 106-108页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 建立一种稳定、可靠的质粒DNA提取改良方法,探讨其在分子生物学实验研究中的应用价值.方法 将含有目的 质粒的菌株扩增后,运用改良后的碱裂解法进行质粒DNA小量提取,微量核酸仪测定提取质粒DNA的产量及纯度;采用琼脂糖凝胶电泳、内切酶酶...

            【关键词】 质粒DNA提取酶切转染

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            【中文期刊】 姚伟  周会  等 《应用与环境生物学报》 2005年11卷6期 776-778页ISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 介绍了一种改进的小量提取质粒DNA的方法,该方法用NH4Ac和LiCl代替常规方法中苯酚和氯仿的抽提,有效去除了样品中RNA和蛋白质;用95%乙醇代替无水乙醇沉淀质粒DNA,降低了终产物中盐和多糖等杂质的含量,获得的质粒DNA质量好,产率高...

            【关键词】 质粒DNA碱裂解法提取方法

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            【中文期刊】 钟万芳  蔡平钟  等 《遗传》 2003年25卷1期 71-72页MEDLINEISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 以苏云金芽孢杆菌库斯塔克亚种、猝倒亚种及以色列亚种为材料,介绍了低拷贝大型质粒DNA的小量提取方法,该法采用PEG 6000进行质粒纯化,省略了苯酚和氯仿抽提过程.实验证明,该法结果稳定,提取的质粒DNA产量和质量均符合大多数分子生物学实验...

            【关键词】 大型质粒低拷贝苏云金芽孢杆菌

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            【中文期刊】 杨献光  齐志广  等 《生物技术通报》 2003年6期 24-26页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 对质粒DNA及其结构、形态和功能进行了综述,介绍了碱裂解法提取质粒DNA的基本步骤,并对其提取过程中的注意事项进行了剖析,分析比较了不同提取方法的优点.

            【关键词】 质粒DNA提取碱裂解法

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            【中文期刊】 刘贤华  白晓军  等 《第三军医大学学报》 1999年7期 531页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:建立一种确实有效的更实用的小量质粒DNA的提取方法.方法:将一含有目的质粒的大肠杆菌扩增后采用改良后的方法提取质粒DNA,然后采用紫外分光光度计测定含量,并且进行酶切.结果:每毫升原细菌培养物质粒DNA的产量明显增高,且酶切效果极好....

            【关键词】 质粒DNA快速提取

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            【中文期刊】 胡小青  肖广原  等 《基础医学与临床》 2019年39卷5期 738-744页ISTICCA

            【摘要】 目的 优化和改进质粒提取方法,以提高质粒的提取效率,增加其在哺乳动物细胞中的表达效率.方法 分别在室温条件和4℃条件提取质粒,并将细菌裂解、过柱和洗脱3个过程分解在两种温度下提取质粒;使用紫外分光光度计和琼脂糖凝胶电泳分别检测质粒浓度和超螺...

            【关键词】 质粒提取质粒构型低温

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            【中文期刊】 杨振苹  张静静  等 《中国医药科学》 2020年10卷13期 11-14页

            【摘要】 目的 比较四种去内毒素质粒提取试剂盒所提质粒中内毒素的水平.方法 本实验选用了四种商业化去内毒素试剂盒进行质粒提取,然后用鲎试剂凝胶法和动态浊度法对所提质粒DNA进行内毒素检测.结果四种试剂盒所提取的质粒得率、A260/A280、A260/...

            【关键词】 质粒内毒素去内毒素质粒提取试剂盒

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            【中文期刊】 王欣  徐剑  等 《基础医学与临床》 2017年37卷5期 619-624页ISTICCA

            【摘要】 目的 构建含人PPARγ2基因启动子的荧光素酶表达质粒,通过建立稳定转染该质粒的细胞系,建立传统中药细胞学筛选方法.方法 首先以pGL3-Basic-Luc和pGL3-Enhancer-Luc为载体构建含不同长度人PPARγ2基因启动子序列...

            【关键词】 过氧化物酶体增生物激活受体γ2中药水溶性提取质粒构建

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            【中文期刊】 李卫玲  易初丽  《江汉大学学报(自然科学版)》 2019年47卷1期 36-40页

            【摘要】 目的 比较几种不同质粒提取试剂盒提取质粒中内毒素水平.方法 选用6种市售商业化试剂盒:QIAGEN质粒小提试剂盒Plasmid Mini Kit(12123),QIAGNE无内毒素质粒大提试剂盒EndoFree Plasmid Maxi K...

            【关键词】 质粒内毒素鲎试剂

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            【中文期刊】 李红民  步怀宇  等 《大学教育》 2019年1期 81-83页

            【摘要】 "质粒DNA提取"是生物学本科生必修专业课分子生物学实验的基本内容.为提高教学效果,教师以实验现象和结果作为切入点,引导学生解释现象、分析结果,启发学生对实验结果进行分析与讨论,并对讨论结果进行小结.实践证明,在实验课教学中,启发学生运用理...

            【关键词】 探究式深入学习质粒DNA提取分子生物学实验

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            【中文期刊】 苑丽娜  王定和  等 《生物技术通讯》 2011年22卷6期 864-866页ISTICCA

            【摘要】 目的:建立一种适用于酵母双杂交系统的简便快捷的酵母质粒提取方法.方法:以酿酒酵母为供试材料,用玻璃珠振荡法破除酵母细胞壁,提取酵母总DNA,最后通过电转化大肠杆菌DH10B获得目的质粒.结果:粗提得到的质粒可直接转化DH10B,作为模板用于...

            【关键词】 玻璃珠法质粒提取酵母质粒酵母双杂交

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            【中文期刊】 马海利  金宁一  等 《中国生物制品学杂志》 2008年21卷3期 237-239,247页ISTICCSCDCABP

            【摘要】 目的 建立简便、快速、安全的乳酸菌质粒提取方法.方法 将文献报道的乳酸菌质粒提取方法和大肠杆菌质粒提取方法相结合,建立乳酸菌质粒提取方法.通过方法比较、溶菌酶浓度优化和酶切分析,验证该方法的可行性.结果 用所建立的方法提取的乳酸菌质粒电泳与...

            【关键词】 乳酸菌质粒提取

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            【中文期刊】 周国雁  郭凤根  等 《生物技术通讯》 2007年18卷5期 800-802页ISTICCA

            【摘要】 目的:为了达到批量提取质粒DNA的目的,在多次实验的基础上,建立一种经济、高效的质粒提取方法.方法:以pUC18、pET28b、pCAMBIA1304等3种质粒为材料,分别采用silica法和碱裂解法提取质粒DNA,通过质粒DNA浓度的紫外...

            【关键词】 质粒DNA提取碱裂解法

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            【中文期刊】 王友如  《生物技术》 2006年16卷6期 42-44页ISTICCA

            【摘要】 目的:简化操作流程,缩短提取时间,降低试验对操作者的危害.方法:该方法去除酚、氯仿等有害试剂,采用LiCl沉淀去除质粒制备物中小片段核酸(包括DNA和RNA);工程菌生长至对数期时通过加入氯霉素后不仅方便质粒DNA的提取过程中蛋白质的去除,...

            【关键词】 质粒DNA提取方法改进

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            【中文期刊】 祁汝峰  黄瑞  《中国血液流变学杂志》 2006年16卷4期 530-531,533页ISTICCA

            【摘要】 通过对质粒DNA提取过程的分析,探讨质粒DNA提取过程中的影响因素,分析影响质粒DNA纯度和量的关键因素,以利解决质粒提取过程中遇到的问题.

            【关键词】 质粒提取方法影响因素

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            【中文期刊】 张林琳  李翔  等 《第四军医大学学报》 2006年27卷18期 封2页ISTICCA

            【摘要】 <篇首> 1 材料和方法1.1 材料 含有人柯萨奇腺病毒受体(human Coxsackie and adenovirus receptor,hCAR)基因的真核表达质粒载体pIRES2-EGFP-hCAR由本研究所构建;转化菌E.coli D...

            【关键词】 质粒DNA酚氯仿提取

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            【中文期刊】 廖志红  赖祥进  等 《广西医科大学学报》 2006年23卷4期 555-556页ISTICCA

            【摘要】 目的:建立一种确实有效的pUHD10-3-p53质粒提取方法,为科学研究制备高纯度pUHD10-3-p53质粒奠定基础.方法:将克隆有Wt-p53基因的eDNA质粒(pUHD10-3-p53)转染感受态细菌E.coli DH5a菌株.经扩增...

            【关键词】 pUHD10-3-p53质粒提取纯化

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            【中文期刊】 张素娥  张潇月  等 《泰山医学院学报》 2017年38卷3期 287-289页

            【摘要】 目的 利用CTAB性质,建立一种快速、简单、高效的质粒DNA提取方法.方法 从CTAB的浓度、时间、pH值、温度和盐溶液浓度几个方面进行质粒DNA提取方法的探讨,与传统碱裂解方法进行比较,经DNA条带回收,PCR实验扩增已知插入片断,来验证...

            【关键词】 CTAB质粒DNA提取

            浏览:62 被引:8 下载:2
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            【中文期刊】 赵玉红  李欣  等 《实验技术与管理》 2017年34卷3期 35-38页

            【摘要】 为进一步增强学科间的交叉与渗透,提高学生灵活运用多学科知识与方法的能力,对质粒DNA提取及电泳检测实验进行改革.在改进经典碱裂解法提取质粒DNA、琼脂糖凝胶电泳检测质粒DNA的基础上,新增试剂盒方法提取质粒DNA、超微量分光光度计检测质粒D...

            【关键词】 质粒DNA提取质粒DNA检测电泳检测

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            【中文期刊】 许朋  余兰  等 《保健文汇》 2017年12期 294-295页

            【摘要】 分子生物学技术发展迅猛,提取质粒DNA方法向着高通量、快速高效、广泛适用的方向发展.本实验采用二氧化硅修饰的磁珠设计了一种快速分离质粒DNA的试剂盒,并设计了多种引物,探索同一质粒DNA对两对引物,同一基因组DNA对两对引物进行PCR验证....

            【关键词】 提取质粒

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            【中文期刊】 黄静  《保健文汇》 2017年6期 263页

            【摘要】 目的:构建人Bcl-2基因原核表达载体,并对其酶切鉴定.方法:将Bcl-2重组质粒转化进入经CaCl2法制备的大肠杆菌DH5α感受态细胞,筛选培养充分克隆,然后用碱裂解法分离提取重组质粒DNA,最后用限制性内切酶酶切重组质粒DNA,并跑电泳...

            【关键词】 人Bcl-2基因质粒转化CaCl2法

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            【中文期刊】 周鹤峰  邵敏  等 《遵义医学院学报》 2005年28卷3期 225-227页ISTIC

            【摘要】 目的对碱裂解法提取质粒DNA中主要试剂的作用进行研究.方法采用不同的溶液Ⅰ、溶液Ⅱ、溶液Ⅲ分别进行质粒DNA的提取.结果方法3得到质粒DNA的量明显偏少,方法4得到的质粒DNA含蛋白质较多.结论溶液Ⅰ对实验结果影响不大,溶液Ⅱ中的NaOH关...

            【关键词】 质粒DNA提取碱裂解法

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            【中文期刊】 薛仁镐  谢宏峰  等 《生物技术》 2005年15卷3期 44-46页ISTICCA

            【摘要】 碱裂解法是目前最为广泛应用的细菌质粒DNA的提取方法.但该法提取DNA所需时间较长,通常需要2h以上.为了快速提取质粒DNA,对常规碱裂法中溶液Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、RNA酶A及无水乙醇的反应时间由原来的5min、5min、10min、30min、1...

            【关键词】 改良快速提取细菌

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            【中文期刊】 王友如  崔洪志  等 《生物技术》 2005年15卷4期 41-43页ISTICCA

            【摘要】 目的:为了减化操作过程,减少药品对操作人员有直接或间接危害,提高农杆菌质粒DNA的产率和实验结果的稳定性.方法:对常规碱裂解法进行了改动,改进的方法通过加大菌液的收集量,利用LiCl沉淀RNA,简化操作流程和严格反映环境条件,并且在操作过程...

            【关键词】 农杆菌质粒DNA提取方法优化

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            【中文期刊】 金术超  杜春梅  等 《生物技术》 2005年15卷6期 44-46页ISTICCA

            【摘要】 以能够降解有机磷农药的两株侧孢芽孢杆菌BL-21和BL-22为研究对象,分别采用碱裂解法、试剂盒提取法和SDS法对侧孢芽孢杆菌BL-21和BL-22的质粒进行提取,并通过凝胶电泳和紫外分光光度法对提取结果进行分析,试验结果证明,适合侧孢芽孢...

            【关键词】 质粒侧孢芽孢杆菌提取方法

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            【中文期刊】 吴立柱  郑海洲  等 《生物学通报》 2004年39卷10期 53-54页ISTICCA

            【摘要】 碱裂解法是进行分子克隆实验中质粒DNA制备最为常用的方法.在实际实验操作过程中,对该实验方法进行了改进,改进的碱裂解法解除了所提质粒DNA中RNA污染及RNase的可能影响,快速提取法使阳性克隆的筛选更加迅速,快捷.两种方法的改进使实验更加...

            【关键词】 质粒DNA的制备快速提取碱裂解法

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            【中文期刊】 单世华  李春娟  等 《生物技术》 2003年13卷2期 19-20页ISTICCA

            【摘要】 常规的农杆菌质粒DNA提取常采用碱裂解和酚、氯仿提纯方法,得率较低,一般在50ng/μl以下.针对常规碱裂解法的不足,利用含有pCGⅡ双价载体的LBA4404菌株通过增加菌液收集量、改变提取流程中的反应条件等对常规方法进行了改良,去除了酚、...

            【关键词】 根癌农杆菌质粒DNA提取改良

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            【中文期刊】 李学伍  杨艳艳  等 《生物技术》 1999年9卷1期 40-42页ISTICCA

            【摘要】 <篇首> 通过两种不同方法对质粒DNA提取效果的比较,证实了阴离子交换树脂法能够获得高纯度的质粒DNA,满足分子生物学的试验要求,操作简便、快速,不污染实验室的环境,是一种较理想的制备高纯度质粒DNA的提取方法.

            【关键词】 质粒DNA提取高纯度

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            【中文期刊】 蔡晶晶  宋小平  等 《长江大学学报(自科版)医学下旬刊》 2014年11卷3期 121-124页

            【摘要】 慢病毒在多种疾病的基因治疗中作为理想的基因转移载体,然而慢病毒滴度不高的问题严重影响慢病毒载体在基因治疗中的推广应用,本文从慢病毒质粒提取、病毒包装、细胞培养、病毒纯化等方面对提高慢病毒滴度的研究现状做一综述.

            【关键词】 慢病毒载体质粒提取病毒包装

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            【中文期刊】 张怡  刘坤  等 《食品与生物技术学报》 2013年32卷11期 1194-1198页

            【摘要】 质粒提取是遗传工程操作的重要步骤.酵母细胞壁坚韧,不易破壁,使酵母质粒提取变得非常困难.为了获得一种快速、简便、高效、稳定的提取酵母质粒的方法,利用琼脂糖凝胶电泳、核酸蛋白测定仪和PCR扩增等方法,对玻璃珠液氮法、蜗牛酶法和试剂盒法提取的酵...

            【关键词】 酵母菌质粒提取玻璃珠液氮法

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            【中文期刊】 任志娟  李轶杰  等 《新疆农业科学》 2011年48卷4期 734-738页

            【摘要】 [目的]建立一种简便、快速、安全的乳酸乳球菌质粒提取方法.[方法]质粒提取采用文献报道的乳酸菌质粒提取与常用的大肠杆菌质粒提取相结合的方法,并对提取过程中溶菌酶浓度、溶菌酶处理方式和时间进行优化.[结果]采用改良后的方法提取乳酸菌质粒效果显...

            【关键词】 乳酸菌质粒提取

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            【中文期刊】 胡辉  余兴龙  等 《湖北畜牧兽医》 2011年9期 10-12页

            【摘要】 使用多种选择培养基,通过菌落形态、革兰氏染色、镜检和生化反应,对猪呼吸道、消化道中常规菌群进行初步分类,并使用碱变性法提取质粒。结果从健康猪呼吸道和消化道中分离培养出66株菌株(兼性厌氧菌),获得了长沙地区猪呼吸道、消化道中菌群的基本数据。...

            【关键词】 呼吸道消化道

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            【中文期刊】 韦明肯  李长秀  等 《长江大学学报(自然版)》 2011年08卷3期 270-272页

            【摘要】 针对传统质粒提取和纯化教学实验中重步骤轻原理、重结果轻现象的问题,提出了"明理、细察、分析"的质粒提取实验教学思路,印通过预习让学生明了整个实验的大原理以及每个步骤的小原理,强调实验中要注意几个关键现象,并学会对实验结果进行分析和评价.实践...

            【关键词】 质粒提取教学

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            【中文期刊】 孙晓东  韩立敏  等 《陕西教育学院学报》 2009年25卷2期 86-88页

            【摘要】 以含有原核表达载体pet21a和真核表达载体EGFP的DH5α系列菌株为材料,分别采用碱裂解法和试剂盒提取法提取质粒DNA,通过凝胶电泳分析,对两种质粒提取方法的各自特点进行了比较与分析.认为碱裂解法和试剂盒提取法提取质粒DNA均可进行后续...

            【关键词】 质粒DNA提取碱裂解法

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            【中文期刊】 陈绍兴  李沁  等 《天津农业科学》 2009年15卷5期 4-5页

            【摘要】 以质粒pBR322为对象,在经典的质粒提取方法的基础上进行了一些改进,将酚氯仿异戊醇抽提和氯仿异戊醇抽提省去.比较了简便方法和经典方法提取质粒的效果,结果显示:两种方法均能够提取出质粒DNA,RNA的量并没有比经典方法提出来的多;简便方法抽...

            【关键词】 质粒DNA提取方法

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