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【中文期刊】 付强 李艳 等 《生物医学工程学杂志》 2015年32卷1期 137-141页MEDLINEISTICPKUCA
【摘要】 本研究用聚乙烯亚胺(PEI)介导表达绿色荧光蛋白(GFP)的rAAV包装系统(pAAV-CMV-GFP、pAAVRC和pHelper)转染人胚肾293细胞(HEK293细胞).用ImagePro Plus6.0图像分析软件计算表达GFP的细...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 刘庆茹 王庆苓 等 《中国现代医学杂志》 2014年24卷26期 1-6页ISTICCA
【摘要】 目的 检测人胃癌细胞株中内皮细胞蛋白C受体(endothelial protein creceptor,EPCR)基因的mRNA表达水平,构建EPCR基因特异的短发夹RNA(shRNA)干扰载体,并通过内源性筛靶实验检测EPCR mRNA表...
【关键词】 内皮细胞蛋白C受体(EPCR)基因；胃癌细胞；短发夹RNA(shRNA)；
- 概要：
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【中文期刊】 李玮 谭建 《中华生物医学工程杂志》 2013年19卷2期 134-139页ISTICCA
【摘要】 目的 构建并鉴定既能在人端粒酶反转录酶(hTERT)启动子调控腺病毒早期区域1A(E1A)基因,又能在胶质纤维酸性蛋白(GFAP)启动子引导入钠碘转染体(hNIS)基因的腺病毒载体.方法 采用免疫印迹分析检测人脑星形胶质母细胞瘤细胞U87、...
【关键词】 条件复制腺病毒；人钠碘转染体基因；人端粒酶反转录酶启动子；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 曹善仁 刘慕君 等 《现代生物医学进展》 2010年10卷13期 2401-2403,2415页ISTICCA
【摘要】 目的:提高核糖体基因区打靶载体的转染效率,优化其电转染肝细胞的孵育条件.方法:在其它电转染参数一致的前提下,设计了6组不同的孵育条件,通过分析转染后细胞活率以及48h后目的基因GFP的表达效率,来比较多组不同的孵育条件对电转染效率的影响.结...
【关键词】 核糖体基因区打靶载体；电转染；孵育条件；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 刘雨潇 张志文 等 《生物化学与生物物理进展》 2011年38卷11期 988-994页SCIISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 体细胞重编程是在特定的条件下使已分化的细胞转变成为另一种细胞.体细胞重编程的方式主要有体细胞核移植技术、细胞融合技术、细胞提取物处理技术及特定转录因子转染技术.现有研究表明,细胞提取物重编程技术在体细胞重编程中发挥着一定的作用,为此,就该技...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 邓晓芬 杨晓佳 等 《生物技术通报》 2019年35卷4期 223-228页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 旨在对编码融合蛋白和抗体的重组质粒转染CHO-S细胞的转染条件进行摸索优化,提高外源基因的转染效率,从而增加外源蛋白的表达.应用Amaxa Nucleofector-Ⅱ 电转仪,从电转染程序、质粒用量及细胞用量三方面着手,最终发现编码融合蛋...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 程卉 王云龙 等 《中国中药杂志》 2018年43卷21期 4311-4316页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 为了观察新藤黄酸(gambogenic acid,GNA)对肺癌血管生成的影响及初步的作用机制.该实验以新藤黄酸处理肺腺癌A549细胞的条件培养基培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC),建立非直接接触型细胞共培养体系;应用Matrigel胶建立...
【关键词】 新藤黄酸；人脐静脉内皮细胞(HUVEC)；肺癌A549；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 曹春萍 狄文君 等 《中华微生物学和免疫学杂志》 2018年38卷10期 748-752页ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 目的 初步探讨IL-22激活自噬信号在保护过氧化氢(H2 O2)介导肝癌细胞损伤中的作用.方法 脂质体转染含有LC3基因并表达GFP的质粒(pEGFP-LC3)的HepG2细胞,在无胎牛血清(FBS)、1％FBS或10％FBS培养基培养条件...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 张晓玲 陈剑 等 《细胞与分子免疫学杂志》 2018年34卷10期 880-884页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 探讨shRNA干扰HIF-1α表达对缺氧条件下人角膜上皮细胞(hCEC)血管内皮生长因子(VEGF)和色素上皮衍生因子(PEDF)表达的影响.方法 针对HIF-1α mRNA序列靶点设计及合成3个小发夹RNA(shRNA),分别在体外...
【关键词】 缺氧；小发夹RNA；自发永生化人角膜上皮细胞；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 石梅 年四季 等 《细胞与分子免疫学杂志》 2018年34卷10期 870-875页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 构建CD20真核表达载体,在HEK293T细胞中高效表达CD20蛋白.方法 以人外周血单个核细胞(PBMC)总RNA为模板,反转录PCR扩增得到CD20基因,并插入真核表达载体pCMV3-C-His,PCR初步验证后,再测序验证.将重...
- 概要：
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【中文期刊】 张玲 邵华 《中国肿瘤生物治疗杂志》 2018年25卷7期 716-720页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:探讨FOXO3a在缺氧诱导骨肉瘤细胞顺铂(cisplatin,DDP)耐药中的作用.方法:利用RT-PCR和Western blot-ting方法检测人骨肉瘤细胞U-2OS在常氧及缺氧条件下FOXO3a的表达水平,Western bl...
【关键词】 叉头转录因子O亚型3a；缺氧；骨肉瘤；
- 概要：
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【中文期刊】 于丽丽 胡博 等 《中国生物工程杂志》 2018年38卷7期 1-6页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:借助实验室前期质谱分析技术和数据分析研究基础,采用免疫共沉淀(Co-IP)和蛋白质沉降实验(GST pull-down)验证HBV X蛋白与Tab1蛋白的相互作用,为进一步研究HBx在HBV慢性感染致癌机制中的作用提供一定的实验依据....
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 苗莹莹 陈杰 等 《神经解剖学杂志》 2017年33卷5期 567-572页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:探讨Notch1/JNK信号通路在缺氧引起的神经元损伤中的作用.方法:原代培养新生SD大鼠皮层神经元,利用低氧条件培养建立缺氧模型.利用CCK-8实验检测在低氧诱导的不同时间,神经元的活性及siRNA干扰后神经元的活性;利用RT-qP...
- 概要：
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【中文期刊】 孙莉 杨全余 等 《解放军医学杂志》 2017年42卷4期 320-325页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 探讨应用siRNA技术沉默EPAS1 (HIF-2α)基因表达对低氧条件下培养的大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖的影响.方法 原代培养大鼠PASMCs共采用免疫荧光法进行鉴定.构建特异性EPAS1 siRNA脂质体,转染PAS...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 粟倩雅 林彤 等 《中华皮肤科杂志》 2017年50卷10期 706-709页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 优化Wnt5A特异性siRNA转染原代人黑素细胞的实验条件,建立沉默Wnt5A基因的模型.方法 培养原代人黑素细胞,将不同浓度(0、20.0、33.3、40.0、60.0 nmol/L)的阳性参照基因GAPDH特异性siRNA通过脂质...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 李凤娥 向国艳 等 《吉林大学学报（医学版）》 2016年42卷3期 612-616,后插4页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:应用脂质体介导的转染方法将pEGFP-N1转染入Fisher大鼠甲状腺滤泡上皮细胞中,并获得较佳的优化方案,阐明该优化条件在转染其他目的基因时的适用性.方法:分别选取不同配比的质粒和脂质体,将pEGFP-N1转入Fisher大鼠甲状腺...
- 概要：
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【中文期刊】 李楚彦 董瓅瑾 等 《中华神经外科杂志》 2012年28卷1期 88-92页ISTICPKUCSCD
【摘要】 目的 构建温度敏感型永生化的骨髓间充质干细胞( tsSV40LTag - BMSCs).观察不同温度条件下,tsSV40LTag - BMSCs的增殖情况.方法 分离、培养大鼠原代骨髓间充质干细胞(BMSCs),FITC标记CD29、CD3...
- 概要：
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【中文期刊】 何志强 范平 等 《中华普通外科杂志》 2012年27卷6期 475-478页ISTICPKUCSCD
【摘要】 目的 观察体外乏氧培养条件下胰腺癌细胞系Panc-1中HIF-1α和TLR4的表达,探讨HIF-1α在低氧条件下对胰腺癌细胞TLR4的调控作用.方法 低氧箱培养和CoCl2化学缺氧法模拟肿瘤缺氧环境,RT-PCR、免疫荧光法和流式细胞法分别...
【关键词】 胰腺肿瘤；Toll样受体4；缺氧诱导因子-1,α亚基；
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 蒋永兴 方艳秋 等 《吉林大学学报（医学版）》 2012年38卷5期 870-875,封2页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建乏氧诱导因子的氧依赖降解结构域(ODDD)调控的乏氧特异性表达荧光报告载体,探索其乏氧调控目的基因表达的可行性.方法:基因重组技术构建含有序列ODDD403-601aa、ODDD549-575aa和其2串联体调控增强型绿色荧光蛋白...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 程巧 厉红元 等 《第三军医大学学报》 2011年33卷3期 286-289页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 研究碱基切除修复途径(base excision repair,BER)关键因子PARP1在Ku70缺失的条件下是否参加DNA双链断裂(double-strand break, DSB)的修复.方法 针对人类Ku70构建编码shRNA...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 李兴花 何敏 等 《实用儿科临床杂志》 2011年26卷21期 1664-1667页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 探讨小干扰RNA( siRNA)对体外人CD4+ CD25-T淋巴细胞MLL1基因表达的抑制效果及体外转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导调节性T淋巴细胞(iTreg)的影响,为治疗与Treg失衡相关的临床疾病提供理论基础.方法 采...
- 概要：
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【中文期刊】 李晓愚 刘方欣 等 《现代预防医学》 2011年38卷16期 3285-3287页ISTICPKUCA
【摘要】 [目的]探讨在乏氧条件下,应用RNA干扰技术沉默HIF-1α基因表达对人宫颈癌细胞株U14辐射敏感性的影响.[方法]构建针对HIF-1α基因的siRNA,将其结合到pSilencer2.1-U6-neo质粒表达载体上,脂质体转染法转入宫颈癌...
- 概要：
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【中文期刊】 詹从清 黄静 等 《神经解剖学杂志》 2011年27卷3期 253-257页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:以原代培养的小鼠大脑皮质神经元为研究工具,优化电穿孔转染条件.方法:通过设置不同的电压和脉冲时间组合等电转染条件,将表达绿色荧光蛋白(GFP)的shNC质粒导入小鼠大脑皮质神经元,24 h后观察并比较神经元的转染效率,确定最佳电转染条...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 李涛 马红婕 等 《中华眼科杂志》 2011年47卷3期 197-201页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 体外培养人视网膜微血管内皮细胞,探讨重组rAAV2-色素上皮衍生因子(PEDF)对该细胞在不同氧环境下增殖的影响.方法 实验研究.2%胰蛋白酶和0.1%Ⅱ型胶原酶消化视网膜,获得视网膜微血管内皮细胞;接种于预先包被纤维连接蛋白的培养瓶...
- 概要：
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- 结论：
【中文期刊】 赵新宇 聂春来 等 《细胞与分子免疫学杂志》 2011年27卷9期 972-974页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建人DRR1基因的真核表达载体,通过转染HEK293细胞建立稳定的DRR1表达细胞株.方法:通过改造质粒pIRES,在其MCS1和MCS2中分别引入串联亲和纯化标签和绿色荧光蛋白基因,形成一个新的表达质粒pFSIG.将PCR扩增的D...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 李倩倩 邓志华 等 《中国肿瘤生物治疗杂志》 2011年18卷3期 251-257页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:观察人端粒酶逆转录酶基因(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)启动子驱动的肿瘤抑素(tamstatin)基因在肝癌细胞HepG2内特异性表达及其体外抗血管形成的作用.方法:构建ph...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 邢宏运 刘霆 等 《中华血液学杂志》 2011年32卷5期 349-351页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 <篇首> 1998年Thomson等[1]成功分离、建立了人胚胎干细胞(hESC)细胞系之后,有关hESC的研究得到迅猛发展.hESC的自我更新和分化过程涉及到多种相关基因表达的活化或抑制,而开展这方面的研究需要有效的转基因技术来完成.由于hE...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 卢夏英 杨蓓 等 《生殖与避孕》 2010年30卷8期 554-559页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 干细胞是具有多向分化潜能的原始细胞,在一定条件下可以分化为多种甚至所有的组织细胞,其中也包括性类固醇激素生成细胞,转染类固醇激素生成因子-1(steroidogenic factor-1,SF-1)和不转染SF-1的胚胎干细胞在离体诱导分化...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 沈艳 范鹏举 等 《中国危重病急救医学》 2010年22卷11期 666-668页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 探讨烧伤血清复合缺氧条件下乳鼠心肌细胞p38丝裂素活化蛋白激酶(p38MAPK)活化与细胞凋亡之间的关系.方法 采用原代培养的乳鼠心肌细胞,按照处理因素不同分为3组:正常对照组细胞自然生长;烧伤缺氧组细胞给予烧伤血清+缺氧刺激(含10...
【关键词】 p38丝裂素活化蛋白激酶；烧伤；缺氧；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 王伟佳 张秀明 等 《中国生物工程杂志》 2010年30卷4期 77-82页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:比较不同电转染条件下,真核表达载体转染HL60细胞的效率,筛选得到针对HL60细胞最佳的电转染条件.方法:采用pDsRED-C1真核表达载体,分别在2mm和4mm电转杯中依照不同电转条件对HL60细胞进行转染,根据存活细胞所占比例确定...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 李涌 白松涛 等 《现代预防医学》 2010年37卷4期 728-732页ISTICPKUCA
【摘要】 [目的]建立环介导等温扩增(LAMP)快速检测人类嗜T淋巴细胞病毒I型方法. [方法]将HTLV-I的PX基因转染pUC57构建HTLV-I检测参考菌株,针对PX基因设计LAMP和PCR引物,用正交实验设计优化反应体系,并考察方法的特异性和...
【关键词】 人类嗜T淋巴细胞病毒I型；环介导等温扩增；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 丁爱军 任丽伟 等 《第三军医大学学报》 2010年32卷16期 1712-1715页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 优化聚乙烯亚胺(polyethylenimine,PEI)介导的细胞转染以提高目的 基因在细胞中的表达强度.方法 根据PEI/DNA不同的质量比(0:1、0.5:1、1:1、2:1、3:1、4:1、5:1、6:1、7:1、8:1、9:...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 滕勇 胡蕴玉 等 《解放军医学杂志》 2010年35卷10期 1230-1234页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 建立永生化人骨髓基质干细胞系,为组织工程提供种子细胞库及标准化细胞系.方法 取单克隆培养的人骨髓基质干细胞,采用脂质体转染法将人端粒酶反转录酶(hTERT)基因导入细胞,G418筛选后获得阳性克隆,体外连续扩增培养,RT-PCR检测转...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 薛妍 杨静悦 等 《中国肿瘤生物治疗杂志》 2010年17卷4期 414-418页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:研究小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)抑制Rac1b表达后对胃癌AGS细胞血管生成相关分子表达的影响.方法:体外合成针对Rac1b基因的siRNA序列(Rac1b siRNA),脂质体法转染AGS细...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 张璐 尹战海 等 《吉林大学学报（医学版）》 2010年36卷3期 429-433,封2页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建人真核表达的TAZ慢病毒载体pLenti6/V5-DEST-TAZ,转染293FT 细胞获得重组慢病毒颗粒,探讨TAZ对成骨前体细胞MC3T3-E1 分化的调控作用.方法:将已经过测序验证的含有TAZ基因慢病毒入门质粒pENTR(...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 苏踊跃 孙林辉 等 《第三军医大学学报》 2010年32卷14期 1546-1548页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 建立钙/钙调蛋白依赖性丝氨酸蛋白激酶(calcium/calmodulin-dependent serine protein kinase, CASK)剔降血管内皮细胞株,初步探讨其对短暂缺氧的反应性.方法 采用RNAi技术和脂质体介...
【关键词】 缺氧；钙/钙调蛋白依赖性丝氨酸蛋白激酶；血管内皮细胞；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 江丹 吴强 等 《眼科研究》 2010年28卷9期 810-815页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 比较可溶性血管内皮生成因子受体1(sFlt-1)胞外第2～3区和第2～4区对缺氧、高糖条件下血管内皮细胞增生、迁移及细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK 1/2)信号转导通路的影响.方法 以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法从人胎盘组织...
【关键词】 糖尿病视网膜病变；可溶性血管内皮生成因子受体1；基因转染；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 石榴 蒋亚琴 等 《中国生物工程杂志》 2010年30卷5期 81-86页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:利用荧光测钙的方法,建立了人源代谢型谷氨酸受体5亚型(mGluR5)的高通量筛选模型.方法:通过基因合成得到mGluR5的ORF区域,并将其构建到pCNDA3.1真核表达载体上.将此重组质粒转染HEK293细胞,利用抗生素筛选和钙流检...
【关键词】 代谢型谷氨酸受体5亚型(mGluR5)；高通量筛选(HTS)；激动剂/拮抗剂；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 吴泽宇 彭林 等 《中华普通外科杂志》 2009年24卷8期 684-685页ISTICPKUCSCD
【摘要】 <篇首> 肝转移是影响胃癌预后的重要因素.Okano等[1]报道90例胃癌肝转移患者(同时性肝转移78例,异时性肝转移12例)中仅19例有条件行肝转移灶切除术,该19例患者1年和3年生存率分别为77%和34%.Hiratsuka等[2]报道胃癌...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 晏维 田德安 等 《中华肝脏病杂志》 2009年17卷4期 284-287页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 研究缺氧对人肝癌细胞SMMC-7721黏着斑激酶(FAK)表达的影响以及FAK表达对SMMC-7721细胞侵袭能力的影响.方法 通过1%体积分数O2的低氧培养建立人肝癌细胞SMMC-7721物理缺氧模型,Western blot检测F...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
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