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            【中文期刊】 刘媛媛  《华西药学杂志》 2019年34卷4期 337-342页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 通过Box-Behnken设计优化去氢骆驼蓬碱纳米结构脂质载体的处方,并评价其对小鼠接种人宫颈癌Hela细胞的抑制效果.方法 采用乳化蒸发-低温固化法制备去氢骆驼蓬碱纳米结构脂质载体,以药物用量、脂质浓度、表面活性剂浓度作为自变量,粒...

            【关键词】 去氢骆驼蓬碱纳米结构脂质载体Box-Behnken设计

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            【中文期刊】 韩亚丽  杨冠恒  等 《中国生物工程杂志》 2018年38卷7期 50-57页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:慢病毒载体(lentiviral vector,LVV)是一种有效的基因治疗导入系统.拟用已研发的携带人的β-珠蛋白基因自删除慢病毒载体,优化其表达有效性和提高其病毒颗粒数.方法:比较三款不同的启动子预测软件的分析结果,分别构建三种不...

            【关键词】 β-地中海贫血自删除慢病毒载体优化

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            【中文期刊】 陈伟  舒健虹  等 《生物技术通报》 2016年32卷10期 219-226页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 从黑麦草(Lolium perenne L.)根际土壤中分离得到28份菌株,采用刃天青(chrome azural S,CAS)平板检测法定性、定量筛选出1株产铁载体能力较强的细菌 WN-H3,经过菌落形态、生理生化特征、16S rDNA ...

            【关键词】 载体产生菌筛选鉴定

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            【中文期刊】 陈婷婷  董战旗  等 《微生物学报》 2016年56卷10期 1561-1570页ISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 [目的]家蚕核型多角体病毒(Bombyx mori nucleopolyhedrovirus,BmNPV) lef-11基因作为杆状病毒高度保守的晚期表达因子之一,对病毒晚期基因的表达极其重要.因此对lef-11基因进行有效RNA干扰将提高...

            【关键词】 家蚕家蚕核型多角体病毒RNA干扰

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            【中文期刊】 傅小蒙  孔令聪  等 《中国生物工程杂志》 2015年35卷10期 86-90页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 毕赤酵母(Pichia pastor)表达系统是近年发展起来的一种高效表达外源蛋白的系统,利用该系统表达外源基因具有良好的应用前景.尽管毕赤酵母表达系统具有比较完备的基因表达调控机制和对真核基因表达产物的加工修饰能力,但由于基因本身及表达系...

            【关键词】 毕赤酵母表达载体菌株

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            【中文期刊】 张学敏  金莉莉  等 《生物工程学报》 2014年30卷8期 1172-1181页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 抗菌肽作为新一代抗生素的潜在应用价值使其备受关注,大量高纯度的抗菌肽是开展基础及临床实验的关键.天然来源的抗菌肽资源有限、纯化困难,化学合成抗菌肽成本高、活性不稳定,因此通过基因重组表达得到大量抗菌肽是低成本、高效益的方法.目前采用大肠杆菌...

            【关键词】 抗菌肽载体蛋白融合表达

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            【中文期刊】 李国坤  高向东  等 《中国生物工程杂志》 2014年34卷1期 95-100页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目前,哺乳动物细胞已成为生产多种生物药物的首选宿主细胞.哺乳动物细胞表达系统可进行翻译后修饰,表达的重组蛋白接近人源构象,因此被大量用于治疗性重组蛋白的生产,如何建立高效的哺乳动物细胞表达系统也受到研究者们的重视.随着基因组学、转录组学、蛋...

            【关键词】 高效表达载体染色质开放元件宿主细胞改造

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            【中文期刊】 路晓庆  白文启  等 《中华实验外科杂志》 2020年37卷7期 1223-1225页ISTICCA

            【摘要】 目的:构建雌激素受体α配体结合域(ERα-LBD)表达载体,优化表达条件得到可溶性ERα-LBD蛋白。方法:在Addgene网站检索关键词ESR(雌激素受体,estrogen receptor),选择符合条件的质粒载体pcDNA-HA-ER...

            【关键词】 雌激素受体α配体结合域重组表达载体条件优化

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            【中文期刊】 王睿  《江苏医药》 2018年44卷7期 737-741,封2页ISTICCA

            【摘要】 目的 探讨不同体外转染条件对酸敏感阳离子聚合物基因载体bPOEAA包裹的荧光素酶质粒pGL3复合物转染效率的影响.方法 获得最佳转染效率后,利用bPOEAA包裹绿色荧光蛋白质粒pEGFP-N1,转染非洲绿猴肾成纤维细胞COS-7和小鼠成纤维...

            【关键词】 阳离子聚合物基因载体转染优化

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            【中文期刊】 安晨  《中国生物制品学杂志》 2014年27卷4期 568-573页ISTICCSCDCABP

            【摘要】 治疗性单克隆抗体的市场需求日益增长,因此如何分离得到高产的稳定表达细胞株及缩短研发过程成为此类研究的热点.在整个治疗性单克隆抗体的研发过程中,哺乳动物细胞表达载体的设计及其优化作为第一步就显得尤为重要.本文从基因转录水平的作用元件、作用方式...

            【关键词】 单克隆抗体哺乳动物细胞作用元件

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            【中文期刊】 马春玲  《世界肿瘤杂志》 2010年9卷1期 1-4页

            【摘要】 本文简要综述腺病毒载体的研究现状,包括各型载体的构成、优势与缺陷,及其相应的优化策略,并指出在我国人群中腺病毒载体作为疫苗和基因治疗的工具所应采取的优化措施.

            【关键词】 腺病毒载体构建优化

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            【中文期刊】 焦志勇  杨东亮  《国外医学(流行病学传染病学分册)》 2001年28卷3期 101-104页ISTICCA

            【摘要】 为进一步增强DNA免疫诱导的特异性抗病毒细胞免疫,近年,国内外学者采用了多种策略来增强DNA免疫的效果.这些策略包括:DNA疫苗的载体优化、基因的转入、体内所表达抗原的处理及提呈、协同刺激分子和细胞因子的应用、多种疫苗的协同作用等,本文对几...

            【关键词】 DNA疫苗细胞免疫免疫效应

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            【学位论文】 作者:刘江 导师:亓宝秀   李新征   山东农业大学   生物学 细胞生物学(硕士) 2013年

            【摘要】 超长链多不饱和脂肪酸(very long chain polyunsaturated fatty acids, VLCPUFAs)是指含3个或3个以上双键且碳链长度大于18个碳原子的直链脂肪酸,如花生四烯酸(AA,20:4Δ5,8,11,1...

            【关键词】 超长链多不饱和脂肪酸去饱和酶

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            【学位论文】 作者:何生美 导师:薛永常   张秀军   大连工业大学   化学工程与技术 生物化工(硕士) 2009年

            【摘要】 AP-1是一种重要的转录因子,其活性失调与肿瘤等多种疾病直接相关.利用AP-1荧光素酶报告基因筛选,发现人ac3-33基因可抑制佛波酯和离子霉素(PMA+Ionomycin)共同诱导的AP-1转录活性.ac3-33(GenBank name...

            【关键词】 ac3-33原核表达载体

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            【学位论文】 作者:李霞 导师:刘亢丁   吉林大学   临床医学 神经病学(硕士) 2009年

            【摘要】 HIV-1慢病毒载体可感染非分裂细胞,具有转移外源基因片段大、使目的基因长期稳定表达、不易诱发宿主免疫反应等优点,是脑梗死基因治疗的理想载体.本实验在慢病毒载体三质粒包装系统基础上,将野生型HIV-1基因组分装在四个质粒中,构建优化新型HI...

            【关键词】 HIV-1慢病毒载体绿色荧光蛋白

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            【学位论文】 作者:李魁彪 导师:徐红   张晓光   中国疾病预防控制中心   生物学 病原生物学(硕士) 2008年

            【摘要】 自1997年H5N1禽流感病毒开始感染人以后,人间病例不断发生,在泰国、印度尼西亚、中国和巴基斯坦还出现过有限的人传人的病例,这表明H5N1流感病毒正在不断进化,一旦H5N1流感病毒获得人传人的能力,引起的世界大流行将给人类带来巨大的灾难....

            【关键词】 H5N1密码子优化

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            【中文期刊】 李书祥  韩睿  等 《生物化学与生物物理进展》 2011年38卷8期 751-758页SCIISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 通过截短玉米黑粉菌CYP51(P450-14DM,UmCYP51)基因(去除编码跨膜区部分)和选取不同的表达载体,构建了9种重组表达质粒,在大肠杆菌中进行UmCYP51基因的表达,发现只有BL21(DE3)/PET32-Um-35重组表达工...

            【关键词】 UmCYP51翻译起始区稀有密码子

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            【中文期刊】 林美璇  周小满  等 《生物技术通报》 2020年36卷1期 81-87页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 旨在研究大肠杆菌产磷脂酰肌醇特异性磷脂酶C(PI-PLC)的发酵表达和分离纯化,探究PI-PLC酶切GPI锚定蛋白的效果.依据NCBI数据库中蜡样芽孢杆菌的PI-PLC的基因序列,按照大肠杆菌的密码子偏好性进行密码子优化,合成相应基因序列并...

            【关键词】 磷脂酰肌醇特异性磷脂酶C蜡样芽孢杆菌密码子优化

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            【中文期刊】 陈和锋  朱晁谊  等 《生物技术通报》 2020年36卷1期 209-219页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 瓦伦西亚烯是一种倍半萜类化合物,广泛应用于香水、香皂、食品和饮料等工业制造上.但由于其自然含量极低,且目前获取瓦伦西亚烯的方法较为麻烦且花费高,因而构建细胞工厂进行瓦伦西亚烯的生物合成是更为高效和环保的方法.选取酿酒酵母(Saccharom...

            【关键词】 酿酒酵母瓦伦西亚烯基因敲除

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            【中文期刊】 朱燕  韩小韦  等 《生物工程学报》 2019年35卷5期 827-836页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 核酸外切酶Ⅷ(ExonucleaseⅧ,ExoⅧ)是一种不依赖于ATP的dsDNA 5’-3'核酸外切酶,可作为体外DNA重组反应极具应用价值的候选蛋白.目前关于ExoⅧ在体外DNA重组反应中的应用尚未有文献报道.本研究构建了保留完整外切活...

            【关键词】 核酸外切酶Ⅷ截短体表达纯化体外同源重组

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            【中文期刊】 赵加玲  武舒佳  等 《生物工程学报》 2019年35卷9期 1771-1786页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 Rv2742是本课题组前期基于蛋白质基因组学策略从结核分枝杆菌Mycobacterium tuberculosis H37Rv中发现、鉴定的遗漏注释基因.文中旨在建立结核分枝杆菌H37Rv漏注释蛋白Rv2742的可溶性诱导表达、纯化体系,为...

            【关键词】 结核分枝杆菌新基因原核表达

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            【中文期刊】 董聪  高庆华  等 《生物技术通报》 2019年35卷7期 114-120页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 旨在获得表达量高的FAD依赖的葡萄糖脱氢酶.通过FAD依赖的葡萄糖脱氢酶密码子优化,人工合成基因片段,构建重组表达载体pMD-GDH,转化毕赤酵母X33菌株后利用甲醇诱导培养实现分泌表达.结果显示,经试管水平筛选阳性转化子获得一株酶活高且稳...

            【关键词】 FAD依赖的葡萄糖脱氢酶密码子优化重组毕赤酵母

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            【中文期刊】 张钰文  袁航  等 《生物技术通报》 2019年35卷9期 93-98页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 筛选和构建高效降解羽毛角蛋白的菌株,以提高角蛋白酶分泌表达量.从全国5个不同地方的猪、羊圈土壤中取样,在牛奶平板上进行初筛,以羽毛为唯一碳氮源对产角蛋白酶菌株进行复筛.通过形态学观察、16S rDNA序列分析,对菌株进行分类鉴定.为进一步提...

            【关键词】 角蛋白酶异源表达信号肽

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            【中文期刊】 孙佩文  唐小琳  等 《中草药》 2019年50卷11期 2675-2682页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 对白木香Aquilaria sinensis AsWRKY62转录因子进行分子克隆、原核表达,并对其进行生物信息学分析和表达特性分析,为深入研究AsWRKY62在白木香生长发育、沉香形成等方面的功能奠定基础.方法 以白木香愈伤组织总R...

            【关键词】 白木香WRKY转录因子

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            【中文期刊】 张川  张悦  等 《微生物学报》 2019年59卷7期 1318-1330页ISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 [目的]克隆多形拟杆菌(Bacteroides thetaiotaomicron) Heparinase Ⅰ基因,在大肠杆菌(Escherichia coli)中进行基因工程表达获得重组酶SUMO-Bt-HepI和Bt-HepI,并研究其酶...

            【关键词】 多形拟杆菌肝素酶ⅠSUMO-Tag

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            【中文期刊】 高燕  陈琪  等 《国际病毒学杂志》 2019年26卷2期 108-111页ISTICPKU

            【摘要】 目的 用原核表达系统表达水痘-带状疱疹病毒(varicella-zoster virus,VZV)糖蛋白(glycoprotein,g)E胞外区,并初步评价其免疫效果.方法 将VZV gE胞外区经密码子优化后,克隆至原核表达载体pET-48...

            【关键词】 水痘-带状疱疹病毒糖蛋白E原核表达

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            【中文期刊】 钟李婷  陈秀珍  等 《生物技术通报》 2019年35卷12期 10-15页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 对广藿香的法尼基焦磷酸酶(PatFPPS)进行重组蛋白的原核表达,并筛选与之互相作用的蛋白.利用PCR扩增PatFPPS编码区并连接到pGEX-6P-1表达载体,测序验证后将质粒转化BL21(DE3)表达菌株,并用IPTG诱导表达蛋白,最终...

            【关键词】 广藿香蛋白表达广藿香醇

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            【中文期刊】 刘璐  孙敬蒙  等 《华西药学杂志》 2019年34卷2期 131-135页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 优选栀子提取物类脂质体粉末的制备工艺并进行质量评价.方法 采用改良-薄膜分散法制备栀子提取物类脂质体,结合单因素考察法和L9(34)正交试验法,以包封率为考察指标,考察表面活性剂HLB值、载体与药物比值、表面活性剂与胆固醇摩尔比、水合...

            【关键词】 改良-薄膜分散法栀子提取物类脂质体

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            【中文期刊】 许昊  刘小亮  等 《第三军医大学学报》 2019年41卷9期 866-870页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 优化Tn5转座酶纯化和组装过程,建立少量细胞高质量转录组深度测序文库(RNA-Seq)的构建策略.方法 构建Tn5转座酶表达载体pSUMO-Tn5,优化Tn5转座酶表达、亲和纯化和组装过程,比较不同组装方式的Tn5转座酶构建少量RAW...

            【关键词】 Tn5转座酶RNA-seq文库构建

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            【中文期刊】 常鹏  尹华  等 《微生物学报》 2019年59卷1期 68-78页ISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 [目的]在白念珠菌中建立一个快捷方便经济的基因敲除与筛选标记再循环的DNA操作系统.[方法]通过Exo III介导的不依赖于连接酶的克隆策略,在异源筛选标记基因CmLEU2、CdHIS1和CdARG4基因的两侧分别插入了loxP位点,成为筛...

            【关键词】 白念珠菌基因敲除Tet-on

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            【中文期刊】 张玲楷  李永锋  等 《生物工程学报》 2018年34卷2期 216-223页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 猪瘟(CSF)是由猪瘟病毒(CSFV)引起的一种毁灭性传染病,给养猪业造成重大经济损失.猪瘟兔化弱毒疫苗(C株)是一株非常安全、有效的优秀弱毒疫苗,对各年龄和品种的猪都极其安全,同时对不同基因亚型的CSFV均能提供有效的免疫保护.在现地,C...

            【关键词】 猪瘟病毒猪圆环病毒2型活病毒载体

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            【中文期刊】 王奕博  杜梓萱  等 《中草药》 2018年49卷11期 2715-2721页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 凝胶贴膏属于新型透皮给药载体,可以克服传统橡皮膏、黑膏药使用不便、刺激性强等缺点,是中药现代化的重要一环,但目前其发展被基质辅料种类、挥发性药物处理方式等关键因素制约.对2000-2017年与中药凝胶贴膏基质优化和挥发油处理方式有关的文献共...

            【关键词】 凝胶贴膏剂基质配比实验设计方法

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            【中文期刊】 徐艳  张心怡  等 《中草药》 2018年49卷17期 4014-4021页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 采用热熔挤出技术制备姜黄素固体分散体,以提高姜黄素的溶解度和溶出度.方法 以姜黄素为模型药物,丙烯酸树脂Eudragit E PO (EPO)为载体,溶解度参数法评价药物与载体的相容性.以姜黄素的含量、结晶度和溶出度为评价指标,单因素...

            【关键词】 姜黄素固体分散体热熔挤出技术

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            【中文期刊】 管庆霞  张伟兵  等 《中草药》 2018年49卷11期 2557-2563页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 优化马钱子碱纳米结构脂质载体(B-NLC)处方与制备工艺.方法 溶剂乳化超声法制备B-NLC,以单因素考察法结合星点设计-效应面法(CCD-RSM)优化处方与制备工艺.结果 所制备的B-NLC为淡蓝色乳光的透明液体.最优条件为药物用量...

            【关键词】 马钱子碱纳米结构脂质载体溶剂乳化超声法

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            【中文期刊】 张安龙  王晔  等 《微生物学通报》 2018年45卷7期 1450-1461页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 [背景]含酚废水是普遍存在的有毒、难降解的有机污染物之一,生物法处理含酚废水因成本低、无二次污染而具有广阔的应用前景.可降解苯酚的微生物中,真菌比细菌对恶劣环境的适应性更好.针对液态菌液保存时间较短和运输困难的瓶颈,制备固体菌剂可以提高菌体...

            【关键词】 降解苯酚真菌菌剂

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            【中文期刊】 石梅  年四季  等 《细胞与分子免疫学杂志》 2018年34卷10期 870-875页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 构建CD20真核表达载体,在HEK293T细胞中高效表达CD20蛋白.方法 以人外周血单个核细胞(PBMC)总RNA为模板,反转录PCR扩增得到CD20基因,并插入真核表达载体pCMV3-C-His,PCR初步验证后,再测序验证.将重...

            【关键词】 CD2O真核表达HEK293T细胞

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            【中文期刊】 丁威  冯延宾  等 《中国生物工程杂志》 2018年38卷4期 63-69页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 脂酰-酰基载体蛋白(fatty acyl-acyl carrier protein,acyl-ACP)是多种生物合成途径中的酰基供体.因供给限制,体外研究常用类似物acyl-CoA替代,而CoA部分和ACP有较大差异,限制了相关酶对底物识别...

            【关键词】 acyl-ACP合成酶acyl-ACP高效液相色谱

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            【中文期刊】 陈远侨  龙定沛  等 《中国生物工程杂志》 2018年38卷2期 54-60页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:探究一种小分子量类弹性蛋白标签(elastin-like protein tag,ELP tag)——ELP30-tag在原核表达系统中的蛋白纯化能力.方法:人工合成ELP30-tag基因并将其构建于pET-28a(+)载体,结合2种...

            【关键词】 类弹性蛋白内含肽增强绿色荧光蛋白

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            【中文期刊】 化磊召  易小萍  等 《中国生物工程杂志》 2018年38卷8期 50-58页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 昆虫细胞-杆状病毒载体表达系统(baculovirus expression vector system,BEVS)是病毒样颗粒亚单位疫苗(virus like particles,VLPs)的理想生产平台.动物细胞培养过程分析技术(pro...

            【关键词】 VLPs昆虫细胞-杆状病毒载体表达系统PAT

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