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【中文期刊】 李祥勇 罗海清 等 《医学研究生学报》 2010年23卷12期 1240-1243页 ISTICPKU
【摘要】 目的 慢病毒载体技术已被广泛应用于基因功能分析、信号转导通路和基因治疗的研究.文中应用慢病毒系统构建凋亡抑制基因Bi-1的慢病毒表达载体并检测其在NIH3T3细胞中的表达,为后续的以Bi-1基因为靶点的肿瘤基因治疗研究奠定基础. 方法 根据...
【中文期刊】 陈小艳 张弓 等 《南方医科大学学报》 2009年29卷5期 837-840页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 构建EB病毒潜伏膜蛋白Ⅰ(LMP1)基因重组慢病毒载体,并检测其在体外的表达.方法 采用DNA重组技术,将LMP1基因克隆到带绿色荧光蛋白的慢病毒表达载体质粒pCDF中,筛选阳性克隆,经限制性酶切、PCR扩增和DNA测序鉴定重组载体....
【中文期刊】 乐克平 孙晓青 等 《医学分子生物学杂志》 2010年07卷6期 493-498页 ISTICCA
【摘要】 目的 探讨FasL基因重组慢病毒载体感染SD大鼠树突状细胞的效率和FasI 蛋白的表达情况,为进一步研究转FasL基因在同种异体器官移植中诱导免疫耐受和保护移植物打下基础.方法 将培养一周的细胞重铺于六孔板中,每孔细胞数量为5×105,24...
【中文期刊】 宁寅宽 刘林志 等 《中国组织工程研究》 2025年29卷23期 4851-4858页 ISTICPKUCA
【摘要】 背景:缺损组织的修复重建受限于自体或异体可替代移植材料的来源问题而导致临床应用受限,转基因干细胞和组织工程材料研究开辟了新的治疗思路.目的:探究增强型绿色荧光蛋白重组慢病毒转染兔骨髓间充质干细胞在体外的生物学特性以及与脱钙骨基质体外构建转基...
【中文期刊】 葛冠群 田普训 等 《细胞与分子免疫学杂志》 2010年26卷12期 1306-1307页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建携带人ILT3基因重组慢病毒载体并检测其生物学功能.方法:从已构建好的含ILT3,的质粒pBluescriptR-ILT3为模板,利用聚合酶链反应(PCR)方法扩增目的基因ILT3;将该基因与慢病毒载体表达质粒pLVX-AcGFP...
【中文期刊】 吴逸卓 黄俊鑫 等 《新疆医科大学学报》 2024年47卷4期 494-499,505页 ISTICCA
【摘要】 目的 构建过表达SRY-box transcription factor 7(SOX7)基因的慢病毒载体,建立SOX7基因过表达的人脐静脉内皮细胞株(Human umbilical vein endothelial cells,HUVECs...
【中文期刊】 蔡忠良 阴继凯 等 《现代生物医学进展》 2012年12卷4期 616-618页 ISTICCA
【摘要】 目的:构建携带Grb2-SH2基因重组慢病毒载体.方法:把Grb2-SH2基因从合成的工程载体PUC-57中导到入门载体pentr--3C中,再利用LR反应重组到目的载体plenti,通过酶切和测序分析对比验证Grb2-SH2基因后,将pl...
【关键词】 生长因子受体连接蛋白; 重组慢病毒载体; 表皮生长因子受体;
【中文期刊】 宁寅宽 刘林志 等 《中国骨质疏松杂志》 2023年29卷4期 497-502页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 探究BMP2重组慢病毒转染兔骨髓间充质干细胞(BMSCs)黏附脱钙骨(DBM)支架体外构建转基因组织工程骨的生物矿化能力.方法 密度梯度离心及贴壁培养法获取第5代兔BMSCs,用BMP2重组慢病毒转染细胞,通过RT-PCR检测目的基因...
【中文期刊】 王哲彦 陈柏洪 等 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 2020年41卷1期 70-78页 ISTICPKUCA
【摘要】 目的:建立过表达细胞珠蛋白Cytoglobin(CYGB)的人肝细胞LO-2稳定株,初步探究CYGB对LO-2细胞生长增殖的影响.方法:采用PCR法扩增CYGB编码基因,并通过GATEWAY克隆技术构建慢病毒重组表达载体Plenti-N-G...
【中文期刊】 李蕾 谢建山 等 《中国组织工程研究》 2020年24卷2期 260-264页 ISTICPKUCA
【摘要】 背景:慢病毒载体作为外源性转基因载体己被广泛应用,但是大鼠甘油二酯激酶γ(diacylglycerol kinase γ,DGKγ)基因慢病毒载体未见报道.目的:用同源重组的方法构建大鼠DGK γ慢病毒过表达载体.方法:提取成年SD大鼠脑组...
【中文期刊】 柏小金 黄文良 等 《中国老年学杂志》 2019年39卷13期 3245-3249页 ISTICPKUCA
【摘要】 目的 探究骨保护素(OPG)基因修饰的骨髓间充质干细胞(BMSCs)治疗SD大鼠骨质疏松的可行性及疗效.方法 提取并培养SD大鼠BMSCs,用携带OPG基因的慢病毒(LV-OPG-GFP)感染BMSCs,构建成OPG基因修饰的BMSCs,并...
【中文期刊】 王来 楚方旋 等 《中国病理生理杂志》 2017年33卷8期 1487-1493页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的: 探讨沉默CREB基因对氧糖剥夺/复氧神经元线粒体形态及细胞凋亡的影响.方法: 3条靶向CREB基因的shRNA片段插入慢病毒载体pLentiLox3.7(PLL),与包装质粒psPAX2和pMD2.G共转染293T细胞包装病毒颗粒后...
【中文期刊】 李欣悦 金月 等 《中国热带医学》 2025年25卷3期 328-332页 ISTICPKUCA
【摘要】 目的 构建人淋巴细胞激活基因3(lymphocyte activation gene 3,LAG3)慢病毒重组表达载体,并转染小鼠成纤维细胞3T3以获得LAG3优势表达的单克隆细胞株.方法 提取人外周血单核细胞总RNA并逆转录为cDNA,以...
【中文期刊】 孙俊梅 龙晶晶 等 《中国比较医学杂志》 2016年26卷2期 55-61页 ISTICPKUCA
【摘要】 目的:建立可调控大鼠局部脑区CNN3基因表达的技术,为进一步研究CNN3基因参与脑内病理生理过程奠定基础。方法设计并合成针对CNN3基因的全长编码序列cDNA和3条shRNA干扰靶点序列,利用基因工程技术构建CNN3-OE和3个CNN3-s...
【中文期刊】 王鑫 陈玲 等 《西安交通大学学报(医学版)》 2014年35卷4期 460-464,480页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 探讨慢病毒介导的CXCR7-shRNA转染人结肠癌细胞株SW620后对CXCR7蛋白表达的影响.方法 ①设计并合成CXCR7的3对shRNA序列及1对阴性对照序列,与pSilencerTM4.1系统合成构建重组慢病毒载体,转染HEK2...
【中文期刊】 张海 蒋正方 等 《中国组织工程研究》 2014年2期 265-270页 ISTICPKUCA
【摘要】
背景:腺病毒的表达时间有限,会限制目的基因的表达时间和表达量,不利于实验的持续进行,故文章选择慢病毒作为载体,与目的基因大鼠肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体基因片段进行基因重组。
目的:探讨构建含有大鼠肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体基因...
【中文期刊】 王博涵 余虓 等 《中国组织工程研究》 2013年7期 1238-1242页 ISTICPKUCA
【摘要】 背景:KLF4基因在细胞分化过程中有重要作用.目的:构建 KLF4基因慢病毒过表达载体.方法:聚合酶链反应扩增(PCR)目的基因 KLF4后插入慢病毒表达载体 pCDH 中,构建重组载体pCDH-KLF4.通过 PCR、双酶切和 DNA 测...
【中文期刊】 王淑红 张雄 等 《中华口腔医学杂志》 2012年47卷z1期 244-247页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 构建低氧诱导因子1 α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)基因(野生、点突变)的两个慢病毒真核表达载体pEGFP-N1-HIF-1α和pEGFP-N1-muHIF-1 α,以期为后续干细胞的基因转染...
【中文期刊】 李涛涛 王湘达 等 《中国组织工程研究与临床康复》 2011年15卷10期 1897-1900页 ISTICPKUCA
【摘要】 背景:目前国内外已有关于人脐血间充质干细胞移植修复鼠脊髓损伤、脑肿瘤、心肌梗死等的报道,将其在特定的条件下向成骨细胞诱导分化的研究也已有报道,但尚未有将脐血间充质干细胞移植治疗动物骨坏死的研究报道.目的:观察重组增强型绿色荧光蛋白慢病毒载体...
【中文期刊】 胡景超 束蓉 等 《上海交通大学学报(医学版)》 2011年31卷5期 538-542页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 观察慢病毒介导的人釉原蛋白(hAm)基因转导对人骨髓基质细胞(hBMSCs)增殖及细胞成骨分化标志物碱性磷酸酶(ALP)合成的影响.方法 采用RT-PCR技术获取hAm编码基因,扩增产物与携带绿色荧光蛋白(GFP)的慢病毒载体质粒(F...
【中文期刊】 陈艳 邵建永 等 《中国病理生理杂志》 2005年21卷6期 1117-1123页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:通过构建携带细胞色素C氧化酶基因的RNAi慢病毒载体,获得可供转染的滴度,为下一步研究该基因缺陷在真核细胞中的影响提供物质基础. 方法: 根据线粒体细胞色素C氧化酶设计的两条互补的单链寡核苷酸退火后形成双链,插入到pENTR/U6质粒...
【中文期刊】 唐俭 陈旭昕 等 《天津医药》 2019年47卷7期 673-677页 MEDLINEISTICCA
【摘要】 目的 构建大鼠paralemmin-3(PALM3)基因重组慢病毒载体,探讨转染大鼠肺泡巨噬细胞系NR8383细胞的最佳感染复数(MOI)值及目的基因PALM3的表达情况.方法 采用聚合酶链反应技术(PCR)扩增鼠PALM3基因片段,并将其...
【关键词】 巨噬细胞,肺泡; paralemmin-3; 重组慢病毒载体;
【中文期刊】 董雷 马春芳 等 《浙江医学》 2019年41卷14期 1477-1479,1485页 ISTICCA
【摘要】 目的 构建小窝蛋白-1(Cav-1)重组慢病毒载体,并在293T细胞和小鼠中验证Cav-1过表达.方法 将Cav-1基因克隆至慢病毒载体GV287,然后利用酶切、PCR扩增鉴定、阳性克隆鉴定及测序验证构建Cav-1重组慢病毒.将Cav-1重...
【中文期刊】 林兰 徐之良 《医学研究杂志》 2017年46卷6期 92-98页 ISTIC
【摘要】 目的 高效包装含绿色荧光蛋白(GFP)的嵌合性抗原受体CD19重组慢病毒载体,对比不同启动子在T细胞中绿色荧光蛋白的表达效率.方法 构建3种不同启动子及CD19-CAR的质粒pHAGE-CMV-EF1α-GFP-CD19、pHAGE-CMV...
【中文期刊】 薛峰 王伯庆 等 《成都医学院学报》 2015年10卷4期 393-396,409页 ISTICCA
【摘要】 目的 构建携带人肝再生增强因子(augmenter of liver regeneration,ALR)基因的慢病毒表达载体,并验证其安全性与有效性.方法 将以人胎肝cDNA为模板扩增得到的ALR与pLenti6/V5-D-TOPO重组慢病...
【关键词】 肝再生增强因子; 慢病毒表达载体; BLR 3A大鼠肝细胞;
【中文期刊】 刘燕青 黄健 等 《贵阳医学院学报》 2015年40卷7期 683-687页 ISTIC
【摘要】 目的:构建组蛋白去乙酰化酶2 (HDAC2)基因RNA慢病毒干扰质粒载体.方法:对比HDAC2基因序列,设计并合成短发夹RNA(shRNA)干扰靶点序列,克隆入经AgeI与EcoRI双酶切后的RNA干扰载体pLKO.1-puro,构建pLK...
【中文期刊】 王伟 答嵘 等 《临床神经外科杂志》 2014年11卷1期 38-40页 ISTIC
【摘要】 目的 构建Vasculostatin慢病毒表达载体.方法 通过基因合成方法获得Vasculostatin的完整序列,将此片段定向克隆到pLenti-CMV-EF1 p-eGFP载体多克隆位点区,筛选重组质粒,采用磷酸钙方法将Lenti-CM...
【关键词】 Vasculostatin; 基因重组; 慢病毒载体;
【中文期刊】 沈文燕 李冉 等 《西部医学》 2014年26卷2期 142-145页 ISTIC
【摘要】 目的 构建pCS-CG-DsRed2-vigilin慢病毒重组载体,以及包装pCS-CG-DsRed2-vigilin重组慢病毒.方法 用NheⅠ、NotⅠ将目的片段红色荧光蛋白基因DsRed2从pDsRed2-N1中切下,连入pcDNA3...
【关键词】 vigilin; DsRed2荧光蛋白; 重组载体;
【中文期刊】 刘思征 赖秀蓝 等 《中国小儿血液与肿瘤杂志》 2014年19卷1期 14-20页 ISTICCA
【摘要】 目的 利用包装制备的重组慢病毒载体感染人脐带间充质干细胞,为后续的细胞重编程奠定基础.方法 利用组织块贴壁法分离、培养、扩增出人脐带间充质干细胞(HUMSC).携带目的基因(oct4、sox2、klf4、c-myc)及绿色荧光蛋白的质粒经验...
【中文期刊】 彭承宏 马迪 等 《组织工程与重建外科杂志》 2013年9卷2期 85-88页 ISTICCA
【摘要】 目的 构建含hTERT基因的慢病毒重组载体,进行病毒包装并检测hTERT在293T细胞中的表达.方法 PCR扩增hTERT,插入慢病毒载体,并与包装质粒转染293T细胞,进行病毒包装,并测定其滴度.Western-Blot检测慢病毒液感染2...
【中文期刊】 程岚 束蓉 等 《上海口腔医学》 2008年17卷1期 45-50页 MEDLINEISTICCA
【摘要】 目的:构建含人釉原蛋白(human Amelogenin,hAm)成熟肽编码区基因的慢病毒载体FuAmw,并观察在重组慢病毒感染的293T细胞中釉原蛋白的表达.方法:以构建好的重组质粒PQE30-Am为模板,采用PCR技术体外扩增hAm成熟...
【中文期刊】 于光 束蓉 等 《上海口腔医学》 2008年17卷1期 40-44页 MEDLINEISTICCA
【摘要】 目的:构建含有人釉原蛋白(human amelogenin,hAm)基因的慢病毒载体质粒,用重组慢病毒感染人牙周膜细胞(Human periodontal ligament cells,hPDLCs),初步探讨釉原蛋白基因修饰种子细胞用于牙...
【中文期刊】 陈玉礼 韦红玉 等 《右江民族医学院学报》 2017年39卷6期 444-447页
【摘要】 目的 构建人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)tat基因重组慢病毒表达载体.方法将pCDH-GFP和pCDH-RFP载体分别用EcoRⅠ和HindⅢ双酶切制备线性化载体;通过设计引物及PCR扩增,获得5′端与3′端分别与15nt线性化载体3′...
【中文期刊】 姚恒美 陈浩明 等 《复旦学报(自然科学版)》 2005年44卷4期 503-506,523页
【摘要】 造血干细胞是基因治疗理想的靶细胞之一,尤其适用于遗传性血液病.而重组慢病毒载体能高效感染造血干细胞,成为造血干细胞途径基因治疗的理想载体.从小鼠骨髓细胞中分离出单个核细胞(MNCs)进行体外悬浮培养,并用免疫磁珠法分离得到高纯度的小鼠Lin...
【关键词】 单个核细胞; Lin-CD117+造血干细胞; 重组慢病毒载体;
【中文期刊】 刘侃 赵超飞 等 《细胞与分子免疫学杂志》 2016年32卷6期 764-769页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 构建硒蛋白PP1(SEPP1)基因的慢病毒质粒并研究SEPP1对人肾透明细胞癌细胞增殖的影响.方法 以HEK293T细胞的cDNA为模板,通过PCR法获得人SEPP1全长序列片段,并与慢病毒表达载体pLV-EGFP (2A) Puro...
【关键词】 硒蛋白PP1(SEPP1); 重组慢病毒载体; 肾透明细胞癌;
【中文期刊】 王子杰 邓忠磊 等 《南京医科大学学报(自然科学版)》 2015年35卷2期 173-177页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建小鼠B、T淋巴细胞衰减子(BTLA)基因重组慢病毒载体,探讨BTLA基因过表达对小鼠脾T淋巴细胞增殖及活化的影响.方法:以小鼠脾脏组织总RNA为模板,逆转录为cDNA,通过PCR技术扩增BTLA基因,构建pWPTS-mBTLA慢病...
【中文期刊】 王鑫 陈玲 等 《中国生物工程杂志》 2014年34卷2期 14-20页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:探讨慢病毒介导的CXCR7-shRNA转染人结肠癌细胞株SW620后对CXCR7蛋白表达的影响.方法:(1)设计并合成CXCR7的3对shRNA序列及1对阴性对照序列,与pSilencerTM4.1系统合成构建重组慢病毒载体,转染HE...
【中文期刊】 林恒 唐春 等 《第三军医大学学报》 2009年31卷22期 2220-2224页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 初步探讨线粒体转录因子A(mitochondrial transcription factor A,TFAM)在重组人肝再生增强因子(rhALR)对梗阻性黄疸大鼠肝功能保护过程中的作用.方法 首先体外合成靶向TFAM的有效慢病毒载体,...
【中文期刊】 谢宝明 于国伟 等 《生物技术》 2016年26卷1期 23-28,69页 ISTICCA
【摘要】 [目的]通过慢病毒载体系统获得稳定表达FRT-LacZ基因的MDCK细胞株.[方法]PCR扩增FRT-LacZ基因,亚克隆至慢病毒载体pLVX-PGK-Puro.经四质粒包装系统共转染293FT细胞包装重组慢病毒并检测病毒滴度,获得的慢病毒...
【关键词】 FRT-LacZ基因; 慢病毒载体; MDCK细胞;
【中文期刊】 肖荣 杨元强 等 《中国临床研究》 2016年29卷7期 874-879页 ISTICCA
【摘要】 目的 构建含有miR-363-3p的慢病毒表达载体,获得能够稳定表达miR-363-3p的DU145细胞株并初步进行细胞形态学实验.方法 利用PCR扩增miR-363-3p片段,插入慢病毒载体pCDH-CMV-MCS-EF1-tRFP中构建...
【关键词】 前列腺癌,激素非依赖性; miR-363-3p; 重组慢病毒载体;