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          【中文期刊】 王安平 孙怀昌  等 《病毒学报》 2007年23卷4期 292-297页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA

          【摘要】 为了开展重组禽腺联病毒(Recombinant avian adeno-associated virus,rAAAV)介导的基因转移研究,用限制性内切酶消化含AAAV全基因组的重组质粒pCR-AAAV,去除AAAV Rep和Cap蛋白编码序...

          【关键词】 重组病毒构建鉴定

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          【中文期刊】 崔潇婷 顾玲玲  等 《江苏农业科学》 2019年47卷5期 153-155页

          【摘要】 为对杆状病毒表达系统制备的重组禽腺联病毒进行生物学特性的鉴定,将含GFP报告基因及AAAV两侧末端重复序列的重组杆状病毒rBac-GFP、表达AAAV结构蛋白的重组杆状病毒rBac-VP、表达AAAV功能蛋白的重组杆状病毒rBac-Rep以...

          【关键词】 重组病毒杆状病毒表达系统鉴定

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          【中文期刊】 吴植 张继玲  等 《中国畜牧兽医》 2017年45卷10期 2871-2877页

          【摘要】 试验旨在利用杆状病毒表达系统制备输卵管特异表达人溶菌酶(hLYZ)的重组禽腺联病毒(recombinant avian adeno-associated virus,rAAAV).参照已发表的hLYZ基因序列设计1对引物,PCR扩增hLYZ...

          【关键词】 重组病毒(rAAAV)人溶菌酶(hLYZ)杆状病毒表达系统

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          【中文期刊】 王永娟 朱善元  等 《畜牧与兽医》 2014年46卷2期 65-67页

          【摘要】 在前期研究基础上,将经转座获得的杆状病毒重组穿梭质粒rBacmid-Rep、rBacmid-VP和rBacmid-LYZ共转染Sf9昆虫细胞,产生了表达人溶菌酶(hLYZ)的重组禽腺联病毒(rAAAV) (rAAAV-hLYZ):然后用纯化...

          【关键词】 重组病毒溶菌酶病原菌

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          【中文期刊】 王永娟 朱善元  等 《江苏农业学报》 2014年30卷1期 144-149页

          【摘要】 为了研究重组禽腺联病毒介导的基因特异miRNAs对传染性法氏囊病毒(IBDV)复制的抑制作用.在前期研究基础上,利用重组DNA技术构建表达vp2与vp1基因特异miRNAs的重组禽腺联病毒转移载体,磷酸钙法制备重组禽腺联病毒;纯化后的病毒经...

          【关键词】 传染性法氏囊病毒重组病毒miRNA

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          【中文期刊】 沈鹏鹏 王永娟  等 《微生物学报》 2011年51卷2期 256-261页 MEDLINEISTICPKUCSCDCABP

          【摘要】 [目的]在鸡胚水平上探索VP1和VP2基因特异miRNA抑制传染性法氏囊病病毒(infectious bursaldisease virus,IBDV)复制的可行性.[方法与结果]将表达VP1基因特异miRNA重组载体pAITR-RFPmi...

          【关键词】 重组病毒miRNA鸡胚导入

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          【中文期刊】 王安平 孙怀昌  《中国生物工程杂志》 2009年29卷12期 30-36页 ISTICPKUCSCDCA

          【摘要】 将输卵管特异表达启动子调控的人组织激肽释放酶(human tissue kallikrein,hKLK1)表达盒插入至AAAV转移栽体pAITR中,与AAAV包装载体pcDNA-ARc及腺病毒辅助质粒pHelper三质粒利用磷酸钙沉淀法共转...

          【关键词】 重组病毒人组织激肽释放酶暂态

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          【中文期刊】 卢渊录 曾亦然  等 《中国预防兽医学报》 2024年46卷4期 333-341,349页

          【摘要】 为构建高效且易于操作传染性支气管炎病毒(IBV)基因组的反向遗传学平台,本研究将IBV H120株全基因组经RT-PCR分段扩增,并在其基因组的5'端引入人巨细胞病毒(CMV)启动子序列以及3'端引入丁型肝炎病毒核酶序列(HDVRz)和牛生...

          【关键词】 传染性支气管炎病毒反向遗传学酿酒酵母

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          【中文期刊】 迟丽丽 刘健  等 《中国畜牧兽医》 2023年50卷8期 3056-3064页

          【摘要】 [目的]在毕赤酵母中构建禽腺病毒(FAdV)血清4型和8b型串联截短Fiber2-Fiber蛋白表达系统,并探索适宜的表达条件.[方法]以前期构建的重组质粒pCold-Fiber2-Fiber为模板,用PCR法扩增Fiber2-Fiber片...

          【关键词】 禽腺病毒(FAdV)Fiber毕赤酵母

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          【中文期刊】 韦悠 谢芝勋  等 《南方农业学报》 2022年53卷8期 2341-2349页

          【摘要】 [目的]获得截短表达的血清4型禽腺病毒(FAdV-4)Fiber-2重组蛋白及其单克隆抗体,为建立快速灵敏的病毒检测方法提供基础材料.[方法]对Fiber-2基因序列进行密码子优化,截取Fiber-2蛋白抗原性集中片段,PCR扩增其基因序列...

          【关键词】 血清4型禽腺病毒(FAdV-4)Fiber-2基因克隆

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          【中文期刊】 钱莺娟 张雪莲  等 《病毒学报》 2004年20卷2期 182-185页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA

          【摘要】 <篇首> 马立克氏病(Marek's disease,MD)是由马立克氏病病毒(Marek's disease virus,MDV)引起的一种具有高度传染性、淋巴组织增生性疾病,病理上以外周神经、性腺、虹膜、各种脏器和皮肤发生单核细胞浸润为特征...

          【关键词】 重组鸡痘病毒马立克氏病病毒表达

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          【中文期刊】 王安平 朱善元  等 《江苏农业学报》 2014年30卷1期 162-166页

          【摘要】 为同时在昆虫细胞中按照合适比例表达禽腺联病毒的3个结构蛋白质,首先根据禽腺联病毒VP基因序列设计引物,扩增VP基因,将其克隆至杆状病毒表达载体pFastBac1,获得重组转移载体pFastBac-VP,将其转化到DH10Bac感受态细胞中,...

          【关键词】 病毒VP基因昆虫细胞

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          【中文期刊】 王安平 朱善元  等 《江苏农业科学》 2013年41卷8期 25-27页

          【摘要】 根据禽腺联病毒VP基因序列设计引物,扩增出VP基因,将其克隆至杆状病毒表达载体pFastBac1,经酶切鉴定筛选出阳性重组转移载体pFastBac-VP,并对阳性质粒进行测序及序列分析;将pFastBac-VP转化到DH10Bac感受态细胞...

          【关键词】 病毒VP基因杆状病毒表达载体

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          【中文期刊】 王建业 孙怀昌  等 《中国兽医学报》 2008年28卷12期 1363-1366页

          【摘要】 分别将禽腺联病毒(Avian adeno-associated virus,AAAV)的Rep78基因和VP3基因克隆入pET-47b原核表达载体并转化BL21(DE3)大肠杆菌,在1PTG的诱导下2种目的蛋白均成功得到了表达.SDS-PA...

          【关键词】 病毒原核表达抗血清

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          【中文期刊】 王建业 孙怀昌  等 《中国预防兽医学报》 2007年29卷11期 825-829页

          【摘要】 为了克隆禽腺联病毒(Avian adeno-associated virus,AAAV)全基因组用于构建基因转移载体研究,以鸡胚致死孤儿病毒(CELO)作为辅助病毒与AAAV共接种SPF鸡胚进行AAAV的增殖,将AAAV约4.7 kb双链基...

          【关键词】 病毒基因组克隆序列分析

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          【中文期刊】 王建业 孙怀昌  等 《扬州大学学报(农业与生命科学版)》 2005年26卷2期 7-10页

          【摘要】 为了获得用于重组载体构建的禽腺联病毒(AAAV), 用无菌处理后的鸡粪便样品与鸡胚致死孤儿病毒同时接种SPF鸡胚, 根据已发表的AAAV基因序列设计引物, 用PCR对致死鸡胚的尿囊液进行检测, 结果从1份样品接种的鸡胚尿囊液中扩增到预期大小...

          【关键词】 病毒分离基因组鉴定

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          【中文期刊】 郭建强 姚立红  等 《生物工程学报》 2010年26卷5期 649-656页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA

          【摘要】 高致病性H5N1亚型禽流感病毒(AIV)严重威胁到人类健康,因此研制高效、安全的禽流感疫苗具有重要意义.以我国分离的首株人H5N1亚型禽流感病毒(A/Anhui/1/2005)作为研究对象,PCR扩增基质蛋白2(M2)和血凝素(HA)基因全...

          【关键词】 H5N1亚型流感病毒基质蛋白2血凝素

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